番茄砧木材料的筛选与青枯病抗性鉴定_莫豪葵_秦东_李业勇_等.pdf

番 茄砧木材料的筛选与青枯病抗性鉴定 莫豪葵 1 秦东 1 李业勇 1 李玉洪 1 刘春长 1 王先裕 2 1 广西桂林市蔬菜研究所 541004 2 广西大学 近十年来 蔬菜嫁接技术和应用在全球范围有 了突飞猛进的发展 1 这对提高蔬菜产量及防止土 传病害的发生起到了很大的作用 同时很大程度上 减少了农药用量 对农产品安全生产及环境保护有 着重要的意义 番茄是主要的蔬菜之一 全国大部分地区均有 种植 番茄青枯病是影响番茄生产的主要病害之 一 特别是华南地区 由于高温高湿的气候条件 番 茄青枯病发生极为普遍 严重时造成绝收 严重影 响了番茄产业的发展 目前 番茄青枯病无免疫品 种也无特效药剂 2 最有效的防治方法是选用抗青 枯病品种以及利用高抗番茄青枯病的材料作砧木 进行嫁接种植 而抗青枯病的番茄品种其经济性状 往往不如人意 3 实践证明 采用嫁接种植是目前最 有效的防治番茄青枯病的办法 因此 番茄砧木品 种的选育越来越受到人们重视 不仅是抗青枯病的 研究 抗根结线虫砧木的研究也越来越多 5 7 在番 茄抗青枯病研究方面 美国与日本早在 20 世纪 70 年代就已经选育出抗青枯病的番茄砧木品种 8 我 国番茄砧木的研究起步较晚 4 总体水平落后于国 外 番茄砧木品种材料相对较少 作为砧木品种不 仅要有较强的抗性 还要有较强的嫁接亲和性和共 生性 因此 本文对广泛收集的番茄品种进行了抗 青枯病的接种鉴定和田间鉴定 同时与 3 个不同的 接穗品种进行嫁接试验 进一步确定砧木高抗青枯 病特性以及较强的嫁接亲和性与共生性 以期筛选 出多抗且具有较强亲和性与共生性的番茄材料 培 育优质番茄砧木品种 更好地为农业生产服务 1 材料与方法 1 1 抗青枯病番茄材料的筛选 桂林市蔬菜研究所科研基地位于桂林市郊 由 于多年连续种植茄科类作物 该基地已成为番茄青 枯病重灾区 不抗病的番茄品种在这里种植 青枯 病感病率在 80 以上 甚至绝收 这正好为筛选抗 青枯病的番茄砧木材料提供了理想的自然筛选场 所 自 2002 年起通过各种渠道共收集各种番茄品 种材料 500 余份 并逐一试种 对抗性强的品种材 料进行自交繁育单株留种 到 2010 年共获得稳定 的抗青枯病自交系番茄砧木材料 26 份 包含了不 同植株形态特征 器官大小 果实类型和颜色 为番 茄砧木品种的选育提供了丰富的品种资源 1 2 抗性材料的青枯病抗性鉴定 青枯病菌接种鉴定 该鉴定由广西农科院植 保所完成 A 材料 番茄材料从筛选的材料中选 出 共 8 份 编号分别为 TA04 TA06 TA08 TA10 TA17 TA18 TB12 TB52 另选用比斯塔 推广的番 基金项目 桂林市科技攻关项目 番茄砧木优良株系父母本 筛选 合同编号 20110310 国家大宗蔬菜产业技术体 系桂林综合试验站任务 CARS 25 C 37 莫豪葵 1963 硕士 助理研究员 主要从事蔬菜品种选育 及推广服务工作 电话 13907837620 E mail 13907837620 收稿日期 2013 08 28 摘 要 通过广泛收集番茄品种资源 在番茄青枯病区进行自然筛选 采用系统育种方法获得多份 6 代以上稳定的 相对抗青枯病的自交系材料 将其中 8 份材料进行青枯病菌接种试验 筛选出 5 份高抗番茄青枯病材料 将筛选出 的 5 份材料在青枯病重灾区作重复对比试验 并与 3 个不同的接穗品种进行嫁接试验 进一步确定其高抗青枯病特 性以及较强的嫁接亲和性与共生性 多项试验证明 筛选的 5 份材料完全可以作为番茄砧木材料或品种进一步研究 利用或推广使用 关键词 番茄砧木 筛选 青枯病 鉴定 JOURNAL OF CHANGJIANG VEGETABLES 下半月刊 2013 24 54 58 DOI 10 3865 j issn 1001 3547 2013 24 021 中图分类号 S436 412 1 5 文献标识码 A 文章编号 1001 3547 2013 24 00054 05 54 0 1 2 3 4 1 砧木一 号 抗 病对 照 4 0 0 1 5 60 6 0 0 0 4 40 3 0 0 1 6 70 4 0 0 2 4 60 2 TA06 8 0 0 0 2 20 7 0 0 0 3 30 9 0 0 0 1 10 8 0 0 0 2 20 3 TA04 9 0 0 0 1 10 9 0 0 0 1 10 9 0 1 0 0 10 8 0 0 0 2 20 4 TA08 8 0 0 1 1 20 9 0 0 0 1 10 8 0 0 0 2 20 10 0 0 0 0 0 5 TA10 8 0 0 0 2 20 9 0 0 0 1 10 9 0 0 0 1 10 8 0 0 0 2 20 编 号 材料 名称 重复 发病级别 发病 率 57 50 20 00 12 50 12 50 15 00 平均发 病率 表 2 番茄砧木材料青枯病调查 编 号 材料 名称 重复 发病级别 发病率 平均发 病率 0 1 2 3 4 6 TA18 8 0 0 0 2 20 17 50 8 0 0 0 2 20 9 0 0 0 1 10 8 0 0 0 2 20 7 TA17 0 0 0 4 6 100 97 50 0 0 0 1 9 100 0 0 0 6 4 100 1 0 0 5 4 90 8 TB12 0 0 0 1 9 100 100 00 0 0 0 2 8 100 0 0 2 4 4 100 0 0 1 5 4 100 9 TB52 4 0 0 2 4 60 47 50 6 0 0 1 3 40 7 0 0 1 2 30 4 0 0 0 6 60 10 比斯 塔 感 病对 照 0 0 0 0 10 100 100 00 0 0 0 0 10 100 0 0 0 0 10 100 0 0 0 0 10 100 茄品种 作感病对照 砧木一号 广泛使用的番茄砧 木品种 作为抗病对照 供试菌株为广西农业科学院植物保护研究所 保存的番茄青枯菌 NN02 分离自感染番茄青枯病 的植株 接种前先将保存的菌株在选择性培养基上 进行活化 筛选出有毒性的单菌落扩繁备用 B 鉴定方法 a 接种方法 接种用菌株采用 PDA 培养基平板培养 菌龄 2 d 接种液用灭菌水配制 采用伤根灌菌液法进行接种鉴定 即于番茄移栽后 20 d 真叶 10 12 片时 在距离番茄植株根部 2 4 cm 处 进 行 伤 根 处 理 然 后 每 株 番 茄 灌 淋 浓 度 为 1 10 7 cfu mL 的番茄青枯菌液 50 mL b 调查方法 接种 20 d 后当感病对照已充分发 病时按番茄青枯病分级标准 表 1 进行调查 番茄材料于 2012 年 8 月 20 日播种 8 月 30 日 移栽到花盆中 每个花盆移植 5 株 每小区 2 盆 共 10 株 重复 4 次 9 月 19 日进行伤根接种 10 月 9 日进行调查 青枯病抗性现场鉴定 a 材料 根据接种鉴 定的结果 选出 5 个抗性较强的砧木材料 编号分 别为 TA04 TA06 TA08 TA10 TA18 以及抗性对 照品种砧木一号与感病对照品种吉奥 桂林市蔬莱 研究所推广的番茄栽培品种 b 方法 2013 年春季将上述品种材料安排在桂 林市蔬莱研究所科研基地种植 每个品种设 3 次重 复 每个重复种植 34 株 随机排列 播种时间为 2012 年 12 月 18 日 定植时间为 2013 年 3 月 3 日 正常管理 青枯病发生后按青枯病为害分级标准 表 1 每隔 5 d 调查感病株数 统计感病率及病情 指数 1 3 亲和性与共生性鉴定 材 料 以 筛 选 出 的 抗 青 枯 病 材 料 TA04 TA06 TA08 TA10 TA18 为砧木 以番茄栽培品种 吉奥 亨利 均为推广品种 及 108 号番茄 新配组 合 为接穗品种 1 级 植株顶端个别叶枝萎蔫 2 级 全株 1 3 的枝叶自上而下萎蔫 早晚有恢复能力 3 级 全株 1 2 的枝叶萎蔫 无恢复能力 4 级 全株枝叶萎蔫枯死 表 1 广西农作物主要病虫测排技术 番茄青枯病分级标准 0 级 无病状表现 分级 症状 下半月刊 2013 2455 病 株 数 感病 率 病情 指数 病 株 数 感病 率 病情 指数 病 株 数 感病 率 病情 指数 病 株 数 感病 率 病情 指数 病 株 数 感病 率 病情 指数 平均 感病 率 TA04 2 5 9 5 9 4 11 8 11 0 5 14 7 12 5 8 23 5 22 1 13 38 2 28 7 16 6 1 2 9 2 9 0 0 0 0 0 0 2 5 9 5 1 2 5 9 5 9 0 0 0 1 2 9 2 2 1 2 9 2 9 1 2 9 2 9 2 5 9 5 9 TA06 0 0 0 1 2 9 2 9 1 2 9 2 9 1 2 9 2 9 2 5 9 5 9 7 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 9 2 9 2 5 9 5 1 2 5 9 5 9 6 17 6 16 2 TA08 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 8 8 8 0 3 8 8 8 8 2 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 TA10 0 0 0 1 2 9 2 9 3 8 8 8 0 8 23 5 21 3 13 38 2 36 0 13 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 9 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 TA18 0 0 0 2 5 9 4 4 4 11 8 10 3 4 11 8 11 8 5 14 7 14 7 6 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 9 2 9 2 5 9 5 9 2 5 9 5 9 砧木 一号 2 5 9 5 9 2 5 9 5 9 3 8 8 8 0 6 17 6 16 9 8 23 5 22 1 12 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 9 2 9 2 5 9 5 9 0 0 0 0 0 0 1 2 9 2 2 1 2 9 2 9 3 8 8 8 1 4 11 8 11 0 7 20 6 19 1 12 35 3 32 4 21 61 8 54 6 27 79 4 77 9 77 4 0 0 0 4 11 8 11 8 8 23 5 22 1 13 38 2 36 0 18 52 9 50 7 平均 感病 率 2 9 0 0 0 0 2 0 8 8 平均 感病 率 4 9 1 9 0 1 0 2 0 2 0 28 4 平均 感病 率 5 9 2 9 0 2 9 4 9 3 9 42 1 平均 感病 率 10 8 2 9 2 9 7 8 5 9 7 8 63 7 品种 重复 5 月 10 日 5 月 15 日 5 月 20 日 5 月 25 日 5 月 30 日 表 3 番茄砧木材料种植现场青枯病调查 吉奥 5 14 7 13 2 18 52 9 50 0 23 67 6 61 8 31 91 2 82 7 34 100 96 2 注 调查总株数为 34 株 病情指数 病株级数 病株数 总株数 4 100 试验方法 以砧木材料 TA04 TA06 TA08 TA10 TA18 分别嫁接吉奥 亨利 108 号 3 个接穗 品种 2012 年 12 月 18 日播种 2013 年 2 月 28 日 嫁接 3 月 14 日定植 定植前调查成活率 一畦定植 两行 其中一行为嫁接苗 另一行为对应接穗品种 实生苗 对照 随机排列 每个处理定植 30 株 试验期间调查株高 果形 单果质量 产量 每 个处理及对照定点 5 株 测量所有成熟果性状 统 计汇总 2 结果与分析 2 1 青枯病菌接种鉴定 接种后 20 d 感病对照品种比斯塔的植株全部 发病 且病级全部达最高级 4 级 供试砧木材料中 未见有免疫的材料 所有砧木均有植株发病 发病 植株的发病级别大多在 3 4 级 表 2 从 发 病 率 看 8 个 砧 木 材 料 中 TA04 TA08 TA10 TA18 和 TA06 这 5 个材料的抗性明显好于 抗病对照品种砧木一号 其中以 TA04 和 TA08 的 发病最轻 发病率均为 12 50 其次为 TA10 发病率 为 15 00 TA18 和 TA06 的发病率也较轻 分别为 17 50 和 20 00 其余材料发病率均较重 抗病对 照砧木一号的发病率为 57 50 未表现出高抗病 的特性 可见 TA04 TA08 TA10 TA18 TA06 的青 枯病抗性明显优于抗病对照品种砧木一号 表现出 较强的青枯病抗性 2 2 青枯病抗性田间鉴定 从种植现场看 5 月 5 日感病对照吉奥开始出 现青枯病株 5 月 10 日开始调查记录 5 月 25 日聘 请广西农业科学院植物保护研究所等单位有关专 家组成的专家组进行了青枯病抗性鉴定 从田间调 查结果 表 3 看 7 个品种材料中 感病对照品种吉 奥青枯病发生率明显高于其他砧木品种材料 到 5 月 30 日 3 个重复总感病率平均达到 77 4 其中 第 3 个重复为 100 筛选的 5 份材料到 5 月 30 日 青枯病发生率分别为 TA08 2 9 TA18 6 8 TA06 2013 24 莫豪葵 等 番茄砧木材料的筛选与青枯病抗性鉴定 56 TA04 108 97 6 13 3 165 142 3 微扁形 5 271 吉奥 95 0 17 7 175 181 2 近圆形 5 662 亨利 100 0 23 3 160 132 6 扁圆形 3 313 TA06 108 97 6 0 160 138 6 微扁形 6 720 吉奥 91 9 3 3 170 175 4 近圆形 6 034 亨利 94 1 6 7 160 126 7 扁圆形 5 523 TA08 108 92 3 6 7 170 140 5 微扁形 5 225 吉奥 89 6 3 3 180 180 7 近圆形 6 344 亨利 91 8 6 7 165 130 3 扁圆形 4 329 TA10 108 85 3 13 3 165 135 6 微扁形 3 745 吉奥 91 2 10 175 178 3 近圆形 5 328 亨利 95 9 10 160 127 8 扁圆形 3 456 TA18 108 86 8 3 3 165 138 7 微扁形 7 117 吉奥 92 6 0 175 183 5 近圆形 7 040 亨利 94 1 6 7 165 135 2 扁圆形 5 675 108 78 3 150 140 8 微扁形 1 319 吉奥 71 6 160 175 4 近圆形 2 045 砧木 品种 接穗 品种 嫁接成 活率 青枯病感 病率 株高 cm 单果 质量 g 果形 667 m 2 产量 kg 表 4 砧木材料嫁接种植性状调查 实生 苗 亨利 90 0 155 128 0 扁圆形 512 注 青枯病调查日期为 5 月 25 日 株高调查日期为 5 月 15 日 产量按每 667 m 2 1 600 株计算 产量 5 株产量总和 5 1 600 株 1 青枯病率 7 8 TA10 13 7 TA04 16 6 5 份材料均表现出 较强的青枯病抗性 这个结果与青枯病接种鉴定结 果基本吻合 只是在材料的抗性顺序上有些差异 抗病对照品种砧木一号发病率为 12 7 同样表现 了较强的抗性 这与青枯病接种鉴定结果差异较 大 原因很可能是溃疡病感染所致 从表 3 中看出 同一品种材料在不同重复中感病率也存在较大差 异 在 3 个重复中 第 2 个重复 7 个品种材料的感 病率明显低于第 1 和第 3 个重复 说明在同一田块 中 不同区域青枯病发生有差异 2 3 砧木材料的亲和性与共生性 砧木的亲和性狭义上是指砧木与接穗嫁接后 嫁接口愈合程度 亲和性好则嫁接口愈合快 成活 率高 反之嫁接成活率低 砧木的共生性是指砧木 与接穗在生理代谢方面的协调性 可通过接穗的茎 叶 果等方面表现 同一砧木与不同接穗间的亲和 性与共生性不相同 好的砧木不仅要有较强的抗性 也要与不同的接穗品种有较强的亲和性与共生性 从试验结果 表 4 看 5 份砧木材料与 3 个不 同的接穗品种嫁接成活率均在 85 以上 说明其亲 和性较强 其中 TA04 表现最好 嫁接成活率在 95 以上 亲和性最强 在株高方面所有嫁接植株 比实生植株略高 5 10 cm 说明所用的砧木品种更 有利于接穗品种的生长 从果实质量看 所有嫁接 苗与实生苗的平均单果质量基本相近 果形一致 从田间观察 5 份砧木材料嫁接苗的嫁接口愈合完 好 砧木与接穗茎粗基本一致或砧木茎粗略大于接 穗 未见 上粗下细 现象 因此 5 份砧木材料与 3 个接穗品种有较强的共生性 另外在青枯病抗性方 面 嫁接苗同样表现出较强的抗性 这个结果与上 述青枯病抗性田间鉴定结果基本一致 由于青枯病 的为害 实生苗的产量比嫁接苗产量低很多 这有 力地说明了采用嫁接技术是防止番茄青枯病发生 最有效的办法 3 小结与讨论 通过多年自然选择及青枯病菌接种鉴定 筛选 的番茄砧木材料 TA04 TA06 TA08 TA10 TA18 表 现出较强的青枯病抗性 且与不同的接穗品种有较 强的亲和性与共生性 优于抗病对照品种砧木一 号 砧木一号是广西最早推广的番茄砧木品种 该 品种的推广和应用在 2005 年获桂林市科技进步奖 9 迄今为止 是广西生产上推广面积最大的番茄砧木 品种 因此上述 5 个砧木材料完全可以进一步研究 利用 也可作为砧木品种推广试用 参考文献 1 别之龙 国际蔬菜嫁接新趋势与我国蔬菜嫁接发展若干 问题探讨 J 中国蔬菜 2012 11 1 4 2 郭棠勋 莫贱友 番茄砧木品种材料抗青枯病接种鉴定试 验 J 广西农业科学 2009 40 3 250 252 3 曾宪铭 广东番茄青枯病的病原及其抗病性鉴定方法 C 李树德 中国主要蔬莱抗病育种进展 北京 科学出版社 1995 265 4 陆民强 番茄抗病砧木嫁接防治青枯病效果及嫁接方法 的初步研究 J 浙江农业科学 1991 5 236 238 5 杨红丽 窦瑞木 王子崇 等 番茄抗根结线虫病砧木的选 育与研究 J 北方园艺 2010 16 165 167 6 王明耀 张桂海 王学颖 等 高抗根结线虫的番茄砧木新 品种科砧一号的选育 J 中国蔬菜 2011 14 80 83 7 张慎璞 梁新安 杨红丽 等 抗根结线虫番茄砧木品种的 选育 J 中国蔬菜 2009 16 74 77 8 李海涛 邹庆道 番茄抗青枯病育种方法研究 J 辽宁农业 科学 2001 6 1 4 9 张良作 陈安琪 廖旺明 砧木一号 番茄砧木的选育及 应用效果 J 广西园艺 2007 18 2 13 14 下半月刊 2013 2457 细 黄链霉菌 AMCC 400001 对油菜促生作用研究 郭建军 1 张永江 2 丁方军 3 陈士更 3 张铭铄 4 周波 4 1 山东省德州市农业科学研究院 253015 2 嘉兴浙华农业技术开发有限公司 3 山东农大肥业科技有限公司 4 土肥资源高效利用国家工程实验室 山东农业大学生命科学学院 油菜 Brassica napus 又名油白菜等 是我国种 植面积最大的茎叶用蔬菜作物之一 其产量占世界 的 30 左右 我国冬油菜产区集中在长江流域 春 油菜产区集中在东北和西北地区 1 随着我国农业 产业政策的调整及油菜作物产区的市场发展 油菜 种植业在我国具有相当大的发展空间 链霉菌 Streptomycetaceae 是抗生素类物质的 主要生产菌 在微生物产生的 20 000 多种活性物 质中 链霉菌占到 60 以上 2 3 是一类作物有益菌 细黄链霉菌 Streptomyces microflavus 作为链霉菌 属 Streptomyces 内的一个种类 在自然栽培条件 下 其自身代谢产物可有效地促进植物生长 2 由中 国农业科学院发现的细黄链霉菌 5406 抗生菌可 产生玉米素 激动素等有效活性成分 已广泛应用 于果树 蔬菜等多种植物栽培上 4 并对蔬菜等作物 具有明显的促生 抗病作用 由链霉菌产生的抗生素 能够抑制多种植物病原菌的生长 因此链霉菌具有 防治作物病虫害的作用 5 刘燕娟等 6 张清霞等 7 潘 文道等 8 李新等 9 均研究报道放线菌对不同作物病 害有较强的抑制作用 因此 本研究选用实验室保 藏的细黄链霉菌 AMCC 400001 菌株发酵产物开 发成微生物菌剂 通过盆栽试验的方法研究该菌剂 不同用量对油菜生长 产量及品质的影响 在此基 摘 要 对细黄链霉菌 AMCC 400001 菌剂促进油菜生长效应及最适施用浓度的确定进行了盆栽试验 试验结果表 明 该菌剂的使用对提高油菜产量具有显著作用 以高浓度 T 3 1 10 7 cfu g 为最适用量 油菜鲜质量 冠根比与对照 相比分别提高了 65 35 和 25 01 在提高叶绿素含量 促进光合作用及蒸腾作用方面 高浓度 T 3 用量也有显著作 用 细黄链霉菌 AMCC 400001 还可以明显促进油菜根系的生长发育 关键词 细黄链霉菌 油菜 促生 产量 Selection and Inoculative Identification of Tomato Stock Cultivars with Bacterial Wilt Resistance MO Haokui 1 QIN Dong 1 LI Yeyong 1 LI Yuhong 1 LIU Chunchang 1 WANG Xianyu 2 1 Guilin Vegetable Research Institute Guangxi 541004 2 Guangxi University Abstract Adopting system breeding method we obtained many tomato inbred lines resistant to bacterial wilt by wide collection of tomato resources and natural selection and then we got five tomato materials highly resistant to bacterial wilt from eight of the inbred lines by inoculative identification The five materials were grafted with three scion cultivars in the serious occurrence area of bacterial wilt the results of grafting test showed that the five materials had good affinity and the grafted plants were resistant to bacterial wilt therefore the five materials could be utilized as tomato stock cultivars Key words Tomato stock Selection Bacterial wilt Identification 中图分类号 S144 S634 3 文献标识码 A 文章编号 1001 3547 2013 24 0058 04 JOURNAL OF CHANGJIANG VEGETABLES 下半月刊 2013 24 58 61 DOI 10 3865 j issn 1001 3547 2013 24 022 222222222222222222222222222222222222222222222 基金项目 十二五 国家科技支撑计划 2011BAD11B01 山 东省自主创新成果转化重大专项 2012ZHZX1A0409 资 助 嘉兴市科技计划项目 2011BZ6014 郭建军 1972 男 高级农艺师 农业推广硕士 主要从事农 作物病虫草害及微生物菌剂的研究开发工作 E mail gjj3185 周波 1972 通信作者 副教授 主要从事资源微生物学及 生物肥料研究 E mail zhoubo2798 收稿日期 2013 08 30 58