微酸性电解水对甘蓝采后黑斑病病原菌的防治效果研究.pdf

保鲜研究 2025 25 12 11 18 保鲜与加工 Storage and Process 27 微酸性电解水对甘蓝采后黑斑病病原菌的 防治效果研究 韩 悦 1 2 3 李晓冰 1 2 3 周宏胜 1 2 张映曈 1 2 胡花丽 1 2 罗淑芬 1 2 刘雪松 1 2 刘欣页 1 2 李鹏霞 1 2 凌 军 1 2 1 江苏省农业科学院农业设施与装备研究所 江苏 南京 210014 2 江苏省农业科学院 农业农村部农产品 冷链物流技术重点实验室 江苏 南京 210014 3 沈阳农业大学食品学院 辽宁 沈阳 110866 摘 要 甘蓝采后黑斑病是影响甘蓝贮藏期间品质和产量的主要病害之一 为研究微酸性电解水 SAEW 对甘蓝采后黑斑病的防治效果 对甘蓝黑斑病的病原菌进行了分离 纯化与鉴定 探讨了不同 浓度SAEW对黑斑病病原菌的抑制作用及防治效果 结果表明 芸薹链格孢菌 Alternaria brassicae GL 14 是导致甘蓝采后黑斑病的主要致病菌之一 100 mg L SAEW处理能够有效抑制病原菌孢子萌 发 而200 mg L SAEW处理则显著抑制菌丝的生长 特别是在高质量浓度SAEW处理下 病原菌的存 活率显著降低 病斑扩展速度显著减缓 此外 当SAEW质量浓度达到200 mg L时 碘化丙啶染色试 验结果显示 Alternaria brassicae的孢子死亡率为84 19 表明SAEW处理破坏了Alternaria brassicae细 胞膜的完整性 进而导致菌丝的蛋白质和核酸泄漏量显著增加 综上所述 SAEW作为一种环保 无 害的防治措施 为甘蓝采后病害防治提供了一种新的有效途径 关键词 甘蓝 芸薹链格孢菌 微酸性电解水 杀菌机制 Study on the Control Effects of Slightly Acidic Electrolyzed Water on Postharvest Black Spot Pathogen of Cabbage HAN Yue 1 2 3 LI Xiaobing 1 2 3 ZHOU Hongsheng 1 2 ZHANG Yingtong 1 2 HU Huali 1 2 LUO Shufen 1 2 LIU Xuesong 1 2 LIU Xinye 1 2 LI Pengxia 1 2 LING Jun 1 2 1 Jiangsu Academy of Agricultural Sciences Institute of Agricultural Facilities and Equipment Nanjing 210014 China 2 Jiangsu Academy of Agricultural Sciences Key Laboratory of Cold Chain Logistics Technology for Agro Products Ministry of Agriculture and Rural Affairs Nanjing 210014 China 3 School of Food Science Shenyang Agriculture University Shenyang 110866 China Abstract Postharvest black spot disease of cabbage is one of the major diseases affecting the quality and yield during storage In this study in order to study the control effects of slightly acidic electrolytic water SAEW on postharvest cabbage black spot disease the pathogen was isolated purified and identified and the inhibitory effects and control efficiency of different concentrations of SAEW treatments on the pathogen were investigated The results showed that Alternaria brassicae GL 14 was one of the major pathogenic fungi causing cabbage postharvest black spot disease The 基金项目 中央引导地方科技发展资金项目 BE2024014 江苏省农业自主创新资金项目 CX 22 1014 江苏省重点研发计划 现代农业 面上项目 BE2022368 作者简介 韩 悦 1999 女 满族 硕士 研究方向为果蔬采后保鲜 通信作者 凌 军 博士 助理研究员 研究方向为果蔬采后保鲜 11 2025年第12期 保鲜与加工 Storage and Process 联系邮箱 bxyjg SAEW treatment with 100 mg L effectively inhibited the pathogen spore germination while the treatment with 200 mg L significantly suppressed the mycelial growth Notably at high concentrations of SAEW the survival rate of pathogen was significantly reduced and the lesion expansion speed was markedly retarded Moreover when the SAEW concen tration reached to 200 mg L propidium iodide PI staining results showed that the spore mortality of Alternaria brassi cae was 84 19 indicating that SAEW induced the disrupted integrity of the cell membrane of Alternaria brassicae leading to a significant increase in the leakage of proteins and nucleic acids from the mycelia In conclusion SAEW treatment as an environmentally friendly and harmless control measure provides a new and effective approach for managing postharvest diseases of cabbage Key words cabbage Alternaria brassicae slightly acidic electrolyzed water sterilization mechanism 中图分类号 S482 2 95 文献标识码 A DOI 10 3969 j issn 1009 6221 2025 12 002 甘蓝 Brassica oleracea var capitata L 为十字花 科芸薹属 Brassica spp 植物 是全球重要的蔬菜作物 之一 具有较高的营养价值和广泛的市场需求 1 然 而 在采后贮藏过程中 甘蓝容易受到多种病害的侵 染 特别是采后黑斑病严重影响了甘蓝的品质和市场 价值 2 甘蓝黑斑病是一种由黑斑病菌引起的常见病 害 病原菌在贮藏过程中会通过伤口侵入 叶片上出 现褐色至黑褐色的点状病斑 且在高湿条件下 病斑 处会产生大量黑色分生孢子及分生孢子梗 影响甘蓝 的外观和品质 造成经济损失 3 十字花科植物的黑斑病主要由链格孢属 Alter naria spp 引起 4 已有研究 5 表明 引发十字花科蔬 菜黑斑病的链格孢属真菌包括萝卜链格孢菌 Alter naria raphani 芸薹链格孢菌 Alternaria brassicae 和 甘蓝链格孢菌 Alternaria brassicicola 目前 针对甘 蓝黑斑病的防治手段主要依赖生物防治和化学防 治 4 传统的病害防治方法通常依赖化学药剂 但由 于化学农药对环境和人体健康的潜在危害 越来越 多的消费者和农业生产者开始关注环保型 低毒性 的替代方法 生物防治技术污染小 毒性低 但在大 面积推广上存在一定困难 因此 本研究旨在探索 一种安全 经济且高效的杀菌方法 以防治甘蓝黑斑 病的主要病原菌 微酸性电解水 Slightly acidic electrolyzed water SAEW 是一种绿色环保的杀菌剂 具有安全 节能和 高效的特点 其主要灭菌成分为次氯酸分子 通过 将氯化钠 NaCl 或稀盐酸 HCl 溶液置于电解槽中 电解生成 具有特殊的理化性质 且其有效pH值在 5 0 6 5之间 6 当前已广泛应用于医疗 农业及食品 行业 7 研究 8 表明 SAEW作为一种非热杀菌技术 不仅能够抑制果蔬的酶促褐变 延缓果蔬衰老 还具 有显著的杀菌效果 并且能够实现瞬时杀菌 大量 关于SAEW在果蔬和水产行业应用的研究 推动了果 蔬保鲜技术的高效发展 薛婧琳等 9 研究表明 SAEW可有效消除食品中 的大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 李斯特菌以及肠炎沙 门氏菌 隋心意 10 研究表明 喷施SAEW对番茄灰霉 病 灰叶斑病原菌菌落扩展及孢子萌发均有明显的 抑制作用 超声结合SAEW可以抑制Rhizopus sto lonifer菌丝生长及孢子萌发 且该处理能够破坏细胞 膜结构 导致细胞质渗透 11 但目前关于SAEW对甘 蓝黑斑病的防治效果尚无系统研究 因此 以采后发生黑斑病的甘蓝为研究对象 分 离并鉴定出其致病菌为芸薹链格孢菌 Alternaria brassicae GL 14 在此基础上探究SAEW处理对甘蓝 采后黑斑病的主要病原菌Alternaria brassicae的防治 效果 以期为甘蓝采后病害防治提供一种安全环保 易于操作的防治方案 1 材料与方法 1 1 材料与设备 1 1 1 材料与试剂 甘蓝 购于江苏省南京市众彩批发市场 挑选大 小均一 无损伤的甘蓝作为试验材料 碘化丙啶 PI 北京酷来搏科技有限公司 二甲 基亚砜 DMSO 北京索莱宝科技有限公司 2 Taq Master Mix Dye Plus 南京诺唯赞生物科技股份有限 公司 ddH 2 O 南京市玄武区东西南纯净水厂 马铃薯 葡萄糖培养液 Potato dextrose broth PDB 马铃薯葡 萄糖琼脂 Potato dextrose agar PDA 培养基 青岛高 科技工业园海博生物技术有限公司 氯化钠 北京康 普汇维科技有限公司 戊二醛 次氯酸钠 NaClO 上 海麦克林生化科技股份有限公司 磷酸盐缓冲液 PBS 上海碧云天生物技术有限公司 12 2025年第12期 韩 悦 等 微酸性电解水对甘蓝采后黑斑病病原菌的防治效果研究 投稿平台 1 1 2 仪器与设备 赐绿得 CLD 35L 次氯酸生成器 南京氯盾 科技有限公司 3K15高速冷冻离心机 德国Sigma公 司 A11 Basic型液氮研磨器 艾卡 广州 仪器设备有 限公司 ZWY 2102C智城恒温培养振荡器 上海智城 分析仪器制造有限公司 TC 96 G H b B基因扩增 仪 杭州博日科技股份有限公司 Unano 1000微量分 光光度计 杭州优米仪器有限公司 Seven Multi pH计 梅特勒托利多科技 中国 有限公司 XU MJX 80B霉 菌培养箱 上海析牛莱伯仪器有限公司 MSD4200迈 时迪光学显微镜 迈时迪 东莞 科技有限公司 EVO LS10扫描电子显微镜 卡尔蔡司 上海 管理有限公 司 Ultra View VOX转盘式激光共聚焦显微镜 振电 苏州 医疗科技有限公司 1 2 方法 1 2 1 病原菌分离纯化 参考冯丽娜等 12 的方法并稍加修改 采用组织 分离法对甘蓝病原菌进行分离 从发病甘蓝病健交 界处剪5 mm 5 mm组织 并使用75 乙醇浸泡30 s 再浸泡于1 NaClO溶液5 min进行表面消毒 经无 菌水漂洗去除残留后 于灭过菌的滤纸上吸干水分 再将其置于PDA培养基中央 于 28 1 培养箱中 倒置培养 直至长出单一菌落 将纯化好的病原菌于 80 保存 用于后续试验 1 2 2 致病性测定 参考鲜泽轩 13 采用菌丝块接种培养法 选择大 小均一 成熟度一致的甘蓝进行清洗消毒后晾干 在 活化4 d后的PDA培养基上打取5 mm的菌饼 将有 菌丝一面贴在甘蓝内侧 将接种好的甘蓝置于乐扣 箱中 并在每个乐扣箱中加入一杯灭菌蒸馏水用于 保湿 接种未接菌的PDA培养基块作为空白对照 于 25 相对湿度95 的环境中定期记录发病情况 1 2 3 形态学鉴定 将活化后的菌株用5 mm打孔器打取菌落边缘的菌 丝块 将有菌丝一面紧贴PDA培养基中央 置于28 培 养箱中避光培养 观察菌落形态 并用光学显微镜对孢 子及菌丝形态进行观察 根据形态学特征进行鉴定 1 2 4 病原菌分子生物学鉴定 采用CTAB法提取甘蓝病原菌菌株的DNA rDNA ITS序列的扩增采用通用引物 ITS1 5 TCCG TAGGTGAACCTGCGG 3 与ITS4 5 TCCTCCGCT TATTGATATGC 3 进行扩增 PCR反应总体积为60 L 2 Taq Master Mix 30 L DMSO 3 L 甘蓝DNA模板1 L ITS1引物1 L ITS4引物1 L ddH 2 O补至60 L PCR反应程序设定如下 95 预变性3 min 95 变 性15 s 55 退火15 s 72 延伸60 s 35次循环 最 后72 延伸5 min 回收PCR产物后送测至南京擎 科生物科技有限公司 将测序所得菌株序列通过 NCBI网站进行比对 采用MEGA11软件 利用邻接法 Neighbor Joining 构建系统发育进化树 1 000次 Bootstrap检验置信度 1 2 5 SAEW的制备与检测 以自来水为原水 NaCl溶液作为电解辅液 用次 氯酸生成器制成SAEW 将制备好的SAEW通过pH 计进行pH值的测定 采用碘量法对SAEW的有效氯 质量浓度 ACC 单位为mg L 进行测定 将满足条 件的SAEW保存 供后续试验使用 1 2 6 SAEW对菌株GL 14孢子萌发的影响 参考王小佳等 14 的方法略作改动 将10 6 个 mL 的孢子悬液分别经50 100 mg L和200 mg L SAEW处 理5 min后用无菌水洗涤3次 再重悬于PDB培养基 中 在28 恒温振荡培养箱中培养 转速180 r min 分别于3 5 7 9 h在光学显微镜下观察孢子萌发 情况 孢子萌发率 孢子萌发数 孢子总数 100 1 2 7 SAEW对菌株GL 14菌丝生长的影响 将不同质量浓度 25 50 100 150 200 mg L SAEW处理5 min后的GL 14菌株置于PDA培养基中 央 并在28 下避光培养 每2 d使用游标卡尺采用 十字交叉法测量菌株GL 14的生长情况 每组3个平 行 结果取其平均值 设置3个生物学重复 1 2 8 SAEW对甘蓝黑斑病的防治效果研究 采用针刺法对甘蓝进行穿刺接种 参考曲正 15 的 方法进行菌丝悬液的制备 将GL 14在28 下培养 3 d后收集菌丝体并进行研磨 将研磨后的菌丝悬液 调至OD 600 nm 为1 0 使用无菌枪头在每个甘蓝叶部针 刺5个伤口 在伤口处分别接种100 150 200 mg L的 SAEW 20 L 待其干后接种20 L GL 14菌丝悬液 其中CK组不接种病原菌 0 mg L组仅接种病原菌不 接种SAEW 接种完毕将甘蓝置于25 相对湿度 90 的培养箱中培养 于3 6 9 12 d观察并记录发病 情况 同时计算发病率和病情指数 16 发病率 发病数量 总数量 100 病情指数 各级发病数量 对应病级数 调查总数 最高病级数 100 13 2025年第12期 保鲜与加工 Storage and Process 联系邮箱 bxyjg 1 2 9 扫描电子显微镜观察SAEW对GL 14形态的影响 参考常霞 17 的方法 将GL 14于培养4日龄的平 板收集孢子 调整孢子液含量为10 6 个 mL后 使用质 量浓度为0 100 150 200 mg L的SAEW处理5 min后 用无菌生理盐水洗涤3次 再次离心后保留沉淀并加 入2 5 戊二醛溶液 立即多次吹吸混匀 并转移至 4 冰箱中过夜固定 将固定后的样品进一步在系 列分级乙醇 50 70 80 90 95 100 中脱 水处理15 min 干燥后将载有样品的玻片通过离子溅 射仪进行喷金镀膜 在扫描电子显微镜下放大1 000 倍观察并记录孢子形态 1 2 10 SAEW对GL 14蛋白质 核酸泄漏量的影响 核酸泄漏量 参考王小岗等 18 的方法测定 蛋白质 泄漏量 参考孙佳琪 19 的方法测定 将1 mL 10 6 个 mL 的GL 14孢子悬液加入100 mL PDB液体培养基中培 养至菌丝旺盛后 将GL 14菌丝经100 150 200 mg L SAEW处理5 min后 离心后吸取上清液通过微量分 光光度计测定260 nm及280 nm处的吸光度 核酸 DNA或RNA 在260 nm紫外光有最大吸收峰 以 OD 260 nm 值表示核酸泄漏量 蛋白质含量计算公式如下 蛋白质含量 mg mL 1 552 OD 280 nm 0 757 3 OD 260 nm 1 2 11 细胞膜完整性检测 参考秦顺新 20 的方法并稍加改动 吸取一定量 的2 10 6 个 mL的GL 14孢子悬液 经200 mg L SAEW处理5 min后离心收集孢子 磷酸盐缓冲液洗 涤5次后加入5 mg L碘化丙啶染色液 避光环境下室 温染色20 min 离心收集孢子 并用PBS漂洗5次以除 去残留染色液 加入适量PBS重悬孢子至适宜浓度 吸取3 L于激光共聚焦显微镜下观察 每个处理3个 视野 孢子着色率计算公式如下 孢子着色率 发荧光孢子数 视野内总孢子数 100 1 2 12 数据处理 采用IBM SPSS Statistics 25软件对试验数据进行 组间比较和差异显著性分析 使用Origin 2024软件 作图 2 结果与分析 2 1 病原菌的致病性测定及形态学观察 从发病甘蓝 图1A 中的病健交界处取样进行分 离 将经过纯化后获得的单一菌落接种于健康的甘蓝 上 病斑表现为黑褐色 随着病情发展 霉层逐渐变 为灰黑色 叶片开始枯黄 图1B 对重新分离的菌株 进行形态学观察 结果与原菌株形态一致 确认该菌 株为导致甘蓝黑斑病的主要病原菌 命名为GL 14 对GL 14菌株进行形态学观察 图1C 图1D 病原菌的菌丝呈绒毛状 生长初期为黄绿色至橄榄 绿色 后期则呈灰黑色 在显微镜下观察孢子及气 生菌丝 发现孢子形态不一 呈椭圆形或卵形 也有 倒棍棒形或长梭形 部分带有喙或无喙 孢子具有 1 4个横膈膜及0 3个纵膈膜 分生孢子的长度范围 为10 36 17 12 m 宽度为6 81 17 12 m 上述形 态学特征与链格孢属 Alternaria spp 高度相似 初步 鉴定GL 14为Alternaria spp 2 2 病原菌的分子生物学鉴定 对GL 14菌株进行ITS序列扩增 获得约850 bp 的扩增片段 将测序结果与NCBI数据库中的序列进 行BLAST比对 结果显示 GL 14与登录号为Alter naria brassicae WZ 293 MN856410 1 的序列相似度 高达99 81 在此基础上 进一步构建了菌株的系 统发育树 图2 发现GL 14菌株与芸薹链格孢菌 Alternaria brassicae 聚类于同一分支 结合形态学特 征分析 最终确定GL 14为Alternaria brassicae 2 3 SAEW对菌株GL 14孢子萌发的影响 由图3可见 不同质量浓度的SAEW对GL 14孢 子的萌发具有显著抑制作用 3 h时 未经SAEW处 理的GL 14孢子开始萌发 萌发率为11 45 7 h时 50 mg L SAEW处理后的孢子开始萌发 萌发率为 13 55 此时0 mg L处理组的孢子萌发率已达到 100 9 h时 未经处理的GL 14孢子萌发率达到 100 而50 mg L SAEW处理后的孢子萌发率仅为 14 69 在100 mg L SAEW处理组中 孢子未见萌发 注 A 甘蓝发病图 B 甘蓝回接图 C 病原菌孢子形态 标尺为 100 m D 病原菌菌丝及孢子形态 标尺为10 m 图1 甘蓝黑斑病病原菌鉴定 Fig 1 Identification of pathogenic bacteria of cabbage black spot disease 14 2025年第12期 韩 悦 等 微酸性电解水对甘蓝采后黑斑病病原菌的防治效果研究 投稿平台 2 4 SAEW对菌株GL 14菌丝生长的影响 SAEW对GL 14菌丝生长具有显著抑制作用 图 4 在PDA培养基上培养6 d时 对照组的平均病斑 直径为58 72 mm 而200 mg L SAEW处理组未观察到 菌丝生长 且与对照组之间存在显著差异 P 0 05 结果表明 SAEW对GL 14菌丝的生长呈浓度依赖性 抑制 并呈负相关趋势 200 mg L SAEW处理组能有 效抑制GL 14菌丝在PDA培养基上的生长 2 5 SAEW对甘蓝黑斑病的防治效果 由图5可见 SAEW对GL 14在甘蓝上的防治效果 显著 接种后3 d 未经SAEW处理的甘蓝开始出现轻 微病斑 经过12 d观察 未处理组的伤口处病斑明显扩 散 病情指数达到90 00 表1 而经过100 mg L 注 A 平板形态 B 病斑直径 图4 不同质量浓度SAEW对GL 14的平板抑菌试验 Fig 4 Plate inhibition test of GL 14 after different mass concentrations of SAEW treatments GL 14 Alternaria brassicae WZ 293 MN856410 1 Alternaria brassicae SCAU210 OK271385 1 Alternaria alternata APRC02 KY067942 1 Alternaria tenuissima ITCC 7808 MH084275 1 Alternaria tenuissima KOR2l PQ035131 1 Stemphylium vesicarium CBS 191 86 KC584239 1 Fusarium graminearum Fg389 MH681145 1 Colletotrichum gloeosporioides 12GM0001 AB981196 1 100 99 59 94 58 0 05 图2 甘蓝黑斑病病原菌GL 14系统发育树 Fig 2 Phylogenetic tree of cabbage black spot pathogen GL 14 A 200 mg L 0 h 3 h 5 h 7 h 9 h 100 mg L 50 mg L 0 mg L B 3 5 7 9 0 20 40 60 80 100 孢子萌发率 0 mg L 50 mg L 100 mg L 200 mg L 时间 h a a a b b b b b b c a c cc cc 注 A 孢子萌发形态 标尺为10 m B 孢子萌发率 图中不同小写 字母表示相同时间不同处理间差异显著 P 0 05 图4 图7 图8同 图3 不同质量浓度SAEW处理GL 14的孢子萌发 Fig 3 Spore germination of GL 14 treated with different mass concentrations of SAEW 15 2025年第12期 保鲜与加工 Storage and Process 联系邮箱 bxyjg 和150 mg L SAEW处理的组别 病情指数分别为 61 94 和11 39 200 mg L SAEW处理组的伤口保 持良好状态 发病率和病情指数均为0 而此时少量 对照组伤口处开始出现病斑 综上所述 200 mg L SAEW能够有效抑制甘蓝黑斑病的发生 2 6 SEM下观察SAEW对GL 14细胞膜结构的破坏程度 扫描电子显微镜能观察到菌株GL 14孢子表面的 形态变化 通过扫描电子显微镜观察经SAEW处理后的 GL 14孢子形态 图6 由图6A可以看出 未经处理的 GL 14孢子形态完整饱满 部分孢子分隔处出现缢 缩 经SAEW处理后GL 14孢子呈现不同程度的破裂 及皱缩 图6B 图6C 图6D 且破裂程度与SAEW处理 质量浓度呈正相关 200 mg L SAEW处理5 min 图6D 后孢子内容物外泄明显 且未破裂的GL 14孢子呈现明 显肿胀形态 2 7 菌株GL 14核酸 蛋白质泄漏量的测定 由图7可见 SAEW处理后 上清液中的核酸和 蛋白质泄漏量显著增加 且在200 mg L下 泄漏量达 到最高值 且与对照组之间存在显著差异 P 0 05 这是因为SAEW显著破坏了GL 14菌株的细胞膜完 整性 导致核酸 蛋白质等大分子物质的泄漏 随着 SAEW质量浓度的增加 对细胞膜的破坏程度加剧 处理效果更加显著 2 8 菌株GL 14孢子的PI染色观察 由图8可见 经过200 mg L SAEW处理的GL 14 孢子着色率达到84 19 显著高于对照组 P 0 05 且未经SAEW处理的病原菌孢子着色率仅为 12 90 这一结果表明 SAEW处理破坏了GL 14孢 图5 不同质量浓度SAEW对GL 14在甘蓝上的防治效果 Fig 5 Control effects of different mass concentrations of SAEW treatments on GL 14 in cabbage 表1 接种12 d后SAEW对GL 14致病力的影响 Table 1 Effects of SAEW on the pathogenicity of GL 14 after 12 days inoculation 单位 处理 CK 0 mg L SAEW 100 mg L SAEW 150 mg L SAEW 200 mg L SAEW 发病率 7 5 5 0 b 100 0 0 0 a 100 0 0 0 a 97 5 2 5 a 0 0 0 0 c 病情指数 1 94 0 55 d 90 00 2 78 a 61 94 7 77 b 11 39 0 56 c 0 00 0 00 e 注 同一列数据后不同小写字母表示差异显著 P 0 05 注 A 对照组 B SAEW处理质量浓度为100 mg L C SAEW处理质量 浓度为150 mg L D SAEW处理质量浓度为200 mg L 标尺为10 m 图6 SAEW处理前后孢子形态变化的观察 Fig 6 Observation of spore morphological changes before and after SAEW treatments 图7 不同质量浓度SAEW对GL 14核酸泄漏量 A 及蛋白质 泄漏量 B 的影响 Fig 7 Effects of different concentrations of SAEW treatments on nucleic acid A and protein B leakage of GL 14 16 2025年第12期 韩 悦 等 微酸性电解水对甘蓝采后黑斑病病原菌的防治效果研究 投稿平台 子的膜结构 导致PI染料进入孢子内部与核酸结合 产生红色荧光 3 讨论 甘蓝作为重要的芸薹属蔬菜作物之一 在我国 种植范围广泛 伴随种植规模的扩大 其病害发生频 率也逐渐上升 21 甘蓝采后病害有真菌性病害和细 菌性病害 如油菜黄单胞菌 Xanthomonas campestris pv campestris 引发的甘蓝黑腐病和胡萝卜果胶杆菌 Pectobacterium carotovorum subsp carotovorum 引发 的软腐病均为细菌性病害 核盘菌 Sclerotinia sclero tiorum 引发的甘蓝菌核病 尖孢镰刀菌 Fusarium oxysporum 引发的甘蓝枯萎病以及链格孢属 Alter naria spp 引发的黑斑病均为真菌性病害 其中芸薹 链格孢菌 Alternaria brassicae 是包括甘蓝在内的芸 薹属植物主要的链格孢菌种类 22 27 Gupta等 28 采用生物防治办法 利用植物生长促 进菌对芥菜中Alternaria brassicae引起的枯萎病进行 防治 但该方法操作较为复杂 Khalse等 29 研究发 现 桉树叶提取物能有效控制由Alternaria brassicae 引起的卷心菜病害 但桉树叶提取物的应用具有地 域局限性 经外源褪黑素处理后接种Alternaria brassi cae的萝卜虽然显示出一定的抑制作用 但仍会出现 黑斑病症状 且病情指数随着处理浓度的增加表现 出先下降后上升的趋势 30 因此 实际操作中需要严 格控制浓度 这对于大规模生产应用具有一定的挑 战 王敏等 31 对7种杀菌剂在Alternaria brassicae上 的毒力及增效作用进行了研究 并进一步发现Alter naria brassicae已对甲基硫菌灵产生抗药性 因此 亟 需探索一种简便 安全且适用于实际采后抑制病原 菌的防治方法 SAEW具有生产成本低廉 杀菌效果显著 安 全性高且无抗药性 因而有望成为甘蓝采后黑斑病 防治的新型方法 结合紫外线处理 SAEW对金黄 色葡萄球菌和大肠杆菌有显著的杀菌效果 主要通 过降低三磷酸腺苷 ATP 水平并增加细胞内活性 氧积累来实现 32 此外 研究 33 还表明 SAEW处理 可导致空肠弯曲菌的蛋白质 核酸和ATP泄漏 从 而进一步降低细胞活性 因此 SAEW可用于防治 因Alternaria brassicae导致的甘蓝黑斑病 且SAEW 处理能够破坏Alternaria brassicae的细胞膜结构和 完整性 4 结论 本研究通过分离与鉴定甘蓝黑斑病的病原菌 确认致病菌株为芸薹链格孢菌 Alternaria brassicae GL 14 研究还发现 不同质量浓度的SAEW处理对 病原菌具有显著的抑制作用 100 mg L SAEW能有效 抑制孢子萌发 而200 mg L SAEW则能显著抑制菌丝 在平板及甘蓝上的生长 SAEW能够破坏Alternaria brassicae的细胞膜结构 导致细胞干瘪变形甚至破裂 进一步造成菌丝体内蛋白质与核酸泄漏 PI染色试 验进一步证明 SAEW处理后 细胞膜的通透性增加 导致细胞内容物的释放 此外 200 mg L SAEW处理 5 min后 Alternaria brassicae 的孢子着色率达到 84 19 综合考虑 200 mg L SAEW处理在实际生产 中效果最佳 以上结果为甘蓝黑斑病的防治提供了 更加安全 简便的方法 并对甘蓝采后病害的防治具 有重要的理论意义和实际应用价值 参考文献 1 WEI D H XIAO X M WEI L J et al Development and com prehensive HS SPME GC MS analysis optimization com parison and evaluation of different cabbage cultivars Bras sica oleracea L var capitata L volatile components J OL 注 BF 明场图 PI 荧光图 标尺为10 m 图8 SAEW处理的孢子PI染色显微镜观察结果 A 和孢子着 色率 B Fig 8 Microscopic observation results A and spore staining rate B of PI stained spores treated by SAEW 17 2025年第12期 保鲜与加工 Storage and Process 联系邮箱 bxyjg Food Chemistry 2021 340 2025 01 28 https doi org 10 1016 j foodchem 2020 128166 DOI 10 1016 j foodchem 2020 128166 2 刘志刚 余方伟 张伟 等 甘蓝黑斑病病原菌鉴定及其对 杀菌剂的敏感性 J 江苏农业学报 2023 39 4 947 955 DOI 10 3969 j issn 1000 4440 2023 04 004 3 沈绍斌 陈继丽 李慧芹 等 4种药剂对甘蓝黑斑病病原菌 的防效研究 J 中国热带农业 2017 6 43 45 DOI 10 3969 j issn 1673 0658 2017 06 012 4 王炳然 花生 西兰花和结球甘蓝黑斑病菌和花生网斑 病菌对五类杀菌剂的抗性检测及抗性菌株生物学特性 D 南京 南京农业大学 2021 DOI 10 27244 ki gnjnu 2021 001391 5 沈钰森 王建升 盛小光 等 十字花科植物黑斑病的研究 进展 J 核农学报 2021 35 3 623 634 DOI 10 11869 j issn 100 8551 2021 03 0623 6 林海潞 胡兴成 李帆 等 微酸性电解水对采后双孢蘑菇贮藏 效果的影响 J 福建农林大学学报 自然科学版 2024 53 5 712 720 DOI 10 13323 ki j fafu nat sci 202311014 7 徐东杉 微酸性电解水对肉鸡沙门氏菌的防治研究 D 泰安 山东农业大学 2022 DOI 10 27277 ki gsdnu 2022 000179 8 程博 张宏博 康宁波 等 微酸性电解水在采后果蔬保鲜 中的作用机理及研究进展 J 食品与发酵工业 2025 51 9 395 404 DOI 10 13995 ki 11 1802 ts 040271 9 薛婧琳 刘慧 甘慧萍 等 微酸性电解水在食品杀菌保鲜 中的应用分析 J 现代食品 2024 30 2 63 66 DOI 10 16736 41 1434 ts 2024 2 020 10 隋心意 微酸性电解水对番茄灰霉病和灰叶斑病防治作 用的研究 D 沈阳 沈阳农业大学 2019 DOI 10 27327 d cnki gshnu 2019 000656 11 LI L L MU T H ZHANG M Contribution of ultrasound and slightly acid electrolytic water combination on inactivating Rhizopus stolonifer in sweet potato J OL Ultrasonics Sono chemistry 2021 73 2025 01 20 https doi org 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