辣椒轻斑驳病毒研究的回顾与展望_杨中周.pdf

中 中 国 国 瓜 瓜 菜 菜 2021 34 9 1 6 专题综述 收 稿 日 期 2021 02 22 修 回 日 期 2021 03 01 基 金 项 目 西 藏 地 区 优 质 特 色 瓜 菜 新 品 种 选 育 及 示 范 推 广 202004e11020004 作 者 简 介 杨 中 周 男 高 级 农 艺 师 主 要 从 事 瓜 菜 品 种 选 育 与 栽 培 研 究 E mail 282552662 2018 年 我 国 辣 甜 椒 Capsicum spp 常 年 播 种 面 积 在 200 万 hm 2 约 占 世 界 辣 椒 播 种 面 积 的 40 在 蔬 菜 作 物 中 稳 居 第 一 成 为 我 国 蔬 菜 第 一 大 产 业 1 3 病 毒 病 是 制 约 我 国 辣 甜 椒 生 产 的 一 类 重 要 病 害 目 前 世 界 上 报 道 能 够 感 染 辣 椒 的 病 毒 有 60 余 种 4 5 我 国 报 道 的 种 类 在30 种 以 上 黄 瓜 花 叶 病 毒 Cucumber mosaic virus CMV 和 烟 草 花 叶 病 毒 Tobacco mosaic virus TMV 仍 是 危 害 辣 椒 的 最 主 要 病 害 但 是 近 些 年 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒 Pepper mild mottle virus PMMoV 在 一 些 地 区 已 经 成 为 了 一 种 普 遍 发 生 的 病 害 特 别 是 在 江 苏 地 区 其 平 均 检 出 率 高 达62 28 6 在 北 京 地 区 市 场 上 销 售 的 商 品 种 子 阳 性 检 出 率 达61 11 该 病 毒 不 但 可 以 通 过 汁 液 摩 擦 传 播 而 且 还 可 以 通 过 种 子 传 播 所 以 具 有 很 大 的 潜 在 传 播 性 7 近 几 年 国 内 外 在PMMoV 分 布 与 寄 主 范 围 检 测 方 法 基 因 序 列 分 析 与 亲 缘 关 系 研 究 抗 病 性 品 种 选 育 等 方 面 取 得 诸 多 重 要 进 展 笔 者 着 重 对 该 病 毒 上 述 方 面 进 行 了 总 结 提 出 存 在 的 问 题 和 发 展 方 向 以 期 为 今 后 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒病的研究提供理论参考 1 PMMoV 危害性与分布 PMMoV 属 于 帚 状 病 毒 科 Virgaviridae 烟 草 花 叶 病 毒 属 Tobamovirus 的 无 包 膜 正 单 链 RNA 病 毒 是 在 世 界 范 围 内 造 成 辣 椒 重 要 经 济 损 失 的 一 个 重 要 病 原 8 辣 椒 叶 片 在 被 侵 染 后 或 表 现 症 状 不 明 显 或 出 现 褪 绿 斑 驳 和 花 叶 症 状 植 株 生 长 明 显 变 缓 发 病 越 早 长 势 受 影 响 越 大 果 实 被 侵 染 后 的 症 状 较 为 明 显 表 现 为 果 小 果 面 有 褪 绿 斑 驳 凹 凸 斑 点 甚 至 出 现 畸 形 与 坏 死 现 象 PMMoV 可 随 带 病 的 辣 椒 进 入 人 体 经 过 消 化 排 出 人 体 后 仍 具 有 侵 染 活 性 9 PMMoV 最 早 于 1964 年 在 美 国 被 发 现 10 其 后 在 西 班 牙 德 国 澳 大 利 亚 阿 根 廷 匈 牙 利 荷 兰 加 拿 大 英 国 保 加 利 亚 韩 国 越 南 印 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒 研 究 的 回 顾 与 展 望 杨 中 周 1 邓 竹 根 1 李 曼 1 2 戴 祖 云 1 2 1 安徽江淮园艺种业股份有限公司 合肥 230031 2 安徽农业大学园艺学院 合肥 230036 摘 要 近 年 来 辣 椒 生 产 中 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒 Peppermildmottlevirus PMMoV 危 害 日 趋 严 重 并 影 响 到 辣 椒 的 品 质 和 产 量 综 述 了 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒 的 危 害 性 与 分 布 寄 主 范 围 在 寄 主 组 织 中 的 分 布 与 传 播 途 径 基 因 组 结 构 致 病 型 及 亲 缘 关 系 检 测 方 法 防 治 方 法 等 方 面 的 研 究 进 展 并 对 存 在 的 相 关 问 题 进 行 分 析 与 展 望 以 期 为 今 后 的PM MoV 防治与抗性品种选育提供借鉴和参考 关键词 辣椒 辣椒轻斑驳病毒 寄主范围 抗病育种 防治方法 中图分类号 S641 3 文献标志码 A 文章编号 1673 2871 2021 09 001 06 ReviewandprospectofresearchonPeppermildmottlevirus PMMoV YANGZhongzhou 1 DENGZhugen 1 LIMan 1 2 DAIZuyun 1 2 1 AnhuiJianghuaiHorticultureSeedsCo Ltd Hefei230031 Anhui China 2 CollegeofHorticulture AnhuiAgriculturalUniversity Hefei230036 Anhui China Abstract In recent years Pepper mild mottle virus PMMoV has become more and more serious in pepper production and affects pepper s quality and yield For this reason we summarize the harmfulness geographic distribution host range distributioninhosttissues transmission genomestructure pathotype phylogeneticrelationship detectionmethod preventionandcontrolofPMMoV Theprospectsandanalysisoftheexistingproblemsarealsodiscussedinordertopro videreferenceforthecontrolofPMMoVandbreedingofresistantvarietiesinthefuture Keywords Pepper Peppermildmottlevirus PMMoV Hostrange Resistancebreeding Preventionandcontrol 1 DOI 10 16861 ki zggc 2021 0226中 国 瓜 菜 第34 卷 专题综述 度 巴 基 斯 坦 塞 尔 维 亚 意 大 利 土 耳 其 捷 克 日 本 等 国 均 有 报 道 并 对 一 些 地 区 的 辣 椒 生 产 造 成 严 重 的 经 济 损 失 11 20 PMMoV 于1994 年 在 我 国 新 疆 石 河 子 地 区 被 首 次 报 道 21 至 今 黑 龙 江 哈 尔 滨 22 四 川 汶 川 23 安 徽 和 县 24 辽 宁 葫 芦 岛 25 26 辽 宁 凤 城 27 青 海 海 东 28 湖 南 29 吉 林 九 台 30 上 海 奉 贤 31 贵 州 绥 阳 8 新 疆 巴 州 32 北 京 33 山 东 寿 光 34 35 江 苏 南 京 36 河 北 保 定 37 广 西 38 广 东 39 海 南 40 云 南 41 宁 夏 42 西 藏 6 等 地 区 已 有 该 病 毒 的 相 关 报 道 2 PMMoV 的寄主范围 在 自 然 条 件 下 PMMoV 会 侵 染 辣 椒 因 此 辣 椒 也 首 次 被 报 道 为 PMMoV 系 统 侵 染 的 一 个 自 然 寄 主 以 往 认 为PMMoV 的 主 要 寄 主 包 括 茄 科 藜 科 和 苋 科 植 物 会 对 其 造 成 局 部 或 系 统 侵 染 43 近 些 年 随 着 全 国 对 蔬 菜 病 毒 病 的 调 查 和 诊 断 明 确 PMMoV 还 能 自 然 侵 染 茄 科 的 番 茄 葫 芦 科 的 南 瓜 黄 瓜 西 葫 芦 甜 瓜 豆 科 的 豇 豆 等 作 物 而 且 在 江 苏 葫 芦 科 蔬 菜 样 品 中 检 出 率 为83 33 并 与 其 他 病 毒 发 生 复 合 侵 染 的 频 率 高 且 范 围 广 未 发 现 PM MoV 自 然 侵 染 十 字 花 科 的 萝 卜 青 菜 大 白 菜 甘 蓝 油 菜 花 椰 菜 牛 皮 菜 芥 菜 青 花 菜 白 菜 薹 菜 薹 和 豆 科 菜 豆 大 豆 的 现 象 6 44 45 在 中 药 材 方 面 PMMoV 能 够 侵 染 延 龄 草 科 的 滇 重 楼 Paris poly phyllavar yunnanensis 使 其 出 现 花 叶 斑 驳 和 褪 绿 症状 46 3 PMMoV 在 寄 主 组 织 中 的 分 布 及 传 播途径 在 侵 染 辣 椒 以 后 PMMoV 在 辣 椒 的 叶 片 花 瓣 花 药 花 粉 粒 果 实 种 子 根 系 等 组 织 中 广 泛 分 布 47 然 而 不 同 的 组 织 器 官 间 含 量 有 差 异 对 同 一 个 组 织 器 官 来 说 又 存 在 分 布 的 不 均 一 性 比 如 叶 片 组 织 中 的 PMMoV 含 量 明 显 高 于 种 子 中 的 含 量 在 叶 肉 细 胞 中 的 含 量 明 显 高 于 叶 脉 且 集 中 分 布 于 叶 肉 细 胞 的 栅 栏 组 织 中 其 次 是 海 绵 组 织 表 皮 组 织 中 仅 有 少 量 分 布 在 种 子 中 又 主 要 集 中 在 种 皮 其 次 是 胚 乳 靠 近 种 皮 的 部 分 而 胚 中 无 分 布 48 49 PMMoV 虽 在 植 物 间 不 易 介 体 传 播 但 鉴 于 其 在 植 物 体 中 的 分 布 情 况 该 病 毒 很 容 易 通 过 种 传 和 汁 液 摩 擦 传 播 带 毒 的 种 子 以 及 被 感 染 的 植 株 是 重 要 的 传 染 源 其 中 种 子 和 花 粉 带 毒 是 其 远 距 离 传播的主要途径 48 50 4 PMMoV 的基因组结构 PMMoV 病 毒 粒 体 呈 直 杆 状 基 因 组 长6356bp 共 有4 个 开 放 阅 读 框 Openreadingframes ORFs 编 码4 个 蛋 白 质 ORF1 70 3423nt 编 码1 个 全 长 1117 aa 分 子 质 量 为 126 kDa 的 蛋 白 质 包 含 甲 基 转 移 酶 和 RNA 螺 旋 酶 区 ORF2 70 4908 nt 编 码 1 个 全 长1613aa 分 子 质 量 为183kDa 的 蛋 白 质 包 括 RNA 复 制 酶 区 ORF3 4909 5682 nt 编 码 一 个 257 aa 分 子 质 量 约 为 28 kDa 与 病 毒 移 动 相 关 的 运 动 蛋 白 ORF4 5685 6158nt 编 码1 个157aa 分 子 质 量 约 为17kDa 用 于 保 护 病 毒 核 酸 且 参 与 侵 染 的 外 壳 蛋 白 ORF1 阅 读 框 终 止 于 琥 珀 密 码 子 UAG 约 有 10 的 概 率 可 通 读 ORF2 ORF1 和 ORF2 所 编 码 的 蛋 白 质 与 病 毒 RNA 复 制 以 及 维 管 束 运 动 有 关 PMMoV 的 3 末 端 和 烟 草 花 叶 病 毒 属 的 其 他 成 员 一 样 具 有 类 似 t RNA 状 的 二 级 结 构 29 46 51 5 PMMoV 的 致 病 型 及 各 分 离 物 之 间 的亲缘关系 L 1 L 2 L 3 L 4 四 个L 系 列 等 位 基 因 是 辣 甜 椒 抗 烟 草 花 叶 病 毒 属 病 毒 的 主 要 抗 性 基 因 52 根 据 烟 草 花 叶 病 毒 属 病 毒 对 四 种 L 抗 性 基 因 的 致 病 性 可 将 该 属 病 毒 划 分 成P0 P1 P1 2 P1 2 3 P1 2 3 4 五 种 致 病 基 因 型 目 前 国 际 上 将 发 现 的PMMoV 致 病 基 因 型 分 为P1 2 P1 2 3 P1 2 3 4 三 种 而 中 国 大 陆 辽 宁 北 京 山 东 青 岛 河 北 保 定 新 疆 等 地 的 分 离 物 都 属 于P1 2 致 病 基 因 型 而 中 国 台 湾 的 分 离 物 属 于P1 2 3 致 病 基 因 型 从 台 湾 进 口 的 种 子 检 测 的 结 果 也 证 实 了 这 点 32 51 53 54 P1 2 致 病 型 病 毒 株 系 能 够 系 统 侵 染 带 有L 1 L 2 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 而 带 有L 3 L 4 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 对 该 病 毒 株 系 表 现 有 抗 性 P1 2 3 致 病 型 病 毒 株 系 能 够 系 统 侵 染 带 有 L 1 L 2 L 3 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 带 有L 4 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 对 该 病 毒株 系表 现有 抗性 P1 2 3 4 致病 型病 毒株 系能 够攻 克 L 4 基 因 抗 性 从 进 化 关 系 来 看 P1 2 3 与 P1 2 3 4 分 别 是由P1 2 和P1 2 3 正向选择进化而来 近 几 年 随 着 越 来 越 多 分 离 物 的 全 基 因 序 列 在 GenBank 上 登 录 更 多 的 基 础 信 息 为 人 们 所 知 研 究 者 们 开 始 对 这 些 序 列 进 行 同 源 性 分 析 和 系 统 进 化 分 析 以 期 探 索 各 分 离 物 之 间 的 亲 缘 关 系 解 决 更 深 层 次 的 进 化 问 题 李 丽 丽 等 22 的 研 究 结 果 显 示 PMMoV 中 国 分 离 物Hrb 与GenBank 中 已 报 道 2第9 期 等 辣椒轻斑驳病毒研究的回顾与展望 专题综述 的 其 他 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒 基 因 组 序 列 的 同 源 性 为 94 0 99 6 基 于 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒 基 因 组 运 动 蛋 白 及 外 壳 蛋 白 序 列 的 系 统 进 化 分 析 结 果 显 示 Hrb 与 日 本 分 离 物 PMMoV J C 1421 Pa18 TPO 2 19 亲 缘 关 系 较 近 与 西 班 牙 分 离 物 PM MoV Ia 亲 缘 关 系 较 远 杨 林 毅 等 46 将 中 国 云 南 曲 靖 分 离 物 PMMoV QJ 与 10 个 PMMoV 分 离 物 基 因 全 序 列 进 行 比 对 分 析 结 果 显 示 同 源 性 为 99 42 99 81 同 源 性 较 高 PMMoV QJ 与 中 国 辽 宁 葫 芦 岛 分 离 物 PMMoV Huludao 2 个 韩 国 分 离 物 PMMoV LS 和 PMMoV RP 的 亲 缘 关 系 较 近 韩 帅 等 23 的 研 究 结 果 显 示 中 国 四 川 汶 川 分 离 物PMMoV WC 与 中 国 北 京 分 离 物PMMoV CN 亲 缘 关 系 较 近 而 与 西 班 牙 分 离 物PMMoV Ia 亲 缘 关 系 较 远 严 丹 侃 等 24 将 安 徽 和 县 的 分 离 物 PM MoV AH 与12 个 国 内 外PMMoV 分 离 物 的 外 壳 蛋 白 基 因 序 列 进 行 系 统 发 育 分 析 发 现 PMMoV AH 与 包 括 PMMoV CN 在 内 的 9 份 亚 洲 分 离 物 的 亲 缘 关 系 较 近 而 与 西 班 牙 分 离 物 PMMoV Ia 意 大 利 分 离 物PMMoV I 和 以 色 列 分 离 物PMMoV Is 亲 缘 关 系 较 远 刘 湘 宁 等 29 通 过 一 致 性 分 析 发 现 湖 南 辣 椒 分 离 物 PMMoV HN1 与 17 种 PMMoV 病 毒 分 离 物 的 一 致 性 在94 2 99 7 之 间 系 统 进 化 分 析 显 示 PMMoV HN1 与 PMMoV CN 的 亲 缘 关 系 最 近 与 PMMoV Ia 和 韩 国 分 离 物 PMMoV P3 亲 缘 关 系 较 远 竹 怀 婷 等 27 的 研 究 表 明 辽 宁 凤 城 分 离 物 的PMMoV FC 与9 个PMMoV 分 离 物 序 列 同 源 性 为 94 4 99 7 同 源 性 很 高 PMMoV FC 与 6 个 来 自 中 国 日 本 韩 国 和 美 洲 的 分 离 物 亲 缘 关 系 较 近 而 与 PMMoV Ia 和 PMMoV P3 相 对 较 远 李 晓 冬 等 26 分 析 了 辽 宁 分 离 物PMMoV LN 与 13 个 国 内 外 PMMoV 分 离 物 的 同 源 性 结 果 显 示 其 同 源 性 为 94 100 系 统 进 化 分 析 表 明 PM MoV LN 和10 份 来 自 于 亚 洲 的 分 离 物 亲 缘 关 系 密 切 且 与 国 内 分 离 物 具 有 相 同 的 进 化 祖 先 而 与 PMMoV I PMMoV Is PMMoV Ia 亲 缘 关 系 较 远 王 少 立 等 34 认 为 中 国 山 东 分 离 物 SD60 与 中 国 贵 州 分 离 物 KC571248 的 相 似 性 最 高 且 亲 缘 关 系 最 近 而 与 以 色 列 分 离 物 EF422083 土 耳 其 分 离 物 HE963028 和 西 班 牙 分 离 物HG514455 等 亲 缘 关 系 较 远 总 体 而 言 中 国 分 离 物 之 间 普 遍 存 在 较 高 的 同 源 性 且 与 许 多 亚 洲 美 洲 分 离 物 之 间 的 亲 缘 关 系 较 近 而 与 西 班 牙 意 大 利 以 色 列 的 分 离 物 之 间 的 亲 缘 关 系 较 远 6 PMMoV 的检测方法 国 内 外 对PMMoV 检 测 的 方 法 有 生 物 学 方 法 电 镜 技 术 血 清 学 测 定 法 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 和 以 核 酸 为 基 础 的 分 子 生 物 学 测 定 法 RT PCR 和 实 时 荧 光 RT PCR 法 目 前 以 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 法 ELISA 和RT PCR 法最为常用 通 过 鉴 定 寄 主 反 应 与 范 围 交 叉 保 护 反 应 和 传 毒 方 式 进 行 植 物 病 毒 病 诊 断 的 生 物 学 方 法 是 植 物 病 毒 检 测 的 传 统 技 术 该 技 术 是 其 他 方 法 的 重 要 基 础 具 有 直 观 的 特 点 曾 被 广 泛 应 用 21 然 而 该 技 术 具 有 需 要 隔 离 温 室 种 植 大 量 鉴 别 寄 主 检 测 样 品 数 量 有 限 耗 时 长 受 环 境 和 季 节 影 响 较 大 等 劣 势 已 经 无 法 满 足 当 前 大 批 量 的 快 速 诊 断 和 田 间 检 测需求 结 合 超 薄 切 片 负 染 色 和 血 清 学 电 镜 技 术 可 直 观 地 观 察 病 毒 粒 体 的 形 态 结 构 和 寄 主 细 胞 的 结 构 变 化 21 特 别 是 结 合 血 清 学 技 术 之 后 电 镜 技 术 更 加 灵 敏 成 为 植 物 病 毒 研 究 的 一 个 重 要 手 段 然 而 该 项 技 术 需 要 人 员 具 有 较 强 的 专 业 知 识 背 景 且 设 备 昂 贵 在 实 际 检 测 中 使 用 频 率 也 相 较 ELISA 和 RT PCR 低 因 此 在 实 际 大 批 量 病 毒 检 测 中 运 用 较 少 采 用 固 相 吸 附 将 免 疫 反 应 和 酶 高 效 催 化 反 应 有 机 结 合 的ELISA 具 有 操 作 简 单 检 测 时 间 短 灵 敏 性 高 特 异 性 强 等 特 点 目 前 在 蔬 菜 种 苗 的 PM MoV 检 测 中 发 挥 重 要 作 用 8 27 32 46 54 在 野 外 工 作 中 也 可 使 用PMMoV 胶 体 金 免 疫 层 析 试 纸 条 对 样 本进行快速检测 24 RT PCR 是 以PCR 为 基 础 的 衍 生 技 术 该 项 技 术 相 较ELISA 具 有 更 高 的 灵 敏 度 7 更 强 的 特 异 性 同 时 可 以 突 破 血 清 学 方 法 的 局 限 能 够 鉴 定 同 种 病 毒 的 不 同 株 系 目 前 该 项 技 术 已 被 大 量 地 运 用 到 PMMoV 检 测 中 22 28 30 32 43 46 54 郭 京 泽 等 55 所 建 立 PMMoV 实 时 荧 光 PCR 检 测 方 法 灵 敏 度 是 DAS ELISA 法 的100 倍 且 检 测 简 便 快 速 能 够 很 好地满足种苗快速诊断和进出口检验检疫需求 7 PMMoV 的防治方法 PMMoV 具 有 种 传 特 性 带 毒 种 子 是 病 毒 长 距 离 传 播 的 重 要 途 径 另 外 PMMoV 可 随 辣 椒 制 品 进 入 人 体 体 内 经 消 化 排 出 后 仍 具 有 侵 染 活 性 9 56 鉴 于 此 加 强 种 子 及 辣 椒 制 品 的 检 疫 是 防 治 其 快 速 蔓 延 的 重 要 途 径 开 展 抗 病 育 种 是 防 治 该 病 毒 的 最 有 效 方 式 之 一 L 系 列 等 位 基 因 L 1 L 2 杨中周 3中 国 瓜 菜 第34 卷 专题综述 L 3 L 4 是 抗 烟 草 花 叶 病 毒 属 Tobamovirus 的 主 要 抗 性 基 因 52 L 3 和 L 4 基 因 对 国 内 的 PMMoV 致 病 型 P1 2 具有 抗性 已在 国内 外辣 甜 椒抗 烟草 花叶 病毒 属 育 种 上 得 到 应 用 Hiroshi 等 57 发 现WA31 1500S 与L 4 紧 密 连 锁 遗 传 距 离 在1 5cM 以 内 该 标 记 可 以 用 于 抗 性 资 源 的 筛 选 张 宝 玺 等 41 58 59 构 建 了 与 L 3 L 4 等 抗 性 性 状 紧 密 连 锁 的 分 子 标 记 并 通 过 回 交 转 育 结 合 分 子 标 记 辅 助 选 择 选 育 出 含 有L 3 抗 性 的 甜 椒 品 种 并 将 L 4 基 因 也 转 育 到 多 份 自 交 系 材 料 中 以期望解决商业种植中的抗病问题 此 外 常 规 种 子 及 土 壤 消 毒 处 理 也 是 有 效 的 保 护 措 施 随 着 溴 甲 烷 MeBr 用 于 包 括 PMMoV 在 内 的 土 传 病 毒 病 熏 蒸 消 毒 的 方 法 被 禁 止 一 些 新 的 方 法 被 挖 掘 出 来 如 Jarret 等 60 的 研 究 表 明 用 10 磷 酸 三 钠 TSP 室 温 下 处 理 PMMoV 感 染 的 辣 椒 种 子2 5h 可 以 钝 化 病 毒 用10 TSP 处 理24h 可 使 2 3 的 供 试 材 料 去 除 PMMoV 由 于 PMMoV 能 侵 染 藜 科 苋 科 植 物 而 在 藜 科 和 苋 科 植 物 中 多 数 成 员 都 是 田 间 杂 草 故 而 很 可 能 田 间 杂 草 上 也 存 在 着PMMoV 因 此 对 田 间 杂 草 连 同 田 间 感 病 作 物 进 行 清 理 消 毒 显 得 尤 为 重 要 Aguilar 等 61 的 研 究 显 示 在 西 班 牙 东 南 部 堆 肥 中 的 高 温 范 围 在61 9 73 8 长 时 间 的 高 温 使 得 病 毒 和 真 菌 不 能 存 活 使 用 PMMoV 感 染 的 植 物 残 体 作 为 有 机 改 良 剂 的 堆 肥 似 乎 没 有 将 病 原 体 重 新 引 入 土 壤 的 风 险 适 合 通 过 堆 肥 从 被 感 染 的 作 物 残 体 中 充 分 清 除PMMoV 病原体 除 以 上 方 法 也 可 以 通 过 农 事 操 作 中 的 一 些 措 施 来 减 少 PMMoV 感 染 的 概 率 巨 大 芽 孢 杆 菌 Bacillusmegaterium 和 皮 氏 罗 尔 斯 通 氏 菌 Ralsto nia pickettii 的 混 悬 液 浸 根 能 有 效 地 抑 制 土 传 PM MoV 病 害 62 食 油 假 单 胞 菌 Pseudomonas oleov orans 菌 株KBPF 004 对 烟 草 病 毒 的 机 械 传 播 具 有 抗 病 毒 活 性 63 Oka 等 64 发 现 商 业 纤 维 素 酶 对 植 物 PMMoV 感 染 有 很 强 的 抑 制 作 用 用 纤 维 素 酶 溶 液 对 甜 椒 叶 片 进 行 预 处 理 可 大 大 减 少PMMoV 感 染 植 株 的 数 量 注 重 对 农 事 操 作 的 机 械 器 具 的 消 毒 适 当 减 少 移 栽 时 的 根 部 受 损 和 采 收 时 的 植 株 受 伤 能 够 明 显 降 低 病 毒 传 播 概 率 65 Rie 等 66 利 用 减 毒PMMoV 分 离 物 的 交 叉 保 护 作 用 提 高 已 接 种 辣椒植株的抗性 获得了较好的经济效益 8 问题与展望 随 着 种 子 贸 易 和 种 质 资 源 交 流 的 日 益 频 繁 PMMoV 已 经 成 为 一 个 世 界 性 病 害 严 重 威 胁 着 辣 椒 的 生 产 在 国 内 其 分 布 范 围 也 在 逐 年 扩 大 在 一 些 地 区 已 上 升 为 主 要 病 毒 种 类 相 关 寄 主 越 来 越 多 的 被 报 道 出 来 之 前 认 为 不 会 被 感 染 的 一 些 作 物 现 在 也 成 为 了 它 的 寄 主 如 番 茄 和 葫 芦 科 的 南 瓜 西 葫 芦 黄 瓜 甜 瓜 等 目 前 中 国 大 陆 的 致 病 型 是 P1 2 而 从 中 国 台 湾 进 口 的 种 子 里 检 测 到 的 致 病 型 是P1 2 3 GenBank 中 更 能 查 询 到 西 班 牙 意 大 利 以 色 列 的P1 2 3 致 病 型 和 以 色 列 的P1 2 3 4 致 病 型 鉴 于 此 应 加 强 种 苗 的 检 测 与 检 疫 工 作 将 PMMoV 作 为 检 疫 对 象 列 入 进 境 植 物 检 疫 性 有 害 生 物 名 录 控 制 好 侵 染 源 头 避 免 致 病 性 更 强 的 病 毒 扩 散 蔓延 目 前 对 于 病 毒 病 最 常 用 的 种 子 消 毒 方 法 是 磷 酸三钠 TSP 法 然而用TSP 处理种子 只能钝化病 毒 不 能 消 除 病 毒 的 侵 染 性 长 时 间 的TSP 处 理 虽 可 使 部 分 种 子 去 除 PMMoV 却 降 低 了 辣 椒 种 子 的 发 芽 率 显 著 增 加 异 常 苗 数 量 60 当 前 急 需 一 套 既 能 有 效 消 除 PMMoV 侵 染 能 力 又 不 至 于 明 显 降 低 种 子 发 芽 势 和 发 芽 率 的 消 毒 方 法 为 种 子 的 长 距 离 调运保驾护航 选 育 抗 病 品 种 无 疑 是 最 为 高 效 经 济 绿 色 环 保 便 于 推 广 的 对 抗 病 毒 病 的 手 段 近 些 年 无 论 是 国 外 还 是 国 内 辣 椒 抗PMMoV 的 研 究 从 病 害 检 测 资 源 引 进 标 记 开 发 新 品 种 选 育 都 有 了 长 足 发 展 育 种 家 通 过 轮 回 选 择 和 分 子 标 记 辅 助 选 择 培 育 出 一 批 含 有L 3 抗 性 基 因 的 商 业 品 种 L 3 抗 性 基 因 虽 然 对 P1 2 致 病 型 有 抗 性 但 因 有 抗 性 基 因 的 压 力 P1 2 致 病 型 会 发 生 基 因 突 变 攻 克L 3 抗 性 使 得 原 先 的 抗 病 品 种 重 新 感 病 接 着 育 种 家 会 选 择 利 用 抗 性 更 强 的L 4 抗 性 基 因 选 育 新 品 种 如 此 交 替 进 行 如 何 使 品 种 获 得 持 久 的 抗 病 性 是 需 要 育 种 家 认 真 考 虑 的 问 题 一 方 面 需 要 寻 找 鉴 定 出 有 别 于 L 系 列 等 位 基 因 的 新 抗 源 拓 宽 遗 传 背 景 并 加 以 利 用 另 一 方 面 可 以 将 更 多 不 同 背 景 的 抗 性 基 因 聚 到 一 个 品 种 中 使 得 病 原 株 系 很 难 通 过 一 个 位 点 的 突 变而攻克品种抗性 近 些 年 随 着 国 内 外 越 来 越 多 的PMMoV 分 离 物 的 基 因 组 全 序 列 被 公 布 开 展 分 子 变 异 特 点 等 基 础 性 的 研 究 工 作 可 为 今 后 研 究 病 毒 扩 散 和 有 效 防 控提供理论指 导 参考文献 1 郑 井 元 李 雪 峰 周 书 栋 等 2017 年 度 辣 椒 科 学 研 究 进 展 J 中国蔬菜 2018 5 9 15 4第9 期 等 辣椒轻斑驳病毒研究的回顾与展望 专题综述 2 王 立 浩 马 艳 青 张 宝 玺 我 国 辣 椒 品 种 市 场 需 求 与 育 种 趋 势 J 中国蔬菜 2019 8 1 4 3 杨 中 周 我 国 辣 椒 品 种 选 育 进 展 与 展 望 J 中 国 瓜 菜 2017 30 5 1 6 4 MOURY B VERDIN E Viruses of pepper crops in the Medi terranean basin a remarkable stasis M Advances in Virus Research 2012 84 127 162 5 KENYON L TSAIWS SHIH S L et al Emergence and diver sity of begomoviruses infecting solanaceous crops in East and SoutheastAsia J VirusResearch 2014 186 104 113 6 刘 勇 李 凡 李 月 月 等 侵 染 我 国 主 要 蔬 菜 作 物 的 病 毒 种 类 分布与发生趋势 J 中国农业科学 2019 52 2 239 261 7 WANG Y LI X LIU Y et al Development of a simple and effective method for specific detection of Pepper mild mottle virus J ActaVirologica 2009 53 1 21 27 8 郑 兴 华 洪 鲲 杨 立 昌 等 贵 州 辣 椒 轻 斑 驳 病 毒 分 离 物 的 分 子 鉴定 J 贵州农业科学 2013 41 5 30 32 9 COLSON P RICHET H DESNUES C et al Pepper mild mottle virus a plant virus associated with specific immune responses fever abdominal pains and pruritus in humans J PlosOne 2010 5 3 10041 10 GREENLEAF W H COOK AA HEYN A N J Resistance to Tobacco mosaic virus in Capsicum with reference to the Sam sunlatentstrain J Phytopathology 1964 54 11 1367 1371 11 KWON S J CHO I S YOON J Y et al Incidence and occur rencepatternofvirusesonpeppersgrowinginfieldsinKorea J ResearchinPlantDisease 2018 24 1 66 74 12 SYMONDSEM SINIGALLIANOC GIDLEYM etal Faecal pollution along the southeastern coast of Florida and insight into the use of Pepper mild mottle virus as an indicator J Journal of appliedmicrobiology 2016 121 5 1469 1481 13 SHARMA P N PATIYAL K RIALCH N et al Association of virus complex with Capsicum under protected cultivation in himachal pradesh and implications in their management J HimachalJournalofAgriculturalResearch 2016 42 1 47 51 14 AHMAD A TIBERINI A ASHFAQ M et al First report of Pepper mild mottle virus infecting chilli pepper in Pakistan J NewDiseaseReports 2015 32 1 31 15 MILOSEVIC D STANKOVIC I BULAJIC A et al Detection and molecular characterization of Pepper mild mottle virus in Serbia J Genetika 2015 47 2 651 663 16 CRESCENZI A VIGGIANO A FANIGLIULO A Resistance breaking Tomato spotted wilt virus isolates on resistant pepper varieties in Italy J Communications in Agricultural and AppliedBiologicalSciences 2013 78 3 609 612 17 BEHCETK HAKAN F TOUFIC E Detection and molecular characterization of Pepper mild mottle virus from Turkey J JournalofPhytopathology 2013 161 6 432 438 18 SVOBODAJ SVOBODOVA LEISOVAL Occurrenceofviruses on pepper plantations in the Czech Republic Short communica tion J HorticulturalScience 2012 39 3