棘孢木霉和超微粉腐殖质改善连作土壤微生态.pdf

浙江农业学报Acta Agriculturae Zhejiangensis 6 6 6 z ny b cn 林辉 张锦 原倩宇 等 棘孢木霉和超微粉腐殖质改善连作土壤微生态 J 浙江农业学报 6 6 6 DO 6 issn 6 收稿日期 基金项目 浙江省公益性技术应用研究计划 C 作者简介 林辉 6 女 浙江苍南人 博士 副研究员 从事环境微生物与施肥研究 m i in 6 com 通信作者 马军伟 m i m u e 6 com 棘孢木霉和超微粉腐殖质改善连作土壤微生态 林 辉 张 锦 原倩宇 叶 静 孙万春 虞轶俊 俞巧钢 马军伟 浙江省农业科学院环境资源与土壤肥料研究所 浙江杭州 西北农林科技大学环境资源学院 陕西杨凌 浙江 省耕地质量与肥料管理总站 农业农村部肥料质量监督检验测试中心 杭州 浙江杭州 摘 要 研究棘孢木霉 Trichoderma asperellum T 超微粉腐殖质及其复配物 腐殖质 T 对连作土壤微生 态的影响 旨在为设施连作土壤调理和土传病害防治提供高效 低成本且环境友好型的方法 采用平板对峙 试验 分析棘孢木霉T 对不同专化型 黄瓜专化型 西瓜专化型 萎蔫专化型 尖孢镰刀菌 Fusarium oxyspo rum 的抑制效果 进一步在微宇宙土壤培养试验中设空白对照 C S 以及添加 质量分数 超微粉腐 殖质 TS 质量分数 T 菌剂 TS 和 质量分数 腐殖质 T TS 个处理 在黄瓜盆栽试验 中设空白对照 C C 添加 质量分数 超微粉腐殖质 TC 和腐殖质 T TC 个处理 定期取样 利 用平板计数法和荧光定量PCR测定分析土壤中尖孢镰刀菌 真菌 细菌 棘孢木霉数量 观察黄瓜发病情况 结果表明 棘孢木霉T 明显抑制各专化型尖孢镰刀菌的生长 对西瓜专化型尖孢镰刀菌的抑制效果最佳 在微宇宙土壤培养条件下 TS TS 和TS 处理均可降低土壤中尖孢镰刀菌的拷贝数 其中TS 处理对尖孢 镰刀菌的抑制率最高 超微粉腐殖质与棘孢木霉T 的复合施用促进了棘孢木霉T 在土壤中的定殖 黄 瓜盆栽试验下 与C C相比 TC 处理显著 P 增加土壤中棘孢木霉和放线菌数量 较TC 处理对尖 孢镰刀菌的抑菌作用更长效 黄瓜病死株数量更低 且表现出一定的促生长效应 综上 棘孢木霉T 超微 粉腐殖质及其复配物均可改善连作土壤微生态 抑制尖孢镰刀菌生长 且以复配使用效果最佳 关键词 棘孢木霉 腐殖质 尖孢镰刀菌 土壤微生物 黄瓜 中图分类号 S S 6 文献标志码 文章编号 6 6 Improving microbial system of continuous cropping soil by addition of Trichoderma asperel lum and ultrafine powder humus N ui Z NG Jin YU N Qi nyu Y Jing SUN W nc un YU Yi un YU Qi og ng Jun ei Institute of Environment Resource Soil College of Natural Resources and Environment Northwest A Hangzhou Center for Inspection and Testing for Quality and Safety of Fertilizer Zhejiang Cultivated Land Quality and Fertilizer Management Station Hangzhou 310020 China Abstract T e esen o k ocused on e e ec s o ic ion o Trichoderma asperellum T u ine o de u mus nd ei combin ion umus T on e mic obi sys em o con inuous c o ing soi o o e ig y e icien o cos nd envi onmen iend y me ods o con o ing soi bo ne dise ses nd evi ion o con inuous c o ing obs c es T e in ibi o y e ec s o T asperellum T on di e en y es o Fusarium oxysporum F oxysporum s cucumberium FOC F oxysporum s niveum FON F oxysporum s vasinfectum FO e e de e mined by e con on ion cu u e e e imen Soi mic ocosm e e imen s e e e o med i e men s inc uding con o C S nd ddi ion o m ss c ion u ine o de umus TS o m ss c ion T as perellum T TS o m ss c ion umus T TS T e design o e men s C S TS nd TS e e so ied in e cucumbe o e e imen nd e e m ked s C C TC nd TC es ec ive y Soi s m es e e co ec ed nd en sub ec ed o e coun ec nique nd e ime qu n i ive o yme se c in e c ion qPCR T e o u ion o F xysporum ungi b c e i nd T asperellum s de e mined s e s e incidence o cucumbe i s s o n T asperellum T e ibi ed in ibi o y e ec s on di e en kinds o F oxyspo rum nd e ig es in ibi ion e ec s obse ved on FON Unde soi mic ocosm condi ion e men s o TS TS nd TS in ibi ed e o i e ion o F oxysporum in con inuous c o ing soi i ou signi ic n y in uencing e soi mic obi o u ion T e m imum in ibi ion e s ound in TS e men Soi mic ocosm e e imen esu s s o ed e combin ion o u ine o de umus nd T inc e sed e co oniz ion o T in soi s Com ed i C C TC signi ic n y P inc e sed e numbe o T asperellum nd c inomyce es in soi s Besides TC e ibi ed mo e e sis en in ibi ion e ec on F oxysporum nd o e mo i y e o cucumbe n TC n conc usion ic ion o T asperellum T u ine o de umus o umus T cou d im ove e soi mic obi sys em in ibi e e g o o F oxysporum in soi nd umus T s o ed e bes esu Key words Trichoderma asperellum umus Fusarium oxysporum soi mic oo g nism cucumbe 设施栽培是我国蔬菜 瓜果等经济作物栽培 的重要方式 随着连作年限延长 设施蔬菜土壤 环境恶化 土壤微生物区系失衡 土传病害等发 生日益严重 连作障碍现象普遍 尖孢镰刀菌 Fusarium oxysporum 是典型的土传病害真菌 可 引起 多种植物发生枯萎病 随栽培年限增 加 土壤中的尖孢镰刀菌数量一般呈上升趋 势 研究显示 致病尖孢镰刀菌增殖已成为设 施连作中较为突出的问题之一 可导致作物减产 甚至绝收 因此 寻求高效 低成本且环境友 好型的方法抑制尖孢镰刀菌 改善土壤环境 对 减轻设施土壤连作障碍具有重要意义 目前 在 防治连作障碍 杀灭土传病菌方面 研究人员提 出了物理防治 化学防治 生物防治等多种手段 其中用生物菌剂进行生物防治的方法受到了广 泛关注 此外 一些土壤调理剂的使用也可以达 到降低土传病害 减轻连作障碍的目的 例如 向土壤中施用生物炭可降低土壤中尖孢镰刀菌 的数量 改善土壤微生物区系 在生物菌剂方面 部分木霉 枯草芽孢杆菌 角担子菌属真菌等被发现均有较好的尖孢镰刀 菌拮抗能力 在作物栽培上应用后减少了蔬菜发 病 增加了经济产量 6 其中 木霉菌被公认 为是一类普遍存在并具有重要经济意义的生防 益菌 以其高效 安全 不易引起病原菌抗药性的 特点 在以可持续发展为宗旨的生物防治中发挥 了重要作用 大量国内外研究也报道了木霉 富集型生物有机肥 Trichoderma en ic ed bio e i ize 在促进作物生长 提高养分利用 抑制氧化 亚氮等温室气体排放和助力化肥减量等方面的 积极作用 据报道 部分棘孢木霉 Tri choderma asperellum 添加到有机肥或者直接施用 于土壤 可以防治枯萎病等植物病害 但 总的来看 现有的生物防治菌剂或多或少地仍存 在一些问题 筛选 开发更多的候选微生物仍显 得非常迫切 棘孢木霉T 具有产孢能力较强 耐受范围较广等特点 目前 关于棘孢木霉 T 的研究主要集中在其对木质纤维素的降解 上 在餐厨 秸秆堆肥中接种棘孢木霉T 提高了垃圾中有机物的降解率 纤维素降解率最 高可增长 降低了垃圾堆肥中氮 磷等养分 的损失 提高了堆肥产物的种子发芽率 6 但棘 孢木霉T 的生物防治能力及其对土壤微生物的 影响等还未明确 泥炭 风化煤等矿物腐殖质是腐殖酸肥料的 重要原料 也常用作生物有机肥的载体 这些风 化煤原料的粒度往往在 目以上 风化煤等 矿物腐殖质中腐殖酸含量丰富 含有多种活性基 6 林辉 等 棘孢木霉和超微粉腐殖质改善连作土壤微生态 团 具有吸附 络合 交换等性能 可通过改善土 壤团聚体质量 提高土壤腐殖酸含量 增加土壤 阳离子交换量等途径来改良土壤 武俊俊 等 研究指出 以经过简单微生物处理的风化 煤作为长山药的基肥 可增加土壤疏松度 地温 活性物质等 改善土壤理化性质 有效促进长山 药的出苗和生长 提高其产量和品质 在水稻土 中使用风化煤可促进水稻对N P等养分的吸收 增强根系活力 提高产量 超微粉腐殖质是 一种利用机械化学技术将泥炭 风化煤等矿物腐 殖质研磨加工到粒度小于 目的超微细颗 粒 成品为深褐色超微细粉末 其中 研磨细度达 到纳米级的腐殖质也被称为乌金散 研究表明 超细粉碎改变了煤粒表面亲水基和疏水基的比 例 电动电位绝对值等各种表面性质 对水溶性 组分含量 腐植酸的析出性能等也有影响 笔者所在课题组的前期研究也表明 超微粉加工 提高了风化煤的游离腐殖酸含量 粉碎粒度在 目左右的原料风化煤中可溶性腐殖酸含量为 6 而超微粉腐殖质中可溶性腐殖酸含量增加 到了 6 由此推测 超微粉腐殖质对土壤的调 理作用可能与未经加工处理的腐殖质原料存在 差异 但无论是矿物腐殖质原料还是超微粉腐 殖质 均未见深入探讨其对土壤病原菌或微生物 区系影响的研究 针对以上背景 本文以棘孢木霉T 和超微 粉腐殖质为对象 研究二者单一和复合使用下对 连作土壤微生物区系的影响 尤其是对典型土传 病菌 尖孢镰刀菌的影响 以期为进一步研发 蔬菜土传病害预防 控制材料和方法提供依据 材料与方法 试验材料 试验菌株 尖孢镰刀菌黄瓜专化型 F oxysporum s cucumberium FOC 尖孢镰刀菌西瓜专化型 F oxysporum s niveum FON 和尖孢镰刀菌萎蔫 专化型 F oxysporum s vasinfectum FO 均购自中国农业微生物菌种保藏中心 棘孢木 霉T 为本实验室保藏菌株 试验土壤 试验土壤采集自宁波某设施蔬菜大棚 土 壤理化性质如下 含水率 值 6 电 导率 C mS cm 有机质含量6 总 氮含量 有效磷含量 mg kg 速 效钾含量 mg kg 阳离子交换量 cmo kg 棘孢木霉T 菌剂 将棘孢木霉T 菌株斜面保藏物接种到马铃 薯葡萄糖琼脂培养基 PD 平板 置于 培 养 d 直至形成大量孢子 采用无菌水 含有 吐温 将孢子和菌丝洗下 平板培养法测 定活菌数 通过稀释将活菌数保持在 m 作为待接种的液体菌剂备用 超微粉腐殖质 超微粉腐殖质取自浙江丰瑜生态科技有限 公司 原料为风化煤 通过机械超细粉加工技术 研磨到超微细颗粒 粒度 扩增效率较高 通过获得 的土壤中尖孢镰刀菌的绝对拷贝数 以单位质量 干土计 计算抑菌率 土壤中棘孢木霉活菌数测定 取新鲜或冷藏土样 g 加入 m 无菌水 配制成土壤悬浮液 稀释度为 min 振荡6 min 使微生物均匀分散 静置后吸 取上层清液依次进行 倍梯度的稀释 不同稀 释度的土壤悬浮液各取 涂抹于分离棘孢 木霉菌的选择性培养基上 恒温黑暗培养 d 统计菌落数量 选取合适的稀释度进行计 数 每处理重复 次 棘孢木霉选择性培养基TS gSO O g PO g C g N NO g 孟加拉红 g 葡萄糖 g 琼脂 g 灭菌 min 使用前先将培养基冷却到 6 加入无菌的氯霉素 g 对二甲基氨基 苯重氮磺酸钠 g 五氯硝基苯 g 土壤中真菌 细菌和放线菌数量测定 取新鲜或冷藏土样 g 加入 m 无菌水 配制成土壤悬浮液 稀释度为 min 振荡6 min 使微生物均匀分散 静置后吸 取上层清液依次进行 倍梯度的稀释 不同稀 释度的土壤悬浮液各取 涂布于不同培养 基上 采用稀释平板法 使用选择性培养基分别 测定土壤中细菌 真菌 放线菌的数量 细菌用牛 肉膏蛋白胨培养基 真菌用孟加拉红培养基 放 线菌用高氏 号培养基 恒温黑暗培养一 定时间后统计菌落数量 选取合适的稀释度进行 试验计数 每处理重复 次 数据分析 采用 ce 软件进行数据处理和作图 采用SPSS 软件对数据进行方差分析 对有 显著 P 差异的 采用 SD法进行多重 比较 6 林辉 等 棘孢木霉和超微粉腐殖质改善连作土壤微生态 结果与分析 棘孢木霉T 对不同尖孢镰刀菌的拮抗 效果 如图 所示 棘孢木霉T 的生长速度明显 快于尖孢镰刀菌 可抑制各种类型尖孢镰刀菌的 生长 其中 T 对FON的抑制效果最佳 培养 d的平皿抑菌率为 而对FOC和FO 的 抑制效果略差 培养 d的平皿抑菌率分别为 和6 室内土壤培养下不同处理对连作土壤微生 物群落的影响 尖孢镰刀菌 图1 平板对峙培养试验结果 Fig 1 P e con on ion ss ys o s in T 如图 所示 添加超微粉腐殖质 TS 棘孢 木霉T 菌剂 TS 与腐殖质 T TS 的处理均 能抑制连作障碍土壤的尖孢镰刀菌数量 各处理 组的尖孢镰刀菌绝对拷贝数显著 P 下 降 d时各处理对土壤尖孢镰刀菌的抑制作用 最强 抑菌率在6 相比单独添加 超微粉腐殖质或棘孢木霉T 腐殖质 T 的抑菌 效果更佳 TS 处理 d和 d对尖孢镰刀菌的 抑制率分别为 和 而相同时间点 TS 和TS 处理的的抑菌率分别为 和6 此外 TS 和TS 处 理对连作土壤尖孢镰刀菌数量的影响无显著差 异 综上 超微粉腐殖质和棘孢木霉T 菌剂复 配使用对尖孢镰刀菌的抑制具有协同增强效应 可培养微生物 图2 不同处理下连作障碍土壤中尖孢镰刀菌的绝对 拷贝数 Fig 2 bso u e co y numbe o F oxysporum in con in uous c o ing soi unde di e en e men s 6 浙江农业学报 第 卷 第6期 由表 可知 相较于对照 C S 向未栽培 作物的连作土壤模拟生态系统中添加超微粉腐 殖质 TS 棘孢木霉T 菌剂 TS 和腐殖质 T TS 均未对土壤细菌数量产生显著影响 表 明 种添加剂对土壤细菌生长的干扰较小 从 添加后 d的数据来看 添加超微粉腐殖质显著 P 降低了土壤中的真菌数量 但抑制作 用较为短暂 添加棘孢木霉T 菌剂和腐殖质 T 的土壤中的真菌数量在 d时显著 P 高于对照 C S 土壤和单独添加超微粉 腐殖质的土壤 该现象可能与TS 和TS 处理中 棘孢木霉T 在土壤中的定殖有关 此外 棘孢 木霉T 菌剂和腐殖质 T 还短暂 d 促进了 土壤中放线菌的生长 但在 d和 d时不同 处理土壤中的放线菌数量均无显著差异 棘孢木霉T 由图 可知 对照 C S 和添加腐殖质 TS 的土壤中均未检出木霉菌 而添加棘孢木 霉T 菌剂 TS 和腐殖质 T TS 的土壤中检 出 g 以上的棘孢木霉 并随着时间延长 其数量先增加后下降 有效活菌数在 d时达到 高峰 盆栽条件下不同处理的试验效果 对黄瓜生长及其枯萎病防治效果的影响 如表 所示 在黄瓜栽培前向土壤中施用超 微粉腐殖质 TC 或腐殖质 T TC 均可增强黄 表1 室内土壤培养下不同处理土壤中真菌 放线菌和细菌数量 Table 1 Cu iv b e numbe o ungi c inomyce es nd b c e i in soi s unde soi mic ocosm condi ions 采集时间 S m ing ime d 细菌B c e i CFU g C S TS TS TS 真菌Fungi g C S TS TS TS 放线菌 c inomyce es 6 g C S TS TS TS 6 b b b b b b 6 6 相同时间不同处理下同一类别微生物数量无相同字母的表示处理间差异显著 P 表 同 D m ked i ou e s me e e s o e s me mic obi communi y indic ed signi ic n P di e ence i in e men s e s me ime T e s me s in T b e 图3 不同处理下连作障碍土壤中棘孢木霉T 数量 Fig 3 Numbe o Trichoderma asperellum T in con inu ous c o ing soi unde di e en e men s 表2 黄瓜幼苗移栽 天后的病死率 Table 2 o i y e o cucumbe seed ings e d ys o ns n ing 处理 T e men 病株 不含死株 Sick n no de d n s 死株 De d n s 总病死率 To mo i y e C C 6 6 TC TC 6 6 瓜的抗病能力 降低病死株数量 促进黄瓜生长 且以腐殖质 T 的促黄瓜幼苗生长和抗病效果最 佳 与施用超微粉腐殖质相比 施用腐殖质 T 的黄瓜叶片更强壮 更绿 图 对土壤中尖孢镰刀菌数量的影响 采集黄瓜苗移栽 d的土壤样品 其 中尖孢镰刀菌的数量变化如图 所示 可知 施 用超微粉腐殖质 TC 或腐殖质 T TC 均能 有效抑制黄瓜土壤中的尖孢镰刀菌 且腐殖酸 T 图4 不同处理下黄瓜幼苗移栽 周后的生长情况 Fig 4 G o o cucumbe seed ings unde di e en e men s e ns n ing o eeks 6 林辉 等 棘孢木霉和超微粉腐殖质改善连作土壤微生态 图5 黄瓜盆栽下不同处理土壤的尖孢镰刀菌数量 Fig 5 Numbe o F oxysporum in cucumbe o ing soi s unde di e en e men s 的抑菌效果优于超微粉腐殖质 在 d观察期内 TC 处理的抑菌率稳定在 而TC 处理 的抑菌率从 6 降至 盆栽试验结果进 一步证实 超微粉腐殖质和木霉T 菌剂复配使用 可以有效抑制土壤中尖孢镰刀菌的增殖 对土壤可培养微生物群落和棘孢木霉数 量的影响 从表 可以看出 相同时间不同处理盆栽土 壤的细菌数量无显著差异 与室内土壤培养试验 结果一致 说明施用超微粉腐殖质或腐殖质 T 并不会对土壤细菌产生显著影响 施用超微粉 腐殖质 TC 或腐殖质 T TC 有助于增加黄 瓜栽培过程中土壤放线菌数量 其中 分别在 d 和 d时 TC 和TC 处理与C C的土壤放线 菌数量差异达到了显著水平 P 施用超 微粉腐殖质 TC 或腐殖质 T TC 改变了土 壤真菌数量的变化趋势 对照 C C 的土壤真 菌数量随时间增加而下降 而TC 和TC 的土壤 真菌数量却随时间延长先增加后下降 d时 施用超微粉腐殖质的处理显著 P 降低了 土壤中的真菌数量 但抑制作用较为短暂 d 时 施用腐殖质 T 的土壤中真菌数量显著 P 高于其他处理 而另 个处理的土壤真菌 数量已无显著差异 d时 个处理的土壤真菌 数量均无显著差异 进一步测定TC 处理土壤 中的棘孢木霉数量 发现其数量变化趋势与真菌 完全一致 推测栽培 d时TC 处理土壤中真菌 数量的显著增加与外源棘孢木霉的定殖有关 表3 盆栽条件下不同处理土壤中真菌 放线菌和细菌数量 Table 3 Numbe o ungi c inomyce es nd b c e i in cucumbe o ing soi s unde di e en e men s 采集时间 S m ing ime d 细菌B c e i 6 CFU g C C TC TC 真菌Fungi g C C TC TC 放线菌 c inomyce es g C C TC TC b b 6 b b 6 b 图6 TC 处理土壤中棘孢木霉T 数量变化 Fig 6 Numbe o Trichoderma asperellum T in soi s unde TC e men 讨论 在连作障碍土壤中 微生物种群失衡现象非 常常见 在连作生产条件下 改变土壤微生物种 群结构 降低尖孢镰刀菌等土传病害菌数量 营 造健康的土壤微生物环境是解决连作障碍的重 要途径之一 在一般情况下 细菌真菌比值较高 的土壤肥力更高 抑病能力更强 在以往改善连 作障碍的相关研究中 6 尖孢镰刀菌等病原 真菌数量的显著减少往往伴随着土壤细菌和放 线菌数量 比例的显著增加 以及真菌数量比例 的明显下降 在本研究中 棘孢木霉T 超微粉 66 浙江农业学报 第 卷 第6期 腐殖质及其复配物均被证实可改善连作土壤微 生态结构 施用于常年蔬菜连作的土壤能抑制尖 孢镰刀菌生长 增加土壤放线菌数量 且不影响 土壤细菌繁殖 黄瓜盆栽试验和土壤培养试验的 结果基本一致 其中 超微粉腐殖质和棘孢木霉 T 复配物的效果最佳 能提高黄瓜的抗病和生 长性能 棘孢木霉对黄瓜专化型尖孢镰刀菌的抑制 效应在以往的报道中多有涉及 如张春秋等 筛选的棘孢木霉 贺字典等 研究的棘孢木 霉菌肥等 棘孢木霉T 在木质纤维素降解方 面具有优势 可作为微生物菌剂促进农业有机废 弃物的降解和肥料化 6 本研究进一步证实 棘孢木霉T 还具有防治土传病害的能力 并发 现其施用能够促进连作土壤上黄瓜的生长 棘 孢木霉生物农药 生物杀菌剂产品一直受到各方 面的关注和欢迎 棘孢木霉T 的生物质分解 能力和植物病原菌拮抗功能使其具备发展成为 生物有机肥生产菌种的潜能 一方面 T 可以用 于促进木质纤维素类废弃物的降解和腐殖化 另 一方面 T 在物料中的定殖可赋予发酵产物一 定的生物防治能力 有利于实现农业有机废弃物 的高值资源化 在本研究检索范围内 还未见到 关于棘孢木霉防治西瓜枯萎病或棉花枯萎病的 研究报道 本研究显示 棘孢木霉T 除了能拮 抗尖孢镰刀菌黄瓜专化型 对萎蔫专化型和西瓜 专化型也具有拮抗能力 暗示其有望同时应用于 西瓜或棉花枯萎病的防治 风化煤作为土壤调理剂已被证实具有改良 土壤理化性状 增加土壤腐殖质 提高作物产量 品质等作用 与传统的风化煤原料相比 超 微粉加工后的风化煤在性质上有一定的改变 如 游离腐殖酸含量增加等 本研究发现 以风化煤 为原料的超微粉腐殖质具有一定的抑制土壤尖 孢镰刀菌生长 提高黄瓜抗病能力的作用 金平 等 研究发现 腐殖酸可以作为农药增效剂来 提高黄瓜的抗病能力 我们推测 超微粉腐殖质 对土壤尖孢镰刀菌的抑制作用及其对黄瓜的促 生长能力可能与其高含量的腐殖酸有关 此外 超微粉腐殖质施用后土壤中有机质含量的增加 可能也是其改良连作土壤微生态的重要途径 要特别指出的是 超微粉腐殖质呈酸性 因此更 适用于碱性较强的土壤 如盐碱土的改良修复 在实际生产中 单独试验生防菌的防治效果 结果往往不稳定 影响其推广和应用 目前 将 生防菌同有机肥相结合使用是主要的发展趋势 谷祖敏等 报道了香菇菌糠对绿色木霉防治黄 瓜枯萎病的增效作用 二者混合使用提高了绿色 木霉在土壤中的定殖 土壤中枯萎病菌数量减少 6 增效显著 本研究发现 棘孢 木霉T 和超微粉腐殖质复配具有协同增效作 用 其对土壤尖孢镰刀菌的抑制作用更持久 对 土壤放线菌的促进作用更强 添加后黄瓜的生长 性能和抗病能力更高 超微粉腐殖质对土壤真 菌的抑制效果显著 推测可能是通过广谱性的抑 菌行为降低了土壤中尖孢镰刀菌的数量 生防 木霉对尖孢镰刀菌的抑制效用有一定的针对性 和靶向性 研究指出 生防木霉与尖孢镰刀菌在 土壤中的生长繁殖一般呈负相关 生防木霉数量 的增加往往伴随着尖孢镰刀菌数量的下降 综合以上信息推测 超微粉腐殖质和棘孢木霉T 的协同增效作用与二者不同的生防机制有极大 相关性 此外 我们认为超微粉腐殖质和棘孢木 霉T 存在明显的互作行为 并且二者通过互作 实现了抑菌和促生长的协同增效 在一些与微 生物菌剂相关的专利中常发现风化煤的添加 据 此我们认为 超微粉腐殖质与棘孢木霉T 复配 的协同增效作用可能还与前者可以作为微生物 的吸附载体 并可以提供养分有关 载体的存在 可以增加菌种的存活率和稳定性 而外源养分对 于提高棘孢木霉T 在土壤中竞争营养和浸染位 点的能力具有重要作用 这一推测的直接证 据是 本研究发现超微粉腐殖质促进了棘孢木霉 T 在土壤中的生长和定殖 此外 微生物已被 证实在风化煤等矿物腐殖质的降解和活化中具 有重要作用 N m siv y m等 研究表明 生 防绿色木霉通过溶解褐煤释放腐殖酸 获得的腐 殖酸添加到高粱栽培土壤中大幅促进了高粱生 长 且效果优于人工合成的腐殖酸 因此 棘孢 木霉的生长代谢还可能促进超微粉腐殖质中活 性物质 如腐殖酸的快速活化释放 从而进一步 增强超微粉腐殖质对土壤的改良效果和对植物 的促生长作用 综上 本研究发现 棘孢木霉T 超微粉腐 6 林辉 等 棘孢木霉和超微粉腐殖质改善连作土壤微生态 殖质及其复配物 腐殖质 T 均能抑制连作土壤 中尖孢镰刀菌的生长 其中 腐殖质 T 的抑菌作 用最佳 在室内土壤培养条件下 腐殖质 T 处理 的尖孢镰刀菌抑菌率达6 在黄瓜 盆栽条件下 前 d的抑菌率均保持在 以 上 黄瓜盆栽试验还表明 施用腐殖质 T 复配 物有效降低了黄瓜病死株数量 表现出促生长效 应 研究成果可为设施连作土壤调理和土传病 害防治提供材料与技术参考 其中 棘孢木霉T 和超微粉腐殖质复配物具有较高的应用开发 价值 参考文献 References 申卫收 林先贵 张华勇 等 不同栽培条件下蔬菜塑料 大棚土壤尖孢镰刀菌数量的变化 J 土壤学报 S N W S N X G Z NG Y e Numbe s o Fu sarium oxysporum in di e en g een ouse vege b e soi s J Acta Pedologica Sinica in C i nese i ng is bs c 周开胜 厌氧还原土壤灭菌对设施蔬菜地连作障碍土壤 性质的影响 J 土壤通报 6 6 Z OU S n uence on e o e ies o con inuous c o ing soi om ci i y vege b e ie d e ed by n e obic educ ion soi disin es ion J Chinese Journal of Soil Science 6 6 in C inese i ng is bs c 王艳芳 相立 徐少卓 等 生物炭与甲壳素配施对连作 平邑甜茶幼苗及土壤环境的影响 J 中国农业科学 W NG Y F X NG XU S Z e ec s o bioc nd c i in combined ic ion on Malus hupehensis Re d seed ings nd soi envi onmen unde e n ing condi ions J Scientia Agricultura Sinica in C inese i ng is bs c 武春成 王彩云 曹霞 等 不同用量生物炭对连作土壤 改良及黄瓜生长的影响 J 北方园艺 WU C C W NG C Y C O X e ec s o di e en bio c ic ion e on im ovemen o con inuous c o ing soi nd cucumbe g o J Northern Horticulture in C inese i ng is bs c 王玫 徐少卓 刘宇松 等 生物炭配施有机肥可改善土 壤环境并减轻苹果连作障碍 J 植物营养与肥料学报 W NG XU S Z U Y S e m ovemen o soi o e ies nd con o o e e n ing dise se by combined ic ion o bioc nd o g nic e i ize J Journal of Plant Nutrition and Fertilizers in C i nese i ng is bs c 6 柳春燕 郭敏 林学政 等 拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌 对黄瓜枯萎病的协同防治作用 J 中国生物防治 6 U C Y GUO N X Z e T e syne gis ic e ic cy o Trichoderma pseudokoningii nd Bacillus subtilis g ins cu cumbe i J Chinese Journal of Biological Control 6 in C inese i ng is bs c 贺字典 武春成 沈江洁 等 棘孢木霉菌肥对黄瓜枯萎 病的防治效果及对连作黄瓜根际土壤微生物种群的影响 J 植物保护学报 Z D WU C C S N J J e ec s o Trichoderma 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6 6 in C inese i ng is bs c 王婕 付晓恒 赵静 等 超细粉碎对煤表