党参茎基腐病镰孢菌鉴定及其对杀菌剂的敏感性研究.pdf

www caaj org 农学学报 2021 11 2 74 78 JournalofAgriculture 基 金 项 目 甘 肃 省 农 业 科 学 院 科 研 条 件 建 设 及 成 果 转 化 项 目 黄 芩 根 腐 病 害 关 键 防 控 技 术 研 究 2020GAAS25 国 家 重 点 研 发 计 划 特 色 经 济 作 物 化 肥 农 药 减 施 技 术 集 成 研 究 与 示 范 2018YFD0201100 甘 肃 省 重 点 人 才 项 目 党 参 根 腐 病 综 合 防 控 技 术 集 成 示 范 推 广 与 人 才 培 养 2019RCXM072 嘉峪关市科技计划 嘉峪关市设施蔬菜根腐病综合治理技术研究与应用 18 20 第 一 作 者 简 介 漆 永 红 男 1978 年 出 生 甘 肃 秦 安 人 副 研 究 员 博 士 主 要 从 事 经 济 作 物 病 害 研 究 通 信 地 址 730070 甘 肃 省 兰 州 市 安 宁 区 农 科 院 新村1 号 甘肃省农业科学院植物保护研究所 Tel 0931 7614844 E mail qiyonghong920 通 讯 作 者 李 继 平 男 1966 年 出 生 甘 肃 静 宁 人 研 究 员 博 士 主 要 从 事 经 济 作 物 病 害 研 究 通 信 地 址 730070 甘 肃 省 兰 州 市 安 宁 区 农 科 院 新 村1 号 甘肃省农业科学院植物保护研究所 Tel 0931 7614844 E mail lijiping 收稿日期 2020 05 19 修回日期 2020 09 21 党参茎基腐病镰孢菌鉴定及其对杀菌剂的敏感性研究 漆永红 1 李敏权 2 曹素芳 2 蒋晶晶 1 李雪萍 1 李青青 1 徐美蓉 3 李继平 1 1 甘肃省农业科学院植物保护研究所 兰州730070 2 甘肃省农业科学院林果花卉研究所 兰州730070 3 甘肃省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 兰州730070 摘 要 为 明 确 党 参 茎 基 腐 病 害 的 病 原 致 病 性 和 优 势 病 原 种 类 及 其 对 不 同 杀 菌 剂 的 敏 感 性 采 用 组 织 分 离 法 进 行 病 原 菌 分 离 并 根 据 其 培 养 性 状 形 态 学 和 分 子 生 物 学 特 征 进 行 鉴 定 同 时 采 用 平 皿 菌 丝 生 长 抑 制 法 测 定 不 同 药 剂 的 敏 感 性 结 果 表 明 该 病 害 的 病 原 为 尖 孢 镰 孢 菌 Fusarium oxysporum 茄 病 镰 孢 菌 F sonali 和 木 贼 镰 孢 菌 F equiseti 其 中 尖 孢 镰 孢 菌 为 优 势 种 室 内 致 病 性 测 试 结 果 表 明 3 种 镰 孢 菌 均 可 引 起 党 参 茎 基 腐 病 其 中 尖 孢 镰 孢 菌 的 致 病 性 最 强 显 著 高 于 其 他2 种 菌 供 试 药 剂 对 菌 丝 生 长 均 有 抑 制 作 用 苯 醚 甲 环 唑 对3 种 镰 孢 菌 具 有 很 强 的 抑 制 活 性 同 时3 种 镰 孢 菌 对 吡 唑 醚 菌 酯 的 敏 感 性 较高 关键词 党参 茎基腐病 镰孢菌 病原鉴定 杀菌剂 敏感性测定 中图分类号 S436 429 文献标志码 A 论文编号 cjas2020 0052 Identification of Codonopsis pilosula Crown Rot Disease and Its Sensitivity to Fungicides Qi Yonghong 1 Li Minquan 2 Cao Sufang 2 Jiang Jingjing 1 Li Xueping 1 Li Qingqing 1 Xu Meirong 3 Li Jiping 1 1 Institute of Plant Protection Gansu Academy of Agricultural Sciences Lanzhou 730070 Gansu China 2 Institute of Fruit and Floriculture Research Gansu Academy of Agricultural Sciences Lanzhou 730070 Gansu China 3 Institute of Agricultural Quality Standards and Testing Technology Gansu Academy of Agricultural Sciences Lanzhou 730070 Gansu China Abstract To clarify the pathogen pathogenicity and dominant pathogen species of Codonopsis pilosula crown rot disease and their sensitivity to different fungicides the pathogen was isolated by tissue isolation and identified according to its culture traits morphology and molecular biological characteristics Meanwhile the sensitivity of differ ent fun gicides was determined by mycelium growth inhibition The results showed that the disease pathogens were identif ied as Fusarium oxysporum F sonali and F equiseti The dominant species was F oxysporum Pathogenicity testing showed that the three species could cause C pilosula crown rot disease F oxysporum had the strongest pathogenicity and its disease rate and disease index had a significant difference from those of the other two L aboratory toxicity test of different fungicides to the mycelia growth of the three species showed that difenoconazole fungicide had the strongest inhibition activity and the three Fusarium species had the highest sensitivity to p yraclostrobin fungicide Keywords Codonopsis pilosula Crown Rot Disease Fusarium spp Pathogen Identification Fungicides Sensitivity Testing0 引言 党 参 Codonopsis pilosula 为 桔 梗 科 党 参 属 多 年 生 草 本 植 物 产 自 中 国 北 方 海 拔1560 3100 m 的 山 地 林 边 及 灌 丛 中 党 参 为 中 国 常 用 的 传 统 补 益 药 具 有 补 中 益 气 健 脾 益 肺 的 功 效 主 要 有 增 强 免 疫 力 扩 张 血 管 降 压 改 善 微 循 环 增 强 造 血 功 能 等 作 用 1 根 据 外 形 和 产 地 不 同 党 参 分 为 西 党 潞 党 东 党 和 条 党 2 甘 肃 省 渭 源 县 是 中 国 党 参 之 乡 主 要 生 产 白 条 党 参 随 着 党 参 人 工 栽 培 面 积 的 逐 年 扩 大 生 长 环 境 的 改 变 和 病 原 菌 的 不 断 积 累 病 害 已 成 为 制 约 党 参 产 量和品质的重要因素之一 国 内 一 些 学 者 对 党 参 的 病 害 进 行 了 研 究 王 艳 等 3 报 道 甘 肃 省 渭 源 和 陇 西 县 党 参 病 害 有 斑 枯 病 Septoria codonopsidis 白 粉 病 Sphaerotheca codonopisi 灰 霉 病 Botrytis cinerea 和 根 腐 病 Fusariumoxysporiums 共4 种 何 先 元 等 4 研 究 发 现 川 党 的 根 腐 病 Fusarium sp 锈 病 Puccinia campanumoeae 紫 纹 羽 病 Helicobasidium mompa 和 霜 霉 病 Peronosporacorydalis 等 病 害 严 重 影 响 了 其 品 质 和 产 量 刘 春 叶 等 5 对 洛 党 参 白 粉 病 锈 病 和 根 腐 病 的 田 间 发 生 动 态 进 行 了 调 查 结 果 发 现 锈 病 发 生 最 早 余 中 莲 等 6 研 究 表 明 川 党 参 主 要 病 害 有 锈 病 根 腐 病 紫 纹 羽 病 白 粉 病 和 斑 枯 病 共5 种 其 中 锈 病 根 腐 病 和 紫 纹 羽 病 发 生 严 重 近 年 来 党 参 茎 基 腐 病 在 甘 肃 省 党 参 种 植 区 普 遍 发 生 为 害 面 积 逐 年 呈 上 升 趋 势 尤 其 以 重 茬 党 参 发 病 严 重 7 据 调 查 一 般 田 间 发 病 率 为5 10 严 重 的 达30 以 上 该 病 害 已 成 为 制 约 当 地 党 参 发 展 的 主 要 因 素 之 一 严 重 影 响 了 党 参 的 产 量 与 品 质 给 种 植 户 带 来 巨 大 的 经 济 损 失 8 关 于 该病害在甘肃省定西市临洮县 渭源县 岷县等地的病 原 种 类 等 未 见 报 道 故 本 研 究 拟 对 定 西 市 发 生 的 党 参 茎基腐病的发生症状进行研究 以确定其病原 致病性 及其优势种群 同时进行室内药剂筛选及敏感性测定 初 步 筛 选 出 化 学 防 治 的 最 佳 药 剂 为 党 参 茎 基 腐 病 的 田间防治提供理论依据 1 材料与方法 1 1 病样采集与病原菌分离和纯化 2018 年6 月 在 甘 肃 省 定 西 市 临 洮 县 渭 源 县 岷 县 等 主 要 党 参 生 产 基 地 采 集 发 病 植 株 装 入 塑 料 袋 带 回 实 验 室 采 用 常 规 组 织 分 离 法 9 剪 取 茎 基 部 病 健 交 界 处5 mm 5 mm 组 织 块 在75 酒 精 中 浸 泡5 s 然 后 转 移 至1 5 次 氯 酸 钠 溶 液 中 消 毒1min 无 菌 水 漂 洗3 次 晾 干 置 于PDA 培 养 基 平 板 内 于25 培 养5 7 天 从 菌 落 边 缘 切 取 菌 丝 块 置 于 香 石 竹 叶 片 琼 脂 CLA 培 养 基 琼 脂15 20g 蒸 馏 水1000mL 每 皿 加 入 长 度1cm 的 无 菌 康 乃 馨 叶 片3 片 在25 培 养7 10 天 将 分 离 纯化的菌株转接至PDA 斜面 4 保存备用 1 2 致病性测定 采 用 牙 签 刺 接 种 法 将 灭 菌 的 牙 签 放 在 带 菌 的 PDA 培 养 基 中 培 养 使 牙 签 上 布 满 菌 丝 用 带 菌 牙 签 穿 刺 党 参 陇 党1 号 幼 苗 茎 部 无 菌 土 掩 埋 接 种 部 位 每 菌 接 种15 株 党 参 幼 苗 以 无 菌 牙 签 穿 刺 党 参 幼 苗 作 为 对 照 CK 接 种30 天 后 观 察 党 参 的 发 病 情 况 统 计 发 病 率 病 情 指 数 根 据 分 级 标 准 进 行 测 定 0 级 茎 基 部 没 有 病 斑 1 级 茎 基 部 有 轻 微 病 斑 病 斑 面 积 占 5 3 级 茎 基 部 有 轻 微 病 斑 病 斑 面 积 占10 5 级 茎 基 部 有 轻 微 病 斑 病 斑 面 积 占25 7 级 茎 基 部 有 轻微病斑 病斑面积占50 以上 1 3 病原菌形态学鉴定 将 病 原 菌 分 别 接 种 在PDA 和CLA 培 养 基 上 25 下 培 养7 天 和10 天 后 观 察 并 拍 照 记 录 菌 落 形 态 颜 色 产 孢 结 构 与 分 生 孢 子 形 态 大 小 根 据 镰 孢 菌 分 类 方法和标准进行病原菌种类鉴定 10 1 4 病原菌分子生物学鉴定 1 4 1 真 菌 基 因 组DNA 提 取 刮 取PDA 培 养 基 上 的 病 原 菌 菌 丝 采 用 真 菌 基 因 组DNA 快 速 抽 提 试 剂 盒E Z N ATM HP Fungal DNA Kit OMEGA 的 方 法 提 取 DNA 保存于 20 备用 1 4 2 分 子 鉴 定 的 引 物 本 试 验 用 真 菌 通 用 引 物 和 镰 孢 菌 特 异 性 引 物 11 12 通 用 引 物F1 和F2 的 序 列 分 别 为 ATTACTCCAGCATCCTTGC TTTACAACTCCCAAA CCCC 核 糖 体 内 部 转 录 间 隔 区 internal transcribed spacer ITS ITS1 和 ITS4 的 序 列 分 别 为 TCCGTAGGTGAACCTGCGG TCCTCCGCTTATTG ATATGC 镰 孢 菌 特 异 性 引 物TEF1 F 和TEF1 R 的 序 列 分 别 为 ATGGGTAAGGARGACAAGAC GGARGT ACCAGTSATCATGTT 1 4 3 PCR 扩 增 PCR 扩 增 体 系 25 L 10 Buffer2 5 L 2 5mol LdNTP4 L 10 mol L 正 反 向 引 物 各1 L T aq 酶0 5 L DNA 模 板1 L 用ddH2O 补 足 至25 L PCR 反 应 条 件 94 预 变 性10 min 94 变 性1 min 55 退 火1 min 72 延 伸2 min 25 个 循 环 72 延 伸 10 min 4 冰 箱 保 存 PCR 产 物 经1 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳检测后 送生工生物工程 上海 股份有限公司测序 将 获 得 的 序 列 与GenBank 核 酸 序 列 库 进 行 同 源 性 比 对分析 1 5 病原菌对药剂的敏感性测定 供 试 药 剂 及 浓 度 10 苯 醚 甲 环 唑 水 分 散 粒 剂 山 75东 惠 民 中 联 生 物 科 技 有 限 公 司 浓 度 为500 250 125 62 5 31 25 g mL 250g L 丙 环 唑 乳 油 中 国 农 科 院 植 保 所 农 药 厂 浓 度 为800 400 200 100 50 g mL 70 代 森 锰 锌 可 湿 性 粉 剂 四 川 国 光 农 化 有 限 公 司 浓 度 为1000 500 250 125 62 5 g mL 25 吡 唑 醚 菌 酯 悬 浮 剂 山 东 惠 民 中 联 生 物 科 技 有 限 公 司 浓 度 为 1000 500 250 125 62 5 g mL 430g L 戊 唑 醇 悬 浮 剂 永 农 生 物 科 技 有 限 公 司 浓 度 为600 300 150 75 37 5 g mL 采用常规菌丝生长抑制法测定供试药剂对病原菌 的 敏 感 性 在DNA 培 养 基 上 培 养3 种 真 菌 打 取 0 5cm 菌 饼 将 其 移 到 含 有 不 同 药 剂 浓 度 的PDA 培 养 基 上 每 种 药 设5 个 浓 度 以 无 药 处 理 作 对 照 25 培 养5 天 后 十 字 交 叉 法 测 量 菌 落 直 径 计 算 抑 制 率 采 用 唐 启 义 和 冯 明 光 13 的 实 用 统 计 分 析 及 其DPS 数 据 处 理 系 统 软 件 用 生 物 测 定 数 量 型 数 据 机 率 值 分 析 模 型 计 算 药 剂 的 毒 力 回 归 方 程 y a b x EC50 和 相 关 系 数 r 同时由平均 b 值确定不同病原菌对药剂的敏感性 2 结果与分析 2 1 党参茎基腐病发病症状 党 参 地 上 部 的 部 分 叶 片 变 黄 植 株 由 下 而 上 变 黄 枯 死 靠 近 地 面 根 上 部 的 茎 基 部 受 害 后 起 初 产 生 红 色的类似 铁锈 病斑 逐渐变为褐色至黑褐色病斑 最 后蔓延到整个茎部 图1 2 2 病原菌在田间的分布及种类鉴定 共 采 集 到 党 参 标 样52 份 室 内 分 离 到 镰 孢 菌 株 328 株 3 种 镰 孢 菌 在 每 个 县 区 均 有 分 布 对 分 离 到 的 菌 株 进 行 鉴 定 和 统 计 尖 孢 镰 孢 菌217 株 占66 16 茄 病 镰 孢 菌 和 木 贼 镰 孢 菌 为63 株 和48 株 分 别 占 19 20 和14 64 其 中 尖 孢 镰 孢 菌 为 党 参 茎 基 腐 病 的 优势种群 各病原菌的培养性状和形态学特征鉴定如下 1 菌 株 编 号HX 2 3 3 1 尖 孢 镰 孢 菌 F oxysporum 在 PDA 培 养 基 上 菌 落 白 色 粉 色 至 紫 色 大 型 分 生 孢 子 镰 孢 形 中 间 粗 两 端 尖 细 具3 5 个 横 隔 膜 多 为3 个 隔 大 小 为 23 5 32 9 m 2 4 3 5 m 足 胞 明 显 小 型 分 生 孢 子 椭 圆 形 长 椭 圆 形 单 胞 无 色 假 头 状 大小为 3 5 14 1 m 1 8 2 9 m 2 菌 株 编 号 WDCJ 1 1 1 茄 病 镰 孢 菌 F sonali 在PDA 培 养 基 上 菌 落 淡 蓝 色 菌 表 白 色 较 繁 茂 或 致 密 大 型 分 生 孢 子 无 色 淡 绿 色 较 宽 两 端 圆 马 特 型 2 5 个 隔 膜 多 为3 个 隔 膜 大 小 为 21 2 37 6 m 3 9 4 8 m 小 型 分 生 孢 子 单 胞 椭 圆 形 肾 形 无 色 大小为 7 1 14 1 m 2 9 4 1 m 3 菌 株 编 号MCJ 2 1 1 木 贼 镰 孢 菌 F equiseti 气 生 菌 丝 棉 絮 状 多 数 菌 株 后 期 变 黄 褐 色 大 型 分 生 孢 子 镰 孢 形 顶 细 胞 延 长 渐 细 足 细 胞 明 显 3 5 个 分 隔 大 小 为 26 0 52 5 m 3 0 5 0 m 小 型 分 生 孢 子 纺锤形或肾形 2 3 病原菌分子生物学鉴定结果 测 序 结 果 与GenBenk 数 据 库 中 进 行Nucleotide Blast 比 对 与 该 病 原 菌 的ITS 片 段 同 源 性 达99 其 中 尖 孢 镰 孢 菌 F oxysporum 茄 病 镰 孢 菌 F sonali 和 木 贼 镰 孢 菌 F equiseti 的 序 列 分 别 为543 546 596 bp 党 参 茎 基 腐 病 与 F oxysporum F sonali 和 F equiseti 亲 缘 关 系 最 近 结 合 形 态 学 特 征 将 从 甘 肃 省 定 西 市 临 洮县 渭源县 岷县采集的党参中分离得到的茎基腐病 致 病 菌 鉴 定 为 尖 孢 镰 孢 菌 F oxysporum 茄 病 镰 孢 菌 F sonali 和木贼镰孢菌 F equiseti 2 4 3 种镰孢菌对党参的致病性测定结果 与对照相比 尖孢镰孢菌 茄病镰孢菌和木贼镰孢 菌 均 对 党 参 有 致 病 性 但 发 病 率 和 病 情 指 数 不 同 表 1 尖 孢 镰 孢 菌 的 致 病 性 最 强 发 病 率 和 病 情 指 数 最 高 分 别 为92 0 和45 2 显 著 高 于 茄 病 镰 孢 菌 和 木 贼 镰 孢 菌 P 0 05 而 茄 病 镰 孢 菌 和 木 贼 镰 孢 菌 对 党 参 的致病力较弱 两者差异不显著 A 地上部 B 茎基部发病 图 1 党参茎基腐病 漆永红等 党参茎基腐病镰孢菌鉴定及其对杀菌剂的敏感性研究 762 5 不同病原菌对杀菌剂的敏感性测定结果 各 种 药 剂 在 一 定 的 浓 度 处 理 下 均 对3 种 镰 孢 菌 有 抑制作用 随着处理浓度的增加 抑制效果增加 不同 药 剂 对3 种 镰 孢 菌 的 半 致 死 中 浓 度 EC50 值 不 同 其 中 苯 醚 甲 环 唑 对3 种 镰 孢 菌 的 EC50 值 最 小 戊 唑 醇 次 之 而 代 森 锰 锌 最 高 表 明 苯 醚 甲 环 唑 对3 种 镰 孢 菌 具 有 很 强 的 抑 制 活 性 表2 从 毒 力 回 归 方 程 可 以 看 出 各 药 剂 在 不 同 镰 孢 菌 中 的 b 值 不 同 吡 唑 醚 菌 酯 的 b 值 最 大 戊 唑 醇 次 之 而 苯 醚 甲 环 唑 的 b 值 最 小 经 统 计 分 析 吡 唑 醚 菌 酯 与 苯 醚 甲 环 唑 丙 环 唑 代 森 锰 锌 相 比 差 异 显 著 而 苯 醚 甲 环 唑 丙 环 唑 代 森 锰 锌 和 戊 唑 醇 四 者 之 间 差 异 不 显 著 表 明3 种 镰 孢 菌 对 吡 唑 醚 菌酯的敏感性较高 表3 3 讨论与结论 植 物 病 害 病 原 种 类 的 确 定 是 防 治 的 前 提 和 基 础 明确病原种类对制定合理的防治策略和提高防治效果 有 重 要 的 指 导 作 用 14 本 试 验 首 次 开 展 了 甘 肃 省 党 参 茎 基 腐 病 害 研 究 初 步 明 确 了 该 病 害 的 病 原 为 尖 孢 镰 孢 菌 F oxysporum 茄 病 镰 孢 菌 F sonali 和 木 贼 镰 孢 菌 F equiseti 其 中 尖 孢 镰 孢 菌 为 优 势 种 这 表 明 党 参 茎 基 腐 病 病 原 种 类 复 杂 存 在 多 种 镰 孢 菌 复 合 侵 染 的 现 象 因 此 不 难 想 象 田 间 党 参 茎 基 腐 病 为 害 的 普 遍 性 和严重性 尖孢镰孢菌是农业生产中危害最严重的土传病原 物 之 一 具 有 很 强 的 寄 生 和 腐 生 能 力 其 致 病 机 制 15 为 1 尖孢镰孢菌产生毒素镰孢菌酸对寄主植物抵抗 力 的 降 低 和 对 寄 主 植 物 细 胞 代 谢 的 影 响 16 17 2 尖 孢 镰孢菌产生的细胞壁降解酶降解寄主植物的细胞壁防 御 和 保 护 组 织 致 使 寄 主 植 物 细 胞 内 的 营 养 物 质 释 放 18 19 3 尖 孢 镰 孢 菌 与 寄 主 植 物 互 作 过 程 中 产 生 一 些 蛋 白 物 质 影 响 病 原 菌 在 寄 主 植 物 根 部 定 植 和 萌 发 20 4 尖 孢 镰 孢 菌 对 寄 主 植 物 防 卫 物 质 解 毒 使 寄 主 植 物 失 去 防 御 机 制 21 本 试 验 仅 明 确 了 党 参 茎 基 腐 病的发病症状 不同镰孢菌的种类和优势病原菌 但关 于不同镰孢菌和党参茎基腐病的致病机理有待于进一 步研究 化 学 防 治 在 镰 孢 菌 的 防 治 中 起 到 很 重 要 的 作 用 22 23 本 试 验 通 过 室 内 药 剂 生 测 筛 选 出 苯 醚 甲 环 唑 对3 种镰孢菌具有很强的抑制活性 同时3 种镰孢菌对 吡 唑 醚 菌 酯 的 敏 感 性 较 高 为 党 参 茎 基 腐 病 的 田 间 防 治提供理论依据 然而 在实际生产当中 长期用药单 一 病原菌对此类药剂产生抗性 应采取多种药剂交替 使 用 的 方 法 来 防 治 党 参 茎 基 腐 病 同 时 对 镰 孢 菌 这 种 土 传 病 原 引 起 植 株 根 部 发 病 选 择 灌 根 药 剂 的 剂 型 应 具 有 双 向 内 吸 的 特 点 可 针 对 不 同 剂 型 这 一 可 控 变 量展开研究 筛选出防效更好的剂型 由 镰 孢 菌 引 起 的 病 害 不 仅 通 过 化 学 方 法 还 可 利 用 综 合 方 法 解 决 这 是 由 于 镰 孢 菌 是 一 种 常 见 的 土 传 病原菌 可通过带菌种子和种苗进行远距离传病 同时 施 用 未 腐 熟 粪 肥 加 重 病 害 发 生 24 这 表 明 遏 制 病 原 菌 传播和施用充分腐熟的农家肥是防治党参茎基腐病最 直 接 和 最 有 效 的 农 业 防 治 措 施 此 外 病 原 菌 由 伤 口 侵 入 植 株 后 迅 速 在 植 株 的 维 管 束 内 繁 殖 并 堵 塞 导 管 严 重 阻 碍 植 株 的 物 质 运 输 导 致 叶 片 黄 化 萎 蔫 及 枯 死 25 这 表 明 彻 底 清 除 土 壤 中 的 蝼 蛄 蛴 螬 和 地 老 虎 等地下害虫 以免其为害造成伤口 使病原菌更易从造 成 的 伤 口 侵 入 加 重 茎 基 腐 病 的 发 生 这 进 一 步 说 明 在 镰孢菌 尖孢镰孢菌 茄病镰孢菌 木贼镰孢菌 CK 接种数 25 25 25 25 发病率 92 0 88 0 80 0 0 0 病情指数 45 2a 21 2b 17 5b 0 0c 表 1 3 种镰孢菌对党参的致病性测定 真菌 尖孢镰孢菌 茄病镰孢菌 木贼镰孢菌 杀菌剂 苯醚甲环唑 丙环唑 代森锰锌 吡唑醚菌酯 戊唑醇 苯醚甲环唑 丙环唑 代森锰锌 吡唑醚菌酯 戊唑醇 苯醚甲环唑 丙环唑 代森锰锌 吡唑醚菌酯 戊唑醇 毒力回归方程 y 2 5348 1 1085x y 2 3749 1 0447x y 2 0356 1 0980 x y 1 6043 1 3486x y 2 1997 1 1430 x y 3 4822 0 3781x y 3 4575 0 6907x y 2 8249 0 8293x y 3 3318 0 8891x y 2 9935 0 9932x y 3 6599 0 8312x y 3 1556 0 8572x y 3 3398 0 7003x y 1 8224 1 3759x y 3 1090 1 0058x EC50 g mL 167 39 325 72 500 99 329 60 281 74 55 24 171 05 419 46 75 21 104 81 40 93 141 83 234 81 203 89 75 88 相关系数 r 0 9970 0 9742 0 9764 0 9965 0 9833 0 9941 0 9886 0 9914 0 9955 0 9934 0 9971 0 9880 0 9852 0 9705 0 9642 表 2 5 种杀菌剂对镰孢菌菌丝生长的抑制效果 杀菌剂 苯醚甲环唑 丙环唑 代森锰锌 平均b 值 0 77b 0 86b 0 88b 杀菌剂 吡唑醚菌酯 戊唑醇 平均b 值 1 20a 1 05ab 表 3 3 种镰孢菌对杀菌剂的敏感性测定 77党参移栽时 选择无虫感染 无机械损伤和表皮光滑健 康种苗的重要性 参考文献 1 国 家 药 典 编 委 会 中 华 人 民 共 和 国 药 典 M 北 京 化 学 工 业 出 版 社 2005 199 2 卢 燕 林 张 强 李 彩 萍 等 地 道 潞 党 参 营 养 特 性 与 产 地 土 壤 特 征 研 究 J 山西农业科学 2007 35 5 42 45 3 王艳 陈秀蓉 王引权 等 甘肃省党 参病害种 类调查及 病原鉴定 J 山西林业科学 2011 39 8 866 868 871 4 何 先 元 马 发 者 前 乔 芝 川 党 参 规 范 化 生 产 标 准 操 作 规 程 试 行 中国现代中药 2007 9 9 39 43 5 刘 春 叶 张 盈 廖 国 会 等 贵 州 道 真 县 洛 党 参 主 要 病 害 发 生 动 态 及 防控对策 J 中国植保导刊 2018 38 9 53 57 6 余 中 莲 雷 美 艳 蒲 盛 才 等 重 庆 党 参 真 菌 病 害 种 类 调 查 及 病 原 鉴 定 J 中药材 2015 38 6 1119 1122 7 陈 秀 蓉 甘 肃 省 药 用 植 物 病 害 及 其 防 治 M 北 京 科 学 出 版 社 2015 72 73 8 龚 成 文 米 永 伟 漆 永 红 等 甘 肃 中 药 材 连 作 障 碍 问 题 探 析 J 甘 肃科技 2020 36 4 153 155 9 方中达 植病研究方法 M 北京 中国农业出版社 2001 6 13 10 王 拱 辰 郑 重 叶 琪 明 等 常 见 镰 孢 菌 鉴 定 指 南 M 北 京 中 国 农 业 科学技术出版社 1996 5 11 Murry M Thompson W Rapid isolation of high molecular weight plantDNA J NucleicAcidsRsearch 1980 8 19 4321 4326 12 Michielse C B Rep M Pathogen profile update Fusarium oxysporum J MolecularPlantPathology 2009 10 311 324 13 唐 启 义 冯 明 光 实 用 统 计 分 析 及 其DPS 数 据 处 理 系 统 M 北 京 科学出版社 2002 121 140 14 漆 永 红 徐 冬 张 彦 梅 等 嘉 峪 关 市 洋 葱 基 盘 腐 烂 病 病 原 鉴 定 及 药 剂室内毒力测定 J 草业学报 2013 22 5 339 344 15 张 荣 姜 子 德 李 敏 慧 等 尖 孢 镰 孢 菌 致 病 机 理 及 相 关 致 病 基 因 研 究进展 J 中国农学通报 2011 27 15 254 258 16 Marr MT Vergani P Albergoni F G Relationship between Fusaric acid uptake and its binding to cell structures in leaves of Egeria densaanditstoxiceffectsonmembranepermeabilityandrespiration J PhysiologicalandMolecularPlantPathology 1993 42 141 157 17 Bouizgarne B Brault M PennarumAM et al Electrophysiological responses to Fusaric acid of root hairs from seedlings of date palm susceptible and resistant to Fusarium oxysporum f sp Albedinis J JournalofPhytopathology 2004 152 321 324 18 Ye S F Yu J Q Peng Y H et al Incidence of Fusarium wilt in Cucumis sativus L is promoted by cinnamic acid an autotoxin in rootexudates J PlantandSoil 2004 263 2 43 150 19 Garcia Maceira F I DI Pietro A Roncero M I G Cloning and disruption of pgx4 encoding an in planta expressed exopolygalacturonase from Fusarium oxysporum J Molecular Plant MicrobeInteractions 2000 13 359 365 20 Inoue I Namiki F Tsuge T Plant colonization of the vascular wilt fungus Fusarium oxysporum requires FOW1 a gene encoding a mitochondrialprotein J PlantCell 2002 14 1869 1883 21 ItoS TakaharaH KawaguchiT etal Post transcriptionalsilencing of the tomatinase gene in Fusarium oxysporum f sp lycopersici J JournalofPhytopathology 2000 150 474 480 22 宋 慧 云 段 志 豪 韦 嘉 怡 等 多 穗 柯 炭 疽 病 病 原 鉴 定 及 其 不 同 杀 菌 剂的室内毒力测定 J 南方农业学报 2019 3 593 599 23 傅 本 重 王 政 又 伍 建 榕 等 美 人 蕉 叶 斑 病 病 原 菌 的 生 物 学 特 性 及 其抑菌药剂筛选 J 中国农学通报 2011 27 31 105 108 24 Sangalang A R Burgess L W Backhouse D et al Mycogeography of Fusarium species in soil from tropical arid and Mediterranean regionsofAustralia J MycologicalResearch 1995 99 5 523 528 25 Burgess LW Summerel BA Mycogeography of Fusarium survey of Fusarium species from subtropical and semiarid grassland soils from Queensland Australia J Mycological Research 1992 96 480 484 漆永红等 党参茎基腐病镰孢菌鉴定及其对杀菌剂的敏感性研究 78