内源抑制物对多花芍药种子上胚轴休眠的影响.pdf

第 52 卷 第 9 期 2024 年 9 月 西 北 农 林 科 技 大 学 学 报 自 然 科 学 版 J ou r na l o f No r t hwe s t A 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 32071825 作 者 简 介 袁 秋 萍 1999 女 陕 西 安 康 人 在 读 硕 士 主 要 从 事 园 林 植 物 资 源 与 利 用 研 究 E ma i l yuanq i up i ng b j f u edu cn 通 信 作 者 刘 燕 1963 女 湖 南 永 州 人 教 授 博 士 博 士 生 导 师 主 要 从 事 园 林 植 物 资 源 与 利 用 研 究 E ma i l l i u yan b j f u edu cn 万 映 伶 1994 女 四 川 成 都 人 讲 师 博 士 主 要 从 事 芍 药 种 质 资 源 与 利 用 研 究 E ma i l wan y i ng l i ng b j f u edu cn 袁 秋 萍 倪 巍 万 映 伶 刘 燕 北 京 林 业 大 学 园 林 学 院 国 家 花 卉 工 程 技 术 研 究 中 心 花 卉 种 质 创 新 与 分 子 育 种 北 京 市 重 点 实 验 室 城 乡 生 态 环 境 北 京 实 验 室 北 京 100083 摘 要 目 的 明 确 多 花 芍 药 生 根 种 子 对 上 胚 轴 休 眠 解 除 抑 制 作 用 最 强 的 部 位 及 其 潜 在 影 响 原 因 为 阐 明 多 花 芍 药 种 子 的 休 眠 机 制 提 供 参 考 方 法 分 别 采 用 多 花 芍 药 生 根 种 子 胚 乳 种 皮 胚 3 部 分 的 浸 提 液 处 理 白 菜 种 子 确 定 抑 制 作 用 最 强 的 部 位 将 该 部 位 浸 提 液 1 2 g L 添 加 到 多 花 芍 药 离 体 胚 培 养 基 中 研 究 其 对 本 体 上 胚 轴 休 眠 解 除 的 影 响 观 测 生 根 离 体 胚 移 入 成 苗 培 养 基 后 的 形 态 和 脱 落 酸 赤 霉 素 ABA GA3 值 变 化 确 定 上 胚 轴 休 眠 解 除 过 程 中 的 关 键 时 间 节 点 用 各 关 键 节 点 胚 浸 提 液 处 理 易 萌 发 的 白 菜 种 子 研 究 其 对 白 菜 种 子 发 芽 率 过 氧 化 氢 H2O2 含 量 羟 自 由 基 OH 清 除 能 力 抗 氧 化 酶 超 氧 化 物 歧 化 酶 SOD 过 氧 化 氢 酶 CAT 过 氧 化 物 酶 POD 活 性 抗 坏 血 酸 AsA 和 谷 胱 甘 肽 GSH 含 量 及 NADP 苹 果 酸 脱 氢 酶 NADP MDH 丙 酮 酸 激 酶 PK 6 磷 酸 葡 萄 糖 脱 氢 酶 G6PDH 活 性 的 影 响 分 析 白 菜 种 子 发 芽 率 与 这 些 指 标 间 的 相 关 性 结 果 多 花 芍 药 生 根 种 子 种 皮 胚 乳 和 胚 浸 提 液 均 可 显 著 抑 制 白 菜 种 子 萌 发 及 幼 苗 生 长 抑 制 强 度 由 大 到 小 依 次 为 胚 胚 乳 种 皮 1 2 g L 胚 浸 提 液 均 可 显 著 降 低 多 花 芍 药 离 体 胚 上 胚 轴 休 眠 解 除 率 生 根 离 体 胚 移 入 成 苗 培 养 基 的 第 4 8 12 16 天 分 别 观 测 到 ABA GA3 出 现 拐 点 S2 胚 芽 萌 出 S3 胚 芽 伸 长 S4 和 真 叶 展 开 S5 关 键 变 化 多 花 芍 药 离 体 胚 移 入 成 苗 培 养 基 之 前 S1 及 S2 S5 节 点 胚 浸 提 液 均 可 抑 制 白 菜 种 子 萌 发 且 S4 节 点 胚 浸 提 液 的 抑 制 强 度 最 大 该 节 点 胚 浸 提 液 处 理 白 菜 种 子 H2O2 含 量 OH 清 除 能 力 SOD 活 性 和 GSH AsA 含 量 均 显 著 提 高 同 时 CAT POD PK G6PDH 活 性 均 显 著 降 低 相 关 性 分 析 结 果 显 示 各 节 点 胚 浸 提 液 处 理 白 菜 种 子 的 发 芽 率 与 H2O2 含 量 OH 清 除 能 力 GSH 含 量 极 显 著 负 相 关 与 SOD 活 性 显 著 负 相 关 与 CAT POD PK 和 G6PDH 活 性 极 显 著 正 相 关 与 AsA 含 量 和 NADP MDH 活 性 相 关 性 不 显 著 结 论 多 花 芍 药 生 根 种 子 抑 制 作 用 最 强 的 部 位 是 胚 胚 中 内 源 抑 制 物 在 胚 芽 伸 长 阶 段 抑 制 作 用 最 强 其 作 用 机 制 是 通 过 影 响 种 子 活 性 氧 及 抗 氧 化 物 质 含 量 呼 吸 代 谢 酶 活 性 而 发 挥 抑 制 作 用 关 键 词 多 花 芍 药 上 胚 轴 休 眠 内 源 抑 制 物 抗 氧 化 物 质 呼 吸 代 谢 酶 中 图 分 类 号 S682 12 文 献 标 志 码 A 文 章 编 号 1671 9387 2024 09 0109 11 E f f e c t s o f e n d o g e n o u s i n h i b i t o r s o n e p i c o t y l d o r m a n c y o f P a e o n i a e m o d i W a l l e x R o y l e s e e d YUAN Qi up i ng NI We i WAN Yi ng l i ng LIU Yan N a t i o n a l E n g i n e e r i n g R e s e a r c h C e n t e r f o r F l o r i c u l t u r e L a b o r a t o r y o f O r n a m e n t a l P l a n t s G e r m p l a s m I n n o v a t i o n M o l e c u l a r B r e e d i n g B e i j i n g L a b o r a t o r y o f U r b a n a n d R u r a l E c o l o g i c a l E n v i r o n m e n t C o l l e g e o f L a n d s c a p e A r c h i t e c t u r e B e i j i n g F o r e s t r y U n i v e r s i t y B e i j i n g 100083 C h i n a A b s t r a c t Ob j e c t i ve I n t h i s s t udy expe r imen t s we r e c a r r i ed ou t t o c l a r i f y t he s t r onge s t i nh i b i t o r y i n t ens i t y o f e a ch pa r t s o f P a e o n i a e m o d i r oo t ed s e eds on ep i co t y l do rmanc y r e l e a s ed and t he po t en t i a l r e a s ons f o r t he i n f l uenc e o f emb r yo i nh i b i t o r s on ep i c o t y l do rmanc y s o a s t o p r ov i de a r e f e r enc e f o r e l uc i da t i ng t he do rmanc y me chan i sm o f P e m o d i s e ed Me t hod The ex t r a c t s f r om endo spe rm s e ed c oa t and emb r yo o f P e m o d i r oo t ed s e eds we r e us ed t o t r e a t B r a s s i c a p e k i n e n s i s s e eds s o a s t o c l a r i f y t he l oc a t i on wi t h t he s t r onge s t i n t ens i t y The ex t r a c t s 1 2 g L o f t h i s pa r t we r e added t o t he exc i s ed embr yo med i um t o s t udy t he e f f e c t on ep i c o t y l do rmanc y o f P e m o d i The change s o f mo r pho l ogy and ABA GA3 o f r oo t ed exc i s ed embr yo we r e obs e r ved a f t e r t hey we r e t r ans f e r r ed i n t o t he s e ed l i ng med i um and t he key t ime node s t o b r e ak ep i c o t y l do rmanc y we r e de t e rmi ned B p e k i n e n s i s s e eds wh i ch we r e e a s y t o ge rmi na t e we r e t r e a t ed wi t h t he embr yo ex t r a c t s f r om t he key node s t o i nve s t i ga t e t he t he ex t r a c t s e f f e c t s on ge rmi na t i on pe r c en t age hyd r ogen pe r ox i de H2O2 con t en t hyd r oxy l r ad i c a l OH s c aveng i ng ab i l i t y an t i ox i dan t en z yme a c t i v i t i e s supe r ox i de d i smu t a s e SOD c a t a l a s e CAT pe r ox i da s e POD a s c o rb i c a c i d AsA and g l u t a t h i one GSH c on t en t r e sp i r a t o r y me t abo l i c enz yme a c t i v i t i e s NADP ma l a t e dehyd r ogena s e NADP MDH py ruva t e k i na s e PK g l uc o s e 6 pho spha t e dehyd r ogena s e G6PDH The co r r e l a t i on be twe en t he ge rmi na t i on r a t e o f B p e k i n e n s i s s e eds and t he s e i ndexe s wa s ana l y z ed Re su l t The ex t r a c t s o f s e ed c oa t endo spe rm embr yo f r om t he r oo t ed s e eds s i gn i f i c an t l y i nh i b i t ed B p e k i n e n s i s s e eds ge rmi na t i on and t he i nh i b i t i on i n t ens i t y embr yo endo spe rm s e ed coa t Me anwh i l e t he embr yo ex t r a c t s 1 2 g L c ou l d s i gn i f i c an t l y r educ e t he ep i co t y l do rmanc y r e l e a s e pe r c en t age o f exc i s ed embr yo On t he 4 t h 8 t h 12 t h and 16 t h days a f t e r t he r oo t ed exc i s ed embr yos we r e t r ans f e r r ed i n t o t he s e ed l i ng med i um t he eme r genc e o f ABA GA3 i n f l e c t i on po i n t S2 p l umu l e ge rmi na t i on S3 p l umu l e e l onga t i on S4 and t rue l e ave s expans i on S5 we r e obs e r ved r e spe c t i ve l y The emb r yo ex t r a c t s o f P e m o d i a t S1 S5 S1 i s be f o r e t he t r ans f e r o f exc i s ed emb r yos i n t o s e ed l i ng med i um i nh i b i t ed t he ge rmi na t i on o f B p e k i n e n s i s s e eds and t he embr yo ex t r a c t s a t S4 had t he g r e a t e s t i nh i b i t o r y s t r eng t h S4 node embr yo ex t r a c t s s i gn i f i c an t l y i nc r e a s ed H2O2 c on t en t OH s c aveng i ng ab i l i t y SOD a c t i v i t y AsA and GSH c on t en t At t he s ame t ime t he a c t i v i t i e s o f CAT POD PK and G6PDH we r e s i gn i f i c an t l y de c r e a s ed Co r r e l a t i on ana l ys i s showed t ha t t he ge rmi na t i on pe r c en t age o f B p e k i n e n s i s s e eds had ve r y s i gn i f i c an t nega t i ve c o r r e l a t i on wi t h H2O2 c on t en t OH s c aveng i ng ab i l i t y and GSH c on t en t had s i gn i f i c an t nega t i ve c o r r e l a t i on wi t h SOD a c t i v i t y and had ve r y s i gn i f i c an t pos i t i ve co r r e l a t i on wi t h CAT POD PK G6PDH a c t i v i t y and had no s i gn i f i c an t co r r e l a t i on wi t h AsA c on t en t and NADP MDH a c t i v i t y Conc l us i on The embr yo wa s t he mo s t s t r ong l y i nh i b i t ed pa r t i n P e m o d i r oo t ed s e eds and t he i nh i b i t o r i n emb r yo exe r t s t he max imum i n h i b i t o r y e f f e c t a t t he p l umu l e e l onga t i on node The i nh i b i t i on i n embr yo may p l ay a r o l e by a f f e c t i ng ROS an t i ox i dan t subs t anc e s and r e sp i r a t o r y me t abo l i c enz yme s K e y w o r d s P a e o n i a e m o d i ep i c o t y l do rmanc y endogenous i nh i b i t o r s an t i ox i dan t subs t anc e s r e sp i r a t o r y me t abo l i c enz yme s 多 花 芍 药 P a e o n i a e m o d i Wa l l ex Roy l e 是 芍 药 科 芍 药 属 的 一 种 分 布 极 其 狭 窄 的 野 生 植 物 资 源 1 与 芍 药 属 其 他 种 相 比 多 花 芍 药 花 量 多 植 株 高 大 可 达 115 cm 是 培 育 丰 花 高 大 芍 药 品 种 的 良 好 育 种 材 料 2 其 根 茎 富 含 芍 药 苷 酚 类 萜 类 等 抗 氧 化 物 质 对 于 治 疗 神 经 性 疾 病 具 有 良 好 的 药 用 价 值 3 但 尚 未 实 现 人 工 栽 培 目 前 对 多 花 芍 药 的 相 关 研 究 较 少 主 要 集 中 在 药 用 价 值 评 价 1 3 和 种 子 休 眠 4 5 方 面 本 课 题 组 前 期 对 多 花 芍 药 的 研 究 结 果 表 明 其 种 子 休 眠 解 除 困 难 需 持 续 110 d 的 低 温 层 积 才 能 解 除 上 胚 轴 休 眠 射 线 处 理 与 赤 霉 素 浸 泡 均 不 能 解 除 完 整 种 子 休 眠 4 5 但 是 对 种 子 休 眠 的 机 制 尚 不 清 楚 种 子 繁 殖 是 不 破 坏 原 生 境 而 获 得 大 量 后 代 的 有 效 方 法 是 资 源 利 用 的 第 一 步 解 析 多 花 芍 药 种 子 上 胚 轴 休 眠 的 原 因 对 于 其 高 效 繁 殖 利 用 具 有 重 要 意 义 种 子 内 抑 制 休 眠 解 除 的 物 质 被 称 为 内 源 抑 制 物 其 是 造 成 种 子 休 眠 的 重 要 原 因 广 泛 分 布 于 各 类 植 物 中 可 以 避 免 种 胚 在 不 适 合 的 环 境 下 萌 发 或 提 前 萌 发 以 保 护 幼 苗 正 常 生 长 6 7 但 在 实 际 生 产 中 内 源 抑 制 物 会 延 长 种 子 休 眠 时 间 降 低 繁 殖 效 率 8 目 前 针 对 休 眠 种 子 内 源 抑 制 物 的 研 究 已 经 取 得 一 些 成 果 对 拟 南 芥 A r a b i d o p s i s t h a l i a n a 9 红 松 P i n u s k o r a i e n s i s 10 乌 桕 S a p i u m 0 1 1 西 北 农 林 科 技 大 学 学 报 自 然 科 学 版 第 52 卷s e b i f e r u m 11 等 物 种 的 研 究 表 明 内 源 抑 制 物 通 过 影 响 种 子 活 性 氧 r e a c t i ve oxygen spe c i e s ROS 水 平 呼 吸 强 度 激 素 含 量 等 发 挥 作 用 关 于 芍 药 属 植 物 种 子 内 源 抑 制 物 的 研 究 已 有 不 少 报 道 但 主 要 集 中 在 牡 丹 组 12 19 芍 药 组 仅 见 芍 药 P l a c t i f l o r a 20 21 及 多 花 芍 药 5 的 初 步 研 究 研 究 发 现 芍 药 属 种 子 的 胚 乳 12 18 20 21 种 皮 12 18 20 21 和 胚 13 14 中 均 存 在 内 源 抑 制 物 张 梅 娟 等 20 研 究 了 芍 药 胚 乳 种 皮 内 源 抑 制 物 在 根 前 期 生 根 期 发 芽 期 的 抑 制 强 度 发 现 这 3 个 时 期 的 抑 制 强 度 逐 渐 降 低 仇 云 云 等 16 对 大 花 黄 牡 丹 P l u d l o w i i 的 研 究 取 得 了 相 似 的 结 果 紫 斑 牡 丹 17 芍 药 21 胚 乳 和 种 皮 内 源 抑 制 物 通 过 影 响 超 氧 化 物 歧 化 酶 supe r ox i de d i s mu t a s e SOD 过 氧 化 氢 酶 c a t a l a s e CAT 和 过 氧 化 物 酶 pe r ox i da s e POD 活 性 来 抑 制 白 菜 种 子 的 萌 发 目 前 尚 未 见 芍 药 属 种 子 内 源 抑 制 物 对 活 性 氧 呼 吸 强 度 和 激 素 含 量 等 生 理 指 标 影 响 的 研 究 报 道 为 此 本 研 究 以 多 花 芍 药 生 根 种 子 为 材 料 白 菜 为 受 体 确 定 生 根 种 子 抑 制 作 用 最 强 的 部 位 以 及 该 部 位 浸 提 液 对 多 花 芍 药 离 体 胚 上 胚 轴 休 眠 解 除 的 影 响 确 定 多 花 芍 药 上 胚 轴 休 眠 解 除 的 关 键 时 间 节 点 并 分 析 各 节 点 浸 提 液 对 白 菜 种 子 发 芽 率 ROS 抗 氧 化 物 质 及 呼 吸 代 谢 酶 的 影 响 以 期 为 多 花 芍 药 内 源 抑 制 物 影 响 自 体 休 眠 作 用 机 制 的 研 究 奠 定 基 础 1 材 料 与 方 法 1 1 试 验 材 料 研 究 所 用 多 花 芍 药 种 子 于 2022 年 8 月 上 旬 采 自 西 藏 吉 隆 县 84 35 86 20 E 28 30 29 30 N 种 子 生 活 力 为 91 11 5 09 种 子 沙 藏 参 考 张 慜 5 的 方 法 在 室 温 下 用 去 离 子 水 浸 泡 24 h 在 15 相 对 湿 度 60 的 环 境 中 进 行 沙 藏 获 取 生 根 2 4 cm 的 种 子 白 菜 种 子 购 自 京 研 益 农 北 京 种 业 科 技 有 限 公 司 种 类 为 结 球 白 菜 发 芽 率 85 0 纯 度 96 0 1 2 试 验 方 法 1 2 1 多 花 芍 药 生 根 种 子 浸 提 液 制 备 及 其 抑 制 强 度 确 定 参 考 李 婉 茹 17 的 方 法 取 多 花 芍 药 生 根 2 4 cm 的 种 子 分 离 胚 乳 种 皮 和 胚 3 个 部 分 分 别 粉 碎 后 各 取 1 g 加 入 10 mL 蒸 馏 水 在 25 下 密 闭 浸 提 24 h 10 000 r mi n 离 心 15 mi n 取 上 清 液 定 容 至 10 mL 即 得 各 部 位 0 1 g mL 浸 提 液 取 胚 乳 T1 种 皮 T2 胚 T3 浸 提 液 各 3 mL 分 别 加 入 放 有 两 层 滤 纸 的 培 养 皿 中 以 加 入 等 体 积 蒸 馏 水 的 处 理 为 对 照 CK 每 个 培 养 皿 放 50 粒 白 菜 种 子 培 养 设 3 个 重 复 培 养 条 件 为 恒 温 25 相 对 湿 度 60 光 照 度 4 000 l x 光 暗 周 期 12 h 12 h 48 h 后 以 胚 根 长 大 于 种 子 直 径 为 发 芽 标 准 统 计 白 菜 种 子 发 芽 数 计 算 发 芽 率 72 h 后 每 皿 随 机 取 20 粒 种 子 用 直 尺 测 量 根 长 和 苗 高 比 较 各 处 理 的 发 芽 率 根 长 和 苗 高 确 定 多 花 芍 药 生 根 种 子 不 同 部 位 浸 提 液 对 白 菜 种 子 萌 发 的 抑 制 强 度 发 芽 率 发 芽 种 子 数 供 试 种 子 总 数 100 1 2 2 离 体 胚 破 眠 处 理 离 体 胚 破 眠 处 理 参 考 张 慜 5 的 方 法 进 行 用 流 水 将 多 花 芍 药 种 子 表 面 彻 底 洗 净 洗 洁 精 浸 泡 20 mi n 后 用 流 水 冲 洗 40 mi n 以 上 在 超 净 工 作 台 上 用 医 用 酒 精 体 积 分 数 为 75 浸 泡 1 mi n 无 菌 水 多 次 冲 洗 种 子 去 除 表 面 残 留 酒 精 再 用 NaClO 溶 液 体 积 分 数 2 浸 泡 15 mi n 无 菌 水 洗 净 从 消 毒 后 的 种 子 中 剥 离 种 胚 接 种 到 生 根 培 养 基 1 2 MS 0 6 g L 活 性 炭 30 g L 蔗 糖 6 5 g L 琼 脂 pH 5 8 6 0 上 培 养 培 养 条 件 为 光 照 时 间 14 h d 光 照 度 2 000 3 000 l x 温 度 23 2 待 离 体 胚 生 根 2 4 cm 时 将 其 移 入 生 根 培 养 基 0 5 mg L 赤 霉 素 GA3 成 苗 培 养 基 对 照 同 时 设 置 多 花 芍 药 生 根 种 子 胚 浸 提 液 培 养 基 成 苗 培 养 基 1 或 2 g L 浸 提 液 处 理 培 养 条 件 同 生 根 处 理 每 处 理 接 种 15 个 胚 设 3 个 重 复 每 天 观 察 各 处 理 离 体 胚 的 生 长 情 况 统 计 胚 芽 萌 出 时 间 上 胚 轴 休 眠 解 除 时 间 生 根 离 体 胚 移 入 各 处 理 培 养 基 至 真 叶 完 全 展 开 的 时 间 待 对 照 真 叶 展 开 40 d 后 统 计 上 胚 轴 休 眠 解 除 率 上 胚 轴 休 眠 解 除 率 真 叶 展 开 的 离 体 胚 数 生 根 离 体 胚 总 数 100 1 2 3 离 体 胚 休 眠 解 除 过 程 关 键 节 点 的 确 定 多 花 芍 药 生 根 种 子 胚 移 入 成 苗 培 养 基 之 前 0 d 记 为 S1 根 据 张 慜 5 的 研 究 结 果 多 花 芍 药 种 子 在 低 温 层 积 到 胚 芽 萌 出 期 间 会 出 现 脱 落 酸 赤 霉 素 ABA GA3 拐 点 将 此 拐 点 时 期 定 为 S2 将 胚 芽 萌 出 胚 芽 伸 长 和 真 叶 展 开 的 时 间 分 别 定 为 S3 S4 和 S5 逐 日 观 察 破 眠 处 理 离 体 胚 的 上 胚 轴 及 子 叶 形 态 变 化 记 录 胚 芽 萌 出 胚 芽 伸 长 和 真 叶 展 开 的 时 间 每 天 用 体 式 显 微 镜 Le i c a EZ 德 国 观 察 15 个 胚 以 90 的 胚 出 现 相 应 形 态 特 征 的 时 间 点 为 准 拍 照 记 录 用 酶 联 免 疫 法 试 剂 盒 购 自 中 国 农 业 大 学 测 定 S1 S5 各 节 点 胚 中 ABA 和 GA3 的 含 量 每 份 样 1 1 1 第 9 期 袁 秋 萍 等 内 源 抑 制 物 对 多 花 芍 药 种 子 上 胚 轴 休 眠 的 影 响品 取 0 2 g 重 复 3 次 根 据 形 态 指 标 和 ABA GA3 值 的 变 化 确 定 休 眠 解 除 的 关 键 节 点 1 2 4 关 键 节 点 胚 浸 提 液 对 白 菜 种 子 相 关 指 标 的 影 响 制 备 S1 S5 节 点 胚 浸 提 液 处 理 白 菜 种 子 浸 提 液 制 备 方 法 及 白 菜 培 养 条 件 同 1 2 1 节 48 h 后 计 算 发 芽 率 并 测 定 相 关 生 理 指 标 其 中 SOD CAT 和 POD 活 性 过 氧 化 氢 H2O2 抗 坏 血 酸 a s co rb i c a c i d AsA 和 谷 胱 甘 肽 g l u t a t h i one GSH 含 量 及 羟 自 由 基 OH 清 除 能 力 均 采 用 南 京 建 成 试 剂 盒 测 定 NADP 苹 果 酸 脱 氢 酶 NADP ma l a t e dehyd r ogena s e NADP MDH 丙 酮 酸 激 酶 py ruva t e k i na s e PK 6 磷 酸 葡 萄 糖 脱 氢 酶 g l u c os e 6 pho spha t e dehyd r ogena s e G6PDH 活 性 采 用 苏 州 科 铭 的 试 剂 盒 测 定 具 体 步 骤 详 见 说 明 书 每 个 处 理 的 每 份 样 品 取 0 1 g 重 复 3 次 以 蒸 馏 水 处 理 为 对 照 CK1 1 3 数 据 分 析 试 验 数 据 采 用 Mi c r os o f t exc e l 2019 进 行 统 计 采 用 SPSS S t a t i s t i c s 26 0 进 行 方 差 分 析 及 Pe a r s on 相 关 性 分 析 用 Gr aphPad Pr i sm 8 进 行 图 表 绘 制 2 结 果 与 分 析 2 1 多 花 芍 药 生 根 种 子 各 部 位 浸 提 液 的 抑 制 强 度 由 图 1 可 知 与 对 照 相 比 多 花 芍 药 生 根 种 子 3 个 部 位 浸 提 液 均 可 显 著 降 低 白 菜 种 子 的 发 芽 率 及 根 长 苗 高 抑 制 强 度 由 大 到 小 依 次 为 胚 胚 乳 种 皮 其 中 胚 浸 提 液 处 理 的 白 菜 种 子 发 芽 率 为 0 种 皮 浸 提 液 处 理 的 白 菜 发 芽 率 显 著 高 于 胚 乳 浸 提 液 处 理 但 两 处 理 的 根 长 和 苗 高 无 显 著 差 异 可 见 多 花 芍 药 生 根 种 子 中 胚 对 白 菜 种 子 萌 发 及 幼 苗 生 长 的 抑 制 作 用 最 强 因 此 选 择 胚 浸 提 液 进 行 后 续 试 验 CK T1 T2 T3 分 别 代 表 蒸 馏 水 及 胚 乳 种 皮 和 胚 浸 提 液 图 柱 上 标 不 同 小 写 字 母 代 表 处 理 间 差 异 显 著 P 0 05 下 图 同 CK T1 T2 and T3 r ep r e s en t d i s t i l l ed wa t e r endo spe rm s e ed c oa t and embr yo ex t r a c t s r e spe c t i ve l y Di f f e r en t l owe r c a s e l e t t e r s r ep r e s en t s i gn i f i c an t d i f f e r enc e s be twe en t r e a tmen t s P 0 05 The s ame be l ow 图 1 多 花 芍 药 生 根 种 子 各 部 位 浸 提 液 对 白 菜 种 子 萌 发 及 幼 苗 生 长 的 影 响 F i g 1 Ef f e c t s o f ex t r a c t s f r om d i f f e r en t pa r t s o f P e m o d i r oo t ed s e eds on s e ed ge rmi na t i on and s e ed l i ng g r owt h o f B r a s s i c a p e k i n e n s i s 2 2 多 花 芍 药 生 根 种 子 胚 浸 提 液 对 其 离 体 胚 上 胚 轴 休 眠 解 除 的 影 响 由 表 1 可 知 与 成 苗 培 养 基 相 比 成 苗 培 养 基 1 或 2 g L 胚 浸 提 液 处 理 的 离 体 胚 上 胚 轴 休 眠 解 除 率 均 显 著 降 低 其 中 添 加 2 g L 胚 浸 提 液 处 理 显 著 延 长 了 胚 芽 萌 出 和 上 胚 轴 休 眠 解 除 的 时 间 结 果 表 明 多 花 芍 药 胚 中 确 实 存 在 内 源 抑 制 物 且 能 显 著 抑 制 本 体 休 眠 解 除 表 1 多 花 芍 药 生 根 种 子 胚 浸 提 液 对 其 离 体 胚 上 胚 轴 休 眠 解 除 的 影 响 Tab l e 1 Ef f e c t o f emb r yo ex t r a c t s o f P e m o d i r oo t ed s e eds on ep i c o t y l do rmancy r e l e a s e o f exc i s ed emb r yo 处 理 方 式 Tr e a tmen t 上 胚 轴 休 眠 解 除 率 Ep i c o t y l do rmanc y r e l e a s e pe r c en t age 胚 芽 萌 出 时 间 d P l umu l e g r owt h t ime 上 胚 轴 休 眠 解 除 时 间 d Ep i c o t y l do rmanc y r e l e a s e t ime 成 苗 培 养 基Se ed l i ng med i um 62 22 15 39 a 8 56 0 51 a 16 80 1 09 a 成 苗 培 养 基 1 g L 胚 浸 提 液 Se ed l i ng med i um 1 g L embr yo ex t r a c t s 17 50 4 33 b 9 61 1 68 a 17 30 3 21 a 成 苗 培 养 基 2 g L 胚 浸 提 液 Se ed l i ng med i um 2 g L embr yo ex t r a c t s 15 87 3 61 b 13 33 2 08 b 30 23 1 25 b 注 同 列 数 据 后 标 不 同 小 写 字 母 代 表 处 理 间 差 异 显 著 P 0 05 No t e Di f f e r en t l owe r c a s e l e t t e r s r ep r e s en t s i gn i f i c an t d i f f e r enc e s be twe en t r e a tmen t s f o r s ame c o l umn da t a P 0 05 2 3 多 花 芍 药 离 体 胚 休 眠 解 除 的 关 键 节 点 离 体 胚