233份中果番茄分离单株的抗病基因检测.pdf

中国农学通报 ChineseAgriculturalScienceBulletin 中国农学通报 2024 40 34 24 32 ChineseAgriculturalScienceBulletin 基 金 项 目 河 北 省 重 点 研 发 计 划 项 目 果 菜 类 蔬 菜 现 代 种 业 科 技 创 新 团 队 优 质 多 抗 设 施 番 茄 种 质 资 源 创 制 与 新 品 种 选 育 21326309D 河 北 省 重 点 研 发 计 划 项 目 高 品 质 多 抗 樱 桃 番 茄 种 质 资 源 创 制 与 新 品 种 选 育 22326313D 河 北 省 农 林 科 学 院 科 技 创 新 专 项 课 题 设 施 番 茄 新 品 种 选 育 及 棚 室 装 备 研 究 应 用 2022KJCXZX JZS 5 河 北 省 农 林 科 学 院 科 技 创 新 人 才 队 伍 建 设 博 士 基 金 番 茄 高 糖 基 因Lin5 的 发 掘 与 利 用 研 究 C22R0801 河 北 省 农 林 科 学 院 基 本 科 研 业 务 费 番 茄 苹 果 酸 相 关 基 因 的 定 位 及 育 种 利 用 2024050203 河 北 省 第 三 批 巨 人 计 划 蔬 菜 科 研 创 新团队项目 第 一 作 者 简 介 王 珊 珊 女 1992 年 出 生 河 北 衡 水 人 助 理 研 究 员 博 士 研 究 生 研 究 方 向 为 番 茄 育 种 研 究 通 信 地 址 050000 河 北 省 石 家 庄 市 新 华 区和平西路598 号中五楼109 室 河北省农林科学院经济作物研究所 E mail 820705239 通 信 作 者 尹 庆 珍 女 1967 年 出 生 河 北 灵 寿 人 研 究 员 硕 士 研 究 生 研 究 方 向 为 番 茄 育 种 研 究 通 信 地 址 050000 河 北 省 石 家 庄 市 新 华 区 和 平 西 路598 号中五楼109 室 河北省农林科学院经济作物研究所 E mail yinqingzhen67 收稿日期 2024 01 10 修回日期 2024 07 10 233 份中果番茄分离单株的抗病基因检测 王珊珊 1 王晨瑜 1 杨超沙 2 蔡晓艺 1 尹庆珍 1 1 河北省农林科学院经济作物研究所 石家庄050051 2 承德市农林科学院 河北承德067055 摘 要 通 过 筛 选 多 抗 中 果 番 茄 资 源 为 番 茄 抗 病 育 种 提 供 材 料 基 础 以 课 题 组 引 进 的28 个 中 果 番 茄 品 种 为 材 料 每 个 品 种 选 择8 10 株 分 离 单 株 的 幼 嫩 叶 片 采 用 五 引 物 扩 增 受 阻 突 变 体 系 PARMS 法 对 其 233 份 分 离 单 株 进 行12 种 病 害 的17 个 抗 性 基 因 检 测 分 别 为 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 烟 草 花 叶 病 毒 抗 病 基 因 Tm 2 a 根 结 线 虫 抗 性 基 因 Mi 1 2 Mi 2 3 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 叶 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 细 菌 性 斑 点 病 抗 性 基 因 Pto 疮 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 Ve 2 结 果 显 示 在233 份 分 离 单 株 中 含 有 抗 性 基 因 Ve 1 Sm Ve 2 Mi 1 2 的 分 离 单 株 较 多 分 别 为222 215 198 194 份 经 统 计 含 有7 8 个 抗 性 基 因 的 分 离 单 株 较 多 分 别 为55 50 份 含8 个 及 以 上 抗 性 基 因 的 共140 份 占 比60 综 合 抗 性 最 终 筛 选 到3 个 含 有12 个 抗 性 基 因 的 分 离 单 株 分 别 为2 2 5 4 21 3 含 有11 个 抗 性 基 因 的 有21 个 分 别 为1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 多抗资源较为丰富 本研究获得了多个多抗中果 番茄资源 下一步可对筛选的分离单株 进行纯化 为 筛选多抗中果番茄提供基础材料 关键词 中果番茄 分离单株 五引物扩增受阻突变体系 抗性检测 中图分类号 S641 2 文献标识码 A 论文编号 casb2024 0012 Detection of Disease Resistance Genes in 233 Medium Fruit Tomato Isolates WANG Shanshan 1 WANG Chenyu 1 YANG Chaosha 2 CAI Xiaoyi 1 YIN Qingzhen 1 1 Institute of Cash Crops Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences Shijiazhuang 050051 2 Chengde Academy of Agriculture and Forestry Sciences Chengde 067055 Abstract In order to screen the resources of medium fruit tomato with multiple resistances and provide material basis for tomato disease resistance breeding using 28 medium fruit tomato varieties introduced by our research group as materials 17 resistance genes of 12 diseases were detected by five primer amplification inhibited mutation system PARMS method including yellow leaf curl virus resistance genes Ty 1 and Ty 5 tobacco mosaic virus resistance gene Tm 2 a root nematode resistance genes Mi 1 2 and Mi 2 3 Fusarium crown and root rot resistance gene Frl leaf mold resistance genes Cf 5 and Cf 9 grey leaf spot resistance genes Sm wilt resistance gene I 2 late blight resistance gene Ph 3 bacterial wilt resistance genes Bwr 12 and Bwr 6 bacterial speck resistance gene Pto bacterial spot resistance gene Rx 4 Verticillium wilt resistance gene Ve 1 and Ve 2 Among the 233 isolates there were 222 215 198 and 194 isolates containing the resistance genes0 引言 番 茄 Solanum lycopersicum 原 产 于 南 美 洲 具 有 独 特 的 风 味 适 应 性 强 容 易 栽 培 近 年 来 已 成 为 世 界 上 重 要 的 蔬 菜 作 物 1 番 茄 中 含 有 丰 富 的 营 养 物 质 深 受 消 费 者 的 喜 爱 由 于 消 费 水 平 的 提 高 消 费 者 对 于 番 茄 的 需求正在发生转变 近几年更加注重番茄的口感 对于 形状外观要求更加多样化 因此不断培育适应市场且 综 合 品 质 较 好 的 番 茄 新 品 种 是 育 种 家 长 久 的 课 题 中国是世界上番茄栽培面积最大且消费量最高的 国 家 番 茄 栽 培 主 要 以 设 施 栽 培 为 主 2 多 年 来 设 施 番 茄 连 作 障 碍 越 来 越 严 重 轮 作 倒 茬 困 难 病 害 多 发 3 产 量 降 低 造 成 了 巨 大 经 济 损 失 且 农 药 化 肥 的 不正确使用 不仅会造成环境污染 还会危害人类身体 健康 因此培育多抗番茄品种是最为健康有效的方法 近 年 来 分 子 标 记 辅 助 选 择 技 术 得 到 快 速 发 展 相 比于传统育种技术 抗病基因的发现可提高鉴定效率 缩 短 育 种 周 期 提 高 抗 病 基 因 聚 合 效 率 黄 化 曲 叶 病 毒病是番茄上毁灭性的病害 主要由烟粉虱介导传播 传 播 迅 速 防 治 较 为 困 难 4 到 目 前 为 止 研 究 者 确 定 了6 个 抗TY 病 毒 的 基 因 5 7 其 中 编 码DFDGD 家 族 的 Ty 1 和 Ty 3 已 被 鉴 定 为 等 位 基 因 8 根 结 线 虫 病 已 发 现9 个 Mi 抗 性 基 因 其 中 Mi 1 是 常 用 抗 病 基 因 4 9 番 茄 花 叶 病 毒 ToMV 是 番 茄 中 传 染 性 最 强 的 病 毒 病 害 之 一 到 目 前 为 止 已 有 Tm 1 Tm 2 和 Tm 2 2 抗 ToMV 基 因 被 报 道 并 用 于 番 茄 品 种 开 发 10 番 茄 叶 霉 病 是 由 半 知 菌 亚 门 的 黄 枝 孢 菌 引 起 的 该 病 害 在 国 内 北 方 发 生 较 为 严 重 防 治 番 茄 叶 霉 病 最 有 效 的 方 法 就 是 培 育 抗 病 品 种 抗 病 基 因 应 用 最 为 广 泛 的 还 是 Cf 5 Cf 9 11 12 颈 腐 根 腐 病 是 由 尖 孢 镰 刀 菌Forl Fusarium oxysporum f sp radicis lycopersici 造 成 的 一 种 危 害 番 茄 极 大 的 土 传 病 害 抗 性 基 因 Frl 被 定 位 在 第9 号 染 色 体 上 13 其 他 病 害 的 抗 性 基 因 很 多 也 被 应 用 主 要 有 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 14 15 定 位 在 番 茄 的11 号 染 色 体 上 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 I 3 16 抗 斑 萎 病 毒 病 基 因 Sw 5 17 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 18 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 19 细 菌 性 斑 点 病 抗 性 基 因 Pto 20 疮 痂 病 抗性基因 Rx 4 21 黄萎病抗性基因 Ve 1 Ve 2 22 PARMS Penta primer amplification refractory mutation system 五 引 物 扩 增 受 阻 突 变 体 系 23 是 一 种 结 合 了1 对 通 用 荧 光 引 物 1 对SNP 等 位 基 因 特 异 引 物 以 及1 条 反 向 共 用 引 物 的SNPPCR 分 析 技 术 24 利 用 前 人 研 究 的 抗 性 基 因 的SNP 位 点 可 快 速 简 单 进 行 SNP 等位基因基因型检测 提高检测效率 25 本 研 究 以 课 题 组 引 进 的28 个 中 果 番 茄 品 种 为 材 料 采 用PARMS 方 法 对 其233 份 分 离 单 株 的12 种 病 害 的17 个 抗 性 基 因 进 行 检 测 分 别 为 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 烟 草 花 叶 病 毒 抗 病 基 因 Tm 2 a 根 结 线 虫 抗 性 基 因 Mi 1 2 Mi 2 3 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 叶 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 细 菌 性 斑 点 病 抗 性 基 因 Pto 疮 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 Ve 2 以 期 为 筛 选 多抗中果番茄提供材料基础 1 材料与方法 1 1 试验材料 供试用中果番茄定植于河北省农林科学院经济作 物研究所日光温室 试验时间为2023 年1 6 月 本研 究 选 择28 个 中 果 番 茄 品 种 表1 每 个 品 种 选 择8 10 株分离单株的幼嫩叶片进行抗性基因检测 1 2 试验方法 1 2 1 DNA 提 取 取100mg 番 茄 幼 嫩 的 叶 片 于EP 管 中 加 入 研 磨 珠 液 氮 冷 却 后 置 于 高 通 量 组 织 研 磨 器 宁 波 新 芝Scientz 192 中 研 磨 研 磨 后 的 样 品 按 照 康 为 世 纪 公 司 的 新 型 植 物 基 因 组DNA 提 取 试 剂 盒 的 步 骤 进 行DNA 的 提 取 并 采 用 微 量 分 光 光 度 计 检 测 提 取 的DNA 的 浓 度 1 2 2 检 测 方 法 检 测 方 法 按 照 杨 超 沙 等 26 的 方 法 利 用PARMS SNP 检 测 技 术 对17 个 抗 性 基 因 进 行 检 测 根 据PARMSmastermix 武 汉 市 景 肽 生 物 科 技 有 限 公 司 说 明 书 配 制PCR 反 应 体 系 采 用Tecan F200 扫 描 FAM HEX 和ROX 信 号 利 用SNPDecoder 对 数 据 进 Ve 1 Sm Ve 2 and Mi 1 2 respectively The isolates with 7 and 8 resistance genes were 55 and 50 respectively 140 isolates were with 8 or more resistance genes accounting for 60 3 isolated strains containing 12 resistance genes were screened which were 2 2 5 4 and 21 3 And there were 21 isolated strains containing 11 resistance genes which were 1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 Polyresistant tomato resources were abundant In this study a number of medium fruit tomato resources with multiple antibodies were obtained and the next step can be purification of the isolated single strain providing a material basis for screening medium fruit tomato with multiple antibodies Keywords medium fruit tomato isolates PARMS resistance detection 王 珊 珊 等 233 份 中 果 番 茄 分 离 单 株 的 抗 病 基 因 检 测 25中国农学通报 行分析并统计结果 1 3 数据分析 试 验 数 据 采 用Microsoft office Excel 2010 软 件 进 行分析 2 结果与分析 本 研 究 采 用PARMS 方 法 检 测233 份 分 离 单 株 的17 个 抗 性 基 因 分 别 为 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 烟 草 花 叶 病 毒 抗 病 基 因 Tm 2 a 根 结 线 虫 抗 性 基 因 Mi 1 2 Mi 2 3 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 叶 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 青 枯 病 基 因 Bwr 12 Bwr 6 细 菌 性 斑 点 病 基 因 Pto 疮 痂 病 基 因 Rx 4 黄 萎 病 基 因 Ve 1 Ve 2 2 1 抗性基因检测 2 1 1 番 茄 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 的 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 的 植 株 共141 份 图1 占 比60 52 其 中 含 纯 合 图中绿点表示不含抗性基因 红点表示杂合抗性基因 蓝点表示含纯合抗性基因 黑色表示阴性对照 灰点表示无法判断 下同 图 1 黄化曲叶病毒病抗性基因 Ty 1 Ty 5 检测结果 表 1 中果番茄种质资源 编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 品种名称 2122F2 1 3 JY213F2 5 1 JM1 号F2 2 6 JM2 号F2 1 5 FQ4 号F2 1 8 T2204F2 3 3 口感9 号F2 5 3 HL15 号F2 4 1 HL16 号F2 7 1 HXF2 4 8 166 2 号F2 1 2 CM 三号F2 6 2 2138F2 2 3 NG803F2 4 5 编号 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 品种名称 303F2 3 1 CXF2 1 5 MLF2 2 3 CM1 号F2 8 2 ZHLBF2 9 2 YMGTF2 7 4 36009F2 5 8 39717F2 4 4 FBY1317F2 6 1 TJ1 号F2 4 2 TJ2 号F2 1 8 TJ3 号F2 2 4 TJ4 号F2 3 1 TJ5 号F2 4 2 图 2 烟草花叶病毒病抗性基因 Tm 2 a 检测结果 抗 性 基 因 植 株48 份 含 杂 合 抗 性 基 因 植 株93 份 含 有 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 5 的 植 株 共8 份 占 比 3 43 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株2 份 含 杂 合 抗 性 基 因植株6 份 2 1 2 烟 草 花 叶 病 毒 抗 性 基 因 Tm 2 a 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 烟 草 花 叶 病 毒 抗 性 基 因 Tm 2 a 的 植 株 共 100 份 图2 占 比42 92 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株 40 份 含杂合抗性基因植株60 份 2 1 3 根结 线虫 抗性 基因 Mi 1 2 Mi 2 3 检测 233 份分 离 单 株 中 含 有 根 结 线 虫 抗 性 基 因 Mi 1 2 的 植 株 共194 份 图3 占 比83 26 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株154 份 含 杂 合 抗 性 基 因 植 株40 份 含 有 根 结 线 虫 抗 性 基 因 Mi 2 3 的 植 株 共150 份 占 比64 38 其 中 含 纯 合 抗 26性基因植株83 份 含杂合抗性基因植株67 份 2 1 4 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 的 植 株 共128 份 图4 占 比 54 94 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株59 份 含 杂 合 抗 性 基因植株69 份 2 1 5 叶 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 叶 霉 病 基 因 Cf 5 的 植 株 共57 份 图5 占 比 24 46 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株22 份 含 杂 合 抗 性 基 因 植 株35 份 含 有 叶 霉 病 基 因 Cf 9 的 植 株 共80 份 占 比34 33 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株34 份 含 杂 合 抗性基因植株46 份 2 1 6 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 的 植 株 共215 份 图6 占 比92 27 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株185 份 含 杂 合 抗 性基因植株30 份 图 3 根结线虫病抗性基因 Mi 1 2 Mi 2 3 的检测结果 图 5 叶霉病抗性基因 Cf 5 Cf 9 的检测结果 图 4 根腐病抗性基因 Frl 的检测结果 王 珊 珊 等 233 份 中 果 番 茄 分 离 单 株 的 抗 病 基 因 检 测 27中国农学通报 2 1 7 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 的 植 株 共165 份 图7 占 比 70 82 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株154 份 含 杂 合 抗 性 基因植株11 份 2 1 8 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 的 植 株 共17 份 图8 占 比 7 30 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株3 份 含 杂 合 抗 性 基 因植株14 份 2 1 9 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 的 植 株 共48 份 占 比 20 6 图9 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株17 份 含 杂 合 抗 性 基 因 植 株31 份 含 有 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 6 的 植 株 共130 份 占 比55 79 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株 42 份 含杂合抗性基因植株88 份 2 1 10 细 菌 性 斑 点 病 抗 性 基 因 Pto 检 测 233 份 分 离 单 图 6 灰叶斑病抗性基因 Sm 的检测结果 图 9 青枯病抗性基因 Bwr 12 Bwr 6 的检测结果 图 7 枯萎病抗性基因 I 2 的检测结果 图 8 晚疫病抗病基因 Ph 3 的检测结果 28株 中 含 有 细 菌 性 斑 点 病 抗 性 基 因 Pto 的 植 株 共5 份 图 10 占比2 15 均为纯合抗性基因 2 1 11 疮 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 疮 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 的 植 株 共6 份 图11 占 比 2 58 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株3 份 含 杂 合 抗 性 基 因植株3 份 2 1 12 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 Ve 2 检 测 233 份 分 离 单 株 中 含 有 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 的 植 株 共222 份 图12 占 比95 28 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株196 份 含 杂 合 抗 性 基 因 植 株26 份 含 有 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 2 的 植 株 共198 份 占 比84 98 其 中 含 纯 合 抗 性 基 因 植 株163 份 含杂合抗性基因植株35 份 根 据 以 上 结 果 可 以 看 出 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 2 根 结 线 虫 抗 性 基 因 Mi 1 2 的 分 离 单 株 较 多 分 别 为222 215 198 194 份 占 总 数 的80 以 上 而 含 有 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 5 细 菌 性 斑 点 病 基 因 Pto 疮 痂 病 基 因 Rx 4 的分离单株较少 分别有8 5 6 份 资源较为短缺 2 2 抗性个数统计 由 表2 3 可 看 出 233 份 中 果 番 茄 分 离 单 株 含 有3 个 抗 性 基 因 的 有3 株 含 有4 个 抗 性 基 因 的 有2 株 含 有5 个 抗 性 基 因 的 有10 株 含 有6 个 抗 性 基 因 的 有22 株 含 有7 个 抗 性 基 因 的 有55 株 含 有8 个 抗 性 基 因 的 有50 株 含 有9 个 抗 性 基 因 的 有39 株 含 有10 个 抗 性 基 因 的 有28 株 含 有11 个 抗 性 基 因 的 有21 株 分 别 为 1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 含 有12 个 抗 性 基 因 的 分 离 单 株 有3 份 分 别 为2 2 5 4 21 3 本研究含有8 个及以上抗性基因的共140 份 占比 60 多 个 抗 性 基 因 的 植 株 较 多 可 为 后 期 抗 病 育 种 及 图 12 黄萎病抗性基因 Ve 1 Ve 2 的检测结果 王 珊 珊 等 233 份 中 果 番 茄 分 离 单 株 的 抗 病 基 因 检 测 图 10 细菌性斑点病基因 Pto 的检测结果 图 11 疮痂病抗性基因 Rx 4 的检测结果 29中国农学通报 抗病基因 研究提供材料基础 3 讨论 张 文 慧 27 对 陕 南 山 区54 个 番 茄 地 方 品 种 的 Ty 2 I 2 Tm 2 a Cf 9 Mi 1 5 个 抗 病 基 因 进 行 鉴 定 发 现 有 3 份材料同时检测出5 个抗病基因分子标记 18 份材料 检 测 出2 个 以 上 抗 病 基 因 分 子 标 记 杨 超 沙 等 26 对81 份 大 果 番 茄 材 料 共1323 株 自 交 系 进 行 了10 个 抗 病 基 因 的 检 测 发 现 含2 个 抗 病 基 因 的 材 料4 个 含3 个 抗 病 基 因 的 材 料18 个 含4 个 抗 病 基 因 的 材 料35 个 含5 个 抗 病 基 因 的 材 料21 个 含6 个 抗 病 基 因 的 材 料3 个 范 惠 冬 等 28 对105 份 番 茄 种 质 资 源 的8 个 抗 性 基 因 Mi 1 I 2 Cf 9 Ph 3 Ty 1 Ty 3 Tm 2 a Sw 分 子 标 记 检 测 含3 个 以 下 抗 性 基 因 材 料 有78 份 含4 个 抗 病 基 因 的 材 料 有9 份 含5 个 抗 病 基 因 的 材 料 有11 份 含6 个 抗 病 基 因 的 材 料 有6 份 含7 个 抗 病 基 因 的 材 料 有1 份 本 研 究 对 抗 性 基 因 进 行 统 计 发 现 含 有3 个 抗 性 基因的有3 株 含有4 个抗性基因的有2 株 含有5 个抗 性 基 因 的 有10 株 含 有6 个 抗 性 基 因 的 有22 株 含 有7 样品编号 1 1 1 3 2 2 2 3 2 4 2 5 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 4 5 7 5 8 8 1 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 21 3 26 2 样品名称 2122F2 1 3 1 2122F2 1 3 3 JY213F2 5 1 2 JY213F2 5 1 3 JY213F2 5 1 4 JY213F2 5 1 5 JY213F2 5 1 7 JY213F2 5 1 8 JM2 号F2 1 5 2 JM2 号F2 1 5 4 JM2 号F2 1 5 5 FQ4 号F2 1 8 4 FQ4 号F2 1 8 7 FQ4 号F2 1 8 8 HL15 号F2 4 1 1 HL15 号F2 4 1 8 CM 三号F2 6 2 1 CM 三号F2 6 2 2 CM 三号F2 6 2 5 CM1 号F2 8 2 7 CM1 号F2 8 2 8 YMGTF2 7 4 8 36009F2 5 8 3 TJ3 号F2 2 4 2 Ty1 H 抗 H 抗 H 抗 H 抗 H H 抗 H H H 抗 抗 H H H H H H H H Ty5 H 抗 H H H H Mi1 2 H H H 抗 H 抗 H 抗 抗 抗 抗 H H H H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 H Mi23 H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 H H H H H TM2 抗 抗 抗 H H H H 抗 抗 抗 H H H H Cf5 H H H H H H H H 抗 H 抗 H H H Cf9 H H 抗 抗 H 抗 抗 抗 H H H H H H H Frl H H H H H H H 抗 H H Bwr12 抗 抗 抗 H H H 抗 抗 抗 H H H H 抗 抗 抗 H H Bwr6 H 抗 H 抗 H H H 抗 H H H 抗 抗 H H H H H H H H I2 H H H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 Ph3 H H H H H H Pto 抗 抗 抗 抗 Rx4 抗 H H H 抗 SM H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 H 抗 H Ve1 抗 抗 抗 H H 抗 H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 Ve2 抗 抗 抗 H H 抗 H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 表 3 中果番茄种质资源抗性基因统计 11 个及以上 注 抗 表示含纯合抗性基因 H 表示杂合抗性基因 表示不含抗性基因 表 2 抗性基因个数统计 抗性基因个数 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 资源份数 3 2 10 22 55 50 39 28 21 3 占比 1 3 0 9 4 3 9 4 23 6 21 5 16 7 12 0 9 0 1 3 30个 抗 性 基 因 的 有55 株 含 有8 个 抗 性 基 因 的 有50 株 含 有9 个 抗 性 基 因 的 有39 株 含 有10 个 抗 性 基 因 的 有 28 株 含 有11 个 抗 性 基 因 的 有21 株 含 有12 个 抗 性 基 因 的 有3 份 多 抗 资 源 相 对 较 为 丰 富 这 可 能 是 因 为 本 研 究 检 测 了17 个 抗 性 基 因 检 测 的 基 因 较 多 多 抗 资源更为丰富 因 目 前 市 场 对 于 中 果 番 茄 的 口 感 品 质 要 求 较 高 本 研 究 的 不 足 之 处 在 于 应 进 行 多 抗 中 果 番 茄 的 品 质 检 测 为 筛 选 多 抗 优 质 番 茄 提 供 更 大 的 筛 选 空 间 4 结论 本 研 究 对28 个 中 果 番 茄 品 种233 份 分 离 单 株 进 行12 种 病 害 的17 个 抗 性 基 因 检 测 结 果 表 明 供 试 的 233 份 分 离 单 株 中 含 有 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 的 分 离 单 株 共222 份 含 有 灰 叶 斑 病 抗 性 基 因 Sm 的 分 离 单 株 共215 份 含 有 黄 萎 病 抗 性 基 因 Ve 2 的 分 离 单 株 共 198 份 含 有 根 结 线 虫 抗 性 基 因 Mi 1 2 共194 份 以 上4 个 抗 性 基 因 在 本 研 究 大 多 数 的 分 离 单 株 中 含 有 的 较 多 占 总 数 的80 以 上 而 含 有 黄 化 曲 叶 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 5 细 菌 性 斑 点 病 基 因 Pto 疮 痂 病 基 因 Rx 4 的 分 离 单 株 较 少 分 别 有8 5 6 份 资 源 较 为 短 缺 通 过 对 每 个 分 离 单 株 抗 性 基 因 个 数 进 行 统 计 发 现 含 有8 个 及 以 上 抗 性 基 因 的 共140 份 占 比60 多 个 抗 性 基 因 的 植 株 较 多 含 有11 个 抗 性 基 因 的 有21 份 分 别 为1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 含 有12 个 抗 性 基 因 的 分 离 单 株 有3 份 分 别 为2 2 5 4 21 3 本 研 究 筛 选 的 多 抗 中 果 番 茄 资 源 可 为 后 期 抗病育种提供丰富的材料基础 参考文献 1 许 向 阳 赵 爽 何 梦 曦 等 128 份 番 茄 种 质 资 源 主 要 农 艺 性 状 鉴 定 及抗病性评价 J 东北农业大学学报 2022 53 5 32 41 2 田 永 强 高 丽 红 设 施 番 茄 高 品 质 栽 培 理 论 与 技 术 J 中 国 蔬 菜 2021 2 30 40 3 李 天 来 我 国 设 施 蔬 菜 科 技 与 产 业 发 展 现 状 及 趋 势 J 中 国 农 村 科技 2016 5 75 77 4 杨 超 沙 王 国 华 吴 志 明 等 番 茄 黄 化 曲 叶 病 毒 及 根 结 线 虫 抗 性 基 因的检测 J 河北农业大学学报 2018 41 2 73 76 5 ZAMIR D EKSTEIN MICHELSON I ZAKAY Y et al Mapping and introgression of a tomato yellow leaf curl virus tolerance gene TY 1 J Theoreticalandappliedgenetics 1994 88 2 141 146 6 YAMAGUCHI H OHNISHI J SAITOA et al An NB LRR gene TYNBS 1 is responsible for resistance mediated by the Ty 2 Begomovirus resistance locus of tomato J Theoretical and applied genetics 2018 131 6 1345 1362 7 JUNG J KIM H J LEE J M et al Gene based molecular marker system for multiple disease resistances in tomato against tomato yellow leaf curl virus late blight and verticillium wilt J Euphytica 2015 205 2 599 613 8 CARO M VERLAAN M G JULI N O et al Assessing the genetic variation of Ty 1 and Ty 3 alleles confer