侵染番茄的番茄褐色皱纹果病毒新疆分离物的分子鉴定及基因组序列分析.pdf

2026 52 1 121 127PlantProtection 收稿日期 2 0 2 4 1 2 1 9 修订日期 2 0 2 5 0 2 1 4 基金项目 自治区公益性科研院所基本科研业务费 K Y 2 0 2 4 0 2 1 新疆维吾尔自治区重大科技专项 2 0 2 2 A 0 2 0 0 5 3 通信作者E m a i l 王俊5 6 6 7 5 1 4 8 q q c o m 许建军x j j 7 2 1 6 3 c o m 为并列第一作者 侵染番茄的番茄褐色皱纹果病毒新疆分离物的 分子鉴定及基因组序列分析 李洁彩1 2 何 伟1 黄 欣1 罗文芳1 周军辉1 张 祥1 王 俊3 许建军1 1 新疆维吾尔自治区农业科学院植物保护研究所 农业农村部西北荒漠作物有害生物综合治理重点实验室 新疆农业生物安全重点实验室 乌鲁木齐 8 3 0 0 9 1 2 新疆农业大学 乌鲁木齐 8 3 0 0 5 2 3 新疆维吾尔自治区植物保护站 乌鲁木齐 8 4 4 0 9 9 摘要 番茄褐色皱纹果病毒 t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s T o B R F V 可以侵染包括番茄在内的多种茄科作物 对番茄的产量和品质造成显著影响 本研究利用小R N A测序技术 从新疆喀什地区叶城县的番茄病样中检测到 T o B R F V 将该分离物命名为T o B R F V X J 该病毒与南方番茄病毒 s o u t h e r n t o m a t o v i r u s S T V 番茄花叶病毒 t o m a t o m o s a i c v i r u s T o M V 复合侵染番茄 通过设计的特异性引物成功扩增了T o B R F V X J的基因组序列 基 因组全长6 2 6 4 n t 包括4个开放阅读框 O R F s 分别编码4个蛋白 系统发育分析表明 T o B R F V X J与山东 登 录号 M T 0 1 8 3 2 0 1 和辽宁 登录号 O R 4 3 7 3 5 4 1 分离物具有较近的亲缘关系 本研究首次监测到了T o B R F V 在新疆设施番茄上发生危害 对控制T o B R F V在新疆的扩散具有重要意义 关键词 番茄褐色皱纹果病毒 新疆喀什 番茄 分子鉴定 全基因组分析 中图分类号 S 4 3 2 1 文献标识码 A DOI 1 0 1 6 6 8 8 j z w b h 2 0 2 4 6 6 7 Molecularidentificationandwhole genomesequenceanalysisoftomato brownrugosefruitvirusinfectingtomatoinXinjiang LIJiecai1 2 HEWei1 HUANGXin1 LUOWenfang1 ZHOUJunhui1 ZHANGXiang1 WANGJun3 XUJianjun1 1 InstituteofPlantProtection XinjiangUygurAutonomousRegionAcademyofAgriculturalSciences Key LaboratoryofIntegratedPestManagementonCropsinNorthwesternOasis MinistryofAgricultureandRuralAffairs XinjiangKeyLaboratoryofAgriculturalBiosafety Urumqi 8 3 0 0 9 1 China 2 XinjiangAgriculturalUniversity Urumqi 8 3 0 0 5 2 China 3 XinjiangUygurAutonomousRegionPlantProtectionStation Urumqi 8 4 4 0 9 9 China Abstract Tomatobrownrugosefruitvirus ToBRFV isnewlyemergingvirusthatinfectsvariousSolanaceous crops particularlytomato Solanumlycopersicum causingsubstantiallossesinbothyieldandquality Inthis study ToBRFVwasdetectedindiseasedtomatosamplescollectedfromYechengcounty Kashgarprefecture Xinjiang byusingsmallRNAsequencingtechnology TheisolatewasdesignatedToBRFV XJ andwasfoundto co infecttomatoplantstogetherwithsoutherntomatovirus STV andtomatomosaicvirus ToMV Thecomplete genomesequenceofToBRFV XJ comprising6 2 6 4nucleotidesandcontainingfouropenreadingframes ORFs that encodefourproteins wassuccessfullyamplifiedusingspecificallydesignedprimers Phylogeneticanalysisindicatedthat ToBRFV XJiscloselyrelatedtotheShandong GenBankaccessionno MT0 1 8 3 2 0 1 andLiaoning GenBankaccession no OR4 3 7 3 5 4 1 isolates ThisstudyrepresentsthefirstreportofToBRFVinfectinggreenhousetomatoesinXinjiang andprovidesimportantinsightsforthemonitoringandpreventionofToBRFVspreadinthisregion Keywords tomatobrownrugosefruitvirus Kashgar Xinjiang tomato molecularidentification whole genomeanalysis 2 0 2 6 番茄Solanumlycopersicum是世界上重要的蔬菜 之一 2 0 2 2年 我国番茄种植面积1 1 4 1 7万h m 2 产量6 8 3 4 1 8万t 占世界番茄产量的3 6 7 2 1 烟草花叶病毒属Tobamovirus病毒对番茄产业安全 构成了严重威胁 2 3 该属病毒包括烟草花叶病毒 t o b a c c o m o s a i c v i r u s T M V 番茄花叶病毒 t o m a t o m o s a i c v i r u s T o M V 番茄斑驳花叶病毒 t o m a t o m o t t l e m o s a i c v i r u s T o M M V 辣椒轻斑 驳病毒 p e p p e r m i l d m o t t l e v i r u s P M M o V 烟草 轻绿花叶病毒 t o b a c c o m i l d g r e e n m o s a i c v i r u s T M G M V 番茄褐色皱纹果病毒 t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s T o B R F V 等 4 T o B R F V是一种新发 s s R N A病毒 其基因 组全长约6 3 k b T o B R F V可以侵染茄科S o l a n a c e a e 葫芦科C u c u r b i t a c e a e和菊科A s t e r a c e a e 等作物 其中番茄和辣椒Capsicumannuum受影响 较大 5 7 该病毒侵染番茄后 叶片表现花叶 变窄 斑驳等症状 番茄的果实表面有褐色病斑 黄斑 皱 纹 畸形等症状 严重影响番茄的产量和品质 8 9 T o B R F V于2 0 1 6年在约旦的番茄果实上首次 报道 1 0 随后传播到墨西哥 美国 西班牙和瑞士 等国 1 1 1 4 我国于2 0 1 9年首次在山东的番茄上发 现并报道了T o B R F V 1 5 随后 陕西 云南 江苏 河北 河南 广东 安徽 辽宁等地相继报道了该病 毒 1 6 1 9 T o B R F V在我国的迅速传播对我国番茄 产业的健康发展构成了重大威胁 2 0 2 1年4月9 日 农业农村部 海关总署发布第4 1 3号公告将T o B R F V增补列入 中华人民共和国进境植物检疫性 有害生物名录 2 0 2 0 2 4年9月 被增补列入 全国 农业植物检疫性有害生物行政区名录 2 0 2 4年 版 2 1 2 0 2 4年 在新疆喀什地区叶城县某设施大棚的 番茄上发现疑似T o B R F V的感染症状 本研究对 疑似病毒病的番茄样品进行病毒检测和鉴定 并对 T o B R F V全基因组序列进行扩增和比对分析 明 确T o B R F V不同分离物间的变异情况和亲缘关系 以期为新疆及周边番茄产区T o B R F V的诊断和防 控提供科学依据 1 材料与方法 1 1 试验材料 供试样品 2 0 2 4年 从新疆喀什地区叶城县设 施番茄大棚内采集了4份叶片和1份果实样品 样 品经液氮速冻后放入 8 0 冰箱中保存备用 主要试剂 大肠杆菌EscherichiacoliD H 5 克 隆载体p M D 1 8 T 琼脂糖凝胶D N A回收试剂盒 2 TaqM a s t e r M i x购自天根生物技术 北京 有限 公司 R N A提取试剂盒购自福技 北京 生物技术有 限公司 反转录试剂盒购自北京鼎国昌盛生物技术 有限责任公司 高保真酶K O D P l u s N e o购自东洋 纺生物技术 上海 股份有限公司 1 2 小RNA测序及分析 2 0 2 4年9月 对采集自新疆喀什地区叶城县的4 份番茄病样混合成1份样品进行小R N A测序 使用 R N A提取试剂盒提取样品总R N A 使用N a n o d r o p 2 0 0 0和A g i l e n t 2 1 0 0 b i o a n a l y z e r检测R N A样品的浓 度和完整性 R N A质量检测合格后使用s m a l l R N A S a m p l e P r e K i t 北京赛百盛基因技术有限公 司 构建文库 使用N o v a S e q平台进行高通量测序 使用V e l v e t软件对比对上的s R N A c l e a n r e a d s序 列进行病毒c o n t i g s从头组装 经组装的c o n t i g s与 G e n B a n k数据库中的病毒基因组序列进行比对 获 得匹配的病毒基因组序列信息 小R N A测序委托 南京集思慧远生物科技有限公司完成 1 3 小RNA测序结果的RT PCR验证 基于小R N A测序获得的病毒序列 使用P r i m e r P r e m i e r 5设计病毒检测引物 表1 引物由生工生 物工程 上海 股份有限公司合成 分别提取5份番 茄病样的R N A 利用反转录试剂盒 北京鼎国昌盛生 物技术有限责任公司 反转录获得c D N A 以c D N A 为模板 使用病毒引物对小R N A测序结果进行P C R 验证 P C R反应体系 2 5 L c D N A模板1 L 2 TaqM a s t e r M i x 1 2 5 L 1 0 m o l L上 下游引物 各1 L d d H 2 O 9 5 L P C R反应程序为 9 4 4 m i n 9 4 3 0 s 退火温度 表1 3 0 s 7 2 9 0 s 3 5 个循环 7 2 5 m i n 4 保存 以健康的番茄样品 为阴性对照和以d d H 2 O作为空白对照 用1 琼脂 糖凝胶电泳进行检测 并用凝胶成像系统记录检测 结果 根据扩增产物大小和产物直接测序结果确定 病样中的病毒种类 1 4 ToBRFV基因组全长扩增 根据小R N A测序结果设计T o B R F V基因组序 列的分段扩增引物 表2 以带毒番茄的c D N A为 模板 对T o B R F V X J的基因组全长进行分段扩增 221 5 2卷第1期李洁彩等 侵染番茄的番茄褐色皱纹果病毒新疆分离物的分子鉴定及基因组序列分析 P C R扩增体系 K O D P l u s N e o 1 L 1 0 P C R B u f f e r f o r K O D P l u s N e o 5 L 2 5 m m o l L M g S O 4 3 L 2 m m o l L d N T P s 5 L 1 0 m o l L上 下游 引物各1 5 L c D N A 2 0 L d d H 2 O 3 1 L P C R 扩增程序 9 4 2 m i n 9 4 1 5 s 退火温度 表2 3 0 s 6 8 2 m i n 3 5个循环 6 8 7 m i n 4 保存 P C R扩增产物使用1 琼脂糖凝胶电泳检测 使用 琼脂糖凝胶D N A回收试剂盒对目的片段进行切胶 回收 将纯化后的片段克隆至p M D 1 8 T载体上 并转入大肠杆菌D H 5 感受态细胞中 在含 2 0 0 g m L A m p 1 0 0 L m L X g a l的L B固体培 养基上3 7 倒置培养过夜 每个平板挑取3 4个 单菌落进行P C R鉴定 阳性克隆送往生工生物工程 上海 股份有限公司进行测序 表1 用于检测番茄病毒的引物 Table1 Primersusedfortomatovirusdetection 病毒名称 V i r u s n a m e 引物 P r i m e r 引物序列 5 3 P r i m e r s e q u e n c e 退火温度 A n n e a l i n g t e m p e r a t u r e 片段大小 b p F r a g m e n t s i z e 番茄褐色皱纹果病毒 T o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s T o B R F V 4 2 2 F G C A T G G G C C G A C C C T A T A G A 6 0 4 2 2 T o B R F V 4 2 2 R G G T G C A G A G G A C C A T T G T A A W C 南方番茄病毒 S o u t h e r n t o m a t o v i r u s S T V 5 0 9 F C G T T T C T T T G G T C T T T C G G 5 9 5 0 0 S T V 5 0 9 R A T A G C C C C T C A A C A G T T T A G C 番茄花叶病毒 T o m a t o m o s a i c v i r u s T o M V 7 6 4 F A A A G A G C G G A C G A A G C C A C 5 7 7 6 4 T o M V 7 6 4 R C C C C C A G C A A C G C A G T A A 表2 用于ToBRFV XJ全基因组序列扩增的引物 Table2 PrimersusedforamplificationofthegenomesequenceofToBRFV XJ 引物 P r i m e r 引物序列 5 3 P r i m e r s e q u e n c e 退火温度 A n n e a l i n g t e m p e r a t u r e 引物位置 n t P r i m e r l o c a t i o n 片段大小 b p F r a g m e n t s i z e T o B R F V 1 F T A C C A A C A A C A A C A A A C A A C A 5 4 4 6 6 7 1 6 6 6 T o B R F V 1 R A A C C T C A G T C T C C T C C A T T C T 1 6 9 1 1 7 1 2 T o B R F V 2 F G G T G G A C T A C G A T C C T T A G A A C T G G 6 0 3 2 6 3 5 1 5 9 3 9 T o B R F V 2 R C C C T C G C T T T A T T A C G T G C C T A C 6 2 8 1 6 3 0 4 1 5 ToBRFV基因组全长序列分析 使用S n a p G e n e对测序得到的基因序列进行拼 接 获得T o B R F V基因组全长序列 从G e n B a n k 数据库中下载已报道的3 4个T o B R F V分离物及 同属于烟草花叶病毒属的烟草花叶病毒 N C 0 0 1 3 6 7 1 番茄花叶病毒分离物 N C 0 0 2 6 9 2 1 的 全基因组序列 用C l u s t a l X 2进行序列比对分析 使 用M A G E 1 1软件 采用最大似然法构建系统发育 树 b o o t s t r a p 1 0 0 0 2 结果与分析 2 1 疑似感染番茄褐色皱纹果病毒的设施番茄发 病症状 调查结果表明 新疆喀什地区叶城县设施番茄 种植基地3 5个温室发生疑似番茄褐色皱纹果病毒 病 平均发病率达6 8 发病症状为幼嫩叶片褪 绿 变窄并伴有泡状斑 图1 a 幼果畸形 出现棕色 皱纹斑块甚至僵果 图1 b 果实出现黄斑 着色不 均或有皱缩 图1 c 2 2 小RNA测序结果分析 将采集自新疆喀什地区叶城县的4份番茄样品混 合成1份样品进行小R N A测序 共获得1 9 1 6 4 2 6 9 条c l e a n r e a d s 将其与参考基因组比对后 拼接得 到1 6 2个病毒c o n t i g s 将这些c o n t i g s在N C B I核 酸数据库中进行B l a s t n搜索 有1 3条c o n t i g s被注 释为番茄褐色皱纹果病毒 T o B R F V 2 2条c o n t i g s被注释为番茄花叶病毒 T o M V 9条c o n t i g s 被注释为南方番茄病毒 S T V 测序结果初步表 明 新疆喀什地区叶城县的混合样品中共鉴定到3 种病毒 2 3 小RNA测序的RT PCR验证结果 分别采用T o B R F V T o M V和S T V特异引物 表1 对4份叶片和1份果实的番茄样品进行P C R 检测 结果表明 样品中含有T o B R F V T o M V和 321 2 0 2 6 S T V 图2 5份番茄样品均为3种病毒复合侵染 将测序得到的序列与N C B I数据库进行比对后得出 扩增产物的序列分别与G e n B a n k上的T o B R F V分离 物 O R 5 0 0 6 9 9 1 T o M V分离物 O N 9 8 7 4 7 9 1 S T V分离物 M T 2 6 9 8 0 8 1 的序列高度相似 相似 性均达到9 9 0 以上 因此 引起新疆喀什地区 叶城县番茄病毒病的种类包括T o B R F V T o M V和 S T V等3种病毒 且存在复合侵染现象 图1 设施番茄疑似感染番茄褐色皱纹果病毒 ToBRFV 的叶片与果实症状 Fig 1 SymptomsonleavesandfruitsofgreenhousetomatoplantssuspectedtobeinfectedwithToBRFV 图2 小RNA深度测序结果的RT PCR验证 Fig 2 ValidationofsmallRNAdeep sequencingresultsbyRT PCR 2 4 ToBRFV新疆分离物 ToBRFV XJ 的全基因 组结构分析 根据小R N A测序 拼接得到T o B R F V基因组 全长为6 3 9 1 b p R T P C R分段扩增T o B R F V X J 基因组序列得到了2个片段长度分别为1 6 6 6 b p和 5 9 3 9 b p的片段 利用S n a p G e n e软件对获得的2 段T o B R F V序列进行拼接 获得了长度为 6 2 6 4 b p的近全长基因组序列 P Q 7 7 4 3 3 5 1 使 用O R F f i n d e r h t t p s w w w n c b i n l m n i h g o v o r f f i n d e r 进行开放式阅读框 O R F 预测 结果显 示 T o B R F V基因组包括4个O R F 分别为O R F 1 2 9 3 3 7 9 n t 编码1 2 6 k D的复制酶 O R F 2 2 9 4 8 7 6 n t 由O R F 1通读得到病毒1 8 3 k D的复制酶 O R F 3 4 8 6 3 5 6 6 3 n t 编码3 0 k D的运动蛋白 M P 而O R F 4 5 6 6 6 6 1 4 5 n t 则编码1 7 5 k D 的外壳蛋白 C P 其在序列的5 U T R和3 U T R区 域分别存在4 5 b p和8 7 b p的缺失 2 5 ToBRFV新疆分离物的基因组全长序列分析 将T o B R F V X J与我国不同地区以及不同国家的 分离物进行比较分析 结果表明 T o B R F V X J与G e n B a n k登录的3 4个分离物的基因组的核苷酸序列相似 性为9 9 2 3 9 9 7 1 其中 与我国山东分离物 登 录号 M T 0 1 8 3 2 0 1 的核苷酸序列相似性最高 达 9 9 7 1 与辽宁 O R 4 3 7 3 5 4 1 河北 O R 7 9 5 5 0 3 1 银川 O R 5 0 0 6 9 8 1 北京 O R 7 9 5 5 0 2 1 和云南 O R 5 9 3 7 5 2 1 分离物的核苷酸序列相似性分别为 421 5 2卷第1期李洁彩等 侵染番茄的番茄褐色皱纹果病毒新疆分离物的分子鉴定及基因组序列分析 9 9 6 5 9 9 3 1 9 9 3 1 9 9 2 3 和9 9 2 3 而 与危害我国番茄 同属于烟草花叶病毒属的T o M V N C 0 0 2 6 9 2 的相似性为8 2 0 9 与T M V N C 0 0 1 3 6 7 的相似性为8 2 0 3 本研究使用T o B R F V X J新疆喀什分离物与其他 已登录G e n B a n k的3 4个T o B R F V分离物的全基因组 序列构建系统发育树 以T o M V N C 0 0 2 6 9 2 1 和T M V N C 0 0 1 3 6 7 1 为外群 结果表明 T o B R F V X J与我国 山东分离物 M T 0 1 8 3 2 0 1 辽宁分离物 O R 4 3 7 3 5 4 1 聚为一支 另一个中国河北分离物 O R 7 9 2 4 6 0 1 与中 国广东分离物 P Q 4 9 2 1 4 6 1 处在一个分支 中国云南 分离物 O R 5 9 3 7 5 2 和银川分离物 O R 5 0 0 6 9 8 1 则与 荷兰分离物 O M 5 1 5 2 3 5 1 聚在一个小分支 而与 同属病毒T o M V和T M V亲缘关系较远 图3 图3 基于新疆番茄褐色皱缩果病毒基因组序列的系统进化树分析 Fig 3 PhylogeneticanalysisbasedonthecompletegenomesequenceofXinjiangisolateoftomatobrownrugosefruitvirus 3 结论与讨论 本研究通过小R N A测序和R T P C R检测 明 确新疆喀什地区叶城县的番茄样品被T o B R F V T o M V和S T V复合侵染 首次证实了T o B R F V在 新疆喀什地区设施番茄上发生危害 研究进一步获 得T o B R F V新疆喀什分离物的近全长基因组序列 6 2 6 4 n t 包含4个O R F 系统发育分析表明新 疆分离物与山东分离物 M T 0 1 8 3 2 0 1 和辽宁 O R 4 3 7 3 5 4 1 分离物亲缘关系最近 新疆番茄褐 色皱纹果病毒的分离物有可能是通过带毒种子的跨 区域流通进入新疆种植区 因此 在实际生产中应 对番茄种子进行病毒检测并做好种子消毒处理 在 番茄苗期喷施诱抗剂 提高番茄自身抗性等 自2 0 1 6年在约旦番茄上首次报道T o B R F V以 来 T o B R F V已在包括我国在内的2 1个国家暴发为 害 1 0 我国已在多个省份的番茄上报道了该病 毒 1 5 2 2 但新疆尚未见T o B R F V发生危害的报 521 2 0 2 6 道 本研究结合田间观察和分子生物学的方法 明 确了T o B R F V已扩散传播到新疆 并危害番茄 然 而 该病毒在新疆其他区域发生危害的情况和该病 毒的传播途径仍需要进一步研究 植物病毒的复合侵染现象较普遍 S a l e m等 5 在辣椒上发现T o B R F V与烟草轻型绿花叶病毒 t o b a c c o m i l d g r e e n m o s a i c v i r u s T M G M V 发生复 合侵染 多种病毒病复合侵染能够加重症状显现 2 0 2 0年 德国首次报道了T o B R F V与凤果花叶病 毒 p e p i n o m o s a i c v i r u s P e p M V 的复合侵染 二者 共同侵染番茄会导致P e p M V引发的病毒症状更加 明显 2 3 本研究通过对新疆维吾尔自治区喀什地 区的疑似T o B R F V病毒病的番茄样本进行分子检 测 在喀什地区的设施番茄上发现T o B R F V与 T o M V S T V发生复合侵染 然而 新疆设施番茄 上是否存在T o B R F V与其他病毒复合侵染还需要 扩大采集范围和样本量进行检测 T o B R F V的传播分为远距离传播和近距离传播 近距离传播主要包括虫媒传播和机械传播 2 4 远距 离传播主要依赖种苗和果实调运 此外 也有报道 表明T o B R F V可能通过废水传播 2 5 2 6 本研究 T o B R F V新疆喀什分离物与山东 M T 0 1 8 3 2 0 1 辽宁 O R 4 3 7 3 5 4 1 分离物聚集在一个分支上 亲缘 关系较近 说明新疆喀什地区的T o B R F V病毒株系 的来源可能是由我国内地省份传入新疆 根据本研 究中的T o B R F V系统进化树分析结果 T o B R F V河北 3个分离物并没有聚在同一分支 而是其中一个河北 分离物 O R 7 9 2 4 6 0 1 是与广东分离物 P Q 4 9 2 1 4 6 1 具有较近的亲缘关系 聚在一个分支 此外 云南分 离物 O R 5 9 3 7 5 2 和银川分离物 O R 5 0 0 6 9 8 1 则与 荷兰分离物 O M 5 1 5 2 3 5 1 聚在一个小分支 暗示 本研究中的T o B R F V X J与我国先前报道的T o B R F V云南 银川 河北及广东分离物可能并非同一 来源 而来自不同国家地区的番茄褐色皱纹果病毒 分离物可能已经在我国开始侵入和蔓延 因此 加 强植物检疫进行种子产品认证 培育抗病毒基因杂 交新品种以及加强田间监测预警 可以有效控制 T o B R F V在国内大面积传播和扩散 参考文献 1 蒋步国 胡珍珍 刘登峰 等 设施番茄生产机械化技术发展 研究 J 农业开发与装备 2 0 2 4 7 5 8 6 1 2 庞小静 赵慧琪 王德富 等 烟草花叶病毒山西番茄分离物 的全基因组序列测定及分析 J 中国蔬菜 2 0 1 7 6 5 0 5 5 3 华明艳 宋兰芳 崔少杰 等 番茄褐色皱纹果病毒分子检测 与基因组部分序列分析 J 华北农学报 2 0 2 4 3 9 3 1 7 9 1 8 6 4 刘勇 李凡 李月月 等 侵染我国主要蔬菜作物的病毒种类 分布与发生趋势 J 中国农业科学 2 0 1 9 5 2 2 2 3 9 2 6 1 5 S A L E M N M J E W E H A N A A R A N D A M A e t a l T o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s p a n d e m i c J A n n u a l R e v i e w o f P h y t o p a t h o l o g y 2 0 2 3 6 1 1 1 3 7 1 6 4 6 Z H A N G S h a o k a n g G R I F F I T H S J S M A R C H A N D G e t a l T o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s A n e m e r g i n g a n d r a p i d l y s p r e a d i n g p l a n t R N A v i r u s t h a t t h r e a t e n s t o m a t o p r o d u c t i o n w o r l d w i d e J M o l e c u l a r P l a n t P a t h o l o g y 2 0 2 2 2 3 9 1 2 6 2 1 2 7 7 7 C H A N D A B G I L L I A E D A J A I S W A L N e t a l C o m p a r a t i v e a n a l y s i s o f h o s t r a n g e a b i l i t y t o i n f e c t t o m a t o c u l t i v a r s w i t h Tm 2 2 g e n e a n d r e a l t i m e r e v e r s e t r a n s c r i p t i o n P C R d e t e c t i o n o f t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s J P l a n t D i s e a s e 2 0 2 1 1 0 5 1 1 3 6 4 3 3 6 5 2 8 P A N N O S C A R U S O A G D A V I N O S F i r s t r e p o r t o f t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s o n t o m a t o c r o p s i n I t a l y J P l a n t D i s e a s e 2 0 1 9 1 0 3 9 6 1 4 4 3 9 闫志勇 房乐 田延平 等 警惕新发病毒番茄褐色皱果病毒 T o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s对我国番茄产业的危害 J 植物保护 2 0 2 0 4 6 5 3 1 6 3 2 0 1 0 S A L E M N M M A N S O U R A C I U F F O M e t a l A n e w t o b a m o v i r u s i n f e c t i n g t o m a t o c r o p s i n J o r d a n J A r c h i v e s o f V i r o l o g y 2 0 1 6 1 6 1 2 5 0 3 5 0 6 1 1 C A M B R O N C R I S A N T O S J M R O D R I G U E Z M E N D O Z A J V A L E N C I A L U N A J B e t a l F i r s t r e p o r t o f t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s T o B R F V i n M i c h o a c a n M e x i c o J R e v i s t a M e x i c a n a d e F i t o p a t o l o g a M e x i c a n J o u r n a l o f P h y t o p a t h o l o g y 2 0 1 9 3 7 1 1 8 5 1 9 2 1 2 L I N G K a i s o n g T I A N T a o G U R U N G S e t a l F i r s t r e p o r t o f t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s i n f e c t i n g g r e e n h o u s e t o m a t o i n t h e U n i t e d S t a t e s J P l a n t D i s e a s e 2 0 1 9 1 0 3 6 1 4 3 9 1 4 4 0 1 3 A L F A R O F E R N A N D E Z A C A S T I L L O P S A N A H U J A E e t a l F i r s t r e p o r t o f t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s i n t o m a t o i n S p a i n J P l a n t D i s e a s e 2 0 2 1 1 0 5 2 5 1 5 1 4 M A H I L L O N M D E C R O E S A P E D U Z Z I C e t a l F i r s t r e p o r t o f t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s i n t o m a t o i n S w i t z e r l a n d J O L N e w D i s e a s e R e p o r t s 2 0 2 2 4 5 1 2 0 6 5 D O I 1 0 1 0 0 2 n d r 2 1 2 0 6 5 1 5 Y A N Z h i y o n g M A H u a y u H A N S h i l i n g e t a l F i r s t r e p o r t o f t o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s i n f e c t i n g t o m a t o i n C h i n a J P l 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