贵州省蓝莓主栽区真菌病害调查初报.pdf

收稿日期 2017 －06 －19; 修回日期 2017 －11 －01基金项目 “蓝莓有害生物绿色防控关键技术研究及应用 ” 黔科合重大专项字 ［ 2015］ 6013 －2 ; “高丛蓝莓产业化高效栽培技术研究及示范 ” 黔科院 SY 字 ［ 2016］ 03 号 －1 ; “贵州省蓝莓工程技术研究中心建设 ” 黔科合平台人才 ［ 2016］5202 号 第一作者 任春光 1981 ， 女 ， 土家族 ， 贵州印江人 ， 硕士 ， 副研究员 ， 主要从事真菌资源及真菌病害研究 ， E-mail408558682 qq． com通信作者 聂飞 ， 研究员 ， E-mail 1134477929 qq． com。贵州省蓝莓主栽区真菌病害调查初报任春光1， 2， 杨丰2， 黄振兴1， 2， 刘曼1， 2， 聂飞1， 2 1. 贵州省生物研究所 ， 贵州 贵阳 550009; 2. 麻江蓝莓产业工程技术中心 ， 贵州 麻江 557602摘要 20152017 年作者采用随机普查和定点调查方式调查贵州省蓝莓 Vaccinium sp． 主要栽培区病害种类 。结果发现 贵州蓝莓叶 、茎 、花共有 7 种真菌病害 ， 其中蓝莓褐斑病 Pseudocercosporasp． 、蓝莓炭疽病 Colletotrichum sp． 、蓝莓茎枯病 Ophiobolus sp． 、蓝莓枯萎病 Phomopsis sp． 值得后期密切关注 。关键词 蓝莓 ; 真菌病害 ; 调查 ; 危害评价中图分类号 S763. 15 文献标志码 A 文章编号 1671 －0886 2018 02 －0022 －06Preliminary investigation of fungal diseases of blueberry in major cultivation areas of Guizhouprovince/ＲEN Chunguang， et al． Guizhou Institute of Biology， Guiyang 550009， ChinaAbstract Fungal diseases of blueberry in major cultivation areas of Guizhou province were investigatedwith random and point surveys from 2015 to 2017． The results showed that there were seven fungal dis-eases on leaf， stem and flower of blueberry in Guizhou province， in which brown spot Pseudocercos-pora sp． ， anthracnose Colletotrichum sp． ， stem blight Ophiobolus sp． and wilt disease Pho-mopsis sp． should be paid close attention to．Key words blueberry; fungal disease; investigation; hazard uation蓝莓 Vaccinium sp． 又称蓝浆果或越桔 ， 属多年生灌木型小浆果果树 ， 果实呈蓝色 ， 是杜鹃花科 Eri-caceae 越橘属 Vaccinium 植物 。因果实中含有丰富的花青素 ， 具有独特的食用营养与保健作用 ， 联合国粮农组织将其列为人类五大健康食品之一 。贵州境内山峦重叠 ， 丘陵起伏 ， 地势变化大 ， 形成了明显的地区性气候差异 。贵州发展蓝莓具有得天独厚的自然条件优势 ， 从 2000 年开始引种兔眼蓝莓 ， 至今已有 17 年栽培历史 ， 先后引入了四类 40 多个品种［ 1 －2］， 贵州的麻江 、黄平 、丹寨 、凤冈 、松桃 、独山 、花溪和乌当等 20 个县区进行了栽培种植 。近年来随着蓝莓种植面积持续增长 、对外引种频繁 ， 病害种类随之增多 ， 发病程度日趋严重 。为了摸清贵州省蓝莓叶 、茎 、花真菌病害种类 ， 有效控制病害的发生 ， 保持蓝莓良好的生长状态 ， 提高生产效益 ， 我们对蓝莓真菌病害种类进行了系统调查 。1 材料与方法1. 1 标本采集 20152017 年 ， 采用随机普查和定点调查方式分别在贵州麻江 、黄平 、丹寨 、凤冈 、松桃等地的蓝莓主要栽培区调查病害种类 ， 采集症状典型的新鲜病株供室内鉴定 。1. 2 病原真菌分离及鉴定 根据真菌病害发生部位和形式 ， 针对性采用不同方法分离病原 。每份材料重复 3 次 ， 取蓝莓基地健康植株组织作空白对照 。对于症状明显 ， 病原菌用肉眼可见的病害 ， 在解剖镜下用无菌接种针直接从病部挑取病原菌放在无菌水中 ， 混合均匀后 ， 再吸取少量菌液在水琼脂培养基 15 g 琼脂 ， 1 000 mL 上 ， 等待萌发后挑取单孢进行多次纯化获得纯培养 。对于症状明显但病原菌无法用肉眼看见的病害 ， 采取组织分离法 ， 取新鲜病健交界处的病组织洗净后切成 4 mm 4 mm 小块 ， 用灭菌水冲洗 3 ～4·22· Forest Pest and Disease Mar． 2018 No．2次 ; 分别用 75酒精消毒 30 s 左右 ， 再在 0. 1升汞中消毒 1 ～2 min， 然后用无菌水冲洗 3 ～4 次 ， 在无菌条件下将感病组织接在 PDA 培养基［ 3］的平板上 。1. 3 致病性测定 对疑难病害用柯赫氏法则进行致病性测定［ 3 －4］。将纯化所得的菌株配成孢子悬浮液 ， 每视野 50 ～60 个孢子 10 16 倍 ， 以刺伤和无伤接种法 ， 把孢子液涂于新鲜健康的离体寄主上 ; 以无菌水保湿作对照 CK ， 然后将接种的叶片或枝条放入无菌湿润滤纸的培养皿中 ， 置于 25 ℃温箱内保湿培养 ， 每处理 3 个重复 ， 每隔 2 d 观察 1 次 ， 记录接种结果 ， 并对接种成功的病斑进行组织分离 ， 确认致病菌株［ 5］。根据病原菌形态特征 ， 参照魏景超［ 5］ 1979真菌鉴定手册 和陆家云［ 4］ 2001 植物病原真菌学 ， 按照 Ainsworth 分类系统 ， 参考有关文献［ 6 －8］，初步鉴定贵州蓝莓病害的病原真菌 。2 结果与分析2. 1 蓝莓褐斑病症状 褐斑病主要危害叶片 ， 叶片受害初期产生棕褐色小点 ， 边缘有卷起 ， 后期随着病斑扩大 ， 边缘褐色至红褐色 ， 病健交界清楚 ， 斑点生于叶正面 ， 形状不规则 ， 多个病斑融合成不规则大斑 图 1a 。病原菌 假尾孢菌 Pseudocercospora sp．。分生孢子梗多根 ， 直立或稍弯曲 ， 灰褐色 ， 有隔膜 ， 分枝 。分生孢子棍棒形 、呈曲膝状 、浅褐色 、多数稍弯曲 ， 两端钝圆 ， 通常有 3 ～ 6 个隔膜 ， 20 ～ 80 μm 2 ～9 μm， 符合假尾孢菌属 Pseudocercospora 的形态描述 图 1b 。分布及危害评价 假尾孢属 Pseudocercosporasp． 在世界各地广泛发生 ， 如美国 、英格兰 、澳大利亚 、韩国等均有报道［ 8］， 在中国的东北 、重庆 、北京 、贵州等其它植物上发现过假尾孢属病原菌［ 7 －9］。假尾孢病原菌在贵州的猕猴桃上有报道 ， 主要危害叶片 ， 引起干枯后卷曲 ， 落叶 ， 严重影响植物光合作用［ 7］。该属是植物病原菌 ， 可危害蔬菜 、花卉 、经济林木 、中药材等多种植物 ， 是非常重要的病原菌 。引起叶片枯焦 ， 提前脱落 ， 或造成落花 、落果 ， 影响产量和品质 ， 常造成一定的经济损失 ， 假尾孢属有些种引起的病害甚至被列在检疫法规中成为检疫对象 。目前蓝莓褐斑病发病率为 10 ～15， 在蓝莓上未见此病原菌报道 。因为蓝莓褐斑病对蓝莓生产可能造成相当大的经济损失 ， 严重时甚至可以导致绝收 ， 因此不能轻视蓝莓褐斑病的危害 ， 应作为后期重点观察病害之一 ; 定点观察蓝莓褐斑病害的发生发展规律 ， 加强室内生物源药剂筛选试验 ， 为预防病害进一步蔓延打下前期基础 。图 1 蓝莓褐斑病症状和病原菌 Pseudocercospora sp．2. 2 蓝莓叶点病症状 主要危害叶片 ， 新叶和老叶均危害 ， 病部多从叶中开始 ， 发病初期出现很多褪绿色大小不一小斑点 ， 后期呈棕色斑点 ， 斑点形状不规则 ， 后期叶片逐渐变红 ， 病斑仍清楚 。保湿培养后着生黑色小点 ， 即病菌分生孢子器 。78 月高温干旱 ， 病害最重 ， 导致叶片提早枯落 图 2a 。病原菌 拟盘多毛孢属 Pestalotiopsis sp．。分生孢子纺锤形 ， 13 ～18 μm 4 ～6 μm， 直或稍弯 ， 3 个隔膜 ， 中间 3 个细胞黑褐色 ， 两端细胞无色 ，圆锥形 ， 顶生 1 ～2 根附属丝 ， 长 12 ～23 μm， 基细胞具短柄 图 2b 。分布及危害评价 拟盘多毛孢属 Pestalotiopsissp． 在世界各地广泛发生 ， 可危害许多农作物及经济植物 ， 例如玉米 、猕猴桃 、竹子等 。目前该病发病率为 5 ～10， 拟盘多毛孢菌是多数植物上的弱致病·32·中国森林病虫 2018 年 3 月 第 37 卷 第 2 期真菌 ， 也是植物上常见腐生真菌 ， 通常引起不同程度斑点状 ， 环境条件适合时发病较重 ， 拟盘多毛孢菌对生产危害不大 ， 及时喷施叶面肥或植物源真菌杀菌剂该症状很快缓解 。图 2 蓝莓叶点病症状和病原菌 Pestalotiopsis sp．2. 3 蓝莓炭疽病症状 蓝莓炭疽病可危害蓝莓花 、叶 、果 ， 嫩芽等 ， 主要危害叶片 ， 在高温多雨时发病较重 ， 发病初期在叶缘或叶尖开始 ， 出现水渍状棕褐色斑点 ， 后期变成深褐色或黑色 、近圆形 、中央稍凹陷的病斑 。天气干燥 ， 病斑中央灰白色 ， 表皮下埋生小黑点即为病原菌分生孢子盘 。严重时造成叶片脱落 ， 嫩梢枯死 ，果实产量下降 图 3a 。病原菌 刺盘孢属 Colletotrichum sp．。分生孢子盘多聚生 ， 黑褐色 ， 顶端不规则破裂 。分生孢子盘上着生刚毛直立 ， 黑褐色 ， 刚毛 1 ～3 根 ， 顶端较尖 ， 基部较粗 ， 1 ～3 个隔膜 ， 80 ～320 μm 2 ～4 μm。分生孢子无色 ， 单胞 ， 纺锤形 、椭圆形或棒状形 ， 两端钝圆 ， 含 1 个油球或无油球 ， 大小为 15 ～27 μm 3 ～5 μm 图 3b 。分布及危害评价 炭疽病原菌能侵染很多经济植物 ， 在世界各地广泛发生 ， 如美国 、英格兰 、澳大利亚等均有报道［ 11 －12］。在中国辽宁 ， 曾报道蓝莓炭疽病发生严重 ， 可造成相当大的经济损失 ， 损失严重时甚至可以导致绝收 ; 有专家认为炭疽病的高发还会导致蓝莓采收后微生物超标 ， 影响产品安全［ 10 －13］。刺盘孢属 Colletotrichum sp． 在贵州的蓝莓 、猕猴桃 、竹子等经济植物上有过报道［ 6 －7， 13 －14］， 目前在贵州蓝莓上发生危害较轻 ， 发病率为 5 ～ 8， 鉴于炭疽病在其它蓝莓栽培区可造成相当大的经济损失 ，因此不能轻视 ， 后期要定点定时观察蓝莓炭疽病的发生发展规律 。图 3 蓝莓炭疽病症状和病原菌 Colletotrichum sp．2. 4 蓝莓茎枯病症状 该病可危害蓝莓叶 、茎 ， 发病初期在嫩茎上形成圆形或椭圆形病斑 ， 后期纵横方向逐渐扩散到整个嫩枝 ， 严重时每株多个枝条受害 ， 严重影响开花和座果率 。嫩茎上密生许多黑色小点 ， 为病原菌的分生孢子器 ， 保湿后长白色丝状霉层 图 4a 。病原菌 蛇孢腔菌属 Ophiobolus sp．。子囊座散生 ， 球形或近球形 ， 浅棕色 ， 顶端呈乳头状突起 。子囊圆筒形或棍棒形 ， 大小为 74 ～113 μm 5 ～8 μm。子囊孢子丝状 ， 无色 ， 有 2 ～5 个隔膜 ， 大小为 72 ～110 μm 2 ～4 μm 图 4b 。分布及危害评价 目前蛇孢腔菌属 Ophiobolussp． 在土 耳 其 、美国等许多国家和地区广泛发生［ 15 －18］， 我国主要在小麦栽培区发生较重 。蛇孢腔菌主要侵染禾本科植物 ， 例如小麦 、玉米 、竹子等植物 ， 可引起禾谷类根部毁灭性的影响［ 15］。蓝莓茎枯·42· Forest Pest and Disease Mar． 2018 No．2病目前发病率为 10 ～15， 蛇孢腔菌在寄主蓝莓上还未见报道 。鉴于蛇孢腔菌属病原菌可能对蓝莓造成毁灭性的影响 ， 所以必须密切注意蓝莓茎枯病的侵染发生情况 ， 积极深入研究病害发生规律及防治措施 ， 及时进行有效防控 ， 避免和减少蓝莓茎枯病的传播 ， 影响贵州蓝莓可持续发展 。图 4 蓝莓茎枯病症状和病原菌 Ophiobolus sp．2. 5 蓝莓灰霉病症状 蓝莓灰霉病可危害蓝莓的花和果实 。在花期 ， 阴雨天气相对湿度大时最易感病 ; 初期多从花尖形成逐渐向花内扩展 ， 形成灰色病斑 ， 后期病斑上着生许多灰色霉层 ， 蓝莓灰霉病病菌易迅速发生 、流行 。采收后的蓝莓在室内存放一周后 ， 果实容易被感染 ， 上呈现灰色霉层 ， 很快软化腐烂 ， 严重影响蓝莓的果实品质 图 5a， b 。病原菌 葡萄孢属 Botrytis cinerea。分生孢子梗细长 ， 直立 ， 通常二叉或三叉分枝 。分生孢子圆形 、卵圆形 ， 单细胞 ， 无色 ， 单生或聚集呈葡萄状 ， 大小为 5 ～11 μm 1 ～8 μm 图 5c 。图 5 蓝莓灰霉病症状和病原菌 Botrytis cinerea分布及危害评价 灰霉病在世界各地均有危害 ， 是植物上常见病害 。多数是腐生真菌 ， 少数是弱寄生真菌 ， 葡萄孢菌在蓝莓上有报道［ 14］。目前发病率 15 ～25， 该病原菌主要受天气影响较大 ， 当·52·中国森林病虫 2018 年 3 月 第 37 卷 第 2 期开花期连续数日阴雨天气 ， 树体抵抗力低 ， 座果率差时 ， 容易感染此病 ， 当天气连续数日晴朗时病原菌数量自然降低 ， 病菌不再传播蔓延 ， 不用喷施药剂症状很快缓解 ， 对生产危害不大 。2. 6 蓝莓枯萎病症状 蓝莓枝条枯萎病往往发生在当年生嫩尖上 ， 主要症状是顶尖死亡 ， 缘叶脉向边缘扩散到整叶 ， 发病初期呈水渍状 ， 后期呈现黑色萎焉 ， 严重时 ，一个植株上多个枝条受害 。保湿培养后上着生黑色小点 ， 即分子孢子器 图 6a 。病原菌 拟茎点霉属 Phomopsis sp． ， 分生孢子有 2 种 。1 种 β 型孢子 ， 钩状或丝状 ， 单孢 ， 无色 ， 9 ～26 μm 1 ～2 μm。另 1 种是 α 型孢子 ， 纺锤型或椭圆形 ， 无色 ， 单胞 ， 4 ～7 μm 1 ～2 μm，内含 1 ～2 个油球 ， 其中 α 型孢子较多 图 6b 。分布及危害评价 拟茎点霉菌呈世界性分布 ，是林业和农业上重要的病原菌和内生菌 。拟茎点霉属真菌种类较多 ， 可引起多种病害 ， 例如果腐 、叶枯 、枝枯 、根腐等 ， 部分种类可以危害人或其他哺乳动物造成真足菌肿病 ， 在自然生态系统中占有非常重要的地位 。拟茎点霉菌在辽宁 、山东 、贵州麻江先后报道 ， 国内将拟茎点霉菌 Phomopsis vaccinii 危害果实的病害列为新的检疫性病害［ 19 －20］。目前拟茎点霉在凯里市宣威镇蓝莓基地上发病率为 5 ～8， 危害蓝莓报道 。鉴于拟茎点霉属的病原菌可能危害蓝莓果实 ， 其中部分病原菌已被列入检疫病害 ， 虽然目前发病较轻 ， 对生产影响不大 ， 但是不能轻视该病的危害 ， 因此后期要定点定时观察其病害的发生发展规律 ， 及时对这些病害进行有效防控 ， 避免此类病害的传播 。图 6 蓝莓枯萎病症状和病原菌 Phomopsis sp．2. 7 叶斑病症状 主要危害叶片 。叶片染病初期为黑褐色小斑点 ， 不久扩大为不规则形大斑 ， 褐色 。随着斑点增多变大 ， 整叶变褐干枯向内卷曲 ， 高温天气病斑中间呈灰白色轮纹状 。潮湿时 ， 病部出现黑色粉状霉层 图 7a 。高温高湿有利于病害发生 。病原菌 链格孢属 Alternaria sp．。分生孢子梗单生或簇生 ， 直立或稍弯曲 ， 褐色具隔膜 。分生孢子单生 ， 倒棒形 ， 直或弯曲 ， 褐色 ， 具隔膜 ， 横隔 2 ～ 4个 ， 纵 、斜隔 0 ～2 个 ， 分隔处略缢缩 ， 13 ～20 μm 5 ～11 μm。喙短柱状 ， 淡褐色 图 7b 。分布及危害评价 蓝莓叶斑病在世界各地广泛发生 。链格孢属病原菌能侵染很多经济植物 ， 是植物上常见病害 ， 多数是腐生真菌 ， 少数是弱寄生真菌 。目前发病率为 10 ～ 15， 此病原菌与环境条件关系密切 。链格孢病原菌对生产危害不大 ， 及时沟施微生物菌肥或喷施叶面肥 ， 病害症状很快缓解 。图 7 蓝莓叶斑病症状和病原菌 Alternaria sp．·62· Forest Pest and Disease Mar． 2018 No．23 结 论与讨论通 过近 2 a 对蓝莓病害的研究 ， 我们已基本摸清了贵州蓝莓叶 、茎 、花病害种类和主要病害危害情况 ， 初步鉴定出贵州蓝莓叶 、茎 、花真菌病害 7 种 ，蓝莓褐斑病 、蓝莓炭疽病 、茎枯病 、枯萎病 4 种病害可能对蓝莓产业造成潜在的危害 。此研究结果对今后蓝莓主要病害的病原生物学特性 、发生规律 、病害检疫及综合防治具有一定的理论参考价值 ， 也为指导蓝莓产业生产提供了重要的理论依据 。目前我国已报道的侵染蓝莓叶部的真菌病害有5 种［ 2， 14， 20］， 其 中假尾孢属和蛇孢腔菌属病原菌在蓝莓上引发病害为首次报道 ， 同属病原菌在不同寄主上危害症状不一 。假尾孢属主要危害蔬菜 、花卉等植物 ， 蛇孢腔菌主要危害禾本科植物 ， 此次蓝莓成为该病原菌的新寄主 ， 是否与贵州一带采用稻谷壳作为蓝莓栽培后覆盖物 ， 果园附近有蔬菜和花卉基地有关 ， 有待进一步验证 。本试验仅从调查和鉴定病害入手 ， 其中重要病害发生发展规律 、发病特点等还需进行深入研究 。参 考文献 ［ 1］ 任艳玲 ， 周杰 ， 王涛 ， 等 ． 贵州蓝莓产业的发展现状及对策［ J］ ． 贵州农业科学 ， 2016， 44 6 172 －175．［ 2］ 张 国辉 ， 李性苑 ， 杨芩 ， 等 ． 麻江县蓝莓重要病虫害的种类调查和病原鉴定 ［ J］ ． 浙江农业科学 ， 2016， 57 3 372 －375．［ 3］ 方 中达 ． 植病研究方法 ［ M］ ． 3 版 ． 北京 中国农业出版社 ，1998 137 －138．［ 4］ 陆家云 ． 植物病原真菌学 ［ M］ ． 北京 中国农业出版社 ， 2001449 －533．［ 5］ 魏景超 ． 真菌鉴定手册 ［ M］ ． 上海 上海科学技术出版社 ，1979 647 －648．［ 6］ 任春光 ， 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