番茄颈腐根腐病抗性鉴定技术的建立及抗性种质资源筛选.pdf

中国农业科学 2022 55 4 707 718 Scientia Agricultura Sinica doi 10 3864 j issn 0578 1752 2022 04 007 收稿日期 2021 07 23 接受日期 2021 08 28 基金项目 山东省自然科学基金 ZR2020QC152 国家现代农业产业技术体系建设专项 CARS 23 G13 山东省农业良种工程 2020LZGC005 联系方式 王梦蕊 E mail wangmr151 刘淑梅 E mail lsmei78 王梦蕊和刘淑梅为同等贡献作者 通信作者苏晓梅 Tel 0531 66659184 E mail sxm198846 开放科学 资源服务 标识码 OSID 番茄颈腐根腐病抗性鉴定技术的建立及抗性种质 资源筛选 王梦蕊 1 2 刘淑梅 1 侯丽霞 1 王施慧 1 吕宏君 1 苏晓梅 1 1 山东省农业科学院蔬菜研究所 山东省设施蔬菜生物学重点实验室 国家蔬菜改良中心山东分中心 农业农村部黄淮地区蔬菜科学观测实验站 山东 济南 250100 2 中国农业大学园艺学院 北京 100193 摘要 目的 探索番茄颈腐根腐病 Fusarium crown and root rot FCRR 苗期抗性鉴定技术 并对番茄种质资 源及品种 进行抗性鉴定分析 挖掘和丰富可利用的抗性资源 为培育抗颈腐根腐病番茄品种打下基础 方法 以尖镰孢番茄颈腐根 腐病专化型病原菌 Fusarium oxysporum f sp radicis lycopersici Forl 和感病栽培番茄 Heinz 1706 为材料 研究 接种菌液浓度 接种寄主苗龄 接种后管理温度和不同接种方法对番茄颈腐根腐病人工接种鉴定效果的影响 随后通过苗期 人工接种鉴定方法结合文献中已报道的与抗性基因连锁的分子标记 对 100 份番茄种质材料进行颈腐根腐病抗性鉴定分析 结果 在一定范围内 番茄颈腐根腐病发病率及病情指数随着接种菌液浓度的升高而增大 接种菌液浓度为 10 7 个孢子 mL 时 发病率及病情指数分别为 100 和 89 2 可以反映寄 主真实的抗性水平 接种寄主苗龄为 2 5 叶期均能使植株发病 不同苗龄间病情指数无显著差异 接种后不同的管理温度对番茄颈腐根腐病的病情指数影响显著不同 其中较低的管理温 度 20 有利于番茄颈腐根腐病的发生 使用浸根法和灌根法进行鉴定 番茄颈腐根腐病发病率和病情指数较高且效果 稳定 显著优于茎注射法 对 100 份番茄种质材料进行分析 接种鉴定结果显示有 38 份材料表现抗病 这些材料可用于 番茄抗颈腐根腐病育种或生产 在已报道的与 Frl 连锁的分子标记中 SCAR Frl的准确率最低 仅为 51 C2 25 的准确率为 59 而 PNU D4 的准确率为 83 该标记可用于番茄抗颈 腐根腐病辅助选择 结论 建立的苗期抗性鉴定技术能客观反映 供试材料的实际抗性水平 可用于番茄抗颈腐根腐病材料的鉴定筛选 关键词 番茄 颈腐根腐病 抗性鉴定 分子标记 Development of Artificial Inoculation ology for uation of Resistance to Fusarium Crown and Root Rot and Screening of Resistance Sources in Tomato WANG MengRui 1 2 LIU ShuMei 1 HOU LiXia 1 WANG ShiHui 1 L HongJun 1 SU XiaoMei 1 1 Institute of Vegetables Shandong Academy of Agricultural Sciences Shandong Province Key Laboratory for Biology of Greenhouse Vegetables Shandong Branch of National Improvement Center for Vegetables Huanghuai Region Scientific Observation and Experimental Station of Vegetables Shandong Ministry of Agriculture and Rural Affairs Ji nan 250100 2 College of Horticulture China Agricultural University Beijing 100193 Abstract Objective The objective of this study is to explore the resistance identification technology of Fusarium crown and root 708 中 国 农 业 科 学 55卷 rot FCRR carry out the resistance identification and analysis of tomato germplasm resources and varieties enrich the available tomato resources resistant to FCRR and to lay the foundation for the cultivation of tomato varieties that resistant to FCRR In the present study four parameters that influence the inoculation effect including inoculum concentration seedlings stage environmental temperature and inoculation s were studied using susceptible line Heinz 1706 infected with Fusarium oxysporum f sp radicis lycopersici Forl Subsequently 100 tomato materials were identified through artificial inoculation at seedling stage as well as the molecular markers linked to the resistance gene Result The disease incidence and disease index of FCRR increased in a certain range along with the increase of inoculum concentration and the actual levels of plant resistance could be revealed with the inoculum of 10 7 spores mL for which the disease incidence and disease index were 100 and 89 2 respectively The disease index was not significantly different among different seedling ages when the host was inoculated at 2 to 5 leaf stage The effects of different environmental temperatures after inoculation on the disease index of FCRR were significantly different and the lower temperature 20 condition was more favorable to the occurrence of FCRR The incidence and disease index were higher and the effect was stable using root dipping and root irrigation s which were significantly better than stem injection The result of inoculation identification suggested that 38 materials showed resistance to FCRR among 100 tomato materials which could be used for breeding or production in tomato for FCRR resistance In addition among the reported markers linked to Frl SCAR Frl has the lowest accuracy of 51 while C2 25 has the accuracy of 59 and the accuracy of PNU D4 is 83 which is expected to be used in marker assisted selection MAS for FCRR resistance Conclusion The established assessment system can identify levels of the resistance to FCRR in tomato seedlings which can be used for identification and screening of tomato materials Key words tomato Fusarium crown and root rot FCRR resistance identification molecular marker 0 引言 研究意义 番茄颈腐根腐病 Fusarium crown and root rot FCRR 是由尖镰孢番茄颈腐根腐病专化 型 Fusarium oxysporum f sp radicis lycopersici Forl 引起的番茄土传性真菌病害 1 2 该病害在世界 范围内均有发生 3 8 设施栽培地区较为严重 在连作 栽培区造成的损失逐年加大 是设施番茄生产的限制 因素之一 9 10 抗源材料的利用是抗病育种的前提和 基础 对种质资源进行抗性鉴定和筛选 对于抗性基 因的克隆以及加速番茄抗颈腐根腐病育种进程具有重 大意义 前人研究进展 近年来 番茄颈腐根腐病 已成为威胁我国设施番茄冬春生产的最重要的病害之 一 侵染后可造成番茄严重减产甚至绝收 11 15 我国 东北 华北地区发病比较严重 尤以山东省寿光地区 病情最为突出 据调查 寿光日光温室番茄颈腐根腐 病发病率达 80 以上 致死率达 30 以上 12 给当地 生产造成了严重影响 培育和利用抗病品种是控制该 病害最为经济 有效的措施 抗性鉴定是抗病育种的 基础工作 也是抗源筛选 挖掘和利用的前提条件 国外开展颈腐根腐病抗性鉴定及抗源筛选利用工作较 早 并且在抗性基因研究和分子标记应用方面也取得 了一定的进展 16 21 然而不同研究者得到的结果也并 不一致 其中 STANIASZEK 等 18 根据与 Frl 紧密连锁 的保守序列位点 C2 At2g38025 设计的 CAPS 标记 C2 25 应用最为广泛 本研究切入点 我国有关番 茄抗颈腐根腐病的研究报道较少 多数集中在对病原 菌的鉴定以及防治措施的简单描述 在颈腐根腐病抗 性鉴定及抗源筛选方面的工作相对落后 抗病育种工 作进展也较为缓慢 22 25 在不同的室内条件下 使用 不同的接种方法产生的效果也不尽相同 因此建立 一套快速 高效 稳定并且适用于大批量试材的抗 性鉴定技术十分必要 拟解决的关键问题 以高 感颈腐根腐病的栽培番茄 Heinz 1706 为材料 研究 人工接种番茄颈腐根腐病的最佳条件 为番茄抗颈 腐根腐病材料的选育提供切实可行的鉴定技术 同 时利用苗期人工接种鉴定技术结合分子标记分析 对收集的 100 份番茄种质材料进行抗颈腐根腐病鉴 定 明确其抗病水平 为番茄抗颈腐根腐病育种提 供基础材料 1 材料与方法 1 1 材料 抗病鉴定技术所用材料为高感颈腐根腐病的番茄 品系 Heinz 1706 抗性种质资源筛选材料共 100 份 由山东省农业科学院蔬菜研究所番茄课题组收集保 存 包括 49 份自交系材料和 51 份杂交种 以上材料 均选取粒饱满无病种子 10 次氯酸钠溶液浸泡 10 min 消毒处理 清洗后在 28 恒温箱中催芽 待露白 后播种于灭菌的基质土中 试验于 2020 年 8 月在山东 省农业科学院蔬菜研究所培养室内进行 苗期控制室 内温度 24 28 正常栽培管理 4 期 王梦蕊等 番茄颈腐根腐病抗性鉴定技术的建立及抗性种质资源筛选 709 供试病原菌采集于山东省农业科学院蔬菜研究 所核心试验区温室内 采用组织分离法进行分离纯 化 经鉴定为尖镰孢番茄颈腐根腐病专化型 80 保存备用 1 2 方法 1 2 1 菌悬液制备 将培养在 PDA 平板培养基上的 病原菌接种于盛有 150 mL PDB 培养基的锥形瓶中 25 下 140 r min 振荡培养 4 d 培养液经过滤除去菌 丝体后 4 000 r min 离心 10 min 倒掉上清液 加灭菌 蒸馏水稀释成一定浓度的接种悬浮液 1 2 2 不同接种条件试验 不同接种菌液浓度 当 番茄长至 2 3 片真叶时 使用浓度为 10 6 10 7 10 8 个 mL 的孢子悬浮液 采用浸根法对番茄幼苗进行 接种 不同寄主苗龄 采用浸根法 使用浓度为 10 7 个 mL 的孢子悬浮液对 2 3 3 4 4 5 叶期的番 茄幼苗进行接种 不同管理温度 采用浸根法 使 用浓度为 10 7 个 mL 的孢子悬浮液对 2 3 叶期的番 茄幼苗进行接种后 将其分别置于 20 25 30 环 境中进行培养 不同接种方法 当番茄长至 2 3 片真叶时 使用 浓度为 10 7 个 mL 的孢子悬浮液进行接种 浸根法 将番茄幼苗从穴盘中轻轻拔起后用水洗掉根部泥土 把主根尖端剪去 0 5 cm 左右后 将幼苗的根系在菌悬 液中浸泡 15 min 然后移栽至灭菌的育苗基质中 20 21 灌根法 当番茄长至 2 3 片真叶时 在幼苗根部一侧 用刀片将部分根轻轻切断 给根系造成机械伤害 将 浓度为 10 7 个 mL 孢子悬浮液 30 mL 灌入伤根部位 14 茎基部注射法 用注射器吸取 0 1 mL 病原菌孢子悬浮 液 由番茄幼苗的茎基部刺入并将接种菌液注射到番 茄幼苗茎基部木质部 每株注射两处 26 试验设置 3 次重复 每重复 10 株苗 4 周后调查 发病情况 1 2 3 番茄种质资源抗病性鉴定 当番茄幼苗长 至 2 3 叶期时 用清水将根系清洗干净后剪去主根 尖端 0 5 cm 放在浓度为 10 7 个 mL 的孢子悬浮液中 浸根处理 15 min 然后移栽至灭菌基质土中 对照 组用清水浸根处理 接种后置于 18 22 室内环境 中 16 h d 1 光照条件 4 周后调查发病情况 试验 设置 2 次重复 每重复 8 株苗 病情分级 disease severity scale DSS 按照 KIM 等 20 的标准稍作修改 0 级 根系正常 1 级 主根基部轻微褐变 侧根正 常 茎纵剖维管束正常 2 级 主根基部褐变 侧根 轻微褐变 茎纵剖维管束褐变 3 级 主根侧根明显 褐变 侧根脱落 茎纵剖维管束明显褐变 4 级 植 株萎蔫死亡或茎基部 根部严重褐变甚至腐烂 侧 根脱落 茎纵剖维管束严重褐变 图 1 病情指数 disease index DI 病级数值 该病级株数 病级最高值 调查株数 100 寄主抗性等级为 免疫 DI 0 高抗 0 DI 12 5 抗病 12 5 DI 25 中抗 25 DI 50 感病 50 DI 75 高 感 75 DI 100 1 2 4 番茄种质资源分子标记检测 当番茄长至 2 3 片真叶时 每个编号混合取样 采用 CTAB 法提 取基因组 DNA 使用文献中已报道的与 Frl 连锁的分 子标记及 Tm 2 功能标记对收集的番茄种质材料进行 标记分析 表 1 PCR 扩增体系为 10 L 50 ng L 1 DNA 模板 2 L 2 PCR mix 5 L 10 mol L 1 上下 游引物各 0 25 L ddH 2 O 补足至 10 L 引物 C2 25 Tm 2 和 PNU D4 的 PCR 产物经酶切后用 2 琼脂糖凝 胶电泳检测 a 0 级 DSS 0 b 1 级 DSS 1 c 2 级 DSS 2 d 3 级 DSS 3 e 4 级 DSS 4 图 1 番茄颈腐根腐病病情级别划分标准 Fig 1 Rating scale of tomato resistance to FCRR 710 中 国 农 业 科 学 55卷 表 1 番茄颈腐根腐病抗性基因 Frl 分子标记 Table 1 Molecular markers of FCRR resistance gene Frl 引物名称 Primer name 引物序列 Primer sequence 5 3 物理位置 Physical position Mb 参考文献 Reference F GTCATCCACATTCGTACTTC C2 25 Apo I R AATTTAGAGCACGTTTCATA 5 5 STANIASZEK et al 18 F CAGCTGAAAGATGTCACCCA PNU D4 Mbo I R TGATCATTTACAAGGCGGCA 6 1 KIM et al 20 F TATGTCACTATCCCAAGCAA Tm 2 Dde I R TAACGGTAGAATTGGACACTC 13 6 F GTAACAAGTGAAGTTAAAAATGCT SCAR Frl R GTGTGGATTTGGGTTCAATTCC 61 8 MUTLU et al 19 1 3 数据分析 采用 Excel和 SPSS 20 0软件进行数据的统计与分 析 应用 Duncan s 新复极差法进行差异显著性检验 2 结果 2 1 不同接种条件对人工接种鉴定效果的影响 2 1 1 接种菌液浓度 不同接种菌液浓度下 番茄幼 苗颈腐根腐病病情指数差异极显著 接种菌液浓度为 10 6 个 mL 时 病情指数为 66 7 发病率为 90 试验 所用高感材料部分表现为抗病 不能真实反映植株本 身的抗性 随着菌液浓度的增加 病情指数也随之增 加 接种菌液浓度为 10 7 10 8 个 mL 时 病情指数分 别为 89 2 和 96 7 发病率均为 100 能够真实反映 材料本身的抗病性 表 2 2 1 2 接种寄主苗龄 2 3 3 4 4 5 叶期进行 人工接种 番茄均可发病 发病率均为 100 随着 表 2 不同接种条件对人工接种鉴定效果的影响 Table 2 Effect of different inoculation treatments on the identification efficiency 接种方法 Inoculation 菌液浓度 Inoculum concentration 个 mL 苗龄 Seedling stage 环境温度 Environmental temperature 发病率 Disease incidence 病情指数 Disease index 10 6 90 0 1aA 66 7 1 4cC 10 7 100 0aA 89 2 1 4bB 10 8 2 3 叶期 2 3 leaf 20 100 0aA 96 7 1 4aA 2 3 叶期 2 3 leaf 100 0aA 91 7 3 8aA 3 4 叶期 3 4 leaf 100 0aA 90 8 2 9aA 10 7 4 5 叶期 4 5 leaf 20 100 0aA 89 2 1 4aA 20 100 0aA 91 7 2 9aA 25 100 0aA 80 8 2 9bB 10 7 2 3 叶期 2 3 leaf 30 100 0aA 71 7 1 4cC 浸根法 Root dipping 100 0aA 97 5 2 5aA 灌根法 Root irrigation 100 0aA 96 7 1 4aA 茎注射法 Stem injection 10 7 2 3 叶期 2 3 leaf 20 100 0aA 81 7 11 5bA 数据后不同大 小写字母分别表示经 Duncan s 新复极差法检验在 0 01 和 0 05 水平差异显著 Different capital and lowercase letters after the data indicate significant differences at 0 01 and 0 05 levels by DMRT respectively 4 期 王梦蕊等 番茄颈腐根腐病抗性鉴定技术的建立及抗性种质资源筛选 711 苗龄的增加 病情指数略有下降 2 3 片真叶时发病 最重 病情指数为 91 7 但不同苗龄接种对病情指数 影响差异并不显著 表 2 2 1 3 接种后管理温度 番茄幼苗植株接种颈腐根 腐病病原菌后 在不同的温度环境中发病率均为 100 在 20 时病情指数最高 随着温度的上升 病情指数也随之下降 差异极显著 表明接种后较低 的管理温度有利于番茄颈腐根腐病的发生 表 2 2 1 4 接种方法 采用不同的接种方法 番茄发病情 况有所不同 使用浸根法和灌根法进行鉴定 番茄颈 腐根腐病发病率和病情指数较高 显著优于茎注射法 表 2 2 2 番茄种质资源接种鉴定 采用苗期人工接种鉴定方法对 100 份番茄种质材 料进行抗颈腐根腐病鉴定 其中高代自交系 49 份 杂 交种 51 份 接种后 4 周进行病情分级调查 计算病情 指数并确定材料抗性级别 鉴定结果如表 3 所示 在 49 份高代自交系材料中 抗病种质有 12 份 包括来 自 TGRC 含 Frl 的 5 份抗源材料 LA1791 LA2829 LA3273 LA3292 和 LA3471 以及课题组筛选的 3 份砧木材料 ZM 4 ZM 6 和 ZM 7 在 51 份杂交种中 表现抗病的品种有 26 份 包括来自伟丽公司的 5 份砧 木以及不同单位或公司选育的商业栽培品种 2 3 番茄种质资源分子标记检测 对 100 份番茄种质材料进行分子标记检测 图 2 不同标记检测结果与人工接种鉴定结果有所差异 改 良 C2 25 标记准确率为 59 PNU D4 标记的准确率 为 83 而改良 SCAR Frl 标记准确率仅为 51 表 3 Tm 2 Dde I 标记检测结果显示 有 37 份材料携带 了纯合 Tm 2 37 份材料携带了杂合 Tm 2 D M R R H S S R H R H H S R R H H H H H H H S S H H M R R H S S R H R H H H R R H H H H H H H H H H H C B M R S S R R H H H H H R S S H H H S S S S S S S M R R S S S S R S R H H S S R R S S S H S S S H S A M DNA ladder 100 bp R 抗病型 Resistant S 感病型 Susceptible H 杂合型 Heterozygous 图 2 分子标记 C2 25 A PNU D4 B Tm 2 C 和 SCAR Frl D 在部分番茄材料中扩增检测结果 Fig 2 Amplification results of molecular markers C2 25 A PNU D4 B Tm 2 C and SCAR Frl D in parts of the tomato germplasms 712 中 国 农 业 科 学 55卷 表 3 番茄种质资源人工接种鉴定与分子标记检测结果 Table 3 The results of artificial inoculation and molecular detection of tomato germplasms 病情分级 DSS 分子标记 Molecular marker 编号 Number 材料 Material 世代 Generation 材料来源 Source 0 级 1 级 2 级 3 级 4 级 病情指数 DI 抗级 RT C2 25 PNU D4 Tm 2 SCAR Frl 1 VF 36 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 4 0 4 8 93 8 8 8 HS S S S S 2 Moneymaker 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS S S S S 3 M82 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS S S S S 4 Hawaii 7998 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 2 0 6 8 96 9 4 4 HS S S S S 5 LA2711 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 1 0 4 1 3 7 89 1 11 0 HS S S S S 6 LA3008 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 4 2 4 6 90 6 4 4 HS S S S S 7 Micro Tom 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 1 0 2 2 5 6 90 6 4 4 HS S S S S 8 E 6203 自交系 IL TGRC 0 0 1 0 1 0 1 1 5 7 89 1 11 0 HS S S S S 9 Ailsa Craig 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 1 0 1 1 6 7 93 8 4 4 HS S S S S 10 KR2 9706 自交系 IL 中国农业科学院 CAAS 0 0 0 0 0 0 1 1 7 7 96 9 0 HS S S R R 11 Momotaro yoku 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S R R 12 LA1589 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 1 2 7 6 95 3 2 2 HS S S S S 13 TS 40 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS S S R R 14 TS 52 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 4 0 4 8 93 8 8 8 HS R S R R 15 TS 151 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 3 1 5 7 93 8 4 4 HS S S S S 16 TS 175 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 3 0 5 8 95 3 6 6 HS S S R R 17 TS 211 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 4 1 4 7 92 2 6 6 HS R R R R 18 Heinz1706 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 1 2 7 6 95 3 2 2 HS S S S S 19 TS 272 自交系 IL TGRC 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS R R R R 20 ZM 4 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 7 6 1 2 0 0 0 0 0 0 4 7 2 2 HR S R R R 21 ZM 6 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I S R S S 22 ZM 7 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I S R S S 23 12g 60 自交系 IL 中国农业科学院 CAAS 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I R R R R 24 LA1791 a 自交系 IL TGRC 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I R R R R 25 LA2829 a 自交系 IL TGRC 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I R R R R 26 LA3273 a 自交系 IL TGRC 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I R R R R 27 LA3292 a 自交系 IL TGRC 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I S R R R 28 LA3471 a 自交系 IL TGRC 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I R R R R 29 强丰 Qiangfeng 自交系 IL 中国农业科学院 CAAS 0 0 0 0 0 0 2 0 6 8 96 9 4 4 HS S S S S 30 SD 1 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 3 1 5 7 93 8 4 4 HS S S R R 31 SD 2 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 8 7 0 1 0 0 0 0 0 0 1 6 2 2 HR S R S S 32 SD 3 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 2 0 6 8 96 9 4 4 HS S S S S 4 期 王梦蕊等 番茄颈腐根腐病抗性鉴定技术的建立及抗性种质资源筛选 713 续表 3 Continued table 3 病情分级 DSS 分子标记 Molecular marker 编号 Number 材料 Material 世代 Generation 材料来源 Source 0 级 1 级 2 级 3 级 4 级 病情指数 DI 抗级 RT C2 25 PNU D4 Tm 2 SCAR Frl 33 SD 4 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 1 0 3 8 4 92 2 11 0 HS S S R R 34 SD 5 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S H H 35 SD 6 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S R S 36 SD 7 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 8 7 0 1 0 0 0 0 0 0 1 6 2 2 HR S R R R 37 SD 8 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S H H 38 SD 9 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S R R 39 SD 10 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS S S S S 40 SD 11 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S H H 41 SD 12 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS S S R R 42 SD 13 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 1 0 2 0 5 8 93 8 8 8 HS S S S S 43 SD 14 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS S S R R 44 SD 15 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S R R 45 SD 16 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 1 1 7 7 96 9 0 HS R R R R 46 SD 17 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 5 3 3 5 0 0 0 0 0 0 12 5 4 4 R S R S S 47 SD 18 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 0 0 8 8 100 0 0 HS S S R R 48 SD 19 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 4 1 4 7 92 2 6 6 HS R S S S 49 SD 20 自交系 IL 山东省农业科学院 SAAS 0 0 0 0 0 0 3 0 5 8 95 3 6 6 HS S S R R 50 Ah2001 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8 98 4 2 2 HS H H H H 51 Ah2002 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 0 0 0 0 1 0 2 1 5 7 92 2 6 6 HS S S H H 52 Ah2003 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 0 0 0 0 0 0 2 1 6 7 95 3 2 2 HS H H R R 53 Ah2004 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I R R R R 54 Ah2005 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 8 7 0 1 0 0 0 0 0 0 1 6 2 2 HR S H H H 55 Ah2006 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 8 7 0 1 0 0 0 0 0 0 1 6 2 2 HR S H H H 56 Ah2007 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I H H H H 57 Ah2008 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 8 7 0 1 0 0 0 0 0 0 1 6 2 2 HR S H H H 714 中 国 农 业 科 学 55卷 续表 3 Continued table 3 病情分级 DSS 分子标记 Molecular marker 编号 Number 材料 Material 世代 Generation 材料来源 Source 0 级 1 级 2 级 3 级 4 级 病情指数 DI 抗级 RT C2 25 PNU D4 Tm 2 SCAR Frl 58 Ah2009 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 5 3 1 2 2 1 0 0 0 2 26 6 15 5 MR S H H H 59 Ah2010 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I S H H S 60 Ah2011 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 7 6 0 1 0 1 1 0 0 0 9 4 0 HR S H H H 61 Ah2012 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 I S H H S 62 Ah2013 杂交种 Hybrid 宛东番茄 公司 WDT 0 0 0 0 0 0 1 0 7 8