菊花‘神马’组培快繁体系的初步建立_苏泳梅.pdf

菊花 神马 组培快繁体系的初步建立 苏null梅 null锐珍 莫雨杏 徐俊苹 岭南师范学院生命科学与技术学院 广东湛江 524048 摘 要 为研究不同配比植物生长调节剂对菊花 神马 叶片愈伤组织诱导及植株再生的影响 通过对菊花 神马 幼叶进行消毒处 理 采用MS培养基和不同BA IAA激素组合 诱导愈伤组织 不定芽和不定根分化 结果显示 愈伤组织和不定芽再分化的最佳 培养基为MS 1 0mg LBA 0 5mg LIAA 再分化率为64 2 且不定芽生长健壮 最佳生根培养基为MS 1 0mg LIAA 生根率 达到100 各项生长指标表现优秀 通过不同土壤基质配比对组培苗进行驯化 发现最佳移栽基质组合为泥炭 珍珠岩 蛭石 2 1 1 生根小苗炼苗移栽后成活率达100 株高 根长 植物茎叶和根的湿干重方面表现最佳 本研究为菊花 神马 的快速繁 殖体系和工厂化育苗提供了理论支持 为其广泛推广和应用奠定了基础 关键词 菊花 神马 愈伤组织 再分化 生根 驯化 1 4 驯化移栽 将长至3cm的组培苗移栽至不同基质 泥炭 珍 珠岩 蛭石 1 1 1 2 1 1 3 1 1 4 1 1 中 覆盖透明膜 逐渐打孔通气 5d后完全揭去 14d 后调null苗的存活率 株高 根长等指标 1 5 数据处理及分析 Duncan s法用于多重比较分析 null母表示处理间 差异的显著性 p 0 05 愈伤组织诱导率 诱导出愈伤组织的外植体数 接种的外植体数 100 不定芽分化率 分化出不 定芽的愈伤组织数 接种的愈伤组织总数 100 不定芽增殖数 接种后增殖的不定芽数 接种的愈伤 组织总数 100 生根率 生根的外植体数 接种 的外植体数 100 驯化存活率 移植存活的外植 体数 移植的外植体数 100 2 结果与分析 2 1 叶片诱导愈伤组织和不定芽分化 由表1可知 添加BA时 愈伤组织诱导率较低 而添加IAA后 诱导率显著提高 达到100 添加I AA的外植体3d后表现出反向卷曲和膨大 7d后形 成黄绿色愈伤组织null粒 14d后愈伤组织增大 null粒紧 菊花原产于亚热带和温带地区 东亚地区常见 广 泛应用于观赏 中药和有机农业 菊花在全球观赏植 物市场中排名第二 主要生产国包括中国 日本和越 南 1 神马 菊花因其花朵大和抗病性强 在亚洲市场 上具有重要地位 中国菊花产业发展迅速 浙江 安徽 山东和河北是主要产区 遗传转化和组织培养为菊花 育种提供了新方法 推动了菊花产业的进步 2 本研究 旨在优化 神马 菊花的组培快繁体系 实现大规模无 性繁殖并保持遗传特性 为菊花遗传改良和产业化生 产提供新途径 推动菊花产业发展 并为其他观赏植物 的组培快繁提供参考 3 1 材料与方法 1 1 试验材料与无菌体系的建立 选取菊花 神马 新鲜幼叶用自来水冲洗干净 在 超净工作台内 先用75 乙醇浸泡30s 再用0 4 NaClO 用0 1 Tween20的灭菌水配制 浸泡10min 最后用无菌水冲洗3次 将叶片切割为0 5cm 0 5cm 的方块 接种于愈伤组织诱导培养基中 1 2 愈伤组织和不定芽的诱导 以MS培养基为基础 单独添加苄氨基腺嘌呤 BA 或混合添加吲哚乙酸 IAA 共10个处理组 见 表1 每个处理接种3个培养皿 每皿9块叶片 重复 3次 14d后 统计愈伤组织诱导率并nullnull生长情况 接着转移到相同培养基上继续诱导不定芽分化 14d 后统计不定芽再分化率和不定芽增殖数 培养基含30 g L蔗糖 8g L琼脂 pH值5 8 温度25 2 光照 16h 光照强度1800Lux 1 3 生根培养 取0 5cm不定芽接种于不同生根培养基 见表 2 每个处理接种10个试管 每试管接种1个芽 重复 3次 14d后统计生根率并null 植株各项生长指标 基金项目 国家自然科学基金项目 No 32302600 国家大学生2023 年大创项目 X202310579037 岭南师范学院高层次人才项目 ZL22017 共同资助 1 0 0 0cZ 0fZ 0fZ 2 0 5 0 0c 0f 0f 3 1 0 0 7 4 5 2b 白色 0f 0f 4 2 0 0 14 8 5 2b 白色 0f 0f 5 1 0 0 1 100 0a 绿色 12 8 1 46d 0 5 0 08d 6 1 0 0 5 100 0a 绿色 64 2 5 24ab 3 1 0 25b 7 1 0 1 0 100 0a 绿色 67 9 2 57a 3 9 0 31a 8 2 0 0 1 100 0a 绿色 4 1 0 52e 0 1 0 03e 9 2 0 0 5 100 0a 绿色 43 2 7 78c 2 0 0 59c 表1不同植物生长调节剂对菊花 神马 叶片诱导愈伤组织再分化的情况 处理 组 BA mg L IAA mg L 诱导率 愈伤组织 形态特征 不定芽诱导 率 不定芽数 10 注 不同的小写字母表示显著差异 p 0 05 下同 2 0 1 0 100 0a 绿色 60 5 3 49b 3 1 0 26b 2026年第17期 现代园艺 试验研究 null DOI 10 14051 ki xdyy 2026 17 010 密 图1 a 14d后转移到新的培养基继续诱导不定 芽 1 0mg LBA 1 0mg LIAA培养基的不定芽分化率 最高 67 9 平均诱导的不定芽数最多为3 9个 其 次为1 0mg LBA 0 5mg LIAA 64 2 和2 0mg L BA 1 0mg LIAA 60 5 观察发现 1 0mg LBA 0 5 mg LIAA的不定芽生长状态优于其他处理组 图 1 b 因此 适宜诱导愈伤组织不定芽再分化的最佳 培养基为MS BA1 0mg L IAA0 5mg L 2 2 生根培养 由表2可知 生根培养中 高浓度IAA 1 0和2 0 mg L 单独或与BA混合添加时对株高生长均有抑制 作用 低浓度IAA促进根的生长 综合考null各项生长 指标 IAA1 0mg L浓度对根长 茎叶湿干重和根湿干 重的促进效果较好 适合作为菊花不定芽的生根培养 图1 MS BA1 0mg L IAA0 5mg L培养基诱导愈伤组织 a 和 不定芽 b MS IAA1 0mg L培养基生根诱导 c 和泥炭 珍珠岩 蛭石 2 1 1土壤基质中驯化培养 d 的情况 1 0 0 0 0 100aZ 5 52 0 52a 4 68 0 47b 0 70 0 08e 0 57 0 05c 0 13 0 01d 39 00 2 5c 6 90 0 66e 2 0 0 0 1 100a 5 54 0 32a 5 32 0 45a 0 62 0 05f 0 49 0 03d 0 16 0 03c 37 88 4 1c 9 14 0 59d 3 0 0 0 5 100a 5 44 0 40a 5 12 0 46a 0 79 0 04d 0 60 0 03c 0 18 0 03c 44 16 3 4b 10 18 0 55c 4 0 0 1 0 100a 4 98 0 37b 5 02 0 45a 0 95 0 06b 0 68 0 05b 0 25 0 02b 49 34 5 1a 10 96 0 46b 5 0 0 2 0 100a 4 94 0 36b 3 04 0 3c 1 23 0 03a 0 86 0 05a 0 34 0 02a 49 26 4 4a 13 18 1 30a 6 0 1 0 5 100a 4 18 0 31c 1 22 0 27d 0 66 0 04ef 0 58 0 06c 0 08 0 01e 43 68 4 1b 4 42 0 02f 7 0 5 0 5 0b 3 46 0 41d 0e 0 86 0 03c 0 67 0 03b 0f 48 46 5 1a 0g 表2 不同植物生长调节剂处理对菊花 神马 生根培养中生长指标的影响 处理组 BA mg L IAA mg L 生根率 株高 cm 根长 cm 植物鲜重 g 茎叶鲜重 g 根鲜重 g 茎叶干重 mg 根干重 mg 1 1 1 1 100az 9 05 0 27a 9 32 0 94a 2 34 0 12a 2 01 0 16a 0 30 0 03b 0 29 0 03a 22 70 2 54b 2 2 1 1 100a 9 12 0 39a 9 42 0 83a 2 41 0 09a 1 99 0 12a 0 41 0 04a 0 28 0 02a 32 76 2 13a 3 3 1 1 100a 9 10 0 43a 9 34 0 91a 2 34 0 10a 1 94 0 11a 0 40 0 03a 0 27 0 02a 30 84 2 79a 4 4 1 1 100a 8 52 0 31b 7 88 0 51b 1 97 0 21b 1 71 0 11b 0 27 0 03b 0 20 0 02b 20 88 2 68b 表3 不同土壤基质对菊花 神马 驯化培养中生长指标的影响 处理组 泥炭 珍珠岩 蛭石 存活率 株高 cm 根长 cm 植物鲜重 g 全株鲜重 g 根鲜重 g 茎叶干重 g 根干重 mg 基 2 3 驯化培养 由表3可知 所有基质配比的成活率均为100 处理组2在株高 根长 全株鲜重和根湿干重方面表现 最佳 其次是处理组3和处理组1 而处理组4生长较 慢 茎叶湿干重方面 处理组4最差 3 讨论与结论 近年来 菊花离体叶片分生组织在转基因研究中 得到广泛应用 转化周期短 遗传稳定性较好 具有良 好前景 4 本研究通过BA和IAA配比探讨了其对菊花 神马 愈伤组织诱导 再分化及生根的影响 为工厂化 育苗和转基因提供技术支持 与之前的研究结果相似 诱导愈伤组织最适培养基为MS 1 0 2 0 mg LBA 0 1 1 0 mg LIAA 仅需14d就能获得色泽透明浅 绿 结构致密的愈伤组织 其诱导率为100 5 MS 1 0 mg LBA 0 5mg LIAA培养基最适合菊花 神马 愈伤 组织的不定芽再分化 这些结果也与Waseem等 6 的研 究结果一致 表明高浓度的IAA具有抑制作用 低浓 度的IAA对于芽再生至关重要 菊花生根培养中 综 合考null生根率 根长和茎叶生长指标 最佳生根培养基 为MS 1 0mg LIAA 7 在组培苗驯化过程中 不同基质 配比成活率均达到100 其中泥炭 珍珠岩 蛭石 2 1 1的配比驯化苗生长情况良好 株高 根长 植 株鲜重和干重均优于其他处理组 8 总的来说 从建立无菌体系到愈伤组织诱导 不定 芽发生 植株生根和驯化 整个过程null需2个月即可获 得大量完整的菊花 神马 植株 这些成果解决了菊花 神马 繁育困难的问题 显著提高了育苗效率 节约了 生产成本和出货时间 为菊花 神马 工厂化育苗提供 了技术支持 同时将促进菊花品种 神马 的遗传转化 为菊花分子育种提供新材料 收稿 2025 07 04 参考文献 1 Fukai S Flowering physiology of chrysanthemum J In International SymposiumonOrchidsandOrnamentalPlants 2014 1025 135 142 2 Okamura M Tanaka A Momose M et al Advances of mutagenesis in flowersandtheirindustrialization J Advancesof mutagenesisin flowers andtheirindustrialization Energy 2006 20 260 1 3 3 Zalewska M Justyna Lema Rumi ska Miler N In vitro propagation using adventitious buds technique as a source of new variability in chrysanthemum J ScientiaHorticulturae 2007 113 1 70 73 4 Jo K M Jo Y Choi H et al Development of genetically modified chrysanthemumsresistanttoChrysanthemumstuntviroidusingsenseand antisenseRNAs J ScientiaHorticulturae 2015 195 17 24 5 Bhat S G Arulananthu G Ramesh N In vitro Callus Induction and Regeneration of Brinjal Solanum melongena L through Cotyledon J 试验研究 现代园艺 2026年第17期 null IndianJournalofAgriculturalResearch 2021 55 3 335 340 6 WaseemK Khan MQ Jaskani J etal Effect of differentauxins on the regenerationcapabilityofchrysanthemumleafdiscs J InternationalJour nalofAgricultureandBiology 2009 11 4 468 472 7 Khan M S I Khatun F Afrin S etal Callus induction and plantlet re generationinChrysanthemum J Int J Bus Soc Sci Res 2020 8 1 6 10 8 殷东林 刘磊 孙伟 菊花茎段组织快繁体系的建立 J 信阳农业高 等专科学校学报 2013 23 4 91 94 山杜英扦插繁殖技术研究 刘丽珍 宁化县林业局 福建宁化 365400 摘 要 以2年生山杜英作为母株 取其枝条剪成扦插繁殖材料 分析不同时期和不同插穗粗度对山杜英扦插繁殖生根的影响 结 果表明 10月上旬进行山杜英扦插繁殖的效果最佳 平均生根率为93 26 平均生根量达7 37条 平均根长6 06条 0 3 0 4cm粗 度的插穗扦插繁殖生根效果最优 山杜英插穗平均生根率达92 18 平均生根量为6 86条 平均根长为5 94cm 关键词 山杜英 繁殖 扦插 生根率 2 2 试验材料 选取2年生生长良好且无病害的山杜英植株作为 采穗母树 剪取其外侧健null的枝条作为扦插穗条 穗条 需保持在稍木质化或半木质化状态 将准备好的穗条 截成8 12cm长的插穗 距顶芽0 5cm处剪成平口 距 底芽1cm处剪成斜口 使用8cm 10cm的无纺布育 苗袋作为育苗容器 袋内装入山土作为育苗基质 2 3 试验设计 2 3 1 不同时期山杜英扦插生根试验 分别于2023年 2月下旬 5月上旬 10月上旬和12月中旬4个时期 开展试验 每个处理50株 重复3次 采用茎粗 0 3 0 4cm的山杜英枝条作插穗 插穗下方3 4cm使 用100mg L浓度的ABT 1 生根剂溶液浸泡2h 育苗容 器中的基质在扦插前1d进行消毒处理 扦插时使用 比山杜英插穗稍微大一些的小竹棍在基质中心打孔深 4 6cm放入插穗 轻压插穗基部周围的基质 增强固 定性 随后用清水浇透基质 在保证介质湿润的同时促 进插穗与基质贴合 扦插完成后 搭建塑料薄膜小拱 棚 高50 60cm 棚内湿度保持在85 95 之间 扦 插后根据天气情况做好相应的通风降热或保温保湿措 施 2 3 2 不同插穗粗度山杜英扦插生根试验 在不同时期 对山杜英扦插生根的影响试验完成后 整理资料得出 最佳扦插时期 在翌年进行不同插穗粗度对山杜英扦 插生根影响的比对试验 选取3种不同茎粗0 1 0 2 cm 0 2 0 3cm 0 3 0 4cm的插穗进行扦插对比试验 采用完全随机设计 每个处理50株 重复3次 插穗的 处理及扦插方法与2 3 1的试验相同 2 4 试验数据调查及统计分析 扦插90d后统计试验数据 以每个处理 50株 进 行调null 调null山杜英不同试验处理的各项生根指标 平 均生根率 平均生根量及平均根长 采用DPSV7 50 版统计软件进行数据分析 3 结果与分析 3 1 不同时期对山杜英扦插生根的影响 由表1可知 5月上旬和10上旬所达到的扦插生 山杜英 ElaeocarpussylvestrisnullLour nullPoir 又名胆八 树 羊屎树 杜莺等 是杜英科杜英属常绿小乔木 1 该 树种具有较高的移植成活率 且在根系稳定后生长速 度快 对环境适应性强 广泛分布于我国的广东 海南 广西 福建 贵州及四川等地区 2 山杜英为常绿小乔 木 树形优美 树null圆整 在一年四季中总带着几片红 叶 形成独特的红绿相间观叶景观 经过多年的绿化开 发使用 山杜英已成为庭院景观点缀 城镇绿化和景观 林建设中的常见树种 3 此外 山杜英不仅是耐火性树 种 对土壤环境的适应能力也较强 在土壤贫瘠的地方 也能较好地生长 因此在营建生物防火林带和水源涵 养林等领域具有一定的应用价值 4 6 作为能带来一定 经济效益和环境效益的乡土阔叶树种 要使其良种保 持性状稳定和优良品质的延续 离不开扦插繁殖技术 的支持 在参阅相关文献 7 9 的基础上 对山杜英开展不 同时期和插穗不同粗度扦插繁殖对比试验 以期为山 杜英良种扦插繁育提供相关技术参考 1 试验地概况 试验地位于福建省宁化县林业局苗圃 东经 116 6167 北纬26 2667 无霜期214 248d 属中 亚热带山地气候 年均日照时数1757h 年平均降 水量1700 1800mm 区内自然条件适宜山杜英扦插 繁育 2 试验材料和方法 2 1 苗床准备 在试验开始前 选择通风且排水良好处的育苗地 进行深翻 并整成null90 100cm 高30 35cm的苗床 扦插前3d清理苗床杂草及杂物 使用代森null锌配制 成的杀菌溶液对苗床进行消毒 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 2026年第17期 现代园艺 试验研究 null