金针菇工厂化液体菌种制备关键技术.pdf

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PECIAL ECONOMIC ANIMALS AND PLANTS 特种经济动植物 S 51 2020 年 第 12 期 金针菇工厂化液体菌种制备关键技术 王伟霞 1 2 张 婷 1 3 仝乐涛 1 4 李福后 1 2 1 江苏海洋大学食品科学与工程学院 江苏 连云港 222005 2 江苏省海洋资源开发研究院 江苏 连云港 222005 3 连云港市质量技术综合检验检测中心 江苏 连云港 222006 4 连云港友和食用菌有限公司 江苏 连云港 223500 摘要 本文对用于金针菇工厂化栽培的液体菌种制备关键技术进行了综述 包括培养基配方 制 备工艺以及注意事项等 以期进一步推动金针菇工厂化栽培的发展 关键词 金针菇 液体菌种 制备 金针菇是我国食用菌工厂化栽培的主要品种 之一 目前 金针菇工厂化栽培已成为金针菇生 产的主要模式 液体菌种使用逐步代替固体菌种 用于金针菇工厂化生产是今后的发展趋势 开展 金针菇液体菌种研发和工厂化生产应用 可有效 提高企业的经济效益 促进产业可持续发展 1 培养基 金针菇液体菌种制备主要涉及三种培养基 分别是 P D A 固体培养基 摇瓶发酵培养基和 发酵罐培养基等 目前已报道了多种摇瓶发酵 培养基和发酵罐培养基配方 都取得了明显实 效 1 4 1 1 摇瓶发酵培养基 配方 1 葡萄糖 2 0 g 蛋白胨 2 g 磷酸二 氢钾 1g 硫酸镁 0 5g 柠檬酸三钠 1g 氯化钙 0 1g 硫 酸 亚 铁 1mg 硫 酸 锰 1mg V B1 0 1 g V B2 0 1 g 水 1 000mL 配方 2 可溶性淀粉 40g 葡萄糖 10g 蛋白 胨 3g 磷酸二氢钾 1g 硫酸镁 0 5g V B1 10 g V B2 50 g 水 1 000mL 1 2 发酵罐培养基 配方 1 马铃薯 150g 麸皮 30g 蔗糖 20g 磷酸二氢钾 1g 硫酸镁 0 5g 水 1 000mL 配方 2 豆粕粉 40g 白砂糖 10g 磷酸二 氢钾 1g 硫酸镁 0 5g V B1 100 g V B2 500 g 水 1 000mL 配方 3 玉米粉 50g 麸皮 30g 磷酸二氢 钾 1g 硫 酸 镁 0 5g V B1 0 1 g V B2 0 5 g 水 1 000mL 在发酵罐培养基中 一般加入适量的消泡剂 如聚二甲基硅氧烷乳液等 可有效防止泡沫的形 成 避免泡沫对液体菌种发酵过程造成影响 2 液体菌种制备过程 在金针菇工厂化液体菌种制备过程中 为 了有效缩短生长周期和避免不必要的污染 生产 企业多采用摇瓶液体种子直接接入发酵罐培养基 中 其具体工艺为 试管或平板固体菌种 摇瓶 发酵 发酵罐菌种 接种栽培料 具体过程如下 2 1 平板接种菌种 选用 PDA 平板培养基 于平板中央接种一 块直径约 0 5cm 的菌种块 25 条件下培养 金 针菇气生菌丝发达 一般 6 7d 即可长满整个平 板 建议使用平板 9cm 培养皿 来培养固体菌种 一是有利于观察菌种的气生菌丝生长状况 二是 有利于从菌落边缘打孔 2 2 摇瓶发酵培养菌丝 利 用 1 000mL 摇 瓶 装 入 600mL 发 酵 培 养基 灭菌后备用 用打孔器从平板菌落边缘 打孔 接种到摇瓶发酵培养基 接种量为 8 10 块 固 体 菌 种 直 径 5mm 转 速 160r min 23 培养 6 7d 为了防止菌丝球凝结在一起 可利用磁力搅拌器将种子液中的菌丝块打散 图 1 A 2 3 发酵罐接种菌种 利用 1 000L 气动式发酵罐 装入 800L 发酵 培养基 高压蒸汽灭菌后备用 接种量为 1 2 特种植物 特色蔬菜 52 2020 年 第 12 期 23 条件下培养 6 7d 即可放罐 用于接种栽培 料 图 1 B 图1 摇瓶和发酵罐培养 3 注意事项 3 1 防止杂菌污染 液体菌种制种效率高 易实现工厂化操作 但杂菌污染是液体菌种制备过程中不容忽视的问 题 特别是中小型金针菇生产企业 抗风险能力 弱 一旦发生杂菌污染 极有可能造成破产倒闭 造成杂菌污染的原因主要有三个 一是技术操作 问题 二是发酵罐及附属设备渗漏 三是菌种 染菌 针对以上问题 建议企业可采取如下措施 将风险控制到最低范围 定期培训技术操作人员 提升技术操作人员理论和操作水平 建立发酵车 间操作规范 引导技术人员按章操作 定期检查 和维护设备 避免设备跑冒滴漏 定期开展菌种 纯化和检验工作 利用平板培养 显微镜观察等 方法 及时判断菌种是否感染杂菌等 3 2 维护菌种稳定 菌种是企业生产的核心 维护菌种稳定是企 业高产稳产的关键 企业应每周对液体菌种进行 一次抽样检测 检测方法有回接平板培养 显微 镜观察等 通过观察气生菌丝生产状况 锁状联 合有无 见图 2 等初步判断菌种质量 防止菌 种退化对企业造成不可挽回的损失 马丹丹等 5 发现 利用加入溴百里芬蓝的 LBL 液体培养基可 排除退化严重菌株 退化严重的菌株脱色能力差 建议生产企业可推广使用 图2 金针菇平板培养和显微镜观察 锁状联合 参考文献 1 宋士良 金针菇液体制种技术 J 农业科技通讯 1993 01 17 2 陈力力 刘红 邹正 金针菇液体菌种的制备及栽培试 验 J 食用菌 2011 33 02 13 14 3 李国庆 柯家厚 焦小雨 等 金针菇工厂化生产的液体 菌种开发与应用 J 安徽农业科学 2017 45 20 53 55 4 黄竹青 郑剑玲 邓铁宏 等 白色金针菇液体菌种制备 及工厂化生产应用初探 J 微生物学杂志 2013 33 02 75 79 5 马丹丹 余昌霞 陈辉 等 生产用金针菇菌种退化的快 速判断 J 食用菌学报 2012 19 01 36 38 基金项目 连云港市第五期 521工程 资助项目 2017 灌南县农业科技计划 GN201805 作者简介 王伟霞 1977 女 讲师 研究方向 食用菌工厂 化栽培 通讯作者 李福后 1978 男 副教授 研究方向 食用菌 工厂化栽培和设施园艺技术推广 应对移栽苗进行一次浇透水 雨季移栽时 选择在 雨 天 前 栽 植 可 不 必 浇 水 3 3 结语 在樟子松容器育苗栽培技术的运用中 应把 握好技术操作要点 才有助于提高干旱地区樟子松 造林成活率和造林效果 参考文献 1 凌利宏 邵百惠 夏得月 容器苗养护管理研究 J 安徽农 业科学 2020 08 140 142 2 贾艳才 樟子松容器苗播种繁育技术要点 J 江西农 业 2020 04 52 53 3 赵亮 章古台地区樟子松抗旱造林关键技术分析 J 防护 林科技 2019 05 70 71 上接第47页
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