草莓分子标记技术发展与应用.pdf

基金项目：国家科技支撑计划项目(No. 2013BAD02B04-02)、北京市粮经作物产业创新团队(No. BAIC09-2017)、北京市博士后工作经费资助项目、北京市农林科学院科技创新能力建设专项(No. KJCX20161504)收稿日期：2018-01-22 接受日期：2018-03-21草莓分子标记技术发展与应用孙瑞 王桂霞 常琳琳 孙健 董静 钟传飞 石琨 张运涛*北京市林业果树科学研究院/北京市草莓工程技术研究中心/农业部华北地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室，北京100093*通讯作者，zhytao1963126.com摘 要 栽培草莓(Fragariaananassa)为八倍体多年生草本植物，具有复杂的遗传背景，多数农艺和品质性状均为多基因控制，为草莓的遗传育种工作带来了挑战。DNA分子标记直观反映基因组的差异和变化，对于遗传高度杂合、生产周期长的多年生果树来说，能够有效提高育种效率。近年来，分子标记技术在果树辅助育种、基因定位、遗传图谱构建、QTL定位、品种鉴定和基因组研究等方面应用广泛，有力地推动了果树分子育种的发展。本文综述了分子标记技术在草莓生产育种中的研究应用现状，以期为后续的研究提供参考，推动草莓的生产和育种。关键词 草莓，分子标记，基因定位，遗传图谱，QTL定位，遗传多样性中图分类号 S603.6 文献标识码 ADevelopment and Application of Molecular Marker Technique inStrawberry (Fragariaananassa)SUN Rui WANG Gui-Xia CHANG Lin-Lin SUN Jian DONG Jing ZHONG Chuan-FeiSHI Kun ZHANGYun-Tao*Beijing Academy of Forestry and Pomology Sciences/Beijing Engineering Research Center for Strawberry/Key Laboratory of Biology andGenetic Improvement of Horticultural Crops (North China), Ministry ofAgriculture, Beijing 100093, China* Corresponding author, zhytao1963126.comAbstract The cultivated strawberry, Fragariaananassa (2n=8x=56), is an octaploid perennial herb plantwith complicated genetic background. Most agronomic and quality traits of strawberry are controlled bypolygenes, resulting in difficulty in breeding. DNA molecular markers showed the genome variances andmutants directly, so it had been widely used in marker associated breeding, gene mapping, genetic mapconstruction, QTL mapping, cultivar identification and genome research since 1990s. And it greatly improvedthe efficiency of breeding, especially for the perennial fruit trees which were highly heterozygous and hadlong growth period. In this paper, we reviewed the current status of the applications of molecular markertechniques in strawberry breeding and production, aiming to provide foundations for further studies and pushforward strawberry breeding and the whole industry.Keywords Fragariaananassa, Molecular marker, Gene mapping, Genetic map, QTL mapping, Geneticdiversity栽培草莓(Fragariaananassa, 2n=8x=56)为八倍体多年生草本植物，是重要的经济作物，在世界范围内广泛栽培。联合国粮农组织(Food andAgri-culture Organization, FAO)统计显示，2016年世界Online system: http:/www.jabiotech.org农 业 生 物 技 术 学 报Journal of Agricultural Biotechnology2018, 26(9): 15881600DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.09.013草莓总产量约为912万吨。我国草莓总产量约为380万吨，占世界草莓总产量的41.7%，为草莓生产第一大国(FAOSTAT 2016. www.faostat3.fao.org)。栽培草莓起源于智利草莓(F.chiloensis)和弗州草莓(F. virginiana)的偶然杂交(Staudt, 1962)，为异源八倍体，遗传背景复杂，相较于二倍体作物其遗传育种研究具有一定难度。目前，普遍认为栽培草莓的基因组组成为AAAABBBB(Bringhurst, 1990)，起源于多个野生二倍体草莓种，包括森林草莓(F.vesca)，饭沼草莓(F. iinumae)，绿色草莓(F. viridis)，布哈拉草莓(F. bucharica)和五叶草莓(F. pentaphylla)等(Senanayake, Bringhurst, 1967; Davis, Yu, 1997;Davis et al., 2006)。同时研究发现，栽培草莓中许多分子标记呈现二倍化分离(Kunihisa et al., 2005;Rousseau-Gueutin et al., 2008; Sargent et al., 2009)，简化了栽培草莓的基因组研究。因此，从二倍体草莓入手，利用分子标记等技术，可能是解析栽培草莓复杂基因组、遗传规律、性状调控的有效途径。分子标记技术，以DNA一级序列的多态性为基础，遗传稳定，不受外界环境影响，位点丰富，多态性高(Agarwa et al., 2008)，尤其在遗传背景复杂，高度杂合的果树研究中具有显著优势。在果树的品种鉴定(Larsen et al., 2017)、遗传多样性分析(Cipriani et al., 2006)、基因定位(Sun et al.,2012)、遗传图谱构建(Sun et al., 2015)、辅助育种(Chagn et al., 2016)等方面得到了广泛的应用，有力地推动了果树分子育种与生物技术研究。草莓相比于苹果(Malusdomestica)、桃(Prunuspersica)等蔷薇科其他果树，具有多倍化特点，国内研究起步较晚，图谱构建、QTL定位等研究鲜有报道。本文综述了分子标记技术在草莓基因定位、遗传图谱构建、农艺品质QTL定位以及品种鉴定、基因组结构、遗传进化等方面的研究现状，以期为我国的草莓遗传育种工作提供参考，推动我国草莓产业和科研的发展。1 分子标记类型与开发基于分子杂交、PCR以及基因组测序等技术，已经建立了多种分子标记技术体系(表1)。在草莓研究中，以随机扩增多态性DNA(random amplifiedpolymorphic DNA, RAPD)，扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)，序列特征扩增区域(sequence characterized amplifiedregion, SCAR)，简单重复序列(simple sequence re-peats, SSR)和单核苷酸多态性(single nucleotide草莓分子标记技术发展与应用Development andApplication of Molecular Marker Technique in Strawberry (Fragariaananassa)缩写AbbreviationRFLPSSCPRAPDAP-PCRSCARSSRCAPSSTSISSRAFLPRBIPIRAPSNPSRAPGSMDArT全称Full name限制性片段长度多态性 Restriction fragment length polymorphism单链构象多态性 Single strand conformation polymorphism随机扩增多态性DNA Random amplified polymorphic DNA随机引物PCR Arbitrarily primed-PCR序列特征扩增区域 Sequence characterized amplified region简单序列重复 Simple sequence repeats酶切扩增多态性序列 Cleaved amplified polymorphic sequence序列标签位点 Sequence tagged sites简单重复序列间隔 Inter-simple sequence repeats扩增片段长度多态性 Amplified fragment length polymorphism基于反转录转座子的扩增多态性 Retrotransposon-based amplified polymorphism反转录转座子间扩增多态性 Inter-retrotransposon amplified polymorphism单核苷酸多态性 Single nucleotide polymorphism相关序列扩增多态性 Sequence-related amplified polymorphism基因特异标记 Gene-specific markers多样性阵列技术标记 DiversityArray Technology (DArT) markers参考文献CitationBotstein et al., 1980Orita et al., 1989Williams et al., 1990Welsh, McClelland, 1990Williams et al., 1991Hearne et al., 1992Lyamichev et al., 1993Fukuoka et al., 1994Zietkiewicz et al., 1994Vos et al., 1995Flavell et al., 1998Kalendar et al., 1999Sachidanandam et al., 2001Li, Quiros, 2001Sargent et al., 2007Snchez-Sevilla et al., 2015表1 已建立的分子标记技术Table 1 Established molecular marker techniques1589农业生物技术学报Journal ofAgricultural Biotechnologypolymorphism, SNP)五种分子标记技术应用最多。近十年来，基于稳定检测、操作简便和高通量等方面的要求，分子标记研究则主要采用SSR和SNP标记。SSR标记在基因组中数量丰富、重复性好且为共显性遗传，在育种应用中有很大的优势，可用于群体的连锁分析、图谱构建、图位克隆等。SNP标记蕴藏的遗传信息更为广泛，可通过质谱、高分辨率溶解曲线(high-resolution melting, HRM)、测序等手段检测(Mahoney et al., 2016; Lee, Lee, 2017; Vin-ing et al., 2017)，具有快速、高通量的特点，适应于大群体、多标记的育种研究。对于RAPD、AFLP等依赖随机引物和限制性内切酶的分子标记，开发时参照已经发表的方法，选用适宜的随机引物和内切酶组合即可。在草莓品种Ever Berry和Toyonoka中，利用175对随机引物开发RAPD标记，其中71对引物获得的89条具有重复性和多态性的扩增条带可用于后续的群体连锁关系研究(Sugimoto et al., 2005)。参考Vos等(1995)的方法，通过EcoR和Mse酶切，产生了69对AFLP引物，在草莓杂交组合TributeHoneoye的127株F1实生苗中进行扩增，获得了1 065条多态性片段，可作为标记进行遗传图谱构建(Weebadde et al., 2008)。由于特异性和转用性方面的局限，在不同草莓群体和品种中均开发了RAPD和AFLP标记，有些还通过测序转化为序列特异的SCAR标记(Haymes et al., 1997; Haymes etal., 2000; Lerceteau-Khler et al., 2003; Lerceteau-Khler et al., 2005)。SSR标记开发需要已知的DNA序列，因此最初的SSR标记都来自基因组文库构建。利用森林草莓Ruegen的基因组文库和森林草莓的AC富集基因组文库，分别获得了21和45个SSR标记(Hadonou et al., 2004; Cipriani et al., 2006)。利用野生八倍体弗州草莓的基因组文库，获得了8个SSR标记，通过群体验证发现这些标记呈高度的二倍化分离，在弗州草莓、智利草莓和栽培草莓3个八倍体种间转用效率高(Ashley et al., 2003)。通过草莓品种Strawberry Festival的cDNA文库构建，获得了208个SSR标记，可在蔷薇科基因组数据库(Ge-nome Database for Rosaceae, GDR)(https:/www.ro-saceae.org/)中下载引用(Folta et al., 2005)。为了使SSR标记的应用更具目的性，Bombarely等(2010)利用草莓品种Carisma、Chandler以及Elsanta等不同发育时期的果实不同部位构建cDNA文库，结合RNA测序，挖掘383个SSR位点，应用于遗传及分子生物学研究。随着EST等公共数据库的发展，SSR标记开发的成本显著降低，且更加简单易行，标记数量大幅提升(Chen et al., 2006)。Zorrilla-Fontanesi等(2011b)利用ESTs数据库，开发SSR标记122个。2013年，从ESTs数据库中获得草莓SSR标记4 349个(Isobe et al., 2013)。随着全基因组测序的发展，标记覆盖范围更加广泛，利用二倍体森林草莓Hawaii 4的基因组序列，获得了10 071个SSR标记(Sargent et al., 2011)。此外，由于SSR标记具有通用性，不同物种间同源保守序列区域的SSR标记可以相互转用，这也是草莓SSR标记的一个来源(Gasic et al., 2009)。SNP标记的开发则依赖于高通量测序和大数据库。森林草莓Hawaii 4全基因组序列的公布(Shulaev et al., 2011)、GDR等大型基因组数据库的不断丰富以及草莓转录组测序、基因组重测序的进行，是草莓大量SNP标记开发的基础。利用草莓果实不同发育时期的RNA测序序列，获得372个SNP位点(Bombarely et al., 2010)。Bassil等(2015)对二倍体饭沼草莓和19个八倍体品系进行测序，与Hawaii 4参考基因组比对，过滤后集成了一张包含95 063个SNP标记的芯片(90 KAffymetrixAxi-omarray)，可以广泛应用于草莓遗传图谱构建、品种鉴定和种群分析等领域，显著提升了检测通量和效率。兴起的子代测序(next-generation sequenc-ing, NGS)也是SNP开发的策略之一，无需基因组信息，可以同时实现标记开发和子代基因分型，适用于大群体的图谱构建和性状关联分析(Davey etal., 2011)。酶切测序 (restriction site-associatedDNA sequencing, RADseq)作为NGS策略的一种(Miller et al., 2007)，已经应用于果树(Sun et al.,2015)，草莓中采用该技术获得了1 098个SNP标记，并将907个定位在了遗传图谱上(Davik et al.,2015)。2 分子标记与基因定位分子标记与生物学形状的连锁分析，是分子标记应用的方向之一。通过杂交群体的标记分型以及表型数据的调查，计算遗传交换率，确定标记与性状的连锁关系。紧密连锁标记可用于分子标记1590辅助育种，进行目标性状的早期筛选；也可通过标记锚定基因组位置，进行相关基因的挖掘和图位克隆。果树中，基因定位的主要方法有集群分离分析法(bulked segregent analysis, BSA)，又称近等基因池法(Nandi et al., 1997)和主基因连锁分析法(Sunet al., 2012)。目前，研究获得了许多与草莓抗性和开花特性等性状连锁的分子标记(表2)。在草莓抗病性基因定位方面，主要病害均获得了与抗性基因连锁的分子标记。利用Md683Senga Sengana杂交群体，获得了4个与红中柱根腐病抗性基因(Phytophthora fragariae resistancegene, Rpf1)连锁的RAPD标记(表2)，并将其中的1个转化为SCAR，遗传距离为3.0 cM(Haymes et al.,1997; Haymes et al., 2000)。与炭疽病抗性基因(An-thracnose resistance gene, Rca2)连锁的分子标记为STS-Rca2_417和STS-Rca2_240，在43个抗感品种中的验证结果显示，验证率分别为81.4%和62.8%(Lerceteau-Khler et al., 2005)。利用达赛莱克特甜查理群体，获得了与灰霉病抗性和白粉病抗性相连锁的SSR标记(曹娴等, 2011; 刘建成等,2012)。四季结果性状或者日中性性状因其能够实现草莓的周年生产，在草莓研究中备受关注。因此，开展了许多与开花性状相关的基因定位研究。在森林草莓中，获得了3个与单季开花基因连锁的SCAR标记，其中SCAR2与单季开花基因间的遗传距离为0.0 cM，定位在连锁群相同位置(Albani etal., 2004)。栽培草莓中，Sugimoto等(2005)首先筛选出了2个与四季结果性状连锁的RAPD标记，但遗传距离较远。Castro等(2015)获得了3个与日中性状Traits红中柱根腐病抗性基因Rpf1Phytophthora fragariaeresistance geneRpf1炭疽病抗性基因Rca2Anthracnose resistancegeneRca2灰霉病抗性Gray mold resistance白粉病抗性Powdery mildew resistance单季开花Seasonal flowering四季结果Everbearing日中性Day-neutrality果实黄色Yellow fruit colour群体PopulationMd683Senga SenganaCapitolaPajaro达赛莱克特甜查理DarselectSweet Charlie达赛莱克特甜查理DarselectSweet CharlieF.vescassp.vescaF.vescassp.semperflorensEver BerryToyonokaSagahonokaSunmmer berrySagahonokaEver berryHeckerSagahonokaTributeHoneoyeDNICYellow WonderYellow WonderFRA520标记类型MarkertypeRAPDSCARSCARSSRSSRSCARRAPDSSRSSRGSMRAPD连锁标记Linked markersOPO-08AOPO-16AOPO-16BOPO-16CSCAR-R1ASTS-Rca2_417STS-Rca2_240UFFxa01H05FSS50FSS121SCAR1SCAR2SCAR3OPE07-1OPB05-1FxaACA02I08CFxaACA02I09CFxaACA02I10CChFaM011-163TChFaM148-184TCX661225-335THF3HB191A遗传距离/cMGeneticdistance1.73.03.03.03.00.62.815.91.33.33.00.01.711.815.81.11.51.16.85.58.40.00.0参考文献CitationsHaymes et al., 1997Haymes et al., 2000Lerceteau-Khleret al., 2005曹娴等, 2011刘建成等, 2012Albani et al., 2004Sugimoto et al., 2005Honjo et al., 2016Castro et al., 2015Deng, Davis., 2001表2 草莓性状连锁标记Table 2 Markers linked to specific trait in strawberry草莓分子标记技术发展与应用Development andApplication of Molecular Marker Technique in Strawberry (Fragariaananassa)1591农业生物技术学报Journal ofAgricultural Biotechnology性性状连锁的SSR标记，遗传距离显著缩小。2016年，利用3个杂交群体，将标记与四季结果性状的遗传距离缩短至1.5 cM以内，3个SSR标记在群体中的验证率高达98%(Honjo et al., 2016)，可用于辅助育种。草莓品质性状的基因定位研究较少，果实黄色性状的定位结果显示，在二倍体草莓群体DNICYellow Wonder和Yellow WonderFRA520中，基因标记F3H和RAPD标记B191A与果实黄色性状紧密连锁，遗传距离为0.0 cM，定位在连锁群同一位置(Deng, Davis, 2001)。3 遗传图谱构建遗传连锁图谱基于分子标记间的连锁关系，呈现标记在染色体上的线性关系，是数量性状QTL定位的基础，也是辅助基因组拼接，研究染色体结构变异的工具，在果树分子育种研究中起重要作用。由于栽培草莓高度杂合，遗传背景复杂，草莓的遗传图谱构建工作率先在二倍体野生草莓中开展，已发表了具有不同二倍体草莓种系谱的多张遗传图谱(表3)。第一张二倍体草莓遗传图谱发表于1997年，利用森林草莓Baron SolemacherWC6的F2群体，共有80个RAPD标记定位在7个连锁群(linkage group, LG)上，图谱总长445 cM(Davis, Yu,1997)。二倍体草莓的参考图谱，利用F.vesca 815F. nubicola 601(后被更正为F. bucharica 601)的F2群体，历经4次修正完善，最终包含411个标记位点，7个LGs，全长442.8 cM(Sargent et al., 2004;Sargent et al., 2006; Sargent et al., 2008; Sargent etal., 2011)。具有绿色草莓系谱的815903BC群体的遗传图谱发表于2006年，仅含有33个标记位点(Nier et al., 2006)。随着技术发展，利用SSR荧光检测技术，NGS和SNP芯片分型技术，构建了饭沼草莓和森林草莓的遗传图谱，在标记数目、图谱密度以及构图效率等方面均都有了很大的突破(Mahoney et al., 2016; Samad et al., 2017)。八倍体栽培草莓的遗传图谱构建与二倍体野生草莓稍有不同，主要利用F1杂交群体，通常会分别构建双亲及整合图谱。同时，连锁群数目变化较大，只有极少图谱能够获得与单倍型相一致的28个连锁群(表4)，可能与部分亚基因组研究不足，标记的丰富度缺乏有关。栽培草莓的首张遗传图谱发表于2003年，主要采用AFLP，STS和SCAR标记，分别构建了双亲图谱(Lerceteau-Khler et al.,2003)。此后，栽培草莓遗传图谱构建发展迅速，发表了多个群体的遗传图谱，且标记类型逐渐转变为以SSR和SNP为主(Isobe et al., 2013; Davik et al.,2015; Castro, Lewers, 2016; Lee, Lee, 2017)。有5个群体的遗传图谱都开展了延续性研究，对标记类型、标记数目进行了更新和补充，提升了应用效率和价值(Lerceteau-Khler et al., 2003; Rousseau-Gueutin et al., 2008; Sargent et al., 2009; Sargent etal., 2012; Weebadde et al., 2008; Castro et al., 2015;Zorrilla-Fontanesi et al., 2011a; Snchez-Sevilla etal., 2015; van Dijk et al., 2014; Bassil et al., 2015)。测序技术的发展以及大数据时代的到来，结合标记分型检测技术的不断进步，草莓高密度遗传图谱也陆续发表(Isobe et al., 2013; Nagano et al., 2017)，这些图谱将在QTL定位，性状候选基因挖掘等研究中，发挥更大的作用。作图群体Mapping populationBaron SolemacherWC6, F2F.vesca815F.nubicola601, F2F.vesca815F.nubicola601, F2F.vesca815F.bucharica601, F2F.vesca815F.bucharica601, F2815903BC, BC1F.iinumaeJ17F.iinumaeJ4, F2Hawaii 4FV, F2标记类型Marker typeRAPDSSR+Gene+SCARSSR+GeneSSR+GeneSSR+GeneSSR+GeneSNPSSR+SNP位点数目No. of loci8076182296411334962395连锁群数No. of linkage groups77777777图谱总长/cMMap length445448424578442.8241.6451.7558参考文献CitationDavis,Yu., 1997Sargent et al., 2004Sargent et al., 2006Sargent et al., 2008Sargent et al., 2011Nier et al., 2006Mahoney et al., 2016Samad et al., 2017表3 二倍体草莓遗传图谱Table 3 Genetic linkage maps of diploid strawberry species15924 QTL定位研究QTL定位依托于遗传连锁图谱，结合表型性状调查与分子标记基因分型，可将表型性状的遗传控制位点锁定在连锁图谱的某个区段内，更加有利于相关连锁标记和基因的分析挖掘。草莓的QTL定位研究起步较晚，近几年才开展了较为广泛的研究，定位的性状主要包括抗性性状、开花行为或四季结果性状以及品质相关性状(表5)。抗性性状方面，与炭疽病抗性相关的QTL定位在LG3，LG5和LG6上(李静等, 2012)；与黄萎病抗性相关的QTL连续三年定位在LG1、LG2、LG3、LG6和LG7上，具有年份稳定性(Antanaviciute et al., 2015)。利用Strawberry FestivalK12-10和StrawberryFestivalK08-17群体对角斑病抗性进行QTL定位研究，发现角斑病抗性受单显性基因控制，主效QTL位点定位在LG6上，与标记HRM6D_33.083和HRM6D_33.110紧密连锁。标记的验证结果显示，可用于抗性单株的初步筛选(Roach et al., 2016)。通作图群体Mapping populationCapitolaCF1116, F1CapitolaCF1116, F1RedgauntletHapil, F1RedgauntletHapil, F1TributeHoneoye, F1TributeHoneoye, F12321392, F12321392, F10212921, S102-19Sachinoka, F1KaorinoAkihime, F1HolidayKorona, F1HolidayKorona, F1SonataBabette, F1DelmarvelSelva, F1Reikou, S1SulhyangSengasengana, F1标记类型Marker typeAFLP+STS+SCARAFLP+STS+SCAR+SSRSSR+Gene+AFLP+RAPDSSR+GSM+AFLP+RAPDAFLPSSR+SCARSSR+AFLP+GSM+SSCPSNP+SSR+GSMSSRSSRSSRSSRSNPSNPSSR+SCARSNP+SSRSNP图谱类型Map type母本 Female父本 Male母本 Female父本 Male母本 Female父本 Male整合 Consensus整合 Consensus整合 Consensus母本 Female父本 Male母本 Female父本 Male整合 Consensus整合 Consensus整合 Consensus母本 Female父本 Male母本 Female父本 Male集成 Integrated整合 Consensus整合 Consensus整合 Consensus母本 Female父本 Male整合 Consensus整合 Consensus位点数目No. of loci23528034437917018231554942911917915412633820898225755562943181856508659490229224211574208连锁群数No. of linkagegroups43432826323769284334422625373334323432332828283141363130图谱总长/cMMap length16041469258221651675.31440.731162140.315411390.11902.8693.5590.51259.824901508.31668.92166.61103.4951.42364184620501581.51529.31317.52816.5800.8参考文献CitationLerceteau-Khleret al., 2003Rousseau-Gueutin etal., 2008Sargent et al., 2009Sargent et al., 2012Weebadde et al., 2008Castro et al., 2015Zorrilla-Fontanesiet al., 2011aSnchez-Sevillaet al., 2015Isobe et al., 2013van Dijk et al., 2014Bassil et al., 2015Davik et al., 2015Castro, Lewers., 2016Nagano et al., 2017Lee, Lee., 2017表4 八倍体栽培草莓遗传图谱Table 4 Genetic linkage maps of octaploid strawberry cultivars and selections草莓分子标记技术发展与应用Development andApplication of Molecular Marker Technique in Strawberry (Fragariaananassa)1593农业生物技术学报Journal ofAgricultural Biotechnology过3个抗性性状的QTL定位结果比较发现，均在LG6上得到了QTL位点，说明LG6上可能存在抗性基因聚集现象或广谱抗性基因。草莓的四季结果性状对实现周年生产具有重要意义，草莓中花序与匍匐茎属于同源器官，具有四季性状的草莓品种一般匍匐茎的发生会减少(Dale et al., 2002)，因此草莓开花行为、匍匐茎发生相关性状的QTL定位研究，是学者们关注的热点。研究发现，无论是在二倍体草莓Hawaii4FV群体中，还是在栽培草莓TributeHoneoye，HolidayKorona和DelmarvelSelva群体中，开花行为相关性状(包括开花周数,开花时间,分类Category抗性Resistance开花行为Floweringbehavior品质性状Qualitytraits定位性状Specific traits炭疽病抗性Anthracnose resistance黄萎病抗病性Verticilliumdahliaeresistance角斑病抗病性Angular leaf spot resistance开花周数Weeks of flowering开花时间Flowering time持续开花Perpetually flower匍匐茎发生数No. of Runners单果重Fruit weight糖度相关Sugar related traits酸度相关Acidity related traits总花色苷含量Total anthocyanin content总酚含量Total phenolics-癸内酯含量-decalactone content作图群体Mapping populationHokowaseSweet CharlieRedgauntletHapilStrawberry FestivalK12-10Strawberry FestivalK08-17TributeHoneoyeDelmarvelSelvabHawaii4FVHolidayKoronaTributeHoneoyeHawaii4FV2321392cCapitolaCF1116cHolidayKorona2321392CapitolaCF1116DelmarvelSelvaHolidayKorona2321392CapitolaCF1116HolidayKorona2321392CapitolaCF1116DelmarvelSelvaDelmarvelSelva2321392QTL位置a