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甘 肃农业科技 Gansu Agr. Sci. and Techn. No. 8 2018 2018年 第 8 期 甘肃农业科技 摘要 为筛选出防治梨黑斑病的高效低毒杀菌剂，采用菌丝生长速率法测定了 11种杀菌剂对梨树黑斑病 菌的毒力。 结果表明 40氟硅唑乳油对梨树黑斑病菌丝的毒力最强， EC 50值最低， 为 0.401 6 μ g/mL ； 其次是 10苯醚甲环唑乳油、 20丙环唑乳油、 25戊唑醇乳油， EC 50值分别为 1.478 0、 2.018 5、 4.101 0μ g/mL ； 1.5 噻霉酮乳油和 75百菌清可湿性粉对菌丝的抑制效果相对较差， EC 50较高， 分别为 886.52 、 759.468 μ g/mL 。 11 种杀菌剂对梨树黑斑病菌菌丝生长均有抑制作用。 关键词 梨树； 黑斑病菌； 杀菌剂； 毒力测定 中图分类号 S436.612.1 文献标志码 A 文章编号 1001-1463 （ 2018） 08-0070-03doi 10.3969/j.issn.1001-1463.2018.08.021 收稿日期 2018-04-02 基金项目 现代农业产业技术体系建设专项资金资助（ CARS-29-41 ）； 梨现代省力高效栽培技术模式创新及配套关键技术 研究与示范（ 1604NKCA063-2 ）； 农业部园艺作物生物学与种质创制学科群西北果树科学观测实验站。 作者简介 曹素芳（ 1979-），女，河南新乡人，助理研究员，主要从事植物病虫害及其综合防治研究。 Email 。 通信作者 李红旭（ 1974-）， 男， 陕西岐山人， 副研究员， 主要从事梨树育种及栽培技术研究。 Email lihongxu8588sina. com 。 11 种杀菌剂对梨树黑斑病菌的室内毒力测定 曹素芳， 王 玮， 赵明新， 曹 刚， 李红旭 （ 甘肃省农业科学院林果花卉研究所， 甘肃 兰州 730070） 梨是世界和我国的重要水果之一，在我国的 栽培面积仅次于苹果 [1 - 2 ] 。由互隔交链孢（ Alternar - ia alternata ）引起的梨黑斑病是梨主产区危害严重 的主要病害之一 [3 - 4 ] ， 导致梨叶与果实产生黑斑症 状及早期落叶，对梨树体健康构成严重威胁。该 病在甘肃省各地均有发生， 尤其在天水秦州区普 遍发生， 严重影响了梨的产量与品质， 已成为制 约当地梨产业发展的主要因素之一。 目前，生产上防治梨黑斑病主要依靠化学药 剂。 为了减少果农在农田用药时的盲目性， 有效 降低梨黑斑病菌的侵染概率，减少因该病害造成 的经济损失，我们对近年来生产上应用比较多的 11种杀菌剂在室内采用菌丝生长速率法对梨黑斑 病菌进行了毒力测定，以期筛选出对黑斑病菌高 效低毒的杀菌剂， 为生产上科学合理用药和病害 的有效控制提供参考依据。 1 材料与方法 1.1 供试菌株 病菌分离自天水市秦州区梨园发病严重且症 状典型的梨树黑斑病病斑，根据菌落特征和病菌 显微镜检确认为梨树黑斑病菌，试验前将菌种转 接到 PDA 平板进行培养待用。 1.2 供试药剂 10苯醚甲环唑乳油（中国农科院植保所廊坊 农药中试厂）， 20丙环唑乳油（中国农科院植保所 廊坊农药中试厂）， 40氟硅 唑乳油（ 美 国 杜邦公司 产品）， 25戊 唑 醇 乳油（ 浙江永 农化 工 有 限公司 ）， 1.5噻霉酮 乳油（ 陕西西大华 特科技有 限公司 ）， 50 多 菌 灵可湿 性 粉 剂（ 山东华阳 科技 股份 有 限公 司 ）， 70 代森锰锌可湿 性 粉 剂（ 利民 化 工股份 有 限 公司 ）， 25嘧 菌 酯悬浮 剂（ 英 国 先正达 有 限公司 ）， 12.5腈 菌唑乳油（ 华北 制药 集团爱诺 有 限公司 ）， [2] 王 珍、 陈彦锋、 范 荣 . 相同密度条件下不同种植 模式对大豆产量的影响[ J ] . 甘肃农业科技， 2017（ 9） 50-52. 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No. 8 2018 2018 年 第 8 期 药剂名称 毒力回归方程（ y bxa ） EC 50 / （ μ g/mL ） 相关系数 / r 1.5噻霉酮乳油 y 0.919 2 x 2.290 4 886.520 0 0.995 7** 70代森锰锌可湿性粉剂 y 1.528 9 x 2.179 9 69.920 0 0.997 0** 12.5 烯唑醇可湿性粉剂 y 0.862 0 x 4.295 1 6.572 6 0.986 2** 10苯醚甲环唑乳油 y 0.891 4 x 4.848 8 1.478 0 0.987 3** 25 戊唑醇乳油 y 1.064 7 x 4.347 5 4.101 0 0.971 6** 20 丙环唑乳油 y 0.904 0 x 4.724 3 2.018 5 0.988 2** 75百菌清可湿性粉剂 y 0.530 7 x 3.471 2 759.468 0 0.876 1 50多菌灵可湿性粉剂 y 1.430 5 x 2.143 1 98.930 8 0.990 7** 12.5 腈菌唑乳油 y 1.313 5 x 2.752 7 51.398 0 0.997 7** 40氟硅唑乳油 y 1.465 7 x 5.580 7 0.401 6 0.972 5** 25 嘧菌酯悬浮剂 y 0.611 2 x 4.474 4 7.244 9 0.974 3** 药剂名称 药剂浓度梯度 / （ μ g/mL ） 抑制率 / 浓度 1 浓度 2 浓度 3 浓度 4 浓度 5 浓度 1 浓度 2 浓度 3 浓度 4 浓度 5 1.5噻霉酮乳油 50 100 400 1 000 2 000 14.52 19.35 35.48 50.54 65.05 70代森锰锌可湿性粉剂 6.25 25.00 50.00 200.00 800.00 17.20 35.48 65.05 79.03 91.40 12.5 烯唑醇可湿性粉剂 1.25 5.00 10.00 40.00 160.00 25.81 46.24 59.68 68.82 92.47 10苯醚甲环唑乳油 0.312 5 1.250 0 5.000 0 10.000 0 40.000 0 28.49 47.85 67.74 72.04 96.24 25 戊唑醇乳油 0.312 5 1.250 0 5.000 0 10.000 0 40.000 0 15.05 32.80 48.39 59.68 96.24 20 丙环唑乳油 0.312 5 1.250 0 5.000 0 10.000 0 40.000 0 20.97 46.24 65.05 67.74 91.40 75百菌清可湿性粉剂 6.25 25.00 200.00 400.00 800.00 16.67 24.73 29.03 37.10 61.83 50多菌灵可湿性粉剂 6.25 12.50 25.00 50.00 200.00 5.91 13.98 19.35 29.03 69.35 12.5 腈菌唑乳油 5 10 20 400 160 11.29 18.28 28.49 42.47 75.81 40氟硅唑乳油 0.062 5 0.250 0 0.500 0 1.000 0 2.000 0 16.13 40.86 47.31 69.35 94.09 25 嘧菌酯悬浮剂 1.25 2.50 5.00 10.00 40.00 27.96 43.55 54.84 58.06 67.74 75百菌清可湿性粉剂（江阴苏利化学有限公司）， 12.5 烯唑醇可湿性粉剂（江苏剑牌农药化工有限 公司）。 1.3 供试培养基 培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基（ PDA ）， 采用常规方法制备，分装入 150 mL 三角瓶（每瓶 49 mL ）， 高压蒸汽灭菌后备用。 1.4 供试药剂母液的配制及保存 根据预试验的测定结果，在无菌环境下配制 各供试药剂的母液，置于消毒的三角瓶中在 4 ℃ 冰箱保存备用。 1.5 毒力测定方法 采用菌丝生长速率法 [5 ] 。将供试药剂母液分 别稀释 5个系列浓度（表 1）， 各取 1 mL 加入 49 mL 定量灭菌冷却至 50～55 ℃ 的 PDA 培养基中， 摇匀， 制成不同浓度带药平板， 以加入 1 mL 无 菌水的培养基平板为对照， 4次重复。 在无菌条 件下，用灭菌打孔器自菌落边缘切取直径 5 mm 菌饼，接入带药和对照培养基平板中央，菌丝面 朝下。 各处理培养皿置于 25 ℃ 恒温培养， 对照菌落 直径长到培养皿直径的 90时，用十字交叉法测 量各处理的菌落直径，计算各药剂处理对病菌菌 丝生长的抑制率。采用唐启义和冯明光 [6 ] 的实用 统计分析及其 DPS 数据处理系统 软 件， 用生 物 测 定 -数 量型 数据 机 率 值 分析 模型 计算各 种 药剂的 毒力回归方 程 （ y bx a） 、 EC 50 和相关系数 r。 2 结果与分析 2.1 不同药剂对病原菌的抑制效果 从 表 1看出 ， 11种 药剂在 设 计浓度下 均 对 梨 树黑斑 病病 原 菌有抑制 作 用。 随着 药剂浓度的 升 高， 其对病 原 菌的抑制率 增 加。 70代森锰锌可湿 性粉剂 800.00 μ g/mL 、 12.5 烯唑醇可湿性粉剂 160.00 μ g/mL 、 10苯醚甲环唑乳油 40.000 0 μ g/mL 、 25 戊唑醇乳油 40.000 0 μ g/mL 、 20 丙环唑乳油 40.000 0 μ g/mL 和 40氟硅唑乳油 2.000 0 μ g/mL 对病 原 菌的抑制率 均 在 91以 上 ， 表明 这 6种 药 剂在 该 浓度下对病 原 菌的抑制 效 果 较好 。 2.2 不同杀菌剂对病原菌的毒力测定 各药剂对 梨树黑斑 病菌的毒力 大小 不同（表 2）。 表 1 11 种杀菌剂对梨树黑斑病菌的抑制率 表 2 11 种杀菌剂对病原菌的毒力测定结果 71 甘 肃农业科技 Gansu Agr. Sci. and Techn. No. 8 2018 2018 年 第 8 期 甘肃农业科技 40氟硅唑乳油 EC 50 值最低， 为 0.401 6 μ g/mL ， 表明 40氟硅唑乳油对病原菌的毒力作用最强； 其次是 10苯醚甲环唑乳油、 20丙环唑乳油和 25戊唑醇乳油， EC 50 值分别为 1.4780 μ g/mL 、 2.018 5 μ g/mL 和 4.101 0 μ g/mL ； 而 1.5噻霉酮乳 油和 75 百菌清可湿性粉剂 EC 50 较高， 分别达 886.520 0 μ g/mL 和 759.468 0 μ g/mL ， 表明这两种 药剂对病原菌的毒力作用最弱。相关性（ r）分析表 明， 75 百菌清可湿性粉剂对病原菌的相关性系数 为 0.876 1， 没有达到显著水平， 其它 10种供试药 剂均达到极显著水平。 2.3 病原菌对不同药剂的敏感性 从毒力回归方程看出，不同药剂处理的斜率 （ b 值）不同（表 2）。 40氟硅唑乳油、 50多菌灵可 湿性粉剂和 70 代森锰锌可湿性粉剂的 b 值较大， 分别达到 1.465 7 、 1.430 4和 1.528 9， 表明病原菌 对 40氟硅唑乳油、 50多菌灵可湿性粉剂和 70 代森锰锌可湿性粉剂较敏感。 而 75 百菌清 可湿性粉剂和 25嘧菌酯悬浮剂的 b 值较小， 分别 为 0.530 7和 0.611 2 ， 表明病原菌对 75 百菌清可 湿性粉剂和 25嘧菌酯悬浮剂不敏感。 3 小结与讨论 选用 11种杀菌剂测定了对梨黑斑病菌菌丝生 长抑制作用， 结果表明， 10苯醚甲环唑乳油、 25戊唑醇乳油、 40氟硅唑、 12.5烯唑醇可湿 性粉剂、 20丙环唑乳油及 70 代森锰锌可湿性 粉剂对梨黑斑病菌菌丝生长抑制率均能达到 90 以上。 在供试的 11 种杀菌剂中， 对病原菌菌丝生 长毒力最强的是 40氟硅唑乳油； EC 50 为 0.401 6 μ g/mL ； 其次为 10苯醚甲环唑乳油、 20丙环唑 乳油和 25戊唑醇乳油； 1.5噻霉酮乳油的毒力 最弱， 为 886.520 0 μ g/mL ，从毒力回归方程的 b 值分析看出， 梨树黑斑病病菌对 70 代森锰锌可 湿性粉剂、 40氟硅唑乳油和 50多菌灵可湿性 粉剂敏感性较高。 综合比较分析， 40氟硅唑乳 油、 10苯醚甲环唑乳油、 20丙环唑乳油及 25 戊唑醇乳油这 4个处理可以作为防治梨黑斑病的 首选药剂和剂量。 化学杀菌剂是防治梨黑斑病的主要手段。本 研究通过对梨黑斑病菌的药剂筛选，初步明确了 对病菌有较高毒力的杀菌剂，结果与付余波 [7 ] 和 崔建潮 [8 ] 的报道基本一致。 本试验所测的药剂 EC 50 值相对较高， 这可能与菌株地理来源不同有 关。 朱红艳 [9 ] 研究表明， 苯醚甲环唑对梨黑斑病 菌菌株的 EC 50 分布在 0.719 0～1.488 6 μ g/mL 范围 内，菌株表现为敏感， 但存在敏感性降低的菌株。 本研究测得的苯醚甲环唑的 EC 50 值为 1.478 0 μ g/mL ，也可能与病原菌对药剂的敏感性降低有 关。黑斑病菌分生孢子产生在病害循环中是非常 关键的一环，本研究仅测定了供试药剂对病原菌 菌丝的毒力大小，对分生孢子的毒力大小还需进 一步研究。 在长期的农药使用过程中， 梨树病害对常规 性的杀菌剂 势必会 产生一定的 抗 药性， 还 易造成 农药 残留 和环 境污染 。 在生产 实际 中， 还 应根据 根据 梨黑斑病的 发 病规 律 ， 交替 使用药剂， 以有 效控 制梨黑斑病的 发 生。 还 应 通过 整形修剪改善 田间 通 风透光条件 及 温 湿 度变 化 等 其它农业 措施 ， 降低 发 病 条件 ， 减少 农药的使用量， 以 延缓 病原 菌 抗 药性的产生， 延 长这 些 杀菌剂的使用 寿命 。 本试验 只 供 田间 病害防治 时 选药 提 供 参考 ， 为了 更 进一步明确药 效 ， 还 应 对这 些 杀菌剂进 行 系 统 的 田间 防 效 试验。 参考文献 [1] 李秀根， 张绍铃 .世界梨产业现状与发展趋势分析 [J] .烟台果树， 2007 （ 1） 1-3. 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