灵芝栽培品种引选与培养基配方筛选.pdf

2021 年 第 62 卷 第 11 期 2169 收 稿 日 期 2021 09 22 基 金 项 目 金 华 市 科 技 重 大 项 目 2019 2 001b 作 者 简 介 徐 金 晶 1982 女 浙 江 金 华 人 农 艺 师 从 事 中 药 材 栽 培 技 术 研 究 与 推 广 工 作 E mail 2242359 qq com 通 信 作 者 钭 凌 娟 1981 女 浙 江 金 华 人 高 级 农 艺 师 硕 士 从 事 中 药 材 栽 培 技 术 研 究 工 作 E mail nalanmyft 126 com 文 献 著 录 格 式 徐 金 晶 李 金 辉 钭 凌 娟 等 灵 芝 栽 培 品 种 引 选 与 培 养 基 配 方 筛 选 J 浙 江 农 业 科 学 2021 62 11 2169 2170 2173 DOI 10 16178 j issn 0528 9017 20211117 灵 芝 栽 培 品 种 引 选 与 培 养 基 配 方 筛 选 徐 金 晶 1 李 金 辉 2 钭 凌 娟 1 方 莉 1 1 金 华 市 农 业 科 学 研 究 院 浙 江 金 华 321017 2 浙 江 菇 尔 康 生 物 科 技 有 限 公 司 浙 江 金 华 321304 摘 要 以 泰 山 仙 芝 龙 泉 119 韩 芝 1 号 灵 芝 为 材 料 研 究 母 种 培 养 基 和 4 个 原 种 培 养 基 配 方 对 灵 芝 菌 丝 生 长 速 度 和 生 长 势 的 影 响 筛 选 出 适 宜 本 地 的 灵 芝 品 种 为 龙 泉 119 研 究 4 个 袋 料 配 方 对 灵 芝 子 实 体 和 孢 子 粉 产 量 的 影 响 若 原 种 用 量 较 多 原 种 培 养 基 配 方 建 议 采 用 棉 籽 壳 78 麦 麸 20 蔗 糖 1 石 膏 1 及 杂 木 屑 78 麦 麸 20 蔗 糖 1 石 膏 1 栽 培 袋 料 建 议 采 用 杂 木 屑 83 麦 麸 15 蔗 糖 1 石 膏 1 栽 培 的 灵 芝 产 量 较 高 且 成 本 低 关 键 词 灵 芝 品 种 培 养 基 筛 选 中 图 分 类 号 S567 文 献 标 志 码 A 文 章 编 号 0528 9017 2021 11 2169 02 灵 芝 作 为 传 统 的 滋 补 珍 品 我 国 最 早 的 药 学 著 作 神 农 本 草 经 将 其 列 为 有 效 无 毒 的 上 上 品 也 是 本 草 纲 目 记 载 的 唯 一 入 五 脏 的 本 草 保 健 养 生 功 效 深 入 人 心 1 现 代 医 学 表 明 灵 芝 在 防 治 肿 瘤 保 肝 护 肝 改 善 睡 眠 等 方 面 有 良 好 的 功 效 2 5 由 于 市 场 上 灵 芝 种 类 和 品 种 比 较 混 乱 加 上 人 为 命 名 随 意 同 名 异 种 同 种 异 名 的 现 象 严 重 为 了 永 康 灵 芝 产 业 的 长 足 发 展 特 开 展 适 宜 本 地 栽 培 的 灵 芝 品 种 及 配 套 培 养 基 筛 选 的 试 验 1 材 料 与 方 法 1 1 材 料 供 试 菌 株 为 泰 山 仙 芝 龙 泉 119 韩 芝 1 号 引 自 浙 江 龙 泉 培 养 基 材 料 有 玉 米 粉 麦 粒 棉 籽 壳 木 屑 马 铃 薯 麸 皮 葡 萄 糖 琼 脂 石 膏 1 2 方 法 1 2 1 菌 种 筛 选 将 不 同 菌 种 接 种 在 母 种 培 养 基 上 考 察 其 菌 丝 生 长 情 况 筛 选 三 者 中 菌 丝 生 长 速 度 快 长 势 好 的 品 种 然 后 针 对 筛 选 出 来 的 菌 种 进 行 原 种 培 养 基 和 栽 培 袋 料 培 养 基 配 方 筛 选 试 验 1 2 2 母 种 制 作 母 种 培 养 基 马 铃 薯 200 g 葡 萄 糖 20 g 琼 脂 20 g 木 屑 100 g 玉 米 粉 50 g 磷 酸 二 氢 钾 3 g 硫 酸 镁 1 5 g 水 1 000 mL 将 马 铃 薯 切 片 加 水 煮 沸 30 min 4 层 纱 布 过 滤 后 定 容 至 1 000 mL 在 滤 液 中 加 入 琼 脂 玉 米 粉 磷 酸 二 氢 钾 硫 酸 镁 和 葡 萄 糖 调 节 pH 至 6 5 并 不 断 搅 拌 分 装 到 18 mm 180 mm 试 管 中 121 灭 菌 0 5 h 后 摆 斜 面 分 离 接 种 3 5 d 可 见 菌 块 周 围 长 出 白 色 菌 丝 并 开 始 在 培 养 基 上 蔓 延 生 长 去 除 杂 菌 污 染 的 试 管 10 15 h 后 可 长 满 试 管 斜 面 筛 选 出 菌 丝 洁 白 浓 密 气 生 菌 丝 多 的 试 管 进 行 继 代 培 养 菌 株 继 代 培 养 基 棉 籽 壳 培 养 基 棉 籽 壳 100 g 麦 麸 10 g 葡 萄 糖 20 g 琼 脂 20 g 水 1 000 mL 将 棉 籽 壳 麦 麸 文 火 煮 50 min 用 4 层 纱 布 过 滤 后 定 容 至 1 000 mL 其 他 步 骤 同 PDA 培 养 基 将 筛 选 出 的 分 离 菌 种 无 菌 分 割 成 5 mm 7 mm 的 菌 块 将 其 接 种 到 继 代 培 养 基 上 于 25 恒 温 培 养 7 10 d 可 长 满 试 管 斜 面 如 此 继 代 培 养 2 3 次 每 次 都 去 除 杂 菌 污 染 的 菌 种 筛 选 出 长 势 好 的 菌 种 可 作 为 栽 培 用 的 母 种 1 2 3 原 种 制 作 原 种 培 养 基 T1 为 棉 籽 壳 78 麦 麸 20 蔗 糖 1 和 石 膏 1 T2 为 杂 木 屑 78 麦 麸 20 蔗 糖 1 和 石 膏 1 T3 为 玉 米 粒 97 蔗 糖 1 石 膏 1 和 碳 酸 钙 1 T4 为 麦 粒 97 2170 2021 年 第 62 卷 第 11 期 蔗 糖 1 石 膏 1 和 碳 酸 钙 1 T1 和 T2 的 制 作 将 培 养 料 混 匀 按 料 水 m V 1 1 5 加 水 拌 匀 后 装 入 500 mL 罐 头 瓶 用 聚 丙 烯 薄 膜 封 口 121 灭 菌 1 5 h T3 和 T4 的 制 作 分 别 将 玉 米 粒 和 麦 粒 煮 至 无 白 心 捞 出 稍 晾 干 后 加 入 其 他 材 料 拌 匀 后 装 入 500 mL 罐 头 瓶 用 聚 丙 烯 薄 膜 封 口 121 灭 菌 1 5 h 原 种 瓶 灭 菌 冷 却 后 在 超 净 工 作 台 内 接 入 灵 芝 母 种 25 恒 温 培 养 1 2 4 栽 培 袋 配 方 试 验 配 方 棉 籽 壳 83 麦 麸 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 杂 木 屑 83 麦 麸 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 棉 籽 壳 45 杂 木 屑 38 麦 麸 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 将 含 水 量 在 38 45 的 直 径 10 cm 的 阔 叶 树 干 截 成 15 cm 的 木 段 栽 培 袋 料 可 用 33 cm 17 cm 0 05 cm 的 聚 丙 烯 塑 料 袋 装 袋 121 灭 菌 2 h 冷 却 后 在 超 净 工 作 台 内 接 入 原 种 25 恒 温 培 养 采 用 大 棚 覆 土 栽 培 将 发 菌 完 全 的 菌 袋 转 移 至 大 棚 覆 土 栽 培 用 铁 锹 以 间 距 40 cm 开 深 度 为 35 cm 直 径 为 15 cm 的 栽 培 穴 在 挖 好 的 坑 内 撒 入 辛 硫 磷 防 虫 将 菌 袋 塑 料 袋 去 除 取 出 菌 棒 竖 直 放 入 坑 内 露 出 部 分 覆 土 全 部 完 成 后 打 开 喷 灌 设 备 进 行 喷 雾 使 菌 棒 吸 足 水 分 后 期 管 理 与 传 统 大 棚 灵 芝 管 理 相 同 6 1 3 测 量 和 观 察 指 标 分 别 在 第 7 天 母 种 和 原 种 测 量 菌 丝 生 长 速 度 并 观 察 菌 丝 生 长 势 菌 丝 的 生 长 势 用 号 表 示 记 录 菌 丝 长 满 瓶 的 时 间 每 个 配 方 随 机 各 选 100 袋 菌 包 采 集 子 实 体 晒 干 随 机 选 100 袋 菌 包 收 集 孢 子 粉 称 取 质 量 1 4 数 据 统 计 与 分 析 使 用 Excel 2010 统 计 数 据 并 分 析 2 结 果 与 分 析 2 1 不 同 灵 芝 菌 种 母 种 培 养 过 程 中 菌 丝 比 较 由 表 1 可 知 不 同 菌 种 在 相 同 培 养 基 及 28 下 继 代 培 养 7 d 后 日 均 长 速 对 比 为 龙 泉 119 泰 山 仙 芝 韩 芝 1 号 菌 丝 长 势 龙 泉 119 韩 芝 1 号 泰 山 仙 芝 由 此 可 见 龙 泉 119 灵 芝 生 长 速 度 最 快 日 均 长 速 达 0 47 cm 菌 丝 长 势 最 好 对 应 的 菌 丝 洁 白 浓 密 健 壮 表 1 不 同 灵 芝 菌 种 母 种 培 养 过 程 中 菌 丝 比 较 灵 芝 菌 种 日 均 长 速 cm 菌 丝 色 泽 菌 丝 浓 度 菌 丝 长 势 泰 山 仙 芝 0 43 纯 白 色 浓 密 龙 泉 119 0 47 纯 白 色 较 浓 密 韩 芝 1 号 0 39 纯 白 色 浓 密 2 2 不 同 培 养 基 对 龙 泉 1 1 9 原 种 菌 丝 生 长 的 影 响 由 表 2 可 知 不 同 配 方 培 养 基 处 理 中 龙 泉 119 原 种 菌 丝 日 均 长 速 最 快 的 是 T4 为 0 56 cm 其 次 是 T3 而 T1 T2 较 差 满 瓶 时 间 最 短 的 是 T3 其 次 是 T4 而 T1 T2 满 瓶 时 间 较 长 在 污 染 率 方 面 T4 T3 高 于 T1 T2 表 2 不 同 原 种 培 养 基 菌 丝 生 长 速 度 对 比 培 养 基 萌 发 时 间 d 日 均 长 速 cm 满 瓶 时 间 d 菌 丝 长 势 污 染 率 T1 1 0 46 35 4 T2 1 0 47 34 3 T3 1 0 53 30 7 T4 1 0 56 32 8 2 3 不 同 栽 培 袋 料 配 方 对 龙 泉 1 1 9 产 量 的 影 响 由 表 3 可 知 4 种 栽 培 袋 料 生 产 配 方 的 龙 泉 119 灵 芝 子 实 体 和 孢 子 粉 产 量 以 配 方 为 最 高 其 次 是 配 方 而 配 方 最 低 表 3 不 同 栽 培 袋 料 配 方 子 实 体 孢 子 粉 产 量 比 较 袋 料 配 方 灵 芝 产 量 kg 孢 子 粉 产 量 kg 袋 料 成 本 kg 6 1 5 2 1 089 8 6 6 5 350 6 8 5 8 751 9 8 7 5 400 注 表 中 为 每 500 kg 干 料 的 数 据 比 较 2 4 栽 培 袋 料 主 料 成 本 当 前 棉 籽 壳 价 格 2 2 元 kg 1 刨 花 桑 枝 等 废 弃 木 屑 价 格 0 42 元 kg 1 段 木 价 格 0 80 元 kg 1 麸 皮 约 2 2 元 kg 1 糖 约 1 2 元 kg 1 石 膏 约 1 元 kg 1 因 此 栽 培 袋 料 主 料 成 本 排 列 顺 序 为 配 方 3 小 结 与 讨 论 本 试 验 引 进 泰 山 仙 芝 龙 泉 119 韩 芝 1 号 3 个 灵 芝 菌 种 龙 泉 119 日 均 长 速 和 菌 丝 生 长 势 都 为 三 者 中 最 好 菌 丝 洁 白 浓 密 针 对 龙 泉 119 菌 种 若 生 产 原 种 数 量 不 多 可 用 玉 米 粒 培 养 基 和 麦 粒 培 养 基 若 原 种 用 量 较 多 建 议 采 用 棉 籽 壳 和 木 屑 作 为 培 养 基 较 适 宜 栽 培 袋 料 配 方 随 着 棉 籽 壳 含 下 转 第 2173 页 王 宗 星 等 栽 培 方 式 对 七 叶 一 枝 花 光 合 及 生 物 特 性 的 影 响 2173 学 特 征 及 物 候 期 研 究 J 湖 南 农 业 科 学 2010 13 18 20 4 梁 娟 郭 泽 宇 叶 漪 不 同 土 壤 水 分 条 件 对 七 叶 一 枝 花 光 合 特 性 及 有 效 成 分 皂 苷 含 量 的 影 响 J 植 物 生 理 学 报 2014 50 1 56 60 5 梁 娟 易 涛 叶 漪 遮 阴 对 七 叶 一 枝 花 光 合 特 性 及 皂 苷 含 量 的 影 响 J 江 苏 农 业 科 学 2016 44 4 265 267 6 王 岚 张 宇 斌 李 建 新 土 壤 不 同 含 水 量 对 七 叶 一 枝 花 光 合 和 生 理 特 性 的 影 响 J 贵 州 农 业 科 学 2015 43 8 42 45 7 张 翠 虞 木 奎 王 宗 星 等 滨 海 围 垦 地 红 叶 椿 光 合 特 性 研 究 J 湖 南 农 业 科 学 2010 3 43 45 8 薛 垠 鑫 刘 根 红 王 晓 钰 滴 灌 条 件 下 氮 磷 钾 肥 配 施 对 玉 米 株 高 光 合 速 率 及 产 量 的 影 响 J 甘 肃 农 业 大 学 学 报 2020 55 6 77 85 9 徐 当 会 李 秋 霞 张 仁 懿 等 硅 氮 添 加 对 高 寒 草 甸 优 势 物 种 披 针 叶 黄 华 生 长 及 净 光 合 速 率 的 影 响 J 草 业 科 学 2020 37 9 1681 1687 10 张 满 利 陈 盈 王 彦 荣 等 氮 素 穗 肥 施 用 对 水 稻 光 合 速 率 和 产 量 的 影 响 J 农 业 与 技 术 2020 40 13 1 4 11 王 培 娟 马 玉 平 霍 治 国 等 土 壤 水 分 对 冬 小 麦 叶 片 光 合 速 率 影 响 模 型 构 建 J 应 用 气 象 学 报 2020 31 3 267 279 12 贺 旺 龙 谷 瑶 袁 德 义 等 不 同 造 林 密 度 下 油 用 柠 檬 桉 光 合 速 率 日 变 化 研 究 J 林 业 科 技 2020 45 6 13 17 13 韩 金 龙 单 成 钢 王 志 芬 不 同 遮 光 处 理 对 9 种 药 用 植 物 光 合 速 率 及 产 量 的 影 响 J 农 学 学 报 2018 8 10 57 60 14 陈 延 松 袁 华 玲 卫 文 渊 等 夏 季 遮 阳 对 红 阳 猕 猴 桃 净 光 合 速 率 的 影 响 及 其 与 生 理 生 态 因 子 的 关 系 J 果 树 学 报 2017 34 9 1144 1151 15 凌 悦 铭 张 亚 黎 王 震 等 高 温 胁 迫 对 小 黑 麦 光 合 作 用 影 响 J 石 河 子 大 学 学 报 自 然 科 学 版 2020 38 2 172 178 16 吕 钦 杨 韦 献 东 陈 鑫 等 八 角 林 不 同 郁 闭 度 对 金 花 茶 和 山 茶 生 长 及 光 合 特 性 的 影 响 J 热 带 作 物 学 报 2020 41 6 1138 1144 17 陈 鑫 李 桃 祯 王 凌 晖 等 不 同 郁 闭 度 下 山 茶 生 长 及 光 合 特 性 差 异 J 广 西 林 业 科 学 2017 46 2 160 164 18 杨 先 裕 袁 紫 倩 颜 福 花 等 不 同 郁 闭 度 板 栗 林 下 套 种 香 榧 的 光 合 生 理 特 性 研 究 J 安 徽 农 业 大 学 学 报 2016 43 3 400 404 19 徐 当 会 李 秋 霞 张 仁 懿 硅 氮 添 加 对 高 寒 草 甸 优 势 物 种 披 针 叶 黄 华 生 长 及 净 光 合 速 率 的 影 响 J 草 业 科 学 2020 37 9 1681 1687 20 郑 梅 霞 陈 宏 苏 海 兰 等 不 同 重 楼 资 源 的 重 楼 皂 苷 含 量 比 较 及 与 土 壤 养 分 的 相 关 性 分 析 J 福 建 农 业 科 技 2020 8 58 66 21 宋 九 华 唐 琼 成 英 等 栽 培 与 野 生 重 楼 药 材 中 重 楼 皂 苷 与 无 机 元 素 含 量 的 比 较 分 析 J 乐 山 师 范 学 院 学 报 2014 29 12 54 56 22 李 碧 琴 王 春 涛 刘 帆 等 采 收 期 对 宝 兴 县 华 重 楼 皂 苷 含 量 的 影 响 J 现 代 农 业 科 技 2018 1 56 58 23 王 跃 虎 牛 红 梅 张 兆 云 等 重 楼 属 植 物 的 药 用 价 值 及 其 化 学 物 质 基 础 J 中 国 中 药 杂 志 2015 40 5 833 899 24 刘 帅 李 沙 沙 张 登 禄 等 重 楼 皂 苷 药 理 作 用 及 作 用 机 制 的 研 究 进 展 J 现 代 中 药 研 究 与 实 践 2020 5 86 90 责 任 编 辑 张 才 德 上 接 第 2170 页 量 的 减 少 灵 芝 子 实 体 和 孢 子 粉 产 量 逐 渐 提 高 这 可 能 与 棉 籽 壳 木 质 素 含 量 较 低 有 关 棉 籽 壳 83 麦 麸 15 蔗 糖 1 石 膏 1 栽 培 成 本 最 高 段 木 栽 培 产 量 最 高 但 是 采 用 木 屑 作 为 袋 料 成 本 最 低 取 材 方 便 可 更 好 地 利 用 农 业 废 弃 物 变 废 为 宝 因 此 杂 木 屑 83 麦 麸 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 作 为 龙 泉 119 栽 培 袋 料 配 方 适 宜 在 本 地 推 广 应 用 参 考 文 献 1 林 志 彬 灵 芝 的 现 代 研 究 M 3 版 北 京 北 京 大 学 医 学 出 版 杜 2007 11 12 2 苏 保 洲 灵 芝 的 现 代 临 床 应 用 探 索 M 现 代 中 西 医 结 合 杂 志 2019 28 5 567 3 张 华 斌 石 松 林 陈 春 美 灵 芝 多 糖 抗 肿 瘤 免 疫 机 制 的 研 究 进 展 J 医 学 综 述 2016 22 2 259 262 4 崔 月 花 章 克 昌 灵 芝 三 萜 皂 苷 GCTL1 的 体 外 抗 氧 化 作 用 J 食 品 科 学 2010 31 19 49 53 5 刘 维 虎 虓 真 朱 莉 等 灵 芝 三 萜 的 研 究 与 应 用 进 展 J 食 品 科 学 2019 40 5 309 6 俞 巍 毅 浙 北 地 区 灵 芝 优 良 品 种 的 引 种 和 选 育 J 浙 江 农 业 科 学 2016 57 4 486 489 责 任 编 辑 张 瑞 麟