营养基质对连作栽培下温室黄瓜生长及土壤微环境的影响_武春成.pdf

1 营养基质对连作栽培下温室黄瓜生长及土壤微环境的影响 武春成 1 2 李天来 1 孟思达 1 张勇勇 1 杨丽娟 3 1 沈阳农业大学园艺学院 辽宁省省部共建设施园艺重点实验室 沈阳 110866 2 河北科技师范学院园 艺科技学院 河北昌黎 066600 3 沈阳农业大学土地与环境学院 沈阳110866 摘 要 分别利用营养基质 稻草 田园土壤 膨化鸡粪 及土壤在同一温室内进行黄瓜的槽式连作栽培 研 究其对黄瓜生长及土壤微环境的影响 结果表明 随着连作茬次的增加 两种栽培方式均出现了不同程 度的连作效应 同一连作茬次间比较 营养基质的养分含量 蔗糖酶和脲酶活性 细菌 真菌均明显高于 土壤 而真菌数量低于土壤 营养基质栽培改变了细菌种群结构 促进了黄瓜植株生长及产量提高 相 关分析表明 连作栽培条件下土壤细菌数量与黄瓜株高 根干质量呈显著正相关 与地上部干质量及产 量呈极显著正相关 土壤脲酶活性与产量呈极显著正相关 综上 与土壤栽培相比 营养基质栽培能够 明显改善根区微环境 有效延缓连作障碍的发生 关键词 温室 营养基质 黄瓜 连作 土壤微环境 文章编号 中图分类号 S642 2 文献标识码 A Effects of nutrition medium on cucumber growth and soil microenvironment in greenhouse under continuous cropping WU Chun cheng 1 2 LI Tian lai 1 MENG Si da 1 ZHANG Yong yong 1 YANG Li juan 3 1 College of Horticulture Shenyang Agricultural University Key Laboratory of Protected Horticulture of Liaoning Province and Ministry of Education Shenyang 110866 China 2 College of Horticulture Hebei Normal University of Science Technology Changli 066600 Hebei China 3 College of Land and Environment Shenyang Agricultural University Shenyang 110866 China Abstract An experiment of continuous cropping of cucumber in nutrition medium composted with straw rural soil and puffed chicken manure or soil was conducted in greenhouse in order to study the effects of medium type on the cucumber growth and soil microenvironment respectively The results showed that the two treatments both displayed different levels of obstacles resulted from continuous cropping In the same cropping season the nutrients content soil invertase and urease activities and B F bacteria fungi ratio in the nutrition medium were obviously higher but fungi quantity was lower than in the soil medium suggesting the use of nutrition medium changed the bacterial population structure as to improve the cucumber growth and yield Under continuous cropping correlation analysis showed that the bacteria quantity was significantly positively related with plant height and root dry mass and markedly significantly positive correlation exited between the aboveground dry mass and yield of cucumber The urease activity was also significantly positively related with the cucumber yield Compared with the soil medium the nutrition medium could greatly improve soil microenvironment and alleviate the continuous cropping obstacle Key words greenhouse nutrition medium cucumber continuous cropping soil microenvironment 现代农业产业技术体系建设专项 CARS 25 国家 十二五 科技支撑计划项目 2011BAD12B03 和辽宁省科技攻关项 目 2011215003 资助 通讯作者 E mail tianlaili 2013 08 23收稿 2014 02 19接受 日光温室是一个相对封闭的设施 与外界环境交流较少 黄瓜 Cucumis sativus 作为设施生产尤其是 日光温室生产的主要蔬菜作物 连作现象十分普遍 连作障碍日趋严重 1 目前生产上解决连作障碍的 措施主要是嫁接换根 合理轮作 选用耐连作品种 土壤改良消毒等 但在连作障碍发生严重的设施内 效果都不明显 2 4 近年来利用营养基质代替连作土壤栽培作为一种解决连作障碍的新兴栽培方式被人 们广泛应用 相关研究报道很多 但大多集中在营养基质的选取及配比和栽培方式等方面 5 9 而对于 长期连作栽培条件下营养基质微环境的变化及其与土壤连作栽培的差异研究相对较少 因此 本试验在 同一日光温室下采用营养基质与土壤进行黄瓜的连作栽培 研究土壤微环境的变化规律及其对黄瓜生长 网络出版时间 2014 03 18 11 59 网络出版地址 2 发育的影响 以探明采用营养基质与土壤在连作栽培上的差异 为营养基质在设施连作栽培中的应用以 及设施园艺的可持续发展提供技术支撑和理论依据 1 材料与方法 1 1 试验材料 供试黄瓜品种为 津优30 供试土壤为田园土 其基本理化性质为 有机质23 0g kg 1 全磷1 61 g kg 1 全钾10 59 g kg 1 碱解氮102 mg kg 1 速效磷41 3 mg kg 1 速效钾222 8 mg kg 1 营养基质的制备 将稻草切碎后与土壤以体积比2 1充分混合 加入膨化鸡粪15 kg m 3 发酵腐 熟 腐熟后基质的基本理化性质为 有机质47 0g kg 1 全磷1 46g kg 1 全钾11 59 g kg 1 碱解氮210 mg kg 1 速效磷52 7 mg kg 1 速效钾308 9 mg kg 1 分别于2006 2007 2009 2010年8月底将腐熟 的营养基质及对照土壤填入栽培槽内 槽的长宽高分别为7 00 m 0 65 m 0 30 m 槽中铺设塑料薄膜 底部打两排直径为2cm的排水孔 从2006年开始 分别于每年9月上旬和翌年3月中旬进行春 秋两 茬黄瓜的连续栽培 2011年春茬后得到连续栽培2 4 8 10茬的营养基质 S 和土壤 CK 1 2 试验设计 本试验于2011年在沈阳农业大学蔬菜基地辽沈 型日光温室内进行 1月10日穴盘育苗 2月28 日定植 随机区组排列 每槽为一个小区 3次重复 定植前每槽施膨化鸡粪7 5 kg 槽面铺滴灌带后 用黑色地膜覆盖 双行定植 每行18株 株距30 cm 行距50 cm 缓苗后每7 d浇一次水 每14 d每 个栽培槽随水施NPK复合肥0 31kg 植株管理同常规生产 1 3 取样方法 定植后50 d测定黄瓜植株的株高 地上部及根系干质量 在拉秧前每个小区以5点法采集0 20cm 耕层土壤 混匀后土壤鲜样一部分保存于 80 冰箱中 用于测定土壤细菌多样性 另一部分保存于4 冰箱中 一周内测定土壤微生物数量 室内自然风干土样过筛后用于测定土壤养分含量及土壤酶活性 1 4 测定指标 1 4 1 土壤理化性状的测定 土壤有机质采用重铬酸钾容量 稀释热法测定 土壤碱解氮采用碱解扩散法 测定 土壤速效磷采用钼蓝比色法测定 土壤速效钾采用火焰光度计法测定 土壤 pH 值按土水比 1 5 用雷磁pHS 3B型酸度计法测定 10 1 4 2 土壤酶活性测定 土壤蔗糖酶活性采用3 5 二硝基水杨酸比色法测定 中性磷酸酶活性采用磷酸 苯二钠比色法测定 脲酶活性采用靛酚蓝比色法测定 多酚氧化酶活性采用邻苯三酚比色法 11 测定 1 4 3 土壤微生物数量测定 采用稀释平板法测定 其中细菌采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 真菌采用 马丁氏培养基 放线菌采用改良高氏1号培养基 1 4 4 土壤细菌多样性的测定 采用康维世纪公司生产的土壤基因组DNA提取试剂盒 SoilGen DNA Kit 提取土壤微生物DNA 土壤细菌16S rDNA 的扩增 将提取的DNA原液用无菌去离子水稀释50倍 采用细菌通用引物 F341 GC 5 CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGGCCTACGGGAGGCAGCA G 3 和R519 5 ATTACCGCGGCTGCTGG 3 进行PCR扩增 50 L PCR反应体系为 DNA模板2 L Taq酶体系25 L 前后引物各1 L 补灭菌去离子水21 L至总体积为50 L PCR反应程序为 94 预变性4 min 94 变性1 min 55 退火1 min 72 延伸45 s 每个循环加1 s 共35个循环 72 延伸10 min 保存在4 冰箱中 PCR产物在1 的琼脂糖凝胶中检测 PCR产物的变性梯度凝胶电泳 DGGE 采用DGGE系统 D Code Bio Rad 采用8 的聚丙烯酰胺凝 胶 变性剂浓度从40 到60 100 变性相当于7 mol L 1 尿素和40 去离子甲酰胺 PCR产物每孔上 样量为40 L 在1 TAE缓冲液 40 mmol L 1 Tris 20 mmol L 1 冰乙酸 1 mmol L 1 Na 2 EDTA 中 60 恒温 180 V电压条件下电泳6 h 电泳结束后 用Genefinder染料 1 TAE稀释10000倍 染色40 min 利用Bio Rad凝胶成像系统拍照 1 5 数据处理 3 采用Quantity one 4 3 1 Bio Rad 软件对DGGE图谱进行数字化处理 采用算术平均数的非加权成组 配对法 UPGMA 对土壤样品进行相似性聚类分析 采用香农多样性指数 H 和丰富度指数 S 表示土壤样 品的细菌多样性 其中电泳条带的数量代表细菌丰富度 S 香农多样性指数H P i lnP i 其中P i n i N n i 为某个带的峰强度 N为该带所在泳道的所有带峰强度之和 采用Microsoft Excel2003软件对试验数 据进行整理 采用DPS软件的新复极差法进行差异显著性分析 相关性分析使用CORREL过程 2 结果与分析 2 1 营养基质与土壤连作栽培对黄瓜植株生长及产量的影响 由表1可知 营养基质及土壤栽培对黄瓜植株株高影响不大 随着栽培茬次的增加 植株地上部及 根干质量均表现为先增后降的变化趋势 第4茬最高 第10茬最低 S 4 地上部干质量显著高于CK 4 S 2 根干质量显著低于CK 2 对黄瓜小区产量的测定结果表明 营养基质栽培黄瓜产量表现为先增再降的趋 势 S 4 最高 且显著高于S 8 和S 10 与S 2 间无显著差异 土壤栽培黄瓜产量呈现逐渐降低趋势 CK 2 最高 且显著高于其他各茬 除第2茬外 其他各茬次营养基质栽培的黄瓜小区产量均高于土壤栽培 分别高 30 0 9 5 和6 2 表1 营养基质与土壤连作栽培对黄瓜植株生长及产量的影响 Table 1 Effects of continuous cropping in nutrition medium and soil on cucumber growth and yield mean SD 处理 Treatment 株高 Plant height cm 地上部干质量 Dry matter of shoot g 根干质量 Dry matter of root g 小区产量 Plot yield kg S 2 163 8 4 6ab 34 61 0 21b 1 74 0 05cd 9 36 0 60ab S 4 174 0 3 5a 41 24 1 16a 2 23 0 05a 10 45 0 79a S 8 161 0 12 0ab 35 62 1 30b 2 03 0 14bc 8 31 0 43bc S 10 163 0 9 2ab 31 79 1 37c 1 72 0 01d 7 34 0 93cd CK 2 165 5 4 9ab 35 46 0 37bc 2 08 0 02ab 9 64 0 42a CK 4 165 8 5 3ab 35 80 0 86b 2 15 0 06a 8 04 0 07cd CK 8 154 8 4 6b 35 57 1 22b 1 80 0 23bcd 7 59 0 50cd CK 10 158 0 2 8ab 31 57 1 01bc 1 55 0 16d 6 91 0 13d S 营养基质Nutrition medium CK 土壤Soil 同列不同小写字母表示处理间差异显著 P 0 05 Differentlettersin the same column meantsignificant difference among treatmentsat 0 05 level 下同 The same below 2 2 营养基质与土壤连作栽培对土壤理化性质的影响 由表2可以看出 随着连作茬次的增加 pH总体呈降低趋势 第2茬显著高于其他各茬 同茬次 间无显著差异 除速效钾和土壤栽培处理的有机质变化无明显规律外 养分含量的其他指标均呈现先升 后降趋势 第8茬最高 除第4茬速效磷外 其他各茬次营养基质处理的养分含量均高于土壤处理 其 中有机质 碱解氮以及第2 8茬的速效磷和速效钾差异显著 表2 营养基质与土壤连作栽培对土壤理化性质的影响 Table 2 Effects of continuous cropping in nutrition medium and soil on soil physicochemical properties mean SD 处理 Treatment pH 有机质 Organic matter 碱解氮 Alkali hydrolyzaleN mg kg 1 速效磷 Available P mg kg 1 速效钾 Available K mg kg 1 S 2 6 59 0 08a 4 76 0 29bc 201 81 1 09bc 320 36 10 07d 211 45 6 43 a S 4 6 26 0 07b 4 75 0 09bc 216 16 14 65ab 344 41 5 48cd 194 10 4 95bc S 8 6 04 0 11c 5 79 0 07 a 234 80 17 39a 445 93 14 99a 213 95 4 03a S 10 6 09 0 11c 5 13 0 16b 218 12 3 56ab 354 10 10 57c 206 15 3 46ab CK 2 6 53 0 04a 3 89 0 54de 161 49 5 64e 260 66 14 71e 191 85 0 64bc CK 4 6 14 0 11bc 4 05 0 16de 182 00 1 98d 346 11 3 86cd 187 60 11 03c 4 CK 8 6 05 0 01c 3 61 0 08e 187 95 0 50cd 397 64 16 67b 194 30 5 52bc CK 10 6 11 0 04c 4 35 0 01cd 179 55 0 50de 323 25 14 26cd 192 95 3 75bc 2 3 营养基质与土壤连作栽培对土壤酶活性的影响 由表3可知 除第10茬外 其他各茬次营养基质处理的蔗糖酶活性均高于土壤处理 其中第4 8 茬差异显著 除第4茬外 其他各茬次营养基质处理的中性磷酸酶活性均高于土壤处理 但差异不显著 随着连作茬次的增加 脲酶活性逐渐降低 同茬次间营养基质处理的脲酶活性均高于土壤处理 其中第 4茬差异显著 营养基质处理的多酚氧化酶活性呈先升后降的趋势 第4茬最高 土壤处理无明显变化 规律 表3 营养基质与土壤连作栽培对土壤酶活性的影响 Table 3 Effects of continuous cropping in nutrition medium and soil on soil enzyme activities mean SD 处理 Treatment 蔗糖酶 Sucrase mg g 1 d 1 中性磷酸酶 Neutral phosphatase mg g 1 d 1 脲酶 Urease mg g 1 d 1 多酚氧化酶 Polyphenol oxidase mg g 1 S 2 6 02 0 01b 0 46 0 06abc 34 42 3 42a 0 33 0 02c S 4 6 62 0 09a 0 39 0 07c 24 68 1 77b 0 48 0 01a S 8 5 61 0 12bc 0 57 0 01a 16 36 0 23c 0 41 0 01b S 10 5 53 0 04bc 0 53 0 01ab 13 95 2 67cd 0 36 0 02c CK 2 5 50 0 39bc 0 45 0 06abc 30 92 5 20ab 0 41 0 01b CK 4 5 04 0 24 d 0 43 0 08bc 14 25 2 63cd 0 42 0 02b CK 8 5 05 0 34d 0 48 0 03abc 9 58 0 06cd 0 36 0 02c CK 10 5 58 0 06bc 0 50 0 02abc 8 00 0 64d 0 41 0 01b 2 4 营养基质与土壤连作栽培对土壤微生物种群结构的影响 2 4 1 土壤微生物数量 由表 4 可知 营养基质处理的细菌数量随着连作茬次的增加呈先升后降趋势 第4茬最高 土壤处理呈逐渐下降趋势 S 4 显著高于CK 4 各茬次营养基质处理的真菌数量均低于土壤 处理 第8 10茬差异显著 同茬次间 营养基质处理的放线菌数量除第4茬显著高于土壤处理外 其 他各茬均低于土壤处理 第2 8茬差异显著 B F呈现先升高后降低的趋势 第4茬最高 除第2茬外 其他各茬营养基质处理的B F均高于土壤处理 分别高60 4 82 1 和45 3 表4 营养基质与土壤连作栽培对土壤微生物数量的影响 Table 4 Effects of continuous cropping in nutrition medium and soil on soil microbial quantity mean SD 处理 Treatment 细菌 Bacterium 10 6 CFU g 1 真菌 Fungus 10 3 CFU g 1 放线菌 Actinomycetes 10 5 CFU g 1 细菌 真菌 B F S 2 37 76 0 05bc 75 52 6 89ab 40 36 1 30bc 500 00 S 4 51 48 0 95a 44 57 3 09de 44 12 8 35b 1155 00 S 8 33 36 4 63bc 33 15 3 29e 20 93 1 31d 1006 58 S 10 28 53 4 48c 36 35 0 72e 23 67 4 8d 784 88 CK 2 42 88 2 80ab 85 76 16 53a 61 13 4 03a 500 00 CK 4 39 18 7 39b 54 41 3 77cd 34 82 4 94c 720 00 CK 8 36 29 5 50bc 65 67 6 52bc 38 45 2 99bc 552 63 CK 10 28 06 0 88c 51 97 0 72d 26 19 4 50d 540 00 5 2 4 2 土壤细菌多样性 应用Quantity One软件定量分析细菌16S rDNA基因的DGGE图谱和条带分布 图 1 图 2 结果表明 各茬次间拥有一些公共条带 如条带 1 2 13 22 39 也存在很多差异性 条带 如条带32只出现在营养基质处理中 条带19出现在土壤处理及S 2 中 条带38只出现在第8茬 中 条带7只出现在CK 2 中 条带36在S 2 中缺失 图1 土壤细菌16S rDNA的PCR DGGE图谱 Fig 1 PCR DGGE atlas of soil bacteria 16S rDNA 图2 土壤细菌16S rDNA的PCR DGGE图谱的条带分布及强度示意图 Fig 2 Sketch of band distribution and relative luminance from PCR DGGE analysis of soil bacteria 16S rDNA 根据图2的DGGE图谱 按照UPGMA算法对图谱进行土壤细菌群落相似性聚类分析 结果如图3 所示 营养基质处理的第2 4 8茬聚为一个分支 土壤处理聚为另一个分支 说明与土壤相比 营养 基质对细菌种群结构的影响较大 S 10 与CK 4 CK 8 CK 10 聚为一支 说明S 10 与土壤处理的细菌群落相 CK 8 S 4 S 2 S 8 S 10 CK 2 CK 4 CK 10 6 似性较高 与其他茬相比 已逐渐失去栽培优势 图3 土壤细菌群落相似性聚类分析 Fig 3 Similarity clustering analysis of soil bacteria 16S rDNA profiles 香农多样性指数越高说明细菌群落多样性越高 从表5可以看出 除第4茬外 营养基质栽培处理 的细菌多样性指数和丰富度指数均高于土壤栽培处理 表5 营养基质与土壤连作栽培对土壤细菌香农多样指数和丰富度指数的影响 Table 5 Effects of continuous cropping in nutrition medium and soil on Shannon diversity index H and richness index S of soil bacteria 处理 Treatment 多样性指数 Shannon diversity index H 丰富度指数 Richnessindex S S 2 2 95 22 S 4 2 98 23 S 8 3 13 27 S 10 3 13 26 CK 2 2 88 20 CK 4 3 06 24 CK 8 3 09 25 CK 10 3 05 24 2 5 黄瓜生长和产量指标与土壤理化性质 酶活性及微生物数量的相关性 由表6可知 根区土壤细菌数量与黄瓜株高 根干质量呈显著正相关 与地上部干质量及产量呈极 显著正相关 黄瓜各生长指标和产量与中性磷酸酶活性呈负相关 与土壤 pH 蔗糖酶 脲酶 多酚氧 化酶活性 放线菌数量 B F呈正相关 其中脲酶活性与产量呈极显著正相关 表6 黄瓜生长和产量指标与土壤理化性质 酶活性及微生物数量的相关系数 Table 6 Correlation coefficients between cucumber growth yield and soil physicochemical properties enzyme activities and microorganism quantity 株高 Plant height 地上部干质量 Dry matterof shoot 根干质量 Dry matterof root 产量 Yield pH 0 409 0 167 0 095 0 690 有机质Organic matter 0 194 0 038 0 038 0 050 碱解氮Alkali hydrolyzale N 0 172 0 189 0 018 0 059 7 速效磷Available P 0 347 0 084 0 026 0 337 速效钾Available K 0 137 0 214 0 298 0 012 蔗糖酶Sucrase 0 691 0 525 0 068 0 698 中性磷酸酶Neutralphosphatase 0 650 0 654 0 467 0 630 脲酶Urease 0 578 0 378 0 293 0 849 多酚氧化酶Polyphenol oxidase 0 624 0 644 0 620 0 401 细菌Bacterium 0 769 0 930 0 729 0 898 真菌Fungus 0 071 0 009 0 004 0 334 放线菌Actinomycetes 0 401 0 459 0 401 0 698 细菌 真菌 B F 0 575 0 610 0 498 0 332 P 0 05 P 0 01 3 讨 论 温室是一个人为干扰作用强 相对比较密闭的独特环境 随着同一种或同一科作物在同一栽培介质 中的连续栽培 连作效应会逐渐显现 主要表现为土壤理化性质恶化 病虫害严重 产量降低 品质下 降等不良现象 1 2 12 15 本试验中随着连作茬次的增加 营养基质和土壤处理的黄瓜植株生长及小区产量 总体表现为逐渐下降的趋势 第10 茬的产量与前茬最高产量 S 4 和 CK 2 差异显著 由此可知 随着 连作茬次的增加 两种栽培方式都已经表现出不同程度的连作效应 同茬次间比较 除第2茬外 营养 基质栽培的黄瓜生长指标及小区产量均高于土壤栽培 说明营养基质栽培促进了黄瓜的生长和产量的形 成 这与前人研究结果一致 4 5 而本试验中营养基质栽培第 2 茬黄瓜生长的各项指标及产量低于土壤 栽培 可能原因是 1 新堆置的营养基质孔隙度大 容重小 保水性差 不利于根系的吸收 2 有机物 料种类及堆置比例不同 作物的生长状况与其生长的根系环境密不可分 具有优良理化性质的栽培介质更有利于作物生长 16 17 本试验中 与土壤处理相比 营养基质处理的有机质 碱解氮 速效磷及速效钾含量均相对较高 改善了根区营养环境 促进了植株生长 这与宋为交等 18 王佳辉等 5 研究结果相同 土壤酶活性表征 土壤生物学活性强度 能够反映土壤熟化程度 土壤肥力及土壤微生物功能多样性 19 21 蔗糖酶是土壤 中的重要酶类 对增加土壤中易溶性营养物质起重要作用 脲酶能促进尿素和有机物分子中碳氢键的水 解 由于土壤中存在着能生成脲酶的微生物 因此向土壤中添加能促进微生物活动的稻草等有机物料可 使脲酶活性增强 本试验结果表明 同茬次间营养基质处理的蔗糖酶 除第 10 茬外 和脲酶活性高于 土壤处理 这与李现伟等 22 的研究结果一致 土壤微生物是表征土壤环境质量的标志之一 23 土壤中 B F越高 土壤生态系统的稳定程度越高 土壤抑制病害能力越强 反之真菌数量增多会打破微生物的 生态平衡 导致连作障碍的发生 24 25 本研究发现 相同茬次营养基质处理的B F 除第2茬外 明显 高于土壤处理 真菌数量明显低于土壤处理 因此营养基质处理的土壤生态系统更稳定 从土壤细菌 DGGE图谱分析结果可知 营养基质栽培改变了细菌的种群结构 增加了一些新的种群种类 相对提高 了细菌的多样性和丰富度指数 本试验中土壤细菌数量与黄瓜株高 根干质量呈显著正相关 与地上部干质量及产量呈极显著正相 关 黄瓜各生长指标及产量与土壤pH 蔗糖酶 脲酶 多酚氧化酶活性 放线菌数量 B F呈正相关 脲酶活性与产量呈极显著正相关 由此表明提高土壤细菌数量 土壤酶活性尤其是脲酶活性更有利于促 进黄瓜植株生长及产量的形成 26 28 这也是黄瓜营养基质栽培优于土壤栽培的主要原因 综上所述 在本试验条件下 温室黄瓜营养基质与土壤在连作栽培上存在着明显的差异 营养基质 处理的理化性质 酶活性及微生物区系结构等均优于土壤处理 从而促进了黄瓜生长及产量的提高 这 可能是营养基质栽培相对于土壤栽培能够有效延缓连作障碍发生的主要机制之一 但随着连作茬次的增 加 10茬后的营养基质已经影响了黄瓜的正常生长 有必要对其采取修复措施 从而保证设施蔬菜优质 高产和可持续发展 但如何对营养基质进行修复还需进一步研究 参考文献 8 1 Yu J Q 喻景权 Soil sickness problem in the sustainable development for the protected production of vegetables Journal of Shenyang Agriculture University 沈阳农业大学学报 2000 31 1 124 26 in Chinese 2 Sun G W 孙光闻 Chen R Y 陈日远 Liu H C 刘厚诚 Causes and control measures for continuous cropping obstacles in protected vegetable cultivation Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering 农业工程学报 2005 21 suppl 184 188 in Chinese 3 Zhang X Y 张雪艳 Tian Y Q 田永强 Gao Y M 高艳明 et al Effect of different cultivation systems in greenhouse cucumber on soil microbial function structure Acta Horticulturae Sinica 园艺学报 2011 38 7 1317 1324 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