文心兰新品种‘七彩湖’大规模组培快繁技术.pdf

2022 4 总第107期 77 实用技术 Practical Technology 文心兰新品种 七彩湖 大规模组培快繁技术 谢光明 1 2 李秀梅 2 刘进平 1 1 海南大学热带作物学院 海南省热带生物资源可持续利用重点实验室 海南海口 570228 2 五指山万泉园艺有限公司 海南省五指山市中山镇红山农场 海南五指山 572216 摘 要 七彩湖 是文心兰的1个盆栽型杂交新品种 有很高的观赏价值 由于其组织培 养存在困难 因此 目前尚未见大规模组培快繁的报道 从 七彩湖 文心兰材料采集 表面消 毒 诱导培养 增殖培养 壮苗生根和炼苗移栽6个阶段对 七彩湖 文心兰大规模组培快繁技术 进行论述 为研究者和种植者提供参考 关键词 兰花 文心兰 七彩湖 组培快繁 Large Scale Tissue Culture and Rapid Propagation Technology of Oncidium cv Qicaihu Colorful Lake XIE Guangming 1 2 LI Xiumei 2 LIU Jinping 1 1 College of Tropical Crops Hainan University Key Laboratory of Sustainable Utilization of Tropical Biological Resources of Hainan Province Haikou 570228 Hainan 2 Wuzhishan Wanquan Horticulture Co Ltd Hongshan Farm Zhongshan Town Wuzhishan 572216 Hainan Abstract Qicaihu Colorful Lake is a new potted hybrid variety of Oncidium which has high ornamental value Due to the dif culty in its tissue culture the large scale tissue culture and rapid propagation of Qicaihu Colorful 基金项目 2021年五指山市科技和工业信息化局项目 文心兰 七彩湖 的规模化繁殖与栽培技术研 究 WZSKTPXM2021005 2020年海南省重点研发计划项目 观赏石斛兰新品种选育与配套栽培技 术研究 ZDYF2020053 2019年海南省基础与应用基础研究计划 省自然科学基金 高层次人才项目 文心兰生物钟相关基因OnPRR9序列克隆 表达分析和功能鉴定 2019RC147 项目 作者简介 谢光明 1983 男 硕士 研究方向为兰花育种与栽培 E mail xieguanmin 163 com 通讯作者 刘进平 1970 男 教授 博士生导师 研究方向为作物遗传育种 E mail liu3305602 78 实用技术 Practical Technology Lake has not been reported This paper discussed the large scale tissue culture and rapid propagation technology of Qicaihu Colorful Lake from the stages of material collection surface disinfection induction culture proliferation culture strong seedling rooting and seedling transplanting in order to provide a reference for the researchers and growers Keywords orchid Oncidium Qicaihu Colorful Lake tissue culture and rapid propagation 文心兰为兰科 Orchidaceae 文心兰属 Oncidium 植物 多年生常绿草本植物 气生性 兰花 由于其艳丽的颜色 独特的花型 酷似跳舞 的美人 又名舞女兰 跳舞兰等 文心兰的花色丰 富 唇瓣可以是白色 红色 黄色 斑点花纹等多 种颜色变化 观赏价值很高 文心兰既有切花品 种 又有盆栽品种 其中文心兰切花被插花界誉为 切花 五美人 之一 为重要的切花类型之一 文心兰传统的繁殖方式主要是分株繁殖 分株 繁殖一般在春秋季节进行 尤其是在春季新芽萌 发时结合换盆进行 但分株繁殖系数低 繁殖速度 慢 适合家庭栽培使用 不能适应对优良新品种进 行大规模推广和满足市场供应的需求 七彩湖 是文心兰的1个杂交新品种 属于 盆栽型文心兰 由于其花期长 花色别致 花量 大 花序美观 因此 其观赏价值和经济价值较 高 深受市场青睐 七彩湖 组织培养存在诸多 困难 文心兰侧芽较小 消毒困难 如果将花梗作 为外植体材料 又因花梗太细 芽诱导困难 再加 上诱导培养的过程中容易出现黄化死芽 增殖率也 不高 因此 一直未见 七彩湖 文心兰组培快繁 的报道 为了促进 七彩湖 文心兰的商品化生 产 这里报道笔者新开发的 七彩湖 文心兰大规 模组培快繁技术 分材料采集 表面消毒 诱导培 养 增殖培养 壮苗生根和炼苗移栽6个阶段 1 材料采集 七彩湖 组培快繁以侧芽作为外植体比较合 适 在准备采芽之前 提前1周选择无病虫害 生 长健壮 开花整齐的优良母株 先用甲基托布津 3000倍液进行杀菌 同时 对植株进行控干处理 即提前1个星期不进行浇水施肥 使其在材料采集 时保持干燥状态 选择饱满但叶片没有完全张开 也未形成假球茎的侧芽作为外植体 采芽时 先用 75 酒精将目标芽进行消毒 用75 酒精消毒后的 手术刀片从侧芽的基部将其和母株分离 切割时要 特别小心 既不能伤到母株 又不能破坏侧芽的生 长点 2 表面消毒 将采集的侧芽外植体用少量洗洁精和自来水冲 洗5min 然后将侧芽用消毒后的纸巾擦干 在超净 工作台上 借助刀片 小心地将苞片和未张开的叶 片剥下 注意不能伤到短缩茎 即形成假球茎之前 的侧芽 因为在压缩茎上的每一片叶片下都有1 个潜伏芽点 这些潜伏芽点将来会诱导长出新芽 在剥掉叶片的同时 需要用消毒后的棉球浸泡75 酒精 顺着叶片生长的方向拭擦 将剥干净的短缩 茎放入75 的酒精中震荡消毒30s 然后用无菌水清 洗3遍 然后放入0 3 的升汞溶液震荡消毒15min 再用无菌水清洗3遍 之后用灭菌后的卫生纸吸干 压缩茎表面的水分 切掉压缩茎底部与消毒液直接 接触而泛白的组织 3 诱导培养 将消毒后的短缩茎接入芽诱导培养基 将切 口一头插入培养基 深度约2 3mm 芽诱导培 养基为 1 2MS 100mL L椰子水 3mg L BA 0 2mg L NAA 8 5g L卡拉胶 15g L食用白糖 接 种后 在暗培养条件下培养40d 以诱导新芽 腋 芽 产生 图1A 待新芽长出2cm以上 将其从短缩茎上剥离 将剥离的新芽切掉顶部叶片 将剩余的基部约 0 8cm的芽体接入新鲜的芽诱导培养基 剥离新芽 后的短缩茎如果还有芽点未产生新芽 可将接触到 培养基的短缩茎基部切掉薄薄1层组织 有利于吸 2022 4 总第107期 79 实用技术 Practical Technology 收营养 转接到新鲜的芽诱导培养基上继续诱 导培养 然后在28 的暗培养条件下进行芽诱导培 养 4 增殖培养 经2 3轮芽诱导培养后 会在新芽基部长出少 量丛生芽 此时可进行增殖培养 芽增殖培养基 为 1 2MS 100mL L椰子水 30g L香蕉泥 20g L 土豆泥 3mg L BA 0 2mg L NAA 8 5g L卡拉 胶 15g L食用白糖 在将丛生芽接种到增殖培养 基时 要破坏所有小芽的生长点 并且多个小芽聚 集放在一起进行增殖培养 图1B 每一个继代增 殖周期为45d左右 避免长时间不及时转接导致丛 生芽黄化死亡 芽增殖培养同样需要在暗培养中进 行 温度维持在28 5 壮苗生根 经过若干次继代增殖培养 增殖芽的数量达到 目标数量后 就进行壮苗培养 需要在增殖培养 转入壮苗培养前30d 将暗培养转变为光照强度为 2500lux的光照培养 光照培养过程中 叶片会从 黄白色转为浅绿色 最后变为深绿色 壮苗培养基 为 2 3MS 30g L香蕉泥 20g L土豆泥 8 5g L卡 拉胶 15g L食用白糖 转接时 将转化为绿色的 芽球团接入壮苗培养基中光照培养 壮苗培养过程中芽球团中部分苗株长得很快 同时在贴着培养瓶的底部长出新的原球茎和芽球 图1C 因此 需要在壮苗培养后45d左右 取 出芽球团 去除原球茎 将苗株按大小分开 将大 苗接入生根培养基 小苗接入壮苗培养基 生根培 养基为 MS 0 2mg L IBA 0 1mg L NAA 30g L 香蕉泥 20g L土豆泥 8 5g L卡拉胶 15g L食用白 糖 壮苗培养和生根培养均采用光照培养 光照强 度为2500lux 温度为28 按此法将大小苗分开转 接 多次重复 直到生根植株 图1D 达到所需数 量 6 炼苗移栽 生根培养35d左右 培养瓶底部可观察到大量 的白色根产生 且苗株长到5cm以上 此时就可以 将组培苗移到温室大棚中炼苗 炼苗初期的温度 维持在28 32 光照强度2500 5000lux 连续 炼苗40d左右时 会出现大量的根 盘绕在培养瓶 底部 苗株长到8cm以上 叶片增多 加厚 颜 图1 七彩湖 文心兰大规模组培快繁 A 诱导培养 B 增殖培养 C 壮苗培养 D 生根培养 E 晾苗 F 移栽 A C F B ED 80 实用技术 Practical Technology 色明显转变为墨绿色 并且在苗株基部有少量假 球茎和侧芽产生 此时 可以把光照强度调整到 5000 8000lux 温度维持在28 32 继续炼苗约 20d后 即可出瓶移栽了 移栽时 将新出瓶的苗株置于阴凉通风处晾苗 图1E 使苗株略显脱水状态 然后将苗株按 大小分级 将株高8cm以上 有4条以上根 约5cm 长 的苗株分为1个等级 其余分为另1个等级 将 两种不同等级的苗株分别种植在1 5寸营养杯和72孔 的穴盘 图1F 中 有利于统一操作管理和苗株的 快速生长 本文报道的组培快繁技术 可为 七彩湖 文 心兰大规模工厂化育苗提供参考 从而促进新品种 七彩湖 的推广和市场供应 1次清水 降低空气温度 以利于授粉 提高坐果 率 在结果期 遇到高温干旱天气应采取勤施水 合理施肥 适时喷药 生草栽培 适度修剪 果实 套袋等措施 降低高温的不利影响 海南岛芒果气象灾害的演变趋势对芒果生产 有利有弊 总体上利大于弊 各地发展芒果生产 需根据当地气候条件 趋利避害 充分利用有利 气候条件 采取措施防御气象灾害 保障芒果丰 产增收 参考文献 1 张明洁 李文韬 张京红 等 1961 2011年海南岛农业气候 资源变化及其影响研究 J 中国农学通报 2014 30 32 232 241 2 铁万祝 罗关兴 王友富 等 我国芒果产业发展概况与主要 问题 J 中国热带农业 2013 5 16 19 3 朱杰 海南芒果产业现状 问题与发展建议 J 农业工程技 术 2019 39 32 20 21 4 王琼 姚树然 朱锐 等 金丝小枣生长期主要气象灾害变化 特征及影响权重检验分析 J 干旱地区农业研究 2021 39 3 202 208 5 王发科 雷玉红 都占良 等 气候变化对柴达木盆地主要农 作物产量的影响 J 中国农学通报 2020 36 14 107 112 6 余会康 徐宗焕 闽东气候变化与龙眼寒冻害影响分析 J 浙江农业科学 2014 344 5 748 752 7 余会康 陈安芳 阮翠冰 闽东气候变化与芒果生长分析 J 中国农业资源与区划 2014 35 4 63 68 8 田俊 霍治国 刘丹 等 江西省早稻雨洗花灾害时空变化及 分区 J 应用气象学报 2019 30 5 608 618 9 刘云鹏 长江中下游气候变化与柑桔花期高温热害 J 中国 南方果树 1997 1 25 10 张朝 王品 陈一 等 1990年以来中国小麦农业气象灾害时 空变化特征 J 地理学报 2013 68 11 1453 1460 11 高爱平 陈业渊 许树培 等 海南芒果发展和研究历程述 评 J 中国热带农业 2010 35 4 25 27 12 周文忠 反季节芒果低产主因分析 J 世界热带农业信息 2006 12 21 23 13 邓彪 马振峰 杜成勋 等 攀枝花芒果种植气象致灾因子危 险性评价 J 高原山地气象研究 2018 38 1 91 95 14 张明洁 张京红 刘少军 等 海南岛1961 2011年气候变化 特征分析 J 热带作物学报 2014 35 12 2488 2495 15 佟金鹤 钱昆 田光辉 等 1977 2017年海南极端气候事件 变化时空差异分析 J 中国农学通报 2019 35 12 89 94 16 中国气象局 冷空气过程监测指标 QX T 393 2017 S 北 京 气象出版社 2017 17 中国气象局 早稻播种育秧期低温阴雨等级 QX T 98 2008 S 北京 气象出版社 2008 18 中国气象局 极端高温监测指标 QX T 280 2015 S 北京 气象出版社 2015 19 韦金海 陆英 卢小丹 等 气候变暖下百色芒果气象灾害演 变特征及适应对策 J 热带农业科学 2019 39 9 101 106 上接第76页