生防菌株L2-2的分离鉴定及其对蓝莓灰霉病的防治效果研究.pdf

doi 10 16473 j cnki xblykx1972 2025 01 011 生防菌株L2 2的分离鉴定及其对 蓝莓灰霉病的防治效果研究 杨威平 颜倩 侯瑞 贵州大学 林学院 贵州 贵阳 550025 摘要 为明确生防菌株L2 2对蓝莓灰霉病的防治机理 根据形态学与分子生物学对菌株L2 2进行鉴定 利用平 板对峙法测定其对蓝莓灰霉病致病菌灰葡萄孢菌HM4 1菌丝和生长的抑制效果 同时 通过盆栽试验测定菌株 L2 2对蓝莓灰霉病的防治效果和对蓝莓相关防御酶活性的影响 并分析蓝莓叶际微生物群落组成变化 结果显示 1 菌株L2 2为苏云金芽孢杆菌 菌株L2 2及其发酵液对蓝莓灰霉病原菌抑制率分别为72 01 41 56 2 菌株L2 2回接蓝莓盆栽苗处理中对蓝莓灰霉病预防和治疗效果达75 55 69 58 3 植物防御酶SOD POD CAT PPO PAL活性出现不同程度提高 出现的最高提升分别为142 04 199 35 428 85 1 318 74 127 33 4 叶际微生物群落分析中 菌株L2 2处理的盆栽苗芽孢杆菌属相对丰度提高了52 53 可得结论 菌株L2 2能够有效降低蓝莓灰霉病的发生 研究结果能够为蓝莓灰霉病生物防治提供一定的理论依据 关键词 蓝莓灰霉病 苏云金芽孢杆菌 生物防治 防御酶活性 叶际微生物 中图分类号 S 763 文献标识码 A 文章编号 1672 8246 2025 01 0085 08 Isolation and Identification of Biocontrol Bacterium L2 2 and Its Control Effect on Blueberry Gray Mold YANG Weiping YAN Qian HOU Rui College of Forestry Guizhou University Guiyang Guizhou 550025 P R China Abstract To clarify the control mechanism of the biocontrol strain L2 2 against blueberry gray mold the strain was identified using morphological and molecular biology methods The antagonistic effect of strain L2 2 against the gray mold pathogen Botrytis cinerea HM4 1 was assessed using the dual culture plate method Additionally pot experi ments were conducted to evaluate the efficacy of strain L2 2 in controlling blueberry gray mold and its impact on re lated defense enzyme activities in blueberries as well as to analyze the changes in the leaf associated microbial com munity composition The results indicated that strain L2 2 is B thuringiensis The inhibition rates of strain L2 2 and its fermentation broth against the gray mold pathogen were 72 01 and 41 56 respectively The treatment of potted blueberry seedlings with strain L2 2 achieved prevention and treatment efficacy rates of 75 55 and 69 58 against gray mold The activities of plant defense enzymes SOD POD CAT PPO and PAL increased to varying degrees with the highest increases of 142 04 199 35 428 85 1 318 74 and 127 33 respectively In the analysis of the leaf associated microbiota the relative abundance of Bacillus species in potted seedlings treated with strain L2 2 in creased by 52 53 In summary strain L2 2 effectively suppresses the occurrence of blueberry gray mold and the re search findings provide a theoretical basis for the biological control of blueberry gray mold 第54卷 1期 2025年2月 西 部 林 业 科 学Journal of West China Forestry Science Vol 54 No 1 Feb 2025 收稿日期 2024 10 29 基金项目 国家自然科学基金项目 32260651 贵州省基础研究 自然科学 项目 黔科合基础 ZK 2023 一般094 第一作者简介 杨威平 1999 男 硕士研究生 主要从事植物病理研究 E mail 401546368 qq com 通信作者简介 侯瑞 1988 女 副教授 主要从事林木病害鉴定和绿色防控方面的研究 E mail jiayouhourui123 163 com Key words blueberry gray mold Bacillus thuringiensis biological control defense enzyme activity leaf asso ciated microbiota 蓝莓为浅根系多年生低灌木 隶属于杜鹃花科 Ericaceae 越橘属 Vaccinium spp 1 2 因富 含营养而被广泛栽培 其酚类活性物质花色苷具有 保护心血管 减轻氧化应激反应 调节肠道菌群 改善视力多种功能 3 4 中国于20世纪80年代对 蓝莓进行引进栽培 2022年中国蓝莓总产量与栽 培总面积已达到世界第一 5 贵州省以贵阳 麻 江 息烽 凤岗等地为蓝莓主栽区 兔眼 高丛等 蓝莓品种种植面积达15 200 hm2 其中麻江县规模 为全国第一 6 7 蓝莓灰霉病 blueberry gray mold 是由世界 分布 寄主范围广泛的兼性寄生菌灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea 侵染引起的病害 该病发病快 范围广而造成产业经济损失 对蓝莓灰霉病的防治 主要以化学防治为主 生物与生态防治为辅 由于 病原菌对农药的抗性 其难以完全清除土壤中的病 原菌 使得农药效果持续性降低 而生物菌剂不仅 抑制病原菌生长还避免环境污染 使其成为控制植 物病害的重要手段 8 12 生物防治是一种利用有益微生物及其代谢产物 对农作物病害进行有效防治的技术与方法 具有无 污染 无残留 作用谱广等优点 13 14 目前已发现 多种真菌能够有效地预防和治疗灰霉病 如淡紫拟 青霉 Paecilomyces lilacinus 盾壳霉 Coniothyri um minitans 和丛枝菌根真菌 Arbuscular Mycorrhi za 分别在对番茄 Solanum lycopersicum 人参 Panax ginseng 草莓 Fragaria ananassa 的灰 霉病防治中表现出显著拮抗作用 而细菌中假单胞 菌属 Pseudomonas sp 芽孢杆菌属 Bacillus sp 对黄瓜 Cucumis sativus 马铃薯 Solanum tuberosum 灰霉病具有较好的防治效果 15 16 芽孢 杆菌防治植物病害的机理主要包括营养和空间位点 竞争 分泌抗菌物质 溶菌和诱导植物抗病性 等 17 短小芽孢杆菌 B pumilus 菌株能分泌出 脂肽类物质 其活性物质能明显抑制番茄灰霉病菌 丝生长和孢子萌发 18 苏云金芽孢杆菌UM96几丁 质酶在对灰霉病防治机制起到关键作用 含几丁质 酶活性的菌株能更好减少三叶草受到灰霉病菌的感 染 19 因此 本研究从蓝莓根际土壤中分离筛选出一 株对蓝莓灰霉病病原菌具有较好抑制作用的细菌菌 株L2 2 对菌株L2 2进行形态学与分子生物学 鉴定 并探究其对蓝莓灰霉病病菌抑菌效果 同 时 探究菌株L2 2回接至蓝莓盆栽苗对蓝莓灰霉 病的防治效果以及对叶际微生物的影响 以期为防 治蓝莓灰霉病提供微生物资源和理论依据 1 材料与方法 1 1 材料 1 1 1 供试菌株 蓝莓灰霉病病原菌灰葡萄孢菌HM4 1菌株 细菌L2 2菌株于2022年5月分离于蓝莓植株 品种为 莱格西 根际土壤 贵州省麻江县 蓝莓栽培基地 107 36 26 E 26 31 40 N 海拔 864 32 m HM4 1 L2 2菌株现保存于贵州大 学林学院森林保护学学科 1 1 2 供试培养基 马铃薯琼脂培养基 PDA 200 g马铃薯 20 g葡萄糖 20 g琼脂 1 000 mL蒸馏水 PDB培养基 PDA培养基不加琼脂 LB固体培养基 10 g胰蛋白胨 5 g酵母提取 物 10 g氯化钠 20 g琼脂 1 000 mL蒸馏水 LB液体培养基 LB固体培养基不加琼脂 培养基pH值自然 于121 条件下高温高压 灭菌30 min 1 1 3 供试植株 1 a生健康 莱格西 蓝莓盆栽植株 1 2 研究方法 1 2 1 菌株L2 2形态学与分子生物学鉴定 形态学鉴定 参照 常见细菌系统鉴定手册 和 伯杰细菌鉴定手册 对接种到LB平板7 d后 的L2 2菌株菌落颜色 大小 生长速度 形状和 边缘特征等观察 并拍照记录 20 21 利用电镜对 菌形态特征进行观察 22 分子生物学鉴定 提取L2 2菌株DNA送至 重庆擎科兴业生物技术有限公司 以细菌16S rD NA通用引物27F 1492R进行PCR扩增 结果在 BLAST多序列比对并于MEGA 7 0软件以邻接法 Neighbor Joining NJ 构建系统发育树 23 1 2 2 菌株L2 2对病原菌HM4 1拮抗作用 采用平板对峙法观察菌株L2 2对病原菌HM4 1 68西 部 林 业 科 学 2025年 在PDA平板生长的抑制率 对照组病原菌基本长 满培养皿后分别测量对照组与对峙组菌落半径 计 算抑菌率 每组处理重复3次 24 菌株L2 2发酵液对病原菌的抑制性 参考 Stinson et al 方法 每处理设置3个重复 测量各 处理组HM4 1菌落直径 并利用以下公式计算其 对病原菌抑菌率 25 抑菌率 对照组病原菌半径 对峙组的病原 菌趋向半径 对照组病原菌半径 100 菌株L2 2对病原菌孢子萌发影响 细菌接种 至LB在摇床培养24 h 发酵液浓度设置为原液 稀释10倍 50倍涂布40 L孢子悬浮液 18 h后 观察孢子萌发 随机观察处理组各样本孢子 约 200个 计算萌发率 每组处理6个样本 进行3 次重复试验 26 孢子萌发率 萌发的孢子 总孢子数 100 孢子萌发抑制率 对照孢子萌发率 处理孢 子萌发率 对照孢子萌发率 100 1 2 3 回接菌株L2 2对蓝莓灰霉病盆栽苗的防 治效果 选取长势基本一致的蓝莓幼苗 以单接清水 生防菌发酵液 病原菌孢子悬浮液处理为对照 生 防菌与病原菌顺反顺序共接处理 其中接种间隔为 24 h 接种后于20 25 保湿处理48 h 置于室温 15 d 调查发病情况并计算其病情指数和相对防效 每组处理设置3个重复 每个重复15株苗 27 相对防效 对照组病情指数 处理组病 情指数 对照组病情指数 100 1 2 4 回接菌株L2 2对蓝莓盆栽苗生理指标影响 各处理组回接蓝莓幼苗24 h后 称取叶片0 5 g 将叶片切成碎片后在预冷研钵中进行研磨 加 入1 mL预冷磷酸缓冲液后冰浴条件下快速研磨成 匀浆 立即移至10 mL容量离心管中加缓冲液定容 至5 mL 离心机温度为4 以10 000 r min 1离 心20 min 取上清液移入新的离心管 对其相关防 御酶超氧化物歧化酶 Superoxide dismutase SOD 过氧化氢酶 Catalase CAT 苯丙氨酸 解胺酶 Phenylalanine ammonia lyase PAL 多 酚氧化酶 Polyphenol oxidase PPO 过氧化物 酶 Peroxidase POD 按照索莱宝 北京索莱宝 科技有限公司 试剂盒操作方法进行酶活测定 1 2 5 菌株L2 2对蓝莓盆栽苗叶际微生物的影响 对1 2 3及其1 2 4具有较好防治效果及生理 指标提高更明显处理组进行叶际微生物分析 高通 量测序分析蓝莓叶际真菌和细菌 基因扩增使用通 用引物ITS1F ITS2R 338F 806R分别操作 最后 在Illumina MiSeq PE 300平台对所采集样品测序 上海美吉生物医药科技有限公司 中国上海 测序结束以后于该公司分析平台上进行蓝莓叶际微 生物群落的数据分析 1 3 数据处理 试验数据利用SPSS软件进行分析 运用origin 2022绘制柱状图 使用MEGA 7软件构建系统发育树 2 结果与分析 2 1 菌株L2 2形态学与分子生物学鉴定 菌株L2 2在LB培养基培养7 d后对菌落进行 观察 菌落生长较快 圆形 边缘整齐光滑 隆 起 乳黄色 蜡状光泽 不透明 粘稠 图1a 电镜下观察 菌株L2 2分布较为均匀 外观致密 且光滑 整体杆状 两端钝圆 无鞭毛结构 细菌 与细菌不粘连 图1b 将菌株L2 2的基因序列 提交到NCBI获得登录号PP474256 并进行 BLAST比对后构建系统发育树 图1c 结合形态 学特征 初步鉴定菌株L2 2为苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis 图1 菌株L2 2平板电镜图及系统发育树 注 a为菌株L2 2培养7 d平板菌落正面 b为菌株L2 2培养7 d 在电镜下的菌体形态 标尺 1 m c为基于菌株L2 2 16S rRNA基因序列构建的系统发育树 Fig 1 Strain L2 2 plate electron microscope and phylogenetic tree 78 第1期 杨威平等 生防菌株L2 2的分离鉴定及其对蓝莓灰霉病的防治效果研究 2 2 菌株L2 2对病原菌HM4 1的拮抗作用 将菌株L2 2与蓝莓灰霉病病原菌HM4 1分 别进行平板对峙和生防发酵液培养 将处理组和对 照组病原菌菌落直径进行比对 平板对峙中 菌株 L2 2对HM4 1的抑制率为72 01 图2 a1 a2 菌株L2 2发酵液培养基对病原菌抑制率为 41 56 表明菌株L2 2对灰霉病病原菌HM4 1 具有显著抑制能力 P 0 05 同时 对接种于不 同浓度发酵液平板的HM4 1进行孢子数量统计 原液抑制率最高 为67 69 50倍稀释浓度抑制 率最低 为31 00 图2 c 结果表明菌株L2 2对病原菌HM4 1的菌丝生长及其孢子萌发具有 显著抑制作用 P 0 05 图2 菌株L2 2对灰霉病HM4 1的抑菌测试及菌液对其抑菌效果 注 a1为灰霉病病原真菌HM4 1在PDA培养基生长平板图 a2为同时接种菌株L2 2与病原菌HM4 1平板对峙图 b1为灰霉病病原真菌 HM4 1在PDA培养基生长平板图 b2为灰霉病病原真菌HM4 1在菌株L2 2发酵液平板生长图 c为病原菌HM4 1孢子在菌株L2 2不 同发酵液浓度下萌发率 原液为未经无菌水稀释孢子萌发率 10 为发酵液稀释10倍孢子萌发率 50 为发酵液稀释50倍孢子萌发率 CK 为未经发酵液处理孢子萌发率 星号 代表各处理间经过多重比较在水平下差异显著 P 0 05 Fig 2 Bacteriostatic test of strain L2 2 against HM4 1 gray mold and bacteriostatic effect of bacterial solution on HM4 1 2 3 L2 2对蓝莓灰霉病盆栽苗的防治效果及相关 防御酶活性测定 所有处理组在相同的环境下培养15 d后 对 植株病情指数进行调查 与对照组相比 接种L2 2菌株的蓝莓苗病情指数均显著下降 病情指数分 别为8 61 10 71 防治效果分别为75 55 69 58 表明L2 2可以显著提高蓝莓对灰霉病的 抗性 图3 表1 对各组蓝莓幼苗进行酶活测定 结果显示 表1 与CK组相比 单接菌株L2 2可以显著 提高SOD PPO POD活性 SOD PPO POD CAT分别提升了47 07 1 318 74 199 35 49 58 单接HM4 1后 CAT活性显著增加 PAL CAT活性分别提升了55 59 428 85 在L2 2 HM4 1的处理组中 SOD PPO PAL 的酶活性显著上升 SOD PPO PAL POD CAT 的酶活性分别提升了142 04 181 66 114 49 7 09 2 96 在HM4 1 L2 2的处理 中SOD PAL POD酶活性显著上升 SOD PPO PAL POD CAT酶活性分别提升了89 92 105 29 127 33 31 61 33 86 2 4 蓝莓叶际微生物群落结构分析 综合上述研究结果 L2 2对蓝莓灰霉病的预 防处理 L2 2 HM4 1 较治疗处理 HM4 1 L2 2 效果更为显著 因此 选取预防处理组进行 后续研究 对CK L2 2 HM4 1 L2 2 HM4 1 处理组进行叶际微生物组成测定 Venn图分析结 果表明 CK的细菌与真菌群落OTU总数量高于各 接菌处理组 其中CK L2 2 HM4 1 L2 2 HM4 1蓝莓叶际真菌群落特有OTU数目分别为 139 112 26 34 细菌群落特有OTU数目分别 为77 57 44 32 图4 88西 部 林 业 科 学 2025年 图3 蓝莓盆栽苗接种菌株L2 2对灰霉病的预防及其治疗效果 注 a 无菌水处理 1 整体图 2 局部细节图 下同 b 单接菌株L2 2 c 单接灰霉病病原菌菌株HM4 1 d 接种菌株L2 2发酵液24 h后接种菌株HM4 1孢子悬浮液 e 接种菌株HM4 1孢子悬浮液24 h后接种菌株L2 2发酵液 Fig 3 Prevention and control effect of inoculated strain L2 2 on gray mold in potted blueberry seedlings 表1 菌株L2 2对蓝莓灰霉病的防治效果及其相关防御酶活性 Tab 1 Control effect of strain L2 2 against gray mold of blueberry and related defense enzyme activities 处理病情指数防治效果 SOD U g 1 PPO U g 1 PAL U g 1 POD U g 1 CAT U g 1 CK 107 47 3 92 d 14 94 1 04 c 36 23 6 35 c 184 27 5 18 c 27 35 4 11 b L2 2 158 06 29 49 c 211 96 14 00 a 33 37 3 58 c 551 62 49 10 a 40 91 3 96 b HM4 1 35 22 1 99 a 104 45 5 13 d 11 68 1 38 c 56 37 3 37 bc 168 81 16 64 c 144 64 8 15 a L2 2 HM4 1 8 61 0 35 b 75 55 0 98 a 260 12 6 30 a 42 08 8 23 b 77 71 10 83 ab 197 34 10 36 bc 28 16 1 65 b HM4 1 L2 2 10 71 0 17 b 69 58 0 47 b 204 11 7 77 b 30 67 4 17 bc 82 36 11 10 a 242 52 18 88 b 36 61 7 33 b 注 表中数据为平均值 标准差 不同小写字母表示P 0 05水平上的显著性差异 图4 蓝莓盆栽苗叶际真菌和细菌OTUs分布与群落组成分析 注 a Venn图 a 1为真菌Venn图 a 2为细菌bar图 b 群落柱状图 b 1为真菌Venn图 b 2为细菌bar图 Fig 4 Venn diagram of OTUs distribution of fungi and bacteria in the interphyllosphere of potted blueberry seedlings 98 第1期 杨威平等 生防菌株L2 2的分离鉴定及其对蓝莓灰霉病的防治效果研究 群落柱状图中 各处理组叶际优势细菌和真菌 的相对丰度与CK存在差异 在细菌属水平 CK的 叶际优势细菌属为假单胞菌属6 91 菌株L2 2处 理组为芽孢杆菌属53 08 HM4 1处理组为未分 类的肠杆菌属85 09 L2 2 HM4 1处理组为未分 类的肠杆菌属32 58 和芽孢杆菌属29 63 图4 b 2 在真菌属水平 CK组叶际优势真菌属为枝 孢菌属Cladosporium 71 66 菌株L2 2处理组为 枝孢菌属43 06 HM4 1处理组为葡萄孢属 25 47 枝孢菌属10 63 L2 2 HM4 1处理组 为葡萄孢属58 53 枝孢菌属24 08 和木霉属 Trichoderma 4 40 图4 b 1 3 讨论与结论 3 1 讨论 本研究通过对菌株L2 2的形态学特征及16S rRNA序列进行鉴定 构建菌株系统发育树 将菌 株L2 2鉴定为苏云金芽孢杆菌 芽孢杆菌具有易 繁殖 生长快 适应强 代谢物稳定等特点 可以 防治马铃薯 辣椒 烟草等多种作物的灰霉病病 害 具有良好的防治效果 28 菌株L2 2在培养基 上生长速度较快 存活时间长 与生防类芽孢杆菌 具有相似性 另有研究表明芽孢杆菌产生的环肽类 的表面活性剂代谢物与碱性脂肪酶能显著抑制柑橘 炭疽病原菌的生长 29 在本研究中 菌株L2 2能 够显著抑制蓝莓灰霉病病原菌生长 且高浓度的发 酵液可以抑制病原菌的孢子萌发 表明菌株L2 2 对病原菌有明显的抑制作用 蓝莓灰霉病主要发生在花 果实 叶片 果柄 以及枝条等部位 在蓝莓盆栽试验中 菌株L2 2 的预防与防治处理均显著降低蓝莓灰霉病病情指 数 在芽孢杆菌对番茄灰霉病的防治研究中 也具 有相似效果 30 芽孢杆菌还能诱导寄主防御酶活 性上升从而提高寄主抗性 31 32 SOD POD CAT 等抗氧化酶可清除植物细胞内过氧化氢和脂质自由 基 减少脂质过氧化物的生成 其间接反映植物抗 逆能力 单接L2 2菌株的蓝莓PPO POD酶活活 性提升了1 318 74 199 35 L2 2 HM4 1 HM4 1 HM4 1 L2 2的3个处理组分别对应SOD CAT PAL酶活性提升了142 04 428 85 127 33 西瓜 Citrullus lanatus 上黄瓜绿斑驳 花叶病毒病害防治中提前施用解淀粉芽孢杆菌 B amyloliquefaciens 宿主生理指标出现显著提 高 生防菌L2 2的接种使得蓝莓防御酶活性提 高 有利于蓝莓的生长和对不利环境的抗性 33 34 叶际中的微生物群落来源本体植株 环境 邻 近的微生物群落 微生物之间共生 竞争 捕食 寄生 抑制组成最适合的微生物组合 35 36 在蓝 莓叶际微生物细菌属水平上 CK假单胞菌属为优 势属 接种L2 2改变叶际微生物群落构成 芽孢 杆菌属成为主要优势属 芽孢杆菌能产生多种酶 蛋白质和次生代谢产物 从而抑制病原菌生长 争 夺竞争空间和营养物质 并刺激宿主植物的防御反 应 芽孢杆菌属的相对丰富度提高有利于植株的生 长发育 37 在HM4 1的处理组中未分类的肠杆菌 属相对丰度达到最高 肠杆菌科能够引起多种植物 病害 接种HM4 1使得肠杆菌属在蓝莓叶片相对 丰度提升而不利于蓝莓的生长 在L2 2 HM4 1 处理组中未分类的肠杆菌属相对丰度出现了明显下 降 表明L2 2的接种能改善叶际微生物环境 构 成有利于寄主生长的群落 蓝莓叶际在菌株L2 2 存在的情况下对于HM4 1所形成的群落产生拮抗 作用 有利于蓝莓植株抵抗病原菌侵染 38 41 在 蓝莓叶际微生物真菌属水平中发现 灰葡萄孢属在 单接生防菌L2 2中出现更高的丰度 且在L2 2 HM4 1处理组中其相对丰度达到最高 但单接病 原菌处理各优势菌属之间丰度差异较小 有研究表 明真菌群落中优势类群有着更高的生态位重叠效 应 而菌株L2 2与原始菌群存在更多的重叠使得 灰葡萄孢属丰度上升 且有研究证实 在喷施生防 菌后发生OTU数量减少的情况 42 43 同时 L2 2 HM4 1处理组可招募具有抑菌作用的木霉属 44 生防菌L2 2与病原菌HM4 1的互作可以改变蓝 莓叶际微生物的群落构成 并使其相对丰度与均匀 度出现显著变化 3 2 结论 本研究从蓝莓根际土壤中分离并筛选出一株对 蓝莓灰霉病病原菌具有较好抑制作用的细菌菌株 L2 2 采用16S rDNA测序与形态学初步鉴定菌株 L2 2为苏云金芽孢杆菌 菌株L2 2对蓝莓灰霉 致病菌HM4 1的平板对峙抑制率为72 01 发 酵液对HM4 1的生长和孢子萌发抑制率为 41 56 67 69 菌株L2 2能够显著降低寄主 的灰霉病发病指数 回接蓝莓盆栽苗中L2 2 HM4 1 HM4 1 L2 2处理组防效达到75 55 69 58 前者L2 2 HM4 1处理组SOD PPO 09西 部 林 业 科 学 2025年 PAL POD CAT的酶活活性分别提升了 142 04 181 66 114 49 7 09 2 96 后者HM4 1 L2 2处理组SOD PPO PAL POD CAT酶活活性分别提升了89 92 105 29 127 33 31 61 33 86 叶际微 生物组成分析中 接种菌株L2 2后芽孢杆菌属丰 度上升 而芽孢杆菌数量的提高有利于寄主抵御灰 霉病病原菌的入侵 综上所述 菌株L2 2具有较 好抑制灰霉病病原菌能力 能够通过抑制病原菌生 长 提高蓝莓植株的抗病性和蓝莓叶际微生物优势 微生物的富集程度来防治蓝莓灰霉病 参考文献 1 董克锋 姜惠铁 影响蓝莓栽培成败的关键因素分 析 J 北方园艺 2015 14 49 51 2 王宏恩 冯国红 徐华东 等 基于可见 近红外光谱 和深度森林的蓝莓成熟度判别 J 光谱学与光谱分析 2024 44 11 3280 3286 3 李梓旋 郭佳婧 苏东林 等 蓝莓花色苷生理活性 提取纯化及稳态化研究进展 J 中国食品学报 2024 24 2 407 417 4 胡雅馨 李京 惠伯棣 蓝莓果实中主要营养及花青 素成分的研究 J 食品科学 2006 10 600 603 5 刘庆忠 崔冬冬 朱东姿 世界及中国蓝莓产业现状 J 落叶果树 2024 56 4 1 7 107 6 李思 尚晓静 张富美 等 蓝莓根部内生木霉分离 鉴定及其拮抗作用 J 核农学报 2022 36 8 1569 1578 7 张雯娟 冷云星 张诗莹 等 贵州省蓝莓产业发展 现状及对策 J 农技服务 2024 41 8 81 84 8 李兴龙 李彦忠 土传病害生物防治研究进展 J 草业学报 2015 24 3 204 212 9 戴启东 李广旭 蓝莓灰霉病病原鉴定和生物学特 性研究 J 中国果树 2011 3 46 48 10 严雪瑞 傅俊范 于舒怡 等 辽宁树莓灰霉病流行调 查及原因分析 J 吉林农业大学学报 2009 31 5 672 674 11 陈宇飞 文景芝 李立军 葡萄灰霉病研究进展 J 东北农业大学学报 2006 37 5 693 699 12 KHAN A R MUSTAFA A HYDER S et al Bacillus spp as bioagents Uses and application for sustainable agriculture J Biology 2022 11 12 1763 1780 13 邱德文 我国植物病害生物防治的现状及发展策 略 J 植物保护 2010 36 4 15 18 35 14 徐杰 农婉晴 张耀芳 等 Bacillus rugosus对香蕉 枯萎病的防治及促生效果 J OL 分子植物育种 2023 03 26 2024 04 25 https link cnki net urlid 46 1068 s 20231025 1308 006 15 庞礴 不同地区蛇足石杉内生真菌多样性及分离 纯化和生物活性研究 D 杭州 浙江理工大学 2023 16 李长印 硒联合茉莉酸甲酯防治番茄灰霉病的微 生物学机制 D 武汉 华中农业大学 2022 17 陈志谊 芽孢杆菌类生物杀菌剂的研发与应用 J 中国生物防治学报 2015 31 5 723 732 18 BOUCHARD ROCHETTE M MACHRAFI Y COSS US L et al Bacillus pumilus PTB180 and Bacillus subtilis PTB185 Production of lipopeptides antifungal activity and bio control ability against Botrytis cinerea J Biological Control 2022 170 104925 19 MART NEZ ABSAL N S ROJAS SOL S D HERN NDEZ LE N R et al Potential use and mode of action of the new strain Bacillus thuringiensis UM96 for the biological control of the grey mould phytopathogen Botrytis cinerea J Bio control Science and Technology 2014 24 12 1349 1362 20 东秀珠 蔡妙英 常见细菌系统鉴定手册 M 北 京 科学出版社 2001 21 相凯文 李丹丹 郭自春 等 一株高产吲哚乙酸促 生菌的筛选鉴定 条件优化 应用效果及其代谢途径 J OL 微生物学通报 2024 11 22 2024 12 01 https doi org 10 13344 j microbiol china 240796 22 袁惠君 余诗曼 徐琰莹 等 1株抗真菌贝莱斯芽 孢杆菌 Bacillus velezensis lut Y1的鉴定及抑菌活性研究 J 中国畜牧兽医 2024 51 6 2354 2364 23 王芳 于璐 齐泽铮 等 大豆镰刀菌根腐病拮抗菌 的筛选及生防效果 J 生物技术通报 2024 40 7 216 225 24 吴慧芳 蒙耀 石晖琴 等 一株马铃薯干腐病生防菌 的鉴定及其抑菌活性研究 J 植物保护 2024 50 3 111 120 25 STINSON M EZRA D HESS W et al An endophytic Gliocladium spp of Eucryphia cordifolia producing selective vola tile antimicrobial compounds J Plant Science 2003 165 4 913 922 26 LIU K W ZHOU X J FU M R Inhibiting effects of epsilon poly lysine PL on Pencillium digitatum and its in volved mechanism J Postharvest Biology and Technology 2017 123 94 101 27 张荣胜 王晓宇 罗楚平 等 解淀粉芽孢杆菌Lx 11产脂肽类物质鉴定及表面活性素对水稻细菌性条斑病的 防治作用 中国农业科学 2013 46 10 2014 2021 28 胡朋 申琳 范蓓 等 番茄灰霉病拮抗细菌Bacillus 1的筛选和鉴定 J 食品科学 2008 6 276 279 29 SIDOROVA T M ASATUROVA A M HOMYAK A I Biologically active metabolites of Bacillus subtilis and their role in the control of phytopathogenic microorganisms J Agric Biol 2018 53 1 29 37 30 张金奎 徐生军 李继平 等 生防细菌HMQ20YJ04 发酵条件优化及其对番茄灰霉病的效果评价 J 中国生物 防治学报 2023 39 6 1418 1433 下转第111页 19 第1期 杨威平等 生防菌株L2 2的分离鉴定及其对蓝莓灰霉病的防治效果研究 Brittle Culm1 a COBRA like protein functions in cellulose as sembly through binding cellulose microfibrils J PLoS Genet ics 2013 9 e1003704 28 NIU E L FANG S SHANG X G et al Ectopic ex pression of GhCOBL9A a cotton glycosyl phosphatidyl inositol anchored protein encoding gene promotes cell elongation thick ening and increased plant biomass in transgenic Arabidopsis J Molecular Genetics and Genomics 2018 293 5 1191 1204 29 SUN A Q YU B ZHANG Q et al MYC2 Activated TRICHOME BIREFRINGENCE LIKE37 acetylates cell walls and enhances herbivore resistance J Plant Physiology 2020 184 2 1083 1096 30 石江涛 刘一星 聂玉哲 等 正常木与应压木木材 形成组织中差异表达蛋白质的减低那个 J 北京林业大学 学报 2013 35 3 137 142 31 王洁华 卢孟柱 木本植物次生维管系统形态建成 的基因调控与信号转导研究进展 J 林业科学 2009 45 11 127 134 32 CAO L ZHANG S CAO J et al Nitrogen modifies wood composition in poplar seedlings by regulating carbon and nitrogen 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