盈江县高山大白菜根肿菌生理小种鉴定及抗源筛选.pdf

盈江县高山大白菜根肿菌生理小种鉴定及 抗源筛选 尹俊龙 1钱正益 2郑宇峰 3赵从新 3岳艳玲 1* （ 1 云南农业大学园林园艺学院，云南昆明650201； 2 景东彝族自治县农业试验站，云南普洱 676299； 3 德 宏州农业技术推广中心，云南芒市 679300） 摘 要采用Williams鉴别系统对云南省盈江县高山大白菜产区采集的根肿菌进行鉴定，4个鉴别寄主均表现为感病，病情 指数分别为21、33、28、30，说明该根肿菌为4号生理小种。采用菌土法接种盈江根肿菌，对18个抗根肿病大白菜品种进 行抗性鉴定，其中6个品种发病率和病情指数均为0，对盈江根肿菌表现免疫；2个品种病情指数＜10，表现抗病，可以作 为该病区大白菜新品种选育的抗性遗传资源。 关键词大白菜；盈江根肿菌；生理小种；抗源筛选 同地区栽培后所表现出的抗性也存在显著差异（谭 翀和岳艳玲，2013） 。盈江是云南省德宏州高山大 白菜的重要产区，但土壤被根肿菌污染后生产受到 严重威胁，产量损失严重，几近绝收，因此筛选适 宜盈江地区栽培的抗病品种尤为重要。为了保障该 地区大白菜生产的需求，对该地区根肿菌进行生理 小种鉴定和抗源筛选，以期为盈江地区大白菜生产 和新品种选育提供理论参考。 1 材料与方法 1.1 试验材料 根肿菌采自云南省德宏州盈江县油松岭大白菜 产区。 Williams鉴别寄主4份，即2个结球甘蓝 Jersey Queen、Badger Shipper和2个 芜 菁 甘 蓝 Laurentian、Wilhelmsburger，源自沈阳农业大学。 从国内外引进抗根肿病大白菜品种18份，品 种名称及来源见表2；对照为感病品种鲁春白1号。 1.2 试验方法 试验于2016年8～10月在云南农业大学园林 园艺学院蔬菜基地进行。利用Williams鉴别系统， 采用菌土法（司军 等，2003）进行根肿菌生理小 种鉴定和大白菜品种抗性鉴定。菌土的孢子浓度为 110 7 个·g -1 （周永红 等，2007） ，每个品种接种 尹俊龙，男，硕士研究生，专业方向蔬菜作物遗传育种，E-mail *通讯作者（Corresponding author）岳艳玲，女，教授，硕士生导师， 专业方向蔬菜作物遗传育种，E-mailyanling- 收稿日期2018-03-13；接受日期2018-05-22 基金项目公益性行业（农业）科研专项（201003029） 大白菜根肿病是由芸薹根肿菌 （Plasmodiophora brassicae Woron.）侵染所引起的 一种世界性土传病害。该病菌最早发现于欧洲， 目前流行于主要十字花科作物产区（伍文宪 等， 2015） 。根肿菌的休眠孢子能够在土壤中存活8 a 以上（谭翀和岳艳玲，2013） ，一旦被侵染将很难 再进行十字花科作物的种植。根肿菌自20世纪末 传入我国，不断蔓延，目前已有多个省市土壤受 到污染，损失惨重（田雅琳，2015） 。近年来，随 着对根肿病防控方法的深入研究，发现施用生石 灰调节土壤pH能够在一定程度上减弱根肿病的为 害（班静洁，2014） ，施用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）生物制剂能够抑制土壤中90的根肿菌孢 子萌发（彭丽莎，2015），施用化学农药氟啶胺（福 帅得）防治效果可以达到80以上（王昌玉 等， 2004） 。但最为经济有效的绿色防控方法是使用抗 病品种。由于根肿菌在不同的地区以不同致病性和 不同类型的生理小种形式存在，造成抗病品种在不 55 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 55 研究论文 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES 2018（8）55 - 57 100株，40 d后调查发病情况，计算发病率和病情 指数。 根据十字花科作物根肿菌苗期病害分级标准 （侯明生和蔡丽，2014）对不同品种大白菜植株发 病情况进行鉴定和分级，分级标准0级，根部无 肿瘤；1级，侧根有小肿瘤；3级，主根肿大，其 直径小于2倍茎基部；5级，主根肿大，其直径是 茎基部的2～3倍；7级，主根肿大，其直径是茎 基部的3～4倍；9级，主根肿大，其直径是茎基 部的4倍以上或肿大的根部变黑。计算病情指数， 病情指数0记为免疫，病情指数＜10记为抗病， 病情指数≥10记为感病。 发病率发病株数/调查株数100 ∑（各级病株数相对级数值） 调查总株数9 病情指数 100 2 结果与分析 2.1 盈江根肿菌生理小种鉴定 Williams 鉴别系统的4个寄主接种盈江根肿菌 40 d后，病情指数分别为21、33、28、30，均大 于10，且各寄主的发病率均为100（表1） 。根据 Williams鉴别系统的分类标准，盈江根肿菌为4号 生理小种。 表 1 盈江根肿菌生理小种鉴定结果 鉴别寄主 总株数/株 感病株 数/株 发病 率/ 病情 指数 抗感 反应 Jersey Queen 100 100 100 21 Badger Shipper 100 100 100 33 Laurentian 100 100 100 28 Wilhelmsburger 100 100 100 30 注 “”代表感病。 2.2 大白菜品种抗性鉴定 从国内外引进的18个抗根肿病大白菜品种接 种盈江根肿菌后，发病率和病情指数明显不同（表 2） 。其中尚品、CR铁甲1号、抗根911、泰能 CR119、倍盛CR12、新抗根等6个品种的发病率 和病情指数均为0，对盈江根肿菌表现免疫，占供 试品种的33.3；德高CR117、中华白菜王的发病 率分别为17和11，病情指数分别为9.7和7.7， 对盈江根肿菌表现抗病，占供试品种的11.1；其 他10个品种和感病对照鲁春白1号的发病率均为 100，病情指数在38.8～65.7之间，表现感病。 表 2 18个抗根肿病大白菜品种对盈江根肿菌抗性鉴定结果 品种名称 来源 总株数/株 感病株 数/株 发病 率/ 病情 指数 抗性 尚品 辽宁 100 0 0 0 免疫 韩国优早四 山东 100 100 100 61.1 感病 CR铁甲1号 山东 100 0 0 0 免疫 德高CR117 山东 100 17 17 9.7 抗病 德高CR63 山东 100 100 100 42.5 感病 抗根911 北京 100 0 0 0 免疫 泰能CR119 山东 100 0 0 0 免疫 靓根CR1 胶州 100 100 100 42.9 感病 倍盛CR12 山东 100 0 0 0 免疫 中华白菜王 山东 100 11 11 7.7 抗病 韩春 韩国 100 100 100 51.8 感病 开拓16号 韩国 100 100 100 38.8 感病 荣耀 山东 100 100 100 50.4 感病 亚菲4号 韩国 100 100 100 45.2 感病 秋冠 韩国 100 100 100 53.7 感病 CR摩根 青岛 100 100 100 57.4 感病 新抗根 山东 100 0 0 0 免疫 韩国春秋王 山东 100 100 100 56.2 感病 鲁春白1号（CK） 青岛 100 100 100 65.7 感病 注病情指数0，免疫；病情指数＜10，抗病；病情指数≥ 10，感病。 3 结论与讨论 3.1 盈江根肿菌是更复杂的根肿菌 本试验中，Willimas鉴别系统的4个寄主接种 盈江根肿菌后全部发病，发病率均为100；病情 指数分别为21、33、28、30，均大于10，鉴定盈 江根肿菌为4号生理小种。但是，抗4号生理小种 的大白菜品种荣耀、亚菲4号和秋冠在接种湖北 枝江和山东青岛2个地区的4号生理小种后均表 现抗病（曾令益 等，2017） ，而在本试验中荣耀、 秋冠和亚菲4号接种盈江根肿菌后的发病率均为 100，病情指数均大于10，表现为感病，说明盈 江根肿菌4号生理小种与湖北枝江和山东青岛根肿 菌4号生理小种不同，盈江根肿菌致病性更强，可 能是Willimas鉴别系统鉴别不到的生理小种，也可 能是含有多个生理小种的混合菌，具体小种组成还 需要进一步进行单孢分离侵染鉴定。 3.2 盈江根肿菌抗病种质资源相对丰富 本试验引进的18个抗根肿病大白菜品种接种 盈江根肿菌后，尚品、CR铁甲1号、抗根911、 泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6个品种的发 病率和病情指数均为0，对盈江根肿菌表现免疫； 56 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 56 研究论文 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES 德高CR117、中华白菜王的发病率分别为17和 11，病情指数分别为9.7和7.7，对盈江根肿菌表 现抗病。说明这8个品种可能含有抗盈江根肿菌的 抗性基因，可利用这些遗传资源，针对该地区特殊 的生理小种，将抗病基因转育到适宜生态类型品系 中，培育符合当地栽培园艺性状需求的大白菜抗病 新品种。 3.3 筛选符合当地生产需求的大白菜新品种 盈江县是云南省德宏州高山大白菜重要产区， 已有20 a的栽培历史，大白菜夏秋季生产是当地农 民创收的重要项目。随着土壤被根肿菌污染，根肿 病发生为害越来越严重，给当地大白菜生产造成了 巨大的损失。近几年来，德高CR117在该地区进 行推广应用，初步取得了较好的防控效果。但是， 盈江地区主要是进行夏秋季栽培，温度高、雨水大， 德高CR117软腐病的发生率为10～13，而且 该品种球形偏大，不太符合当地市场需求。本试验 筛选出6个对盈江根肿菌表现免疫的大白菜品种， 可通过进一步试种，对其在当地的表现进行综合评 价，以筛选出适宜当地气候条件和市场需求的抗病 品种，丰富盈江地区大白菜的品种类型。 参考文献 班静洁．2014 ．土壤含水量、pH、Ca 2 浓度对芸薹属根肿菌侵染 及发病影响研究〔硕士论文〕．武汉华中农业大学． 侯明生，蔡丽．2014．十字花科蔬菜根肿病．武汉湖北科学技术 出版社27-29． 彭丽莎．2015．十字花科作物根肿病生防菌研究进展．植物保护， 41（4） 16-22． 司军，李成琼，肖崇刚，任雪松，王小佳．2003．甘蓝根肿菌接种 方法．西南农业大学学报，25（3）29-31． 谭翀，岳艳玲．2013．不同大白菜品种对根肿病的抗性鉴定．中国 蔬菜，（8）91-94． 田雅琳．2015．十字花科根肿病研究现状及未来预测．天津农业科 学，21（4）123-124． 王昌玉，朱建良，保世森，陈露萍，阮石佑，周金玉．2004．百 菌清防治大白菜根肿病应用技术研究．农药科学与管理，26 （7）16-18． 伍文宪，刘勇，张蕾，黄小琴．2015．芸薹属根肿菌致病机理的研 究进展．中国农学通报，31（18）260-265． 曾令益，任丽，刘凡，陈旺，陈坤荣，徐理，方小平．2017．28 个大白菜品种对根肿菌不同菌株的抗性反应及抗病基因位点 检测．中国油料作物学报，39（4）532-639． 周永红，孙保亚，沈向群．2007．大白菜根肿病抗病接种浓度的研 究．辽宁农业科学，（3）34-35． Physiological Race Identification of Plasmodiophora brassicae and Screening of Resistant Source in Chinese Cabbage at Yingjiang County YIN Jun-long 1 ，QIAN Zheng-yi 2 ，ZHENG Yu-feng 3 ，ZHAO Cong-xin 3 ，YUE Yan-ling 1* （ 1 College of Landscape and Horticulture，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，Yunnan，China； 2 Agricultural Experiment Station of Jingdong Yi Autonomous County，Pu’er 676299，Yunnan，China； 3 Dehong State Agricultural Technology Promotion Center，Mangshi 679300，Yunnan，China） AbstractThe Williams identification system was adopted to identify the Plasmodiophora brassicae collected from the Chinese cabbage producing area at the mountainous areas in Yingjiang County，Yunnan Province．The 4 differential hosts all showed that they were susceptible，and the disease index was 21、 33、28、30，respectively，indicating that fungus was physiological race No.4．The resistance of 18 Chinese cabbage cultivars from home and abroad was identified by planting on fungal soil ．The results showed that the incidence and disease inds of 6 varieties were 0，and they were immune to Yingjiang Plasmodiophora brassicae．The disease index of 2 varieties were ＜10，indicating they were resistant to Yingjiang Plasmodiophora brassicae．They could be used as resistant genetic resources for selecting new Chinese cabbage varieties for this disease． Key wordsChinese cabbage；Yingjiang Plasmodiophora brassicae；Physiological race；Screening of resistant source 57 新优品种 栽培管理 本期视点 产业市场 病虫防控 57 研究论文 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES