大花蕙兰'红酒'× 莲瓣兰'边草素花' 杂交种组培快繁技术.pdf

Guihaia Oct 2019 39 10 1327 1333 http www guihaia DOI 10 11931 guihaia gxzw201812057 引 文 格 式 刘 洋 王 玉 英 李 枝 林 等 大 花 蕙 兰 红 酒 莲 瓣 兰 边 草 素 花 杂 交 种 组 培 快 繁 技 术 J 广 西 植 物 2019 39 10 1327 1333 LIUY WANGYY LIZL etal TissuecultureandrapidpropagationtechniquesinCymbidiumhybridum hongjiu C tortisepalum biancaosuhua J Guihaia 2019 39 10 1327 1333 大 花 蕙 兰 红 酒 莲 瓣 兰 边 草 素 花 杂 交 种 组 培 快 繁 技 术 刘 洋 王 玉 英 李 枝 林 李 茹 云 南 农 业 大 学 园 林 园 艺 学 院 昆 明650201 摘 要 该 研 究 以 大 花 蕙 兰 红 酒 Cymbidiumhybridum hongjiu 莲 瓣 兰 边 草 素 花 C tortisepalum biancaosuhua F1 代 杂 交 种 原 球 茎 和 根 状 茎 为 材 料 比 较 了 不 同 激 素 配 比 增 殖 分 化 生 根 的 培 养 基 建 立 了 适 用 杂 交 兰 组 培 快 繁 体 系 结 果 表 明 1 2MS 6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 香 蕉80 g L 1 对 原 球 茎 增 殖 效 果 最 佳 增 殖 率 达 到307 1 2MS 6 BA1 5mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 有 利 于 原 球 茎 分 化 分 化 率 为82 1 2MS TDZ2 0mg L 1 NAA0 1mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 对 根 状 茎 增 殖 分 化 效 果 最 佳 增 殖 率 为293 分 化 率 为79 1 2MS IBA0 5mg L 1 NAA0 3 mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 为 最 佳 生 根 培 养 基 生 根 率 达 到84 7 且 根 粗 苗 壮 叶 色 浓 绿 此 体 系 为 杂 交 兰 种 苗 的 规 模 化 生 产 提 供 了 技 术 支 持 关 键 词 兰 花 杂 交 种 根 状 茎 原 球 茎 增 殖 与 分 化 中 图 分 类 号 Q945 文 献 标 识 码 A 文 章 编 号 1000 3142 2019 10 1327 07 Tissuecultureandrapidpropagationtechniquesin Cymbidiumhybridum hongjiu C tortisepalum biancaosuhua LIUYang WANGYuying LIZhilin LiRu InstituteofLandscapePlants YunnanAgriculturalUniversity Kunming650201 China Abstract Arapidpropagationtechniquesystemofhybridorchidwasestablishedbycomparingtheeffectsofdifferent hormoneratiosonproliferationandrooting withtheprotocormsandrhizomesofF1hybridsofCymbidiumhybridum hongjiu andC tortisepalum biancaosuhua wereusedasmaterials Theresultswereasfollows 1 2MS 6 BA1 0 mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 hadthebestconductiveeffectsonproliferationofprotocorm andtheproliferativeratereachedto307 1 2MS 6 BA1 5mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 mediumwasbeneficialtodifferentialprotocormculture andthedifferentialratewas82 1 2MS TDZ2 0mg L 1 收 稿 日 期 2019 05 25 基 金 项 目 云 南 省 重 点 新 产 品 开 发 计 划 项 目 2012BB008 云 南 农 业 大 学 自 然 科 学 青 年 科 研 基 金 2016ZR10 Supportedbythe KeyNewProductDevelopmentofYunnanProvince China 2012BB008 NaturalScienceYouthResearchFoundationofYunnanAgricul turalUniversity 2016ZR10 作 者 简 介 刘 洋 1994 女 湖 南 邵 阳 人 硕 士 研 究 生 主 要 从 事 园 林 植 物 资 源 利 用 与 创 新 研 究 E mail 893747155 通 信 作 者 李 枝 林 硕 士 教 授 主 要 从 事 植 物 资 源 的 利 用 和 创 新 研 究 E mail 13708870986 NAA0 1mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 mediumwasconductivetoproliferationanddifferentiationofrhizome andtheproliferativeratereached293 thedifferentialratewas79 Mediumof1 2MS IBA0 5mg L 1 NAA0 3 mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 wasthebestforrooting therootingratewas84 7 andtherootswerehealthy withstrongseedlings andtheleavesweredarkgreen Thissystemprovidestechnicalsupportforlarge scaleproduction ofhybridorchidseedlings Keywords Orchidhybrid rhizome protocorm proliferationanddifferentiation 兰 花 为 中 国 传 统 名 花 观 赏 价 值 极 高 国 兰 ChineseCymbidium 是 中 国 传 统 十 大 名 花 之 一 通 常 是 指 兰 科 兰 属 Cymbidium 植 物 中 的 部 分 地 生 兰 其 花 型 较 小 但 气 味 芳 香 叶 态 优 美 大 花 蕙 兰 Cymbidiumhybridum 属 兰 科 Orchidaceae 兰 属 Cymbidium 多 年 生 草 本 植 物 是 兰 属 内 一 些 附 生 兰 杂 交 种 的 统 称 其 大 部 分 品 种 叶 片 长 且 披 散 花 无 香 味 朱 根 发 等 2004 大 花 蕙 兰 红 酒 为 大 花 早 开 花 品 种 常 在 圣 诞 节 前 后 开 花 可 用 于 培 育 圣 诞 节 开 花 的 红 花 盆 栽 品 种 莲 瓣 兰 边 草 素 花 是 兰 科 兰 属 多 年 生 草 本 植 物 属 地 生 兰 为 细 叶 莲 瓣 兰 类 叶 槽 较 深 叶 边 金 黄 色 花 为 淡 黄 色 全 素 开 花2 4 朵 花 幽 香 以 红 酒 边 草 素 花 为 亲 本 进 行 种 间 杂 交 意 在 获 得 花 期 长 花 朵 较 大 鲜 艳 美 丽 且 有 香 味 的 兰 花 新 品 种 对 大 花 蕙 兰 Cymbidiumhybri dum 若 采 用 传 统 的 分 株 繁 殖 则 繁 殖 速 度 慢 周 期 长 卢 思 聪 1994 且 大 多 是 引 进 的 国 外 优 良 品 种 难 以 满 足 市 场 需 求 因 此 需 通 过 组 织 培 养 来 快 速 繁 殖 大 花 蕙 兰 国 内 外 已 开 展 了 对 兰 花 杂 交 种 的 研 究 目 前 已 有 数 千 个 品 种 但 对 地 生 兰 和 附 生 兰 杂 交 种 的 研 究 较 少 近 年 来 国 内 的 研 究 大 多 集 中 在 杂 交 育 种 和 胚 培 养 方 面 郑 立 明 2010 朱 根 发 等 2005 丁 长 春 和 夏 念 和 2011 陈 瑶 瑶 等 2009 杂 交 兰 原 球 茎 的 增 殖 分 化 研 究 报 道 较 多 宋 莲 等 2017 谢 利 等 2014 根 状 茎 报 道 较 少 但 对 大 花 蕙 兰 红 酒 莲 瓣 兰 边 草 素 花 F1 代 杂 交 种 的 快 繁 技 术 目 前 尚 未 见 有 研 究 报 道 因 此 本 研 究 以 大 花 蕙 兰 红 酒 莲 瓣 兰 边 草 素 花 F1 代 杂 交 种 的 根 状 茎 和 原 球 茎 为 材 料 在 不 同 的 培 养 基 上 进 行 增 殖 分 化 生 根 以 筛 选 出 最 适 培 养 基 从 而 为 杂 交 兰 的 工 厂 化 生 产 和 新 品 种 选 育 奠 定 基 础 1 材 料 与 方 法 1 1 材 料 大 花 蕙 兰 红 酒 与 莲 瓣 兰 边 草 素 花 杂 交 种 原 球 茎 和 根 状 茎 材 料 由 云 南 农 业 大 学 花 卉 研 究 所 自 主 培 育 杂 交 种 萌 发 后 产 生 原 球 茎 和 根 状 茎 杂 交 兰 产 生 的 胚 状 体 长 条 状 称 为 根 状 茎 形 成 的 胚 状 体 圆 球 形 称 为 原 球 茎 从 中 分 别 挑 选 出 性 状 长 势 一 致 的 原 球 茎 和 根 状 茎 为 试 验 材 料 本 试 验 在 云 南 农 业 大 学 园 林 园 艺 学 院 花 卉 所 组 培 实 验 室 进 行 1 2 方 法 1 2 1 原 球 茎 和 根 状 茎 的 增 殖 分 化 将 原 球 茎 大 小 为0 3cm 和 根 状 茎 约 为1 5cm 分 别 接 种 于 1 2MS 基 本 培 养 添 加 不 同 浓 度 配 比 的NAA TDZ 和6 BA 附 加 香 蕉80g L 1 和 活 性 炭0 5g L 1 暗 培 养45d 后 再 进 行 光 照 培 养 培 养 条 件 为 温 度 23 2 光 照 度1800 2500lx pH5 8 琼 脂 7g L 1 和 蔗 糖30g L 1 每 处 理42 个 原 球 茎 根 状 茎 处 理30 个 重 复3 次 对30d 后 的 增 殖 率 和 60d 后 的 出 芽 率 进 行 数 据 分 析 1 2 2 生 根 培 养 将 苗 高2 3cm 的 无 根 苗 接 种 于 1 2MS 基 本 培 养 添 加 如 下 植 物 激 素 浓 度 6 BA0 3 mg L 1 NAA0 2 0mg L 1 和IBA0 1 0mg L 1 上 进 行 光 照 培 养 培 养 条 件 同 上 培 养60d 统 计 生 根 率 根 长 根 粗 等 情 况 1 3 数 据 统 计 分 析 原 球 茎 增 殖 分 化 阶 段 每 瓶5 个 每 处 理10 瓶 重 复3 次 根 状 茎 增 殖 分 化 阶 段 每 瓶5 个 每 处 理 10 瓶 重 复3 次 生 根 培 养 阶 段 每 瓶5 苗 每 处 理 10 瓶 重 复3 次 数 据 采 用DPS9 50 统 计 软 件 分 析 进 行 差 异 显 著 性 分 析 8 2 3 1 广 西 植 物 39 卷 2 结 果 与 分 析 2 1 不 同 激 素 配 比 对 原 球 茎 增 殖 分 化 的 影 响 在 原 球 茎 增 殖 分 化 培 养 基 中 培 养10d 后 开 始 增 殖 出 芽 分 化 随 着 天 数 的 增 加 增 殖 率 出 芽 率 增 大 30d 后 不 同 激 素 配 比 培 养 基 增 殖 率 出 芽 率 有 所 差 异 由 表1 可 知 随 着6 BA 浓 度 的 增 加 增 殖 率 出 现 了 先 上 升 后 下 降 的 趋 势 不 同 浓 度 6 BA 对 杂 交 兰 原 球 茎 增 殖 分 化 影 响 显 著 2 号 培 养 基1 2MS 6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 对 原 球 茎 增 殖 分 化 最 好 增 殖 率 为307 比6 BA2 0mg L 1 2 5mg L 1 的 培 养 基 显 著 高186 344 数 据 表 明6 BA 浓 度 高 于2 0mg L 1 原 球 茎 增 殖 率 明 显 下 降 原 球 茎 出 芽 率 增 殖 不 明 显 5 号 培 养 基 出 现 了 部 分 褐 化 由 此 可 见 激 素 浓 度 大 于 一 定 限 度 不 利 于 原 球 茎 增 殖 3 号 培 养 基 出 芽 率 显 著 高 于 其 他 培 养 基 出 芽 率 为82 分 别 比 添 加NAA 1 0 2 0 2 5 mg L 1 培 养 基 培 养 的 出 芽 率 显 著 高105 78 310 芽 体 翠 绿 无 褐 化 情 况 可 见6 BA1 5mg L 1 最 适 于 原 球 茎 出 芽 增 殖 太 低 或 太 高 浓 度 的 6 BA 均 不 能 启 动 芽 分 化 还 会 导 致 出 芽 黄 化 以 上 结 果 表 明 6 BA1 0mg L 1 有 利 于 原 球 茎 增 殖 6 BA1 5mg L 1 促 进 分 化 培 养 效 果 最 佳 高 浓 度6 BA 抑 制 了 增 殖 分 化 效 果 表1 不 同 培 养 基 对 原 球 茎 增 殖 分 化 的 影 响 Table1 Effectsofdifferentmediaonproliferationanddifferentiationprotocorms 培 养 基 编 号 Medium number 6 BA 浓 度 6 BAconcentration mg L 1 NAA 浓 度 NAAconcentration mg L 1 接 种 数 Inoculation number 增 殖 数 Proliferation number 增 殖 率 Proliferation rate 出 芽 数 Budding number 出 芽 率 Buddingrate 1 0 5 1 0 42 57 143c 27 27c 2 1 0 1 0 42 123 307a 66 40b 3 1 5 1 0 42 90 221b 108 82a 4 2 0 1 0 42 44 107d 39 46b 5 2 5 1 0 42 27 69e 14 20c 注 同 列 数 据 后 不 同 小 写 字 母 表 示 差 异 显 著 P 0 05 下 同 Note Differentlowercaselettersinthesamecolumnshowsignificantdifferences P 0 05 Thesamebelow 2 2 不 同 激 素 配 比 对 杂 交 兰 根 状 茎 增 殖 分 化 的 影 响 将 原 球 茎 诱 导 出 来 的 根 状 茎 接 种 于 不 同 浓 度 的 培 养 基 中 进 行 培 养 随 时 间 延 长 增 殖 分 化 出 根 状 茎 不 定 芽 结 果 如 表2 所 示 不 同 浓 度TDZ 对 根 状 茎 增 殖 分 化 效 果 明 显 NAA 浓 度 为0 3mg L 1 处 理1 比 含TDZ2 0mg L 1 3 0mg L 1 的 培 养 基 显 著 高288 443 随 着TDZ 浓 度 的 增 加 增 殖 率 出 现 了 明 显 下 降 的 趋 势 表 明 高 浓 度 的 TDZ 不 利 于 根 状 茎 增 殖 根 状 茎 长 度 增 长 不 明 显 颜 色 较 浅 TDZ 浓 度 为2 0mg L 1 时 NAA 浓 度 为0 1mg L 1 分 化 效 果 最 佳 分 别 比 添 加NAA0 3 mg L 1 0 5 mg L 1 的 培 养 基 显 著 高216 203 且 颜 色 呈 绿 色 根 状 茎 长 度 明 显 增 长 在 原 有 的 根 状 茎 上 增 殖 出 长 短 不 一 的 根 状 茎 茎 周 围 新 长 出 茂 密 的 绒 毛 随 着NAA 浓 度 增 加 分 化 率 越 低 抑 制 芽 的 分 化 芽 体 颜 色 较 浅 为 淡 绿 色 所 以 综 合 考 虑4 号 培 养 基1 2MS TDZ2 0mg L 1 NAA0 1mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 对 根 状 茎 增 殖 分 化 效 果 最 佳 增 殖 率 为293 出 芽 率 为79 出 芽 较 多 芽 体 呈 绿 色 以 上 结 果 表 明 TDZ2 0mg L 1 和NAA0 1 9 2 3 1 10 期 刘 洋 等 大 花 蕙 兰 红 酒 莲 瓣 兰 边 草 素 花 杂 交 种 组 培 快 繁 技 术 表2 不 同 培 养 基 对 根 状 茎 增 殖 分 化 的 影 响 Table2 Effectsofdifferentmediaonproliferationanddifferentiationrhizome 培 养 基 编 号 Medium number TDZ 浓 度 TDZconcentration mg L 1 NAA 浓 度 NAAconcentration mg L 1 接 种 数 Inoculation number 增 殖 数 Proliferation number 增 殖 率 Proliferation rate 出 芽 数 Budding number 出 芽 率 Buddingrate 1 1 0 0 3 30 49 163b 25 32c 2 2 0 0 3 90 38 42d 59 46b 3 3 0 0 3 90 27 30d 29 25c 4 2 0 0 1 30 88 293a 92 79a 5 2 0 0 5 30 23 77c 14 26c mg L 1 组 合 使 用 有 利 于 根 状 茎 的 增 殖 分 化 高 浓 度 的TDZ NAA 抑 制 根 状 茎 的 增 殖 分 化 效 果 2 3 不 同NAA IBA 浓 度 生 根 的 影 响 将 原 球 茎 和 根 状 茎 分 化 的 无 根 小 苗 接 种 于 不 同 培 养 基 中 培 养 随 着 时 间 延 长 苗 体 数 量 不 断 增 加 60d 统 计 结 果 如 表3 可 知 不 同 激 素 配 比 的 培 养 基 对 植 株 生 根 有 影 响 2 号 培 养 基 和3 号 培 养 基 的 生 根 率 均 较 高 NAA 浓 度 在0 5 1 0mg L 1 为 最 佳 浓 度 生 根 率 均 达 到72 根 系 诱 导 较 好 根 粗 而 多 叶 色 浓 绿 长 势 好 当NAA 浓 度 大 于 1 0mg L 1 时 苗 的 生 根 受 到 抑 制 生 根 率 出 现 了 先 上 升 后 下 降 的 趋 势 受 诱 导 形 成 的 组 培 苗 本 身 激 素 含 量 的 影 响 壮 苗 培 养 时 低 浓 度 的NAA 可 以 更 好 地 促 进 苗 体 生 长 比 添 加NAA1 5mg L 1 2 0 mg L 1 显 著 高46 140 但 是 不 添 加 NAA 植 株 则 表 现 为 矮 化 叶 片 部 分 黄 化 随 着 IBA 浓 度 增 大 生 根 率 也 明 显 提 高 生 根 率 出 现 了 先 上 升 后 下 降 的 趋 势 在 左 利 娟 等 2015 的 研 究 中IBA 浓 度 对 杂 交 兰 根 状 茎 有 促 进 作 用 本 研 究 NAA0 3mg L 1 和IBA0 5mg L 1 组 合 使 用 为 最 佳 浓 度 生 根 率 为84 7 分 别 比 添 加IBA0mg L 1 0 3 mg L 1 1 0 mg L 1 的 培 养 基 显 著 高 11 32 9 57 4 综 合 考 虑 1 2MS IBA0 5 mg L 1 NAA0 3mg L 1 AC0 05 香 蕉80 g L 1 为 最 佳 生 根 培 养 基 以 上 结 果 表 明 高 浓 度NAA 抑 制 了 生 根 效 果 IBA0 5mg L 1 和NAA0 3mg L 1 组 合 使 用 促 进 植 株 生 根 且 叶 色 浓 绿 根 数 较 多 而 粗 苗 长 势 良 好 3 讨 论 与 结 论 兰 科 植 物 大 多 是 由 原 球 茎 分 化 成 完 整 植 株 Amaki Haguchi 1989 杂 交 兰 诱 导 分 化 出 原 球 茎 进 一 步 生 长 为 根 状 茎 王 国 兴 1989 用 于 兰 花 组 培 的 材 料 主 要 有 茎 尖 叶 片 种 子 目 前 大 多 采 用 种 子 萌 发 形 成 中 间 材 料 进 行 扩 繁 本 研 究 以 杂 交 兰 原 球 茎 和 根 状 茎 为 材 料 进 行 组 培 研 究 以 期 实 现 杂 交 兰 的 规 模 化 繁 殖 原 球 茎 增 殖 分 化 选 择 培 养 基 尤 为 重 要 适 宜 浓 度 的 激 素 配 比 对 原 球 茎 的 增 殖 分 化 影 响 较 大 吴 彦 秋 等 2016 以 杜 鹃 兰 原 球 茎 为 材 料 对 比 在 1 2MS MS VW KC 培 养 基 上 的 不 同 生 长 情 况 1 2MS 培 养 基 的 增 殖 率 及 长 势 显 著 高 于 其 他 处 理 孙 芳 等 2012 和 孙 玉 芬 等 2014 研 究 也 显 示 兰 属 植 物 组 培 以 1 2MS 效 果 较 适 宜 聂 菁 等 2016 以 蝴 蝶 兰 品 种 红 太 阳 无 菌 播 种 形 成 的 原 球 茎 为 材 料 6 BA5 0mg L 1 NAA0 7mg L 1 为 最 佳 的 类 原 球 茎 诱 导 和 增 殖 培 养 基 浓 度 本 研 究 在 激 素 和 培 养 基 选 择 具 有 相 同 性 以1 2MS 培 养 基 中 添 加6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 增 殖 分 化 效 果 最 佳 添 加NAA 6 BA 有 利 于 原 球 茎 分 化 这 与 相 关 研 究 宋 莲 等 2017 胡 蕾 和 申 婷 2017 一 致 说 明 不 同 品 种 的 杂 交 兰 对 激 素 的 0 3 3 1 广 西 植 物 39 卷 表3 不 同 激 素 浓 度 对 杂 交 种 苗 生 根 情 况 Table3 Effectsofdifferenthormoneconcentrationsonrootingofhybridseedlings 编 号 No IBA 浓 度 IBA concen tration NAA 浓 度 NAA concen tration 6 BA 浓 度 6 BA concen tration 转 接 根 数 Root number 生 根 情 况 Rootingcondition 生 根 率 Rooting percentage 平 均 根 数 Average number ofroots 平 均 根 长 Average length ofroots mm 根 粗 Root diameter 苗 生 长 情 况 Growthofseedlings 1 0 0 0 3 0 46 06b 0 89bc 12 57a 叶 黄 化 长 势 差 Yellowing poorgrowth 2 0 0 5 0 3 0 72 14a 1 23abc 11 50a 叶 色 浓 绿 长 势 良 好 Leavesaredarkgreenandgrowwell 3 0 1 0 0 3 0 72 82a 1 62a 9 83ab 叶 色 浓 绿 长 势 较 好 Leavesaredarkgreenandgrowwell 4 0 1 5 0 3 0 49 61b 1 31ab 8 09b 植 株 矮 化 少 量 叶 片 黄 化 Plantdwarfing asmallamountofleafyellowing 5 0 2 0 0 3 0 30 95b 0 84c 7 05b 茎 粗 壮 长 势 一 般 Stemsstrong generalgrowth 6 0 0 3 0 0 39 24b 0 94a 4 7b 有 部 分 褐 化 长 势 差 Partialbrowning poorgrowth 7 0 3 0 3 0 0 63 72ab 1 21a 9 01a 苗 粗 壮 长 势 一 般 Seedlingsarestrongandgrownormally 8 0 5 0 3 0 0 84 71a 1 33a 8 02a 叶 色 浓 绿 长 势 良 好 Leavesaredarkgreenandgrowwell 9 1 0 0 3 0 0 53 83ab 1 18a 9 25a 叶 色 浓 绿 长 势 一 般 Leavesaredarkgreenandgrownormally 注 代 表 根 粗 一 般 代 表 根 粗 良 好 代 表 根 粗 健 壮 Note meansroughnessofrootsisgeneral meansrootthicknessisgood meansrootthicknessandrobustness 敏 感 性 有 差 异 杂 交 兰 通 过 种 子 萌 发 获 得 原 球 茎 进 一 步 分 化 出 根 状 茎 根 状 茎 增 殖 速 度 较 慢 故 提 高 根 状 茎 的 繁 殖 系 数 尤 为 关 键 陈 云 喜 等 2010 研 究 表 明6 BA 和NAA 组 合 使 用 促 进 根 状 茎 增 殖 分 化 说 明 原 球 茎 和 根 状 茎 增 殖 分 化 有 其 相 似 性 TDZ 能 刺 激 植 株 再 生 Hutchinson Sax ena 1996 但TDZ 诱 导 芽 变 成 完 整 植 株 存 在 问 题 如 生 根 困 难 不 利 于 芽 的 生 长 等 Huetteman Preece 1993 在 红 花 草 莓 组 培 诱 导 过 程 中TDZ 的 诱 导 效 果 优 于6 BA TDZ 与NAA 配 合 使 用 效 果 优 于 与IBA 的 组 合 金 美 芳 等 2017 在 蝴 蝶 兰 的 不 定 芽 诱 导 中 单 独 添 加TDZ 或6 BA 芽 诱 导 率 显 著 高 于NAA 与TDZ 或6 BA 的 组 合 程 强 强 等 2011 TDZ 在 杂 交 兰 根 状 茎 的 增 殖 分 化 方 面 的 研 究 尚 未 报 道 因 此 本 实 验 使 用TDZ 和NAA 促 进 根 状 茎 增 殖 结 果 表 明TDZ 浓 度2 0mg L 1 和 NAA0 1mg L 1 组 合 使 用 时 根 状 茎 增 殖 的 最 佳 效 果 这 与 程 强 强 等 2011 的 研 究 有 所 差 异 可 能 受 植 株 本 身 激 素 的 影 响 在 增 殖 培 养 中 所 需NAA 浓 度 较 低 激 素 浓 度 使 用 有 所 不 同 使 用 新 型 激 素 TDZ 和NAA 组 合 促 进 根 状 茎 增 殖 组 培 苗 长 势 决 定 了 其 后 期 扩 繁 和 移 栽 的 难 易 程 度 许 申 平 等 2018 以 墨 兰 根 状 茎 分 化 出 苗 培 养 基MS 25 g L 1 糖 7 5g L 1 琼 脂 2g L 1 活 性 炭 墨 兰 的 生 根 效 果 最 好 6 BA 和NAA 浓 度 增 加 幼 苗 生 根 率 下 降 本 研 究 与 之 相 较 差 异 较 大 这 可 能 由 杂 交 兰 的 特 异 性 决 定 不 同 杂 交 兰 遗 传 特 性 的 差 异 导 致 在 生 根 阶 段 所 需 激 素 种 类 不 一 同 种 激 素 不 同 浓 度 的 生 根 情 况 有 较 大 区 别 激 素 选 择 上 IBA NAA 组 合 比6 BA NAA 组 合 生 根 率 要 好 生 根 培 养 基 选 择1 2MS IBA0 5mg L 1 和NAA0 3mg L 1 组 合 可 以 促 进 植 株 生 根 叶 色 浓 绿 根 数 较 多 而 粗 生 根 效 果 最 佳 与 左 利 娟 等 2015 的 研 究 一 致 有 研 究 表 明 活 性 炭 促 进 增 殖 分 化 苗 体 生 根 防 止 褐 1 3 3 1 10 期 刘 洋 等 大 花 蕙 兰 红 酒 莲 瓣 兰 边 草 素 花 杂 交 种 组 培 快 繁 技 术 化 王 玉 英 等 2015 在 辐 射 诱 变 的 线 艺 兰 快 繁 技 术 体 系 研 究 中 加 入 了80g L 1 香 蕉 泥 本 研 究 在 增 殖 分 化 生 根 培 养 中 均 添 加 了 香 蕉 泥 和 活 性 炭 来 促 进 苗 体 生 长 减 轻 叶 片 褐 化 现 象 本 研 究 结 果 表 明 诱 导 筛 选 并 建 立 了 大 花 蕙 兰 红 酒 莲 瓣 兰 边 草 素 花 杂 交 兰 的 快 繁 技 术 体 系 研 究 结 果 表 明 最 适 宜 原 球 茎 增 殖 的 培 养 基 为1 2MS 6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC 0 05 香 蕉80g L 1 原 球 茎 分 化 最 佳 培 养 基 为 1 2MS 6 BA1 5mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC 0 05 香 蕉80g L 1 1 2MS TDZ2 0mg L 1 NAA0 1mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 对 根 状 茎 增 殖 分 化 效 果 最 佳 1 2MS IBA0 5mg L 1 NAA0 3mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 为 最 佳 生 根 培 养 基 此 体 系 的 建 立 为 种 苗 生 产 提 供 了 技 术 支 持 参 考 文 献 AMAKIW HAGUCHI H 1989 Effects of dividing on the growthandorganogenesisofprotocorm likebodiesinDortae noosis J SciHortic 39 l 63 68 CHENYY ZHANGY ZHANGC etal 2009 Astudyon aseptic seed germination of interspecific hybrid between Cymbidiumhybrida C sinenseandC faberi J Acta HorticSin 36 3 441 446 陈 瑶 瑶 张 燕 张 琛 等 2009 杂交 兰 韩 国 桃 花 蕙 兰 种 间 杂 交 种 子 无 菌 萌 发 特 征 研 究 J 园艺学 报 36 3 441 446 CHEN YX HE DD LIAO HR et al 2010 Factors influencingonshootdifferentiationofrhizomeofCymbidium sinense Cymbidiumlancifolium J ChinAgricSciBull 26 9 65 69 陈 云 喜 何 丹 丹 廖 浩 如 等 2010 影 响 墨 兰 兔 耳 兰 根 状 茎 芽 分 化 的 因 素 J 中 国 农 学 通 报 26 9 65 69 CHENGQQ ZHUANGDH XUDX etal 2011 Thehigh frequencyinductionofadventitiousshootsandplantregene rationfromleafexplantsofPhalaenopsiswithaddedthidia zuron J SciPlantJ 29 4 524 530 程 强 强 庄 东 红 许 大 熊 等 2011 TDZ 高效诱导 蝴 蝶 兰 叶 片 不 定 芽 及 植 株 再 生 J 植物 科学学报 29 4 524 530 DING CC XIA NH 2011 Embryo culture of interspecific hybridbetweenCymbidiumtortisepalumandC skymintpatty J SWChinJAgricSci 24 4 1609 1611 丁 长 春 夏 念 和 2011 莲 瓣兰 与 大 花 蕙 兰 黄 金 薄 荷 种 间 杂 种 胚 培 养 研 究 J 西南 农业学报 24 4 1609 1611 HUL SHENT 2017 Tissuecultureandrapidpropagationof hybridorchid J JZhejiangAgricSci 58 2 259 260 264 胡 蕾 申 婷 2017 杂 交 兰 的 组 织 培 养 与 快 繁 技 术 J 浙 江农 业 科学 58 2 259 260 264 HUTCHINSONMJ SAXENAPK 1996 Acetylasalicylicacid enchancesand synchronizes TDZ induced somatic embryo genesisingeranium Pelargonium horturumBailey tissue cultures J PlantCellRep 15 512 515 HUETTEMAN CA PREECE JE 1993 TDZ A potent cytokininfor woody plant tissue culture J Plant Cell TissueOrganCult 33 105 119 JINMF CAOZ CAIJJ etal 2017 Tissuecultureandrapid propagation technique of red flowered strawberry J Guihaia 37 11 1395 1405 金 美 芳 曹 智 蔡 俊 杰 等 2017 红 花草 莓 的组 织培 养 与 快 繁 技 术 研 究 J 广 西 植物 37 11 1395 1405 LU SC 1994 Chinese Cymbidium and tactics of orchids M Beijing Golden Shield Press 62 81 卢 思 聪 1994 中国 兰与 洋兰 M 北京 金盾 出版 社 62 81 NIEQ LIULF RENHH etal 2016 Preliminarystudyon multiplication and regeneration system of protocorm like bodiesinphalaenopsis J ShanxiUniv NatSciEd 39 2 318 32 聂 菁 刘 丽 凤 任 海 虹 等 2016 蝴 蝶 兰 类原 球 茎诱 导 增殖 及 植 株 再 生 条 件 初 步 研 究 J 山 西 大学 学 报 自然科 学 版 39 2