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保 鲜 研 究 2025 25 11 33 41 保鲜与加工 Storage and Process 拮抗酵母复合涂膜处理对采后樱桃番茄果实 品质的影响 谢佳彤 1 谢燊丞 1 郭文欢 1 王欣媛 1 朱建华 1 叶 俊 1 刘日斌 1 邹秀容 1 2 3 1 韶关学院食品学院 广东 韶关 512005 2 广东省粤北食药资源利用与保护重点实验室 广东 韶关 512005 3 宁波大学食品科学与工程学院 浙江 宁波 315800 摘 要 为 了 探 究 海 藻 酸 钠 基 拮 抗 酵 母 复 合 涂 膜 处 理 对 采 后 樱 桃 番 茄 果 实 品 质 的 影 响 以 海 藻 酸 钠 为 基 材 将 拟 郎 比 可 假 丝 酵 母 Candida pseudolambica 封 装 于 海 藻 酸 钠 基 质 中 制 备 了 复 合 涂 膜 材 料 并 评 估 了 其 对 灰 葡 萄 孢 Botrytis cinerea 的 抑 制 效 果 及 对 樱 桃 番 茄 果 实 品 质 的 影 响 结 果 表 明 海 藻 酸 钠 基 拮 抗 酵 母 复 合 涂 膜 仍 保 留 较 高 数 量 的 活 酵 母 在 体 外 显 著 抑 制 了 B cinerea 菌 丝 的 生 长 抑 制 率 高 达 89 0 以 上 在 樱 桃 番 茄 果 实 伤 口 处 拮 抗 酵 母 能 够 有 效 定 殖 并 增 殖 复 合 涂 膜 处 理 显 著 降 低 了 樱 桃 番 茄 灰 霉 病 的 发 病 率 和 病 斑 直 径 贮 藏 第 5 天 时 复 合 涂 膜 处 理 组 的 发 病 率 和 病 斑 直 径 分 别 比 对 照 组 降 低 了 26 7 个 百 分 点 和 40 8 此 外 复 合 涂 膜 处 理 还 显 著 降 低 了 果 实 的 失 重 率 维 持 了 果 实 的 硬 度 但 对 果 实 的 可 溶 性 固 形 物 含 量 酸 度 和 色 泽 影 响 较 小 因 此 海 藻 酸 钠 基 拮 抗 酵 母 复 合 涂 膜能有效控制樱桃番茄采后灰霉病 维持果实较好的品质 关键词 采后保鲜 可食性膜 海藻酸钠 拮抗酵母 樱桃番茄 灰霉病 Effects of Antagonistic Yeast Composite Coating Treatments on the Postharvest Qualities of Cherry Tomato Fruits XIE Jiatong 1 XIE Shencheng 1 GUO Wenhuan 1 WANG Xinyuan 1 ZHU Jianhua 1 YE Jun 1 LIU Ribin 1 ZOU Xiurong 1 2 3 1 School of Food Science and Technology Shaoguan University Shaoguan 512005 China 2 Guangdong Provincial Key Laboratory of Utilization and Conservation of Food and Medicinal Resources in Northern Region Shaoguan 512005 China 3 College of Food Science and Engineering Ningbo University Ningbo 315800 China Abstract This study aimed to investigate the effects of sodium alginate based antagonist yeast composite coating treatments on the postharvest qualities of cherry tomato fruits The Candida pseudolambica was encapsulated in sodium alginate matrix to prepare composite coating materials and the inhibitory effects against Botrytis cinerea and its impacts on cherry tomato fruit qualities were evaluated Results demonstrated that the sodium alginate antagonist yeast composite coating maintained high populations of viable yeast cells which significantly inhibited the mycelium growth of B cinerea in vitro with inhibition rates exceeding 89 0 Antagonistic yeast could effectively colonize and proliferate at the wound sites of cherry tomato fruits and the incidence of gray mold and the diameter of diseased spots 基金项目 广 东 省 普 通 高 校 重 点 领 域 专 项 2024ZDZX2022 韶 关 学 院 博 士 科 研 启 动 资 助 项 目 433 9900064702 广 东 省 级 大 学 生 创 新 创 业 项目 S202310576025 韶关学院校级自然科学基金项目 SZ2022JK03 作者简介 谢佳彤 2003 女 汉族 本科 研究方向为食品保鲜 通信作者 邹秀容 博士 副教授 研究方向为食品保鲜与加工 332025 年第11 期 保鲜与加工 Storage and Process 联系邮箱 bxyjg were significantly reduced after the composite coating treatment On the 5th day of storage the incidence and lesion diameter of the composite coating treatment group were reduced by 26 7 percentage points and 40 8 respectively compared with the control group Furthermore the treatment also significantly decreased the weight loss rates and maintained the firmness of the fruits while exhibiting minimal impacts on soluble solids contents acidity and color parameters Therefore the sodium alginate based coating combined with antagonistic yeast can effectively control the postharvest gray mold disease in cherry tomatoes and maintain the good fruit qualities Key words postharvest preservation edible films sodium alginate antagonistic yeast cherry tomatoes gray mold disease 中图分类号 S641 2 文献标识码 A DOI 10 3969 j issn 1009 6221 2025 11 004 海 藻 酸 钠 Sodium alginate SA 是 从 海 带 巨 藻 等 褐藻 类植 物中 提取 的天 然多 糖类 化合 物 其基 本结 构 由1 4 D 甘 露 糖 醛 酸 和 L 古 洛 糖 醛 酸 通 过 1 4 糖 苷 键 组 成 海 藻 酸 钠 来 源 丰 富 安 全 无 毒 且 无 异 味 成 本 低 廉 具 备 可 降 解 性 保 湿 性 成 膜 性 和 生 物 相 容 性 等 多 种 特 性 在 果 蔬 保 鲜 领 域 展 现 良 好 的 应 用 潜 力 1 通 过 向 海 藻 酸 钠 中 复 合 添 加 增 塑 剂 表 面 活 性 剂 及 抗 菌 剂 等 成 分 可 进 一 步 优 化 可 食 膜 性 能 增强其贮藏保鲜效果 2 近 年 来 的 一 些 研 究 3 7 表 明 将 涂 膜 材 料 与 生 防 微 生 物 结 合 的 策 略 不 仅 能 有 效 提 升 可 食 性 膜 的 内 在 特 性 还 赋 予 其 出 色 的 抑 菌 活 性 为 生 物 活 性 包 装 材 料 提 供 了 新 的 途 径 例 如 Aloui 等 8 分 别 以 海 藻 酸 钠 和 刺 槐 豆 胶 为 成 膜 基 质 封 装 异 常 威 克 汉 姆 酵 母 Wickerhamomyces anomalus 所 制 备 的 生 物 涂 膜 剂 不 仅 酵 母 存 活 率 高 于 85 且 能 够 完 全 抑 制 指 状 青 霉 Penicillium digitatum 的 体 外 生 长 有 效 降 低 了 柑 橘 贮 藏 期 的 失 重 率 维 持 了 果 实 硬 度 使 柑 橘 绿 霉 病 在 贮 藏 14 d 内 的 发 生 率 明 显 降 低 此 外 I iguez Moreno 等 9 研 究 表 明 向 海 藻 酸 钠 涂 膜 中 添 加 卡 利 比 克 迈 耶 氏 酵 母 Meyerozyma caribbica 能 改 善 涂 膜 的 热 性能 增强 薄膜 强度 降低 水蒸 汽透 过率 有效 抑制 鳄 梨 果 肉 变 色 从 而 使 果 实 贮 藏 期 延 长 至 12 17 d Li 等 10 制 备 了 一 种 由 1 海 藻 酸 钠 1 魔 芋 葡 甘 露 聚 糖 1 5 羧 甲 基 纤 维 素 钠 及 拮 抗 酵 母 构 成 的 生 物 膜 并 将 其 应 用 于 豆 荚 保 鲜 发 现 复 合 涂 膜 相 较 于 单 独 使 用 拮 抗 酵 母 或 植 物 多 糖 能 更 有 效 地 减 少 豆 荚 的 失重率 腐烂率和色泽变化 延长其贮藏期 本 研 究 团 队 前 期 从 海 洋 热 带 潮 间 带 成 功 分 离 得 到 一 株 海 洋 源 拮 抗 酵 母 拟 郎 比 可 假 丝 酵 母 Can dida pseudolambica 该 酵 母 具 有 强 抗 逆 性 能 有 效 拮 抗 多 种 病 原 菌 并 显 著 抑 制 果 实 腐 烂 11 12 展 现 出 作 为 生 防 菌 的 巨 大 潜 能 本 试 验 研 究 了 海 藻 酸 钠 C pseu dolambica 复 合 涂 膜 对 常 见 病 原 真 菌 灰 葡 萄 孢 Botrytis cinerea 体 内 及 体 外 的 抑 制 效 果 并 评 估 其 对 樱 桃 番 茄 果 实 品 质 的 影 响 以 期 为 新 型 绿 色 生 物 防治技术开发提供理论依据 1 材料与方法 1 1 材料与设备 1 1 1 材料与试剂 樱 桃 番 茄 Lycopersicon esculentum var cerasi forme 品 种 为 千 禧 8 成 熟 采 自 韶 关 市 浈 江 区 的 农 贸 市 场 挑 选 大 小 均 一 成 熟 度 一 致 无 机 械 损 伤 无病虫害的果实进行试验 拟 郎 比 可 假 丝 酵 母 C pseudolambica 从 海 洋 潮 间 带 沉 积 物 中 分 离 纯 化 得 到 并 经 分 子 生 物 学 鉴 定 其种属 于 80 甘油管中保存 灰 葡 萄 孢 B cinerea 编 号 ACCC 36028 购 自 中 国 农 业 微 生 物 菌 种 保 藏 管 理 中 心 甘 油 保 藏 于 80 冰 箱 使 用 时 将 甘 油 保 藏 的 B cinerea 接 种 于 马 铃 薯 葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基 Potato dextrose agar medium PDA 于 25 恒 温 恒 湿 培 养 箱 中 培 养 5 d 进 行 活 化 活化至三代以备用 甘 油 海 藻 酸 钠 上 海 源 叶 生 物 科 技 有 限 公 司 氯 化 钠 氯 化 钙 氢 氧 化 钠 葡 萄 糖 柠 檬 三 钠 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 酵 母 浸 膏 牛 肉 浸 膏 均 为 FMB 级 别 生 工 生 物 工 程 上 海 股 份 有 限 公 司 琼 脂 粉 生物技术级别 北京索莱宝科技有限公司 营 养 酵 母 葡 萄 糖 肉 汤 Nutrient yeast dextrose broth NYDB 和 PDA 培 养 基 的 配 制 参 照 Zou 等 11 的 方法 1 1 2 仪器与设备 FJ200 型 高 速 分 散 均 质 机 上 海 精 密 仪 器 仪 表 有 限 公 司 H1750R 型 高 速 台 式 冷 冻 离 心 机 湖 南 湘 仪 实 验 室 仪 器 开 发 有 限 公 司 SW CJ 2FD 超 净 工 作 台 苏 州 安 泰 空 气 技 术 有 限 公 司 VXMNAL 型 迷 你 涡 旋 振 荡 器 奥 豪 斯 仪 器 上 海 有 限 公 司 Hitachi 342025 年第11 期 谢佳彤 等 拮抗酵母复合涂膜处理对采后樱桃番茄果实品质的影响 投稿平台 TM3030 扫 描 电 子 显 微 镜 Scanning electron micro scope SEM Hitachi E 1010 离 子 溅 射 仪 日 本 日 立 公 司 Ci6X 型 手 持 式 色 差 仪 爱 色 丽 上 海 色 彩 科 技 有 限 公 司 PHSJ 3F 型 pH 计 上 海 仪 电 科 学 仪 器 有 限 公 司 ZQ GY 4 1 型 水 果 硬 度 计 东 莞 市 智 取 精 密 仪 器 有 限 公 司 PAL 1 型 便 携 式 数 显 折 光 仪 广 州 市 爱 宕 科 学 仪 器 有 限 公 司 SYG A2 5 型 电 热 恒 温 水 浴 锅 天 津 市 泰 斯 特 仪 器 有 限 公 司 HWM 358 型 恒 温 恒 湿 箱 宁 波 江 南 仪 器 厂 ZQLY 180 型 立 式 全 温 振 荡 培 养 箱 上 海 知 楚 通 用 设 备 发 展 有 限 公 司 78 1 型 磁 力 加 热 搅 拌 器 常 州 普 天 仪 器 制 造 有 限 公 司 LDZX 50L 型 高 压 蒸 汽 灭 菌 器 上 海 申 安 医 疗 器 械 厂 GZX 9140MBE 型 电 热 鼓 风 干 燥 箱 上 海 博 迅 医 疗 生 物 仪 器 股 份 有 限 公 司 FJ200 型 高 速 分 散 均 质 机 上海精密仪器仪表有限公司 1 2 方法 1 2 1 酵母菌悬液和孢子悬浮液的制备 酵 母 菌 悬 液 的 制 备 取 一 环 80 冰 箱 中 保 存 的 拮 抗 酵 母 甘 油 菌 液 移 入 NYDB 培 养 基 于 28 180 r min 条 件 下 振 荡 培 养24 h 完 成 第 一 次 活 化 继 代 培 养 一 次 取 菌 悬 液 于4 6 000 r min 下 离 心5 min 去 除 上 清 液 再 用 无 菌 水 重 悬 酵 母 沉 淀 再 次 离 心 去 除 上 清 液 此 步 骤 重 复 2 次 最 后 再 以 无 菌 水 重 悬 酵 母 沉 淀 用 血 球 计 数 板 调 整 酵 母 菌 悬 液 的 浓 度 灰 霉 孢 子 悬 浮 液 的 制 备 取 适 量 的 无 菌 水 冲 洗 培 养 第 10 天 的 灰 霉 平 板 并 用 无 菌 涂 布 棒 刮 洗 数 次 得 到 的 孢 子 悬 浮 液 再 经 300 目 的 绢 网 过 滤 以 去 除 菌 丝 孢 子 悬 浮 液 的 浓 度 经 血 球 计 数 板 调 整 为 1 10 5 spores mL 1 2 2 海藻酸钠 结冷胶基基础膜的制备 基 础 膜 配 方 每1 000 g 膜 液 中 含 海 藻 酸 钠12 5 g 结冷胶0 3 g 甘油4 g 余量为水 基 础 膜 制 备 方 法 准 确 称 取 12 5 g 海 藻 酸 钠 溶 于 盛 有 650 mL 热 水 的 烧 杯 中 用 磁 力 加 热 搅 拌 器 匀 速 搅 拌 约 10 min 将 烧 杯 置 于 90 水 浴 锅 中 加 热 50 min 待 海 藻 酸 钠 彻 底 溶 解 溶 液 无 颗 粒 粉 块 结 团 另 称 取 0 3 g 结 冷 胶 将 其 置 于 含 300 mL 热 水 的 烧 杯 中 并 搅 拌 均 匀 将 烧 杯 置 于 水 浴 锅 中 加 热 约 15 min 待 结 冷 胶 彻 底 溶 解 后 迅 速 倒 入 上 述 溶 解 好 的 海 藻 酸 钠 中 搅 拌 直 至 混 合 均 匀 称 量 4 g 甘 油 将 甘 油 溶 解 于 少 量 水 中 再 加 入 混 合 膜 液 搅 拌 直 至 混 合 均 匀 1 2 3 海藻酸钠 结冷胶基拮抗酵母复合膜的制备 将 C pseudolambica 酵 母 菌 悬 液 加 入 按 上 述 1 2 2 制 备 的 膜 液 使 膜 液 中 酵 母 菌 的 终 浓 度 为 1 10 8 cells mL 使 用 高 速 匀 浆 机 以 11 000 r min 搅 打 3 min 使 其 均 匀 分 散 得 到 含 菌 膜 液 分 别 准 确 称 取 20 g 上 述 基 础 膜 液 和 含 菌 膜 液 倒 入 培 养 皿 中 于 37 电 热 鼓 风 干 燥 箱 中 干 燥 约 28 h 干 燥 完 成 后 用镊子将薄膜与培养皿分离 用于后续试验测定 1 2 4 扫描电子显微镜观察膜结构 参 考 Guo 等 13 的 方 法 采 用 扫 描 电 子 显 微 镜 SEM 观 察 生 物 膜 的 形 貌 特 征 将 制 备 好 的 生 物 膜 裁 剪 成 大 小 为 5 mm 5 mm 的 规 则 形 状 通 过 导 电 碳 胶 带 将 其 固 定 于 铝 制 样 品 台 样 品 经 真 空 金 溅 射 镀 膜 处 理 电 流 30 mA 时 间 30 s 后 在 加 速 电 压 5 0 kV 下 利用扫描电子显微镜观察其表面结构 1 2 5 复合膜中拮抗酵母存活率的测定 参 照 Settier Ram rez 等 14 的 方 法 稍 作 修 改 精 确 称 取 一 定 质 量 干 燥 前 后 的 含 菌 膜 材 料 分 别 置 于 含5 mL 柠 檬 三 钠 溶 液 0 1 mol L 的 离 心 管 中 将 样 品 管 置 于 恒 温 振 荡 摇 床 28 300 r min 持 续 解 离 3 h 使 生 物 膜 充 分 溶 解 然 后 进 行 10 倍 梯 度 稀 释 分 别 取 100 L 10 6 和 10 7 梯 度 稀 释 液 均 匀 涂 布 于 NYDA 平 板 于 28 恒 温 培 养 48 h 后 对 平 板 上 的 酵 母 进 行 计 数 结 果 以 lg CFU film 表 示 试 验 设 置 3 次 生 物 重复 每次重复进行 2 次平行测定 1 2 6 不 同 涂 膜 处 理 对B cinerea 的 体 外 菌 丝 抑 制 率 的测定 参 照 Gonz lez Estrada 等 15 的 方 法 稍 作 修 改 用 打 孔 器 从 已 培 养 5 d 的 B cinerea 培 养 基 边 缘 切 取 直 径 为 6 5 mm 的 菌 饼 接 种 于 新 制 备 的 PDA 培 养 基 中 央 然 后 将 含 菌 膜 和 无 酵 母 的 基 础 膜 分 别 置 于 含 有 B cinerea 菌 饼 的 PDA 培 养 基 表 面 以 两 层 封 口 膜 密 封 平 板 将 其 置 于 25 恒 温 培 养 箱 中 培 养 4 d 以 事 先 涂 布 100 L 酵 母 菌 悬 液 1 10 8 cells mL 再 接 B cinerea 菌 饼 的 处 理 作 为 阳 性 对 照 以 不 加 膜 和 酵 母 的 处 理 作 为 空 白 对 照 每 天 测 量 B cinerea 的 菌 落 直 径 按 照 公 式 1 计 算 菌 丝 生 长 抑 制 率 每 个 处 理 6 个重复 菌丝抑制率 空白对照菌落直径 mm 各处理菌落直径 mm 空白对照菌落直径 mm 6 5 100 1 1 2 7 复合膜中酵母在樱桃番茄伤口处的生长动态 参 考 Godana 等 16 的 方 法 略 作 修 改 在 樱 桃 番 茄 果 实 赤 道 处 刺 一 个 3 mm 3 mm 大 小 的 伤 口 分 别 向 伤 口 注 射 10 L 1 10 8 cells mL 酵 母 菌 悬 液 和 35