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NAC转录因子参与植物生长发育的诸多过程,在植物逆境应答中发挥重要的作用。本研究以蝴蝶兰的叶片为材料,运用RT-PCR及RACE技术克隆得到一条蝴蝶兰的NAC转录因子基因完整的cDNA序列,命名为PhNAC1GenBank登录号MF797909。PhNAC1基因cDNA序列全长1442 bp,ORF全长942 bp,编码313个氨基酸。预测其蛋白分子量35.22 kDa,等电点6.95,属于稳定亲水性蛋白。二级结构预测表明,无规则卷曲和延伸链为该蛋白的主要结构元件,与三级结构预测结果基本相符。PhNAC1编码的氨基酸序列与其他已登录的兰科植物NAC蛋白进行同源序列比对,表明与小兰屿蝴蝶兰XP＿0205763790亲缘关系较近,序列一致性达97,其次为铁皮石斛XP＿020695081,一致性为84。实时荧光定量PCR分析表明,PhNAC1基因在营养器官和生殖器官中均有表达,在蕊柱中的表达量最高。在11℃/6℃低温条件下,PhNAC1基因的转录表达水平在前5天随着处理时间逐渐升高,第7天下降;在4℃低温条件下,PhNAC1基因的表达水平在处理0.5 h表达量有所下降,1 h后表达量上升至对照水平,之后无明显变化,在处理24 h至48 h又逐渐升高,推测PhNAC1基因参与蝴蝶兰低温胁迫响应。实验结果为研究NAC转录因子在蝴蝶兰低温胁迫响应中的分子调控机理提供理论基础。
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