花毛茛组培快繁技术研究.pdf

北 方 园 艺 园林花卉 第一作者简介 白艳荣 男 彝族 硕士 副教授 现 主要从事园林花卉植物等研究工作 责任作者 蒋亚莲 女 硕士 研究员 现主要从事 花卉生产等研究工作 收稿日期 花毛茛组培快繁技术研究 白 艳 荣 蒋 亚 莲 王 进 英 昆明学院 云南 昆明 云南省农业科学院 花卉研究所 云南 昆明 摘 要 以花毛茛初代培养无菌苗为试材 采用 培养基 分别向培养基中添加不同 配比的细胞分裂素 和细胞生长素 对花毛茛进行初代诱导 增殖培养 继代生根 培养 并以不同比例泥炭 蛭石 珍珠岩 河沙为基质 对花毛茛进行炼苗移栽试验 结果表 明 最佳初代诱芽培养基为 诱导率达 增殖诱导愈伤组织培养基为 增殖系 数为 继代生根培养基为 生根率 移栽最适基质为 泥炭 河沙 蛭石 成活率 关键词 花毛茛 增殖培养 生根培养 愈伤组织 中图分类号 文献标识码 文章编号 花毛茛 属毛茛科花毛茛属多年生草本花卉 又名芹菜花 陆莲花 花毛茛茎干直立 叶片碧绿 花色丰 富 有红 黄 绿 白 观赏价值较高 适宜南温带 和亚热带地区园林 庭院做绿化 美化栽培 也可 盆栽观赏和鲜切花生产 花毛茛主要作为冬春季 鲜切花生产上市 受到广大消费者的青睐 随着 种植规模的逐年增加 花毛茛用于鲜切花生产的 种苗需求量日趋加大 而鲜切花生产的种苗主要 依靠进口 难以满足市场需求 通过种子繁殖难 以获得花色纯一的切花种球 分球繁殖增殖较慢 种源引进成为生产者主要的成本投入和困难 目 前 花毛茛组培增殖已获得成功 但由于增殖 较慢 大规模出苗存在着一定的难度 要保证组 培苗顺利培育为切花种球 组培苗移栽成为组培 繁育花毛茛种球的又一障碍 该研究对花毛 茛组培快繁技术进行研究 以期为摸清云南当地 花毛茛组培快繁技术 建立完善 高效的花毛茛组 培快繁体系 为工厂化生产花毛茛优质种苗和云 南花毛茛产业的发展提供参考依据 材料与方法 试验材料 供试材料为英茂花卉公司组培室的花毛茛初 代培养无菌苗 供试仪器 高压蒸汽灭菌锅 电子天平 烧杯 酸度计 无菌培养皿 超净工作台 酒精灯 解剖 刀 镊子 显微镜 记号笔 培养架 穴盘等 供试 试 剂 琼 脂 蔗 糖 萘 乙 酸 泥炭 蛭石 珍珠岩 河沙 试验方法 花毛茛初代培养 以 培养基为基本培养基 添加植物激素 和 共设置 个试验组 个空 白对照组 采用单因素随机试验设计共 个组合 表 调至 将消毒好的花毛茛叶片沿 中部横切 把 片叶切为 块作外植体 外植体背 面再用刀轻轻划一伤口 切好的外植体接种到培 养瓶 每瓶 块外植体 瓶为 个处理 每个处 理设置 个重复 将接种后的花毛茛组培苗放到 瓶苗培养室中进行培养 其培养的温度为 光强为 光照时间为 在培养的过程中每隔 观察一次培养瓶中组 培苗的生长状况 统计各处理的不定芽再生率和 愈伤诱导率 选出适合愈伤组织形成和不定芽再 生的激素配比 表 花毛茛初代培养基 与 浓度配比 处理 重复次数 次 接种数 个 花毛茛芽的增殖 以 培养基为基本培养基 添加植物激素 和 采用双因素随机正交实验设计共 个组合 表 把高度在 以上的芽切下接 入增殖培养基 每瓶接 个芽 每个处理接 瓶 重复 次 接种后放在培养室内培养 后记 表 花毛茛增殖培养基 与 浓度配比 处理 重复次数 次 接种数 个 录无菌苗的有效芽增殖数并选出最适宜增殖培 养基 这 个处理的培养基配方 均加入蔗糖 琼脂 花毛茛无菌苗生根培养 以 培养基为基本培养基 培养基中添 加 浓度组合 配比 设 置 一 个 空 白 对 照 表 调 至 采用 增 殖 试 验 得 到 的 无 菌 苗 选 取 株 高 以上 长势良好 无污染无病的苗接入生根 培养基 每瓶接入 个无根苗 每个处理 瓶 重 复 次 接种后放在培养室内培养 后观察 记录无菌苗的生根情况选出最适生根培养基 随 机每个处理选取 株长势中等的花毛茛组培苗 用镊子分别将组培苗取出 用清水对根系进行清 洗 统计花毛茛组培苗的生根率 根长 根粗 根的 数量 将组培苗培养 后 随机每个处理取 株长势中等的花毛茛组培苗 将组培苗取出 用清 水对根系进行清洗 测量每株的根长 然后取其平 均值 以组培苗根基 处的直径作为根粗 表 花毛茛生根培养基 浓度配比 处理 浓度 重复次数 次 接种数 个 炼苗和移栽 以泥炭 蛭石 珍珠岩 河沙 火山岩为基本材 料 分别配置泥炭 河沙 珍珠岩为 泥 炭 河沙 蛭石为 火山岩 泥炭为 蛭石 泥炭为 的栽培基质 用 多菌灵 倍液可湿性粉剂将基质拌到潮湿状 态 分装在育苗盘里制成移栽苗床 将培养瓶移出培养室 置于常温室内 利用自 然光照培养 周 打开瓶盖 炼苗 炼苗 结束后把苗从培养瓶移出并洗净根部的琼脂 以 防移栽时烂根 洗干净的全部根系用 倍 液 多菌灵浸泡 然后晾干准备移栽 第 期 北 方 园 艺 把苗移栽到穴盘 每个穴移栽 株 每个处理移栽 株 移栽完成后把苗放到塑料小棚内养护 每 隔 对棚内的苗喷雾一次 喷雾以基质湿润 为宜 避免积水以防烂苗 另外每隔 周喷 次 倍液 多菌灵 后观察记录植 株生长势 根生长情况 计算移栽成活率 选出最 适移栽的基质及配比 项目测定 不定芽再生率 再生不定芽的叶片数 接种总叶片数 愈伤诱导率 形成愈伤 的叶片数 总接种叶片数 增殖系数 增殖 芽的总数量 接种的外植体总数 生根率 生 根株数 诱导株数 平均根长 所有根 长之和 总根数 平均根数 所有根数之和 生根 苗数 数据分析 采用 软件处理数据 用 软件进行 差异显著性分析 结果与分析 不同激素浓度配比对花毛茛初代培养的影响 培养 后观察记录结果 计算不同激素浓 度培养下外植体愈伤组织的诱导率和诱芽率 从 表 可以看出 处理 均能诱导外植 体形成愈伤 其中处理 诱导愈伤效果最好 能达 到 处理 和 与处理 之间差异不显 著 但诱导愈伤组织的效果要差一些 因此诱导外 植体 形 成 愈 伤 组 织 以 效果最好 激素的浓度越高 越有利于愈伤的形成 从诱芽结果来看 处理 效果最好 当激素 浓度高于 时 诱芽效果都会变差 在浓度大于 外植体无法诱导出芽 外植体以形成愈伤组织为 主 因此 诱导外植体形成芽以 效果最好 不同激素浓度配比对花毛茛增殖的影响 把高度在 以上的芽切下接入增殖培养 基 接入的芽都形成了新芽 但增殖系数存在差 异 培养 后对芽的增殖系数进行统计分析 从表 可以看出 处理 之间差异不显 著 但处理 的增殖系数最高 增殖效果最好 浓度为 时增殖效果要比浓度 在 和 时增殖效果好 的 配合适宜浓度的 对 增殖能起到一定的促进作用 表 不同激素浓度配比对花毛茛初代培养的影响 处理 激素浓度 愈伤诱导率 诱芽率 注 应用 法在 水 平 下 进 行 多 重 比 较 字 母 不 同 表 示 差 异 显著 表 不同激素浓度配比对花毛茛芽增殖的影响 处理 激素浓度 新增芽数 个 增殖系数 不同激素浓度配比对花毛茛生根的影响 从表 可以看出 花毛茛的生根比较容易 在 浓度为 时生根率也可以达到 但生根数和平均根长与处理组相比要差 一些 当 浓度为 时生根效果 最好 从平均生根数和平均根长来看 与处理 和 处理 差异不 显 著 与 和 处 理 及 处 理 北 方 园 艺 月 上 表 不同激素浓度配比对花毛茛生根的影响 处理 激素浓度 平均生根数 个 平均根长 根粗 生根率 植株生长状况 根少 根系粗壮 红白色 根多 根系纤细 红白色 根多 较健壮 根系红白色 根多 根系细弱红白色 根较少 根系细弱黄绿色 差异显著 说明 最有利 于生根 不同基质配比对花毛茛组培苗移栽成活率 的影响 泥炭富含腐殖质 能促进植株生根和生长 固 体颗粒体河沙 蛭石 珍珠岩和火山岩能改善基质 的透气性 从表 可以看出 各处理中以处理 移栽效果最好 说明处理 的基质养分和透气性 能都比较合理 所以生根情况最好 表 不同基质配比对花毛茛组培苗移栽成活率的影响 处理 基质 配比 生根率 平均生根数 个 成活率 泥炭 河沙 蛭石 泥炭 河沙 珍珠岩 泥炭 蛭石 火山岩 泥炭 讨论 花毛茛的组培快繁通常采用叶片作为外植 体 花茎只有在花毛茛的生殖生长阶段才能得到 并且花茎的生长情况不一致 过嫩和过老的花径 都不适合作为外植体使用 因此用花茎作为外植 体会给挑选材料带来一定困难 选用叶片作为外 植体就能避免以上问题 另外选用叶片作为外植 体不受时间 季节的限制 能灵活方便的进行组培 繁殖工作 对 花 毛 茛 进 行 芽 的 增 殖 发 现 最有利于 芽 的 增 殖 当 的 浓 度 提 升 为 时 芽的增殖系数会降低 并且在切 口处会形成大量的愈伤 芽的数量降低跟形成的愈 伤组织消耗大量养分有关 另外在 的浓度 为 时 适当降低 浓度也会提高 芽的增殖系数 说明在 浓度适宜时 相对提高 细胞分裂素和生长素的比值会提高芽的增殖系数 花毛茛愈伤组织的增殖目前还没有相关的研究文 献 如果想通过愈伤组织发生途径来诱芽 那就需 要足够量的愈伤组织 对愈伤组织进行增殖不仅要 求愈伤组织的产量高 还要求愈伤组织要健康生 长 从试验结果中发现 能兼 顾 个指标的要求 高浓度的 会导致愈伤组 织玻璃化 另外当 浓度为 时 适当降低细胞分裂素与生长素的比值也会对愈 伤组织的增殖起到一定的促进作用 采用愈 伤组织发生途径诱芽 在愈伤组织分化阶段消耗的 时间比较长 导致了愈伤组织发生途径诱芽的效率 比较低 另外愈伤组织长时间进行继代培养容易玻 璃化 以上因素导致了愈伤发生途径诱芽的效果 不如器官发生途径的诱芽效果理想 花毛茛的生根采用 作为生根剂 处理结 果以 效果最好 处理结果与 处理结果 差 异 显 著 处 理 结 果 与 处理结果差异不显著 第 期 北 方 园 艺 对植物生根的浓度在 效果最 好 花毛茛的移栽从试验结果来看比较容易 只要 在移栽的过程中做好基质消毒 保持较高的空气湿 度和适宜的基质湿度移栽成活率非常高 另外 不同的移栽基质对移栽苗的生根会有一定的影响 基质以泥炭 河沙 蛭石 效果最好 结论 该试验结果表明 最佳初代诱芽培养基为 诱导率达 增殖诱导愈伤组织培养基为 增殖系数 为 继代生根培养基为 生根率 移栽最适基质为泥炭 河 沙 蛭石 成活率 参考文献 王彩云 包满珠 胡惠蓉 等 花卉学产学研相结合的探索与 实践 华中农业大学学报 社会科学版 吴丽芳 田兴山 花毛茛组培方法研究 云南农业科技 胡平 花毛茛栽培技术 中国花卉园艺 顾永华 刘科伟 潘春屏 花毛茛商品球根规模化生产技术 黑龙江农业科学 陈进友 易朝晖 花毛茛的繁殖及盆花生产栽培技术 北 方园艺 王其刚 柴卫淑 低温预处理对花毛茛种子萌发的影响 湖南农业大学学报 自然科学版 李洪忠 彭世勇 于艳 等 花毛茛叶片组织培养的初步探索 辽宁农业职业技术学院学报 盛玉婷 植物组织培养技术及应用进展 安徽农学通报 梁冰 杨爱馥 樊锐锋 等 矮牵牛 组织培养技术研究 东北农业大学学报 李学磊 李娟 潘春屏 花毛茛育种技术 中国花卉园艺 祁宏英 徐洪国 张志 矮牵牛组织培养及不同基质对生根 的影响 北方园艺 肖林 花毛茛品种及切花生产技术 农村实用工程技术 温室园艺 李丕睿 顾永华 花毛茛育种及繁殖栽培技术研究进展 安徽农学通报 黄建明 花毛茛栽培技术 河北林业科技 陈进友 王列富 花毛茛灰霉病的防治 中国花卉园艺 蔡祖国 徐小彪 周会萍 植物组织培养中的玻璃化现象及 其预防 生物技术通讯 陆从巍 赵震虎 王鹏 等 提高花卉组培苗移栽成活率的技 术 农业科技通讯 刘宾照 高红梅 陶艳 不同浓度 种激素对花毛茛组培增 殖率的影响 安徽农学通报 王其刚 张素芳 陈敏 花毛茛组培苗移栽试验初探 天 津农业科学 李玲 对花毛茛无根试管苗生根效应的研究 高等 继续教育学报 邹娜 李意 连芳青 等 优良观赏药用地被植物 花毛茛组 织培养及快速繁殖研究 江西农业大学学报 柳娜 郭延秀 晋玲 等 甘肃省榆中县毛茛科药用植物资源 调查研究 甘肃中医药大学学报 北 方 园 艺 月 上 北 方 园 艺 园林花卉 作者简介 李红 女 硕士 副教授 现主要从事植 物栽培及植物组织培养等研究工作 基金项目 河北科技厅重点研发计划资助项目 收稿日期 蝴蝶兰组培苗对不同移栽基质的适应性 李 红 保定职业技术学院 农林与生物工程系 河北 保定 摘 要 以蝴蝶兰组培苗为试材 研究了炭基肥和椰糠 水苔以不同比例混合对移栽前 基质理化性质和移栽后基质理化性质 蝴蝶兰组培苗的生长特性的影响 以期为蝴蝶兰的栽 培提供参考依据 结果表明 在椰糠和水苔中加入炭基肥 显著改变了基质的理化性质 提 高了有机质 全氮 全磷和全钾含量 蝴蝶兰成活率提高了 叶宽增加 叶绿素含量和净光合速率显著提高 其中 椰糠和炭基肥以 生长状 况最好 水苔和炭基肥以 生长状况最好 说明炭基肥在蝴蝶兰组培苗基质中的应用有 显著效果 关键词 蝴蝶兰 组培苗 移栽基质 中图分类号 文献标识码 文章编号 蝴蝶兰原产于亚洲南部热带地区 叶肉质 茎 短缩 色彩艳丽 花期持久 有 洋兰皇后 的美誉 具有很高的经济价值和观赏价值 从 世纪 末开始 在我国迅速发展 由于蝴蝶兰很难进行 分株繁殖 常规培养条件下种子发育不完全 极难 萌发 因此多采用组织培养来繁殖种苗 其具有 培育周期短 繁殖系数大 性状稳定等特点 但是 由于组培苗是在封闭无菌 养分充足 光温适宜的 环境中生长的 一旦出瓶移栽 外界剧烈的环境变 化极易造成病毒侵染 因此创造良好的移栽条 件是保证幼苗生长的关键所在 其中培养基质是 最为关键且直接的影响因素 由于蝴蝶兰气生根 对根际氧气含量要求较高 基质类型和质量直接 影响蝴蝶兰生长及质量 因此 保肥水能力强 疏松透气的基质能够有效保证蝴蝶兰的正常生长 发育 近年来 研究者对蝴蝶兰组培苗移栽基质 的选择做了一些探索 许明修等 研究表明 椰糠 可替代泥炭进行蝴蝶兰栽培 马春花 研究表 明 水苔 菇渣 和水苔 菇渣 的混 合基质均能保证 寸蝴蝶兰植株正常生长 水 苔 锯末 能保证 寸蝴蝶兰植株正常 生长 张京伟等 对多种蝴蝶兰基质理化性质进 行比较 研究发现 椰糠 椰块以及泥炭可在蝴蝶 兰栽培中广泛使用 蝴蝶兰组培苗对养分的需求 量较大 充足的养分对幼苗生长影响较大 炭基 肥含有生物炭和有机质 能够起到调节基质理化 性质 供给养分的作用 且炭基肥具有肥料缓释的 特点 能够缓慢 持续供给养分 但是目前对于 蝴蝶兰组培移栽基质的研究主要集中在不同基质