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收稿日期 作者简介 刘会宁 （），女 ，硕士 ，教授 ，现主要从事葡萄抗病性及园艺植物优质高效栽培方面的研究工作 ，。引著格式 刘会宁 ，李丛玉塑料大棚内 个欧亚种葡萄品种对霜霉病的抗性表现长江大学学报（自然科学版 ），（）：，塑料大棚内个欧亚种葡萄品种对霜霉病的抗性表现刘会宁 ，李丛玉（长江大学园艺园林学院 ，湖北 荆州）摘要 在葡萄霜霉病盛发期 （月份），通过田间自然鉴定和室内离体叶圆片接种鉴定方法 ，探讨了塑料大棚内 个欧亚种葡萄品种对霜霉病的抗性 。种方法均以叶片为调查对象 ，以发病率和病情指数为指标 。结果表明 ：供试的 个欧亚种葡萄品种都不抗霜霉病 ，但品种间存在感病性的差异 。根据室内离体叶圆片接种鉴定的病情指数 ，将试验品种分为 类 ：凤凰 号为高感品种 ，维多利亚 、研选 号 、为中感品种，早紫 、粉红亚都蜜为低感品种 。由于供试品种中早紫和粉红亚都蜜品种对霜霉病的抗病性最强 ，建议在霜霉病发病严重的南方保护地适度推广栽培 ，也可作为育种的原始材料加以利用 。关键词 塑料大棚 ；欧亚种葡萄 ；霜霉病 ；抗病性中图分类号 ；文献标志码 文章编号 （）欧亚种葡萄 （ ）是品质优良的葡萄种类 ，但通常不抗真菌性病害 。葡萄霜霉病病菌（ ）是危害葡萄生产的主要真菌病害 ，几乎遍布全世界所有的葡萄产区，。目前 ，尚未发现一个葡萄免疫品种 、品系或类型 ，也没有一种农药能根除葡萄霜霉病。葡萄霜霉病起源于美洲 ，年因引种抗葡萄根瘤蚜的砧木而传入法国 ，其后陆续传至世界各地 。该病主要为害叶片 ，可导致叶片早落 。发生严重时 ，导致葡萄植株发育不良 ，对树势和产量影响很大 ，一般导致减产，严重时可达以上。葡萄霜霉病是复侵染病害 ，目前主要采用农药防治方法 ，但农药防治不仅增加生产成本 ，污染环境 ，还会降低葡萄及其加工产品的品质 ，长期使用农药后还会使植株产生抗药性 。因此 ，需要寻找新的病害防治途径 。实践证明 ，选育和合理推广抗药新品种是综合防治葡萄霜霉病的最有效措施，。笔者通过田间自然鉴定和室内离体叶圆片接种鉴定种方法 ，对个欧亚种葡萄品种对霜霉病的抗性进行了鉴定 ，旨在筛选出抗病性较强的葡萄品种直接用于生产栽培 ，或为抗病育种提供原始材料 。 材料与方法 试验材料所用试验材料种植于长江大学园艺园林学院教学实习基地塑料大棚内 。供试品种有维多利亚 、粉红亚都蜜 、研选号 、早紫和凤凰号共个 ，株行距为，单臂篱架 ，扇型整枝 。试验期间 ，所有品种田间管理条件相同 。 试验仪器及设备试验中所用仪器及设备主要有型人工气候箱 、显微镜 （倍 ）、手持喷雾器 、血球计数板 、打孔器等 。长江大学学报 （自然科学版 ）年 第 卷 第 期 （ ），DOI:10.16772/j.cnki.1673-1409.2019.11.013 试验方法 田间自然鉴定试验于年月份进行 。每个品种随机选取非边缘位置且长势大致相同的植株作为病害鉴定用植株 ，单株小区 ，次重复 ，以叶片为调查对象 。在发病过程中 ，分次 （月日和月日 ）对各品种的感病情况进行调查 。每小区选取个枝条 ，调查片以上叶片 。记录各小区调查的总叶片数和发病叶片数以及叶片病斑面积占总叶片面积百分率 （严重度 ），根据的 “”级分级方法（见表），统计每一级别的感病叶片数 ，计算各品种的发病率和病情指数 ：发病率发病叶片数调查总叶片数病情指数（病级值该级发病叶片数 ）最高病级值调查总叶片数表 葡萄霜霉病分级标准 （分级法 ）级别 严重度 对叶片的病情指数进行方差分析 （测验 ），差异显著者再进行多重比较 （新复极差法 ），然后计算最小显著差数 （，），再按感病性将供试品种依据文献 的方法分成种类型 ：感病性弱的品种 ，这一类品种的病情指数下限为最抗病品种的病情指数，上限为；感病性中等的品种 ，包括所有介于类和类之间的品种 ；感病性强的品种 ，这一类品种的病情指数上限为最感病品种的病情指数，下限为。 室内离体叶圆片接种鉴定）适宜孢子囊接种浓度的确定将取自田间自然发病的葡萄叶片 ，用洁净的毛笔刷下病菌 ，加蒸馏水配制成孢子悬浮液 ，用血球计数板在显微镜下计数 ，配制成、孢子囊 共种浓度的菌液备用 ，以蒸馏水作对照 。采摘供试植株第或第节位上的无病叶片 ，用直径的打孔器将各品种的无病叶片打成叶圆片片 ，叶背向上平摆于同一个底部垫有三层吸水纸的瓷盘上 ，重复次 ，然后用手持喷雾器进行喷雾接种 ，接种后用塑料薄膜盖住瓷盘以保持湿度。将瓷盘放置于温度为、光周期为、光强为的人工气候箱中 。后统计发病情况 ，用的 “”的分级法进行分级 ，并计算病情指数 。结果表明以孢子囊 浓度菌液接种所引起的不同品种间病情指数的极差和变异系数均最大 ，为室内接种的最佳浓度 ，因此室内接种的抗病性鉴定用此浓度进行 。）室内离体叶圆片接种年月日 ，以孢子囊 的菌液对供试的个品种的离体叶圆片进行喷雾接种 ，重复次 ，试验方法 、试验条件均与适宜孢子囊接种浓度筛选的完全相同 ，接种后后统计发病率和严重度并计算病情指数 。 结果与分析 田间自然鉴定对供试品种植株的叶片进行田间自然鉴定 ，统计其发病率和病情指数 ，结果如表所示 。由表可知 ，年月日与月日的鉴定结果基本一致 ，品种间的抗病性有差异 。从年月日的鉴定结果可知 ，霜霉病叶片发病率在，平均。病情指数在，平均。从发病率来看 ，、研选号无显著差异 ；粉红亚都蜜 、凤凰号和早紫之间无显著差异 。病情指数也是如此 。对病情指数的调查结果进行方差分析 （第 卷 第 期 刘会宁 等 ：塑料大棚内 个欧亚种葡萄品种对霜霉病的抗性表现，），并计算所得最小显著差数，将供试品种分为个级别 ：维多利亚为高感品种 ，、研选号为中感品种 ，粉红亚都蜜 、凤凰号 、早紫为低感品种 。表 不同葡萄品种对霜霉病的田间感病性品种发病率 病情指数 抗性分类发病率 病情指数 抗性分类维多利亚 高感 高感 中感 中感研选 号 中感 中感粉红亚都蜜 低感 中感凤凰 号 低感 低感早紫 低感 低感注 ：表中数据为 次重复的平均值 ；表中大写字母表示 水平上显著 ，小写字母表示 水平上显著 。年月日的鉴定结果表明 ，叶片发病率在，平均。维多利亚 、研选号之间无显著差异 ；凤凰号 、早紫之间无显著差异 。病情指数在，平均。、研选号和粉红亚都蜜之间无显著差异 ；凤凰号 、早紫之间无显著差异 。对病情指数的调查结果进行方差分析 （，），并计算所得最小显著差数，将供试品种分为个级别 ：维多利亚为高感品种 ，研选号 、粉红亚都蜜 、为中感品种 ，凤凰号 、早紫为低感品种 。 室内离体叶圆片接种鉴定表 供试品种对霜霉病的抗性表现品种病情指数 表现型凤凰 号高感维多利亚中感研选 号中感 中感早紫低感粉红亚都蜜低感室内离体叶圆片接种结果如表所示 。由表病情指数的多重比较结果可知 ，维多利亚 、研选号 、之间无显著差异 ；早紫和粉红亚都蜜之间无显著差异 。为了将供试品种按感病性进行分级 ，对病情指数的鉴定结果进行了方差分析 （，），计算所得最小显著差数，然后将供试品种对霜霉病的感病性分为个级别 ：凤凰号为高感品种 ，维多利亚 、研选号 、为中感品种 ，早紫 、粉红亚都蜜为低感品种 。 田间自然鉴定和室内离体叶圆片接种鉴定的相关分析田间自然鉴定与室内离体叶圆片接种鉴定的病情指数相关性分析结果如表所示 。从表可以看出 ，月号 、月号田间自然鉴定的病情指数与室内接种鉴定的病情指数间的相关系数分别为和，均达极显著水平 ，表明种鉴定方法的结果极显著正相关 。室内接种鉴定排除了气候等因素对鉴定结果的影响 ，具有较强的可靠性 ，也最能说明品种间抗病性的差异。故品种间抗病性的强弱以室内接种鉴定结果进行归类 。表 田间鉴定与室内离体叶圆片接种鉴定的病情指数相关性分析品种田间自然鉴定月 日 月 日室内离体叶圆片接种鉴定维多利亚 研选 号 粉红亚都蜜 凤凰 号 早紫 相关系数（下转第页 ）长江大学学报 （自然科学版 ） 年 月参考文献 贺会利 ，魏小兵 ，欧长波 ，等鸡传染性支气管炎病毒研究进展动物医学进展，（）：磨美兰 ，韦平 ，韦正吉 ，等鸡传染性支气管炎病毒分型研究进展中国家禽，（）：亓丽红 ，艾武 ，黄兵 ，等鸡传染性支气管炎病毒 和 基因遗传变异的相关性中国兽医学报，（）：，刘振湘中药防治鸡传染性支气管炎的疗效观察中国兽医杂志，（）：刘鹏飞麻杏石甘粉防治人工感染鸡传染性支气管炎的试验研究保定：河北农业大学 ，王海花 ，张晓峰 ，马晓海黄连清瘟散对自然感染鸡传染性支气管炎的治疗效果中国家禽，（）：王真 ，梁雄燕 ，安红柳 ，等抑制 增殖的植物乙醇提取物的初步筛选黑龙江畜牧兽医，（）： ， ， ， ，：王真禽传染性支气管炎病毒非结构蛋白 的生物学功能研究荆州：长江大学 ，范桂锋中草药防治鸡传染性支气管炎研究兽医导刊，（）：石晋丽 ，朱甘培中国香薷属植物的药用及开发前景中药材，（）：丁晨旭 ，纪兰菊香薷化学成分及药理作用研究进展上海中医药杂志，（）：陈钟文 ，吴文茂 ，刘华 ，等药用香薷类植物化学成分的研究中国实验方剂学杂志，（）：应国红 ，郑民实种中草药抗乙型肝炎病毒的实验研究江西医学院学报，（）：应国红 ，罗国生中草药抑制 的实验研究江西中医学院学报，（）： ， ， ， ，： ， ， ， ， ，：卢年芳 ，黄爱龙干扰素抗病毒作用的机制国际流行病学传染病学杂志，（）：编辑 余文斌（上接第页 ） 结论在欧亚种葡萄对霜霉病抗性鉴定试验中 ，个品种的叶片都表现出不同程度的感病性 ，同一时期各品种的叶片发病情况也存在一定程度的差异 。按室内离体叶圆片接种鉴定的病情指数对各品种叶片的感病性进行分类 ，其叶片感病性强的为凤凰号 ；感病性中等的有维多利亚 、研选号和；感病性弱的有早紫 、粉红亚都蜜 。根据试验所得结果 ，建议将抗病力强的早紫和粉红亚都蜜品种在霜霉病发病严重的南方保护地适度推广栽培 ，也可作为育种的原始材料加以利用 。与露地相比较 ，塑料大棚内葡萄霜霉病的发病程度较轻 ，发病时期较晚 ，这表明欧亚种葡萄在南方地区宜采用保护地栽培。参考文献 贺普超葡萄学北京：中国农业出版社 ，邱强中国果树病虫原色图鉴郑州：河南科学技术出版社 ，宋润刚 ，张亚凤 ，李昌禹山葡萄品种（品系 ）对霜霉病抗性的研究 北方园艺，（）：刘书晓 ，段秀玲用绿乳化铜防治葡萄霜霉病试验北方果树，（）：曹若彬果树病理学北京：中国农业出版社 ，宋润刚 ，路文鹏 ，李昌禹山葡萄种内杂交 对霜霉病抗性遗传的研究园艺学报，（）：李华葡萄优质抗病育种 理论与方法研究北京：中国农业出版社 ，李华分级法在鉴定葡萄霜霉抗性中的利用四川农业大学学报，（）：盖钧镒试验统计方法北京：中国农业出版社 ，贺普超 ，刘延琳葡萄属种间杂交一代对霜霉病抗性遗传的研究园艺学报，（）：汤钿葡萄霜霉病离体接种方法的研究微生物学通报，（）：刘延琳 ，贺普超欧亚种葡萄品种间杂交一代霜霉病抗性的遗传葡萄栽培与酿酒，（）：李莹葡萄文献分布的探讨农业图书情报学刊，（）：，编辑 李启栋长江大学学报 （自然科学版 ） 年 月 ， （ ， ， ，； ， ， ，）， ， ， ， ， （ ， ， ，）， （ ， ， ，）： ， ， ， ， ： ， ， ， ； ， ， ， （） ； ， ， （） ： ； ； ； （ ， ， ， ，） （ ， ， ，） ， ， （ ， ， ， ，）： （） （） ， ： （）（ ）（）（）（）（ ）（）（） ， ， （） ， ； ， ， ， ， ， ， ， ， ， ； ， ， ：； ； ； ， （ ， ， ，）： （ ）， （ ） ， ， ， ： ， ； ， ： ； ；
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