生防菌D25与嘧环·咯菌腈复配对番茄灰霉病防治的增效作用.pdf

38 4 860 867 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2022 年 8 月 收稿日期 2022 07 11 基金项目 国家重点研发计划 2019YFD1002000 吉林省科技发展计划资助项目 20200703019ZP 作者简介 黄鑫 硕士研究生 E mail huangxin3508 通信作者 张浩 教授 E mail haozhang100 王迎春 副研究 员 E mail wyc13943450028 DOI 10 16409 ki 2095 039x 2022 04 018 生防菌 D25与嘧环 咯菌腈复配对番茄灰霉病防治的增效作用 黄 鑫 1 郑丽宁 1 顾学虎 1 许煊炜 2 张 浩 1 王迎春 3 1 吉林农业大学植物保护学院 长春 130118 2 农业农村部人参鹿茸监督检验测试中心 长春 130118 3 吉林省白城市农业科学院 白城 137000 摘要 为了筛选获得生防菌 D25 与杀菌剂的复配制剂 降低杀菌剂用量并提高番茄灰霉病的防治效果 本 文采用含毒介质法测定了 12 种杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力 并用平板计数法测定抑菌作用较好的 杀菌剂与生防菌 D25 的生物相容性 采用毒性比率筛选出杀菌剂与生防菌 D25 复配的最佳比例 并通过 盆栽试验进一步验证生防菌 D25 与杀菌剂复配对番茄灰霉病的防效 结果表明 12 种杀菌剂中 枯草芽 胞杆菌和哈茨木霉对番茄灰霉病菌的毒力最高 EC 50 值分别为 4 564 10 5 和 0 021 mg L 嘧环 咯菌腈对 番茄灰霉病菌的毒力较强 EC 50 值达 0 043 mg L 植物源杀菌剂香芹酚和苦参 蛇床素对番茄灰霉病菌的毒 力最低 EC 50 值分别为 12 469 和 19 220 mg L 生物相容性试验结果表明 嘧环 咯菌腈与生防菌 D25 有较 好的生物相容性 0 043 mg L 嘧环 咯菌腈与 7 10 4 CFU mL 的生防菌 D25 以 5 5 体积比进行复配时 毒 性比率可达 1 3943 表现为增效作用 盆栽试验中预防处理组的防效达 72 29 比两种单剂的防效分别提 高了 19 26 和 29 29 治疗处理组的防效达 61 57 相比两种单剂的防效分别提高了 15 40 和 21 23 综上所述 生防菌 D25 与嘧环 咯菌腈复配对番茄灰霉病菌具有增效作用 在不降低防病效果的情况下 可减少嘧环 咯菌腈的施药量达 50 具有很大应用潜力 关 键 词 生防菌 番茄灰霉病菌 联合毒力 增效作用 中图分类号 S471 S436 412 文献标识码 A 文章编号 1005 9261 2022 04 0860 08 Synergistic Effect of a Biocontrol Bacterium D25 and Cyprodinil Fludioxonil on the Control of Tomato Gray Mold HUANG Xin 1 ZHENG Lining 1 GU Xuehu 1 XU Xuanwei 2 ZHANG Hao 1 WANG Yingchun 3 1 College of Plant Protection Jilin Agricultural University Changchun 130118 China 2 Ginseng Product Quality Supervision and Inspection and Testing Center of the Ministry of Agriculture and Rural Affairs Changchun 130118 China 3 Baicheng Academy of Agricultural Sciences Baicheng 137000 China Abstract In order to screen the fungicide complex composed of biocontrol bacterium D25 and chemical fungicide to improve the biocontrol efficacy on tomato gray mold as well as reducing the dosage of chemical fungicides toxicity of 12 fungicides against Botrytis cinerea was firstly tested in vitro by toxic medium method Bio compatibility between fungicides with strong antifungal activity and biocontrol bacterium D25 was determined by plate counting method Optimal ratio of fungicides and biocontrol bacteriun D25 was screened by the toxicity ratio and control efficacy of the complex in suppressing tomato gray mold was further tested in pot experiment The results showed that among 12 fungicides Bacillus subtilis and Trichoderma harzianum had the strongest toxicity against B cinerea with EC 50 values of 4 564 10 5 mg L and 0 021 mg L respectively Cyprodinil fludioxonil had better toxicity with EC 50 value of 0 043 mg L Two botanical fungicides carvacrol and matrine osthol had the lowest toxicity with EC 50 values of 12 469 mg L and 19 220 mg L respectively Biocompatibility test showed that 第 4 期 黄鑫等 生防菌 D25 与嘧环 咯菌腈复配对番茄灰霉病防治的增效作用 861 no negative effect was found between cyprodinil fludioxonil and bio control bacterium D25 The complex of cyprodinil fludioxonil 0 043 mg L and bio control bacterium D25 7 10 4 CFU mL at a volume ratio of 5 5 performed synergistic effect with the toxicity ratio of 1 3943 In the pot experiment the control efficacy of the prevention group reached 72 29 which was higher than that of the individual fungicide by 19 26 and 29 29 respectively while the control efficacy of the treatment group reached 61 57 which was higher than that of the individual fungicide by 15 40 and 21 23 respectively In conclusion combined application of bio control bacterium D25 and cyprodinil fludioxonil had a synergistic effect against B cinerea which reduced the application amount of cyprodinil fludioxonil by 50 without reducing the control efficacy on tomato gray mold and had great potential to be applied in field Key words biocontrol bacterium Botrytis cinerea combined virulence synergistic effect 番茄灰霉病是由半知菌亚门灰葡萄孢 Botrytis cinerea 引起的一种真菌性病害 灰霉病菌致病能力较强 一旦侵入番茄组织就会迅速让植株产生病状并能够快速产生新的分生孢子进行多次侵染 1 低温 高湿有 利于该病害的发生 2 在春冬季节易发生 甚至暴发 可导致果实减产 20 30 病害发生严重时可减 产 50 60 3 该病害在番茄产后贮存和运输过程中依然可以发生 一旦条件适宜 番茄灰霉病菌就会 大量繁殖导致果实腐烂 进而造成严重的经济损失 4 目前 喷施化学农药是防治番茄灰霉病的主要方法 5 但长期大量使用杀菌剂会产生一系列问题 如 危害人类健康 破坏生态环境 使灰霉病菌产生抗药性等 纪明山等 6 报道从辽宁省田间采集的番茄灰霉 病菌对腐霉利的抗性频率已经达到 84 84 对嘧霉胺的抗性频率已高达 100 冯宝珍等 7 报道山西运城 地区的番茄灰霉病对啶酰菌胺的抗性频率已经达到 77 14 筛选高效 低毒防治药剂和防治方法成为目前 生产中防治番茄灰霉病急需解决的问题 8 生防菌具有低毒 高效等特点 目前已经被广泛研究 但因其 受环境影响较大 防治效果不稳定 使得其在农业生产中的应用受到限制 9 部分杀菌剂对真菌的抑制作 用强 对细菌几乎无抑制作用 因而采用生防细菌与杀菌剂复配可能是一种有效防治番茄灰霉病的措施 10 前人研究表明部分化学杀菌剂与生防菌联合使用可在降低农药使用量的同时提高防效 如王兵 11 报道以 25 氰烯菌酯与绿色木霉 LZT 3 联合使用防治水稻恶苗病 以 25 嘧菌酯与长枝木霉 CZT 2 联合使用防治 纹枯病 以 50 醚菌酯与枯草芽胞杆菌 ZKC 1 联合使用防治胡麻斑病和稻瘟病有明显的增效效果 其抑 菌率分别可达 94 96 86 82 和 95 00 陈美云 12 将枯草芽胞杆菌 LV 与 99 噁霉灵联合使用对生姜茎 基腐病的防病效果可达到 77 32 同时具有一定的促生作用 张萌等 13 使用荧光假单胞菌 YG 1 与啶酰菌 胺联合使用防治番茄灰霉病 可减少一半施药量且防效可达 71 31 较啶酰菌胺单剂提高了 22 45 Ji 等 14 将氟醚菌酰胺与甲基营养型芽胞杆菌 TA 1 联合使用 使田间番茄灰霉病发病率降低 20 左右 生防 菌和化学杀菌剂复配在一定程度上解决了用药量过多导致病原菌抗药性急剧增长和生防菌见效慢的问题 生防菌 D25 是从番茄根际土壤中分离得到的菌株 属于泛菌属 对番茄灰霉病有较强防治作用 15 为 了减少化学杀菌剂用量 同时提高生防菌的防治效果 本研究从 12 种杀菌剂中筛选出与生防菌 D25 具有 较好生物相容性的杀菌剂 明确了复配的最适配比及其防病效果 为番茄灰霉病的科学防治提供依据 1 材料与方法 1 1 试验材料 供试菌株 番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea 和泛菌 Pantoea jilinensisD25 由吉林农业大学农药生测实验 室分离保存 PDA 培养基 马铃薯 200 0 g 葡萄糖 20 0 g 琼脂 20 0 g 蒸馏水 1000 mL LB 培养基 胰蛋白胨 10 0 g 酵母浸粉 5 0 g 氯化钠 10 0 g 琼脂 15 0 20 0 g 蒸馏水 1000 mL 供试番茄品种 京丹绿宝石 2 号 由吉林农业大学植物保护学院提供 供试杀菌剂见表 1 862 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 表 1 供试杀菌剂 Table 1 The tested fungicides 编号 Number 杀菌剂 Fungicide 生产厂家 Manufacturer 1 14 啶菌噁唑 咯菌腈 SC 山东省青岛奥迪斯生物科技有限公司 2 30 啶酰 咯菌腈 SC 深圳诺普信农化股份有限公司 3 27 啶酰 嘧菌酯 SC 江阴苏利化学股份有限公司 4 40 咯菌腈 异菌脲 SC 福建新农大正生物工程有限公司 5 40 啶酰 异菌脲 SC 青岛小蜂生物科技有限公司 6 50 异菌 腐霉利 SC 陕西亿农高科药业有限公司 7 62 嘧环 咯菌腈 WG 瑞士先正达作物保护有限公司 8 38 唑醚 啶酰菌 WG 江西正邦作物保护股份有限公司 9 100 亿 CFU g 枯草芽胞杆菌 WP 山东潍坊双星农药有限公司 10 3 亿 CFU g 哈茨木霉菌 WP 美国拜沃股份有限公司 11 1 5 苦参 蛇床素 AS 山西德威本草生物科技有限公司 12 5 香芹酚 SL 山西德威本草生物科技有限公司 1 2 试验方法 1 2 1 不同杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力测定 采用含毒介质法 16 测定 12 种杀菌剂对番茄灰霉病 菌的抑制率 向冷却至 50 的 PDA 培养基中加入配制好的不同浓度梯度的药液 表 2 混合均匀后倒 板 对照组平板使用无菌水制备 将直径为 5 0 mm 的番茄灰霉病菌饼接种在制备好的含药 PDA 平板中央 每个浓度重复 3 次 于 25 黑暗条件下培养 5 7 d 后测量真菌菌落直径 计算抑菌率 17 18 抑制率 对照菌落直径 处理菌落直径 对照菌落直径 菌饼直径 100 表 2 杀菌剂的浓度梯度 Table 2 The concentration gradient of fungicide 浓度梯度 Concentration gradient 杀菌剂 Fungicide 1 2 3 4 5 单位 unit 枯草芽胞杆菌 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 哈茨木霉菌 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 CFU mL 嘧环 咯菌腈 0 025 0 05 0 1 0 2 0 4 啶酰 咯菌腈 0 025 0 05 0 1 0 2 0 4 啶菌噁唑 咯菌腈 0 025 0 05 0 1 0 2 0 4 唑醚 啶酰菌 0 025 0 05 0 1 0 2 0 4 啶酰 异菌脲 0 25 0 5 1 2 4 咯菌腈 异菌脲 0 25 0 5 1 2 4 异菌 腐霉利 0 25 0 5 1 2 4 啶酰 嘧菌酯 0 25 0 5 1 2 4 香芹酚 4 8 16 32 64 苦参 蛇床素 4 8 16 32 64 mg L 注 表中浓度为培养基中最终浓度 Note The concentration in above table was the final concentration in the medium 1 2 2 泛菌 D25 与杀菌剂相容性测定 对番茄灰霉病菌毒力较高的杀菌剂 测定其与泛菌 D25 的相容 性 采用混和平板法测定微生物杀菌剂与泛菌 D25 的相容性 19 具体方法如下 向已冷却至 50 左右 的 90 mL PDA 培养基中加入 10 mL OD 600 1 48 的泛菌 D25 菌悬液 混和均匀后倒板 然后分别吸取配 第 4 期 黄鑫等 生防菌 D25 与嘧环 咯菌腈复配对番茄灰霉病防治的增效作用 863 置好的 10 L 枯草芽胞杆菌和哈茨木霉菌菌液点在平板中央 28 黑暗条件下进行培养 48 h 后观察 有无抑菌圈出现 采用平板计数法测定泛菌 D25 与化学杀菌剂的相容性 在 LB 平板中加入化学杀菌剂 使其终浓度为 50 100 150 200 250 mg L 将 1 mL OD 600 1 48 的泛菌 D25 菌液进行 10 倍系列稀释 6 次 取 100 L 稀释后的菌悬液均匀涂布于 LB 平板上 以无菌水为对照 28 黑暗条件下培养 48 h 后测定泛菌 D25 的菌落数 计算每毫升菌液 D25 的存活量 每组重复 3 次 采用 DPS 软件统计分析生 物相容性 1 2 3 泛菌 D25 与杀菌剂复配比例筛选 根据 12 种杀菌剂的室内毒力测定结果以及泛菌 D25 与杀菌剂间 的相容性试验结果 选择对番茄灰霉病菌毒力最高且对泛菌 D25 菌体生长影响最小的嘧环 咯菌腈与泛菌 D25 进行复配 为能够清晰地看出复配剂对番茄灰霉病菌的影响 嘧环 咯菌腈的浓度以 EC 50 0 043 mg L 进行配制 泛菌 D25 浓度同样选择对番茄灰霉病菌抑制率在 50 左右的浓度 7 0 10 4 CFU mL 按照 嘧环 咯菌腈与 D25 的体积比 V V 10 0 9 1 8 2 7 3 6 4 5 5 4 6 3 7 2 8 1 9 0 10 进行复配比例 的筛选 根据张萌等 13 方法计算毒性比率 1 2 4 盆栽试验 将直径为 5 0 mm 的番茄灰霉病菌菌饼接种在制备好的 PDA 培养基中央 于 25 黑暗 条件下培养 5 7 d 后 向培养皿中加入 10 mL 0 5 的吐温 80 静置 2 min 然后将其菌丝和孢子刮下 用 4 层纱布过滤 获得孢子悬液 采用血细胞仪计数法将浓度调至 5 10 6 孢子 mL 备用 20 番茄种子用 0 5 次氯酸钠溶液消毒 1 min 然后用无菌水冲洗干净 置于两层湿滤纸间 于 28 培养 4 d 发芽后播种至 9 cm 10 cm 花盆中 每盆装有 0 8 Kg 灭菌土 V 蛭石 V 土壤 1 5 所有花 盆放置在 25 30 光照 14 h d 相对湿度 70 左右的温室中 定期浇水 待番茄幼苗长至 6 叶 期进行防病试验 分别设置一组治疗处理和一组预防处理 探究杀菌剂与泛菌 D25 复配后的效果 在 治疗处理中 先将 20 mL 浓度为 5 10 6 孢子 mL 的番茄灰霉病孢子悬液均匀喷施 在番茄幼苗叶片上直 至径流 48 h 后 分别喷施 10 mL 嘧环 咯菌腈和泛菌 D25 菌液的复配剂 体积比 5 5 10 mL 嘧环 咯 菌腈和 10 mL 泛菌 D25 各处理中嘧环 咯菌腈浓度为 0 043 mg L D25 菌液浓度为 7 10 4 CFU mL 预防处理组则先将复配剂 嘧环 咯菌腈和泛菌 D25 单剂分别喷施在番茄幼苗叶片上 48 h 后喷施浓度 为 5 10 6 孢子 mL 的番茄灰霉病孢子悬液 各药剂浓度及用量同治疗组 对照组用清水进行处理 每 个处理选取 9 盆番茄 每盆中 3 株番茄苗 共设 3 次重复 接种 5 7 d 后调查植株发病情况 病害分 级标准参照 GB T 17980 28 2000 0 级 无病斑 1 级 单叶片有病斑 3 个 3 级 单叶片有病斑 4 6 个 5 级 单叶片有病斑 7 10 个 7 级 单叶片有病斑 11 20 个 部分密集成片 9 级 单叶片有病 斑密集占叶面积四分之一以上 采用 DPS 软件统计分析防治效果 病情指数 病级数 该病级植株 数 最大病级数 植株总株数 100 防治效果 对照组病情指数 处理组病情指数 对照病情指数 100 2 结果与分析 2 1 12 种杀菌剂对番茄灰霉病的毒力分析 12 种杀菌剂的室内毒力见表 3 其中枯草芽胞杆菌和哈茨木霉菌两种微生物菌剂表现出较高的抑菌活 性 EC 50 值分别为 4 564 10 5 与 0 021 mg L 嘧环 咯菌腈 啶酰 咯菌腈和啶菌噁唑 咯菌腈 3 种化学杀菌 剂有较高的抑菌活性 EC 50 值分别为 0 043 0 081 和 0 093 mg L 均小于 0 1 mg L 而香芹酚和苦参 蛇床 素两种植物源杀菌剂的抑菌活性较低 其 EC 50 值分别为 12 469 和 19 220 mg L 所以选择枯草芽胞杆菌 哈茨木霉菌 嘧环 咯菌腈 啶酰 咯菌腈和啶菌噁唑 咯菌腈与泛菌 D25 进行生物相容性的测定 2 2 泛菌 D25 与杀菌剂的相容性分析 微生物杀菌剂与泛菌 D25 相容性测定结果表明 枯草芽胞杆菌和哈茨木霉菌对泛菌 D25 的生长有抑 制作用 生物相容性不佳 化学杀菌剂与 D25 相容性测定结果表明 在浓度为 50 mg L 的异菌脲 腐霉利和 啶酰 咯菌腈的平板上 D25 的活菌量分别为 1 14 10 9 和 1 22 10 9 CFU mL 显著低于对照组活菌量 P 0 05 但在浓度为 50 mg L 的嘧环 咯菌腈的平板上 泛菌 D25 的活菌量为 1 67 10 9 CFU mL 与对照 无显著差异 表 4 表明嘧环 咯菌腈与泛菌 D25 具有较好的生物相容性 864 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 表 3 十二种杀菌剂对番茄灰霉病毒力测定结果 Table 3 Toxicity of twelve fungicides to B cinerea 杀菌剂 Fungicide 毒力回归方程 Virulence regression equation y 相关系数 Correlation coefficient r EC 50 mg L 枯草芽胞杆菌 y 0 460 x 1 996 0 9864 4 564 10 5 哈茨木霉菌 0 448x 1 224 0 9767 0 021 嘧环 咯菌腈 y 2 475x 3 392 0 9874 0 043 啶酰 咯菌腈 1 487x 1 624 0 9834 0 081 啶菌噁唑 咯菌腈 y 1 281x 1 322 0 9823 0 093 唑醚 啶酰菌 0 936x 0 627 0 9607 0 21 啶酰 异菌脲 y 1 290 x 0 326 0 9726 0 559 咯菌腈 异菌脲 y 1 743x 0 880 0 9695 0 890 异菌 腐霉利 1 743x 0 180 0 9742 1 024 啶酰 嘧菌酯 y 1 494x 0 107 0 9894 1 513 香芹酚 1 727x 1 893 0 9659 12 469 苦参 蛇床素 y 1 659x 2 130 0 9905 19 220 表 4 三种杀菌剂对泛菌 D25 菌体生长的影响 Table 4 Effects of three fungicides on the growth of P jilinensis D25 杀菌剂 Fungicide 浓度 Concentration mg L 活菌量 Alive bacteria amount 10 8 CFU mL 50 11 40 ef 100 6 63 h 150 5 83 i 200 4 43 j 异菌脲 腐霉利 250 3 30 k 50 16 70 a 100 13 30 b 150 12 50 c 200 11 60 de 嘧环 咯菌腈 250 11 00 f 50 12 20 cd 100 11 00 f 150 10 70 200 9 23 g 啶酰 咯菌腈 250 9 17 对照 17 00 a 注 同列不同小写字母表示差异显著 P 0 05 Note Data with different lowercase letters in the same column indicate significant difference P 0 05 2 3 不同比例的嘧环 咯菌腈与泛菌 D25 复配对番茄灰霉病菌的抑制作用 嘧环 咯菌腈与泛菌 D25 不同比例复配对番茄灰霉病菌的抑制效果见表 5 结果表明当嘧环 咯菌腈与 泛菌 D25 体积比为 9 1 8 2 2 8 和 1 9 时 毒性比率在 0 8858 0 9567 之间 均小于 1 表现为拮抗作用 而 7 3 6 4 5 5 4 6 3 7 五个比例的毒性比率在 1 2224 1 3943 之间 均大于 1 表现为增效作用 其 中比例 5 5 的毒性比率最大可达 1 3943 说明在此比例下嘧环 咯菌腈与泛菌 D25 的协同作用最强 防治效 果最好 第 4 期 黄鑫等 生防菌 D25 与嘧环 咯菌腈复配对番茄灰霉病防治的增效作用 865 2 4 盆栽试验结果 将 0 043 mg L 的嘧环 咯菌腈与 7 10 4 CFU mL 泛菌 D25 按体积比 5 5 复配 进行盆栽试验 测定其 预防和治疗效果 结果 表 6 表明 预防处理组中 泛菌 D25 和嘧环 咯菌腈单剂对番茄灰霉病的防治效 果分别为 43 00 和 53 03 而复配剂可使病情指数降低至 12 82 防治效果可达 72 29 治疗处理组中 泛菌 D25 和嘧环 咯菌腈单剂的防治效果略低 分别为 40 34 和 46 17 复配剂可使病情指数降低至 17 78 防治效果可达 61 57 上述结果说明 嘧环 咯菌腈和泛菌 D25 复配剂对番茄灰霉病菌的抑制效果最强 复配剂对番茄灰霉病的预防和治疗效果无明显差异 表 5 嘧环 咯菌腈与泛菌 D25 复配对番茄灰霉病的抑制作用 Table 5 Inhibition of the cyprodinil fludioxonil and P jilinensis D25 complex on B cinerea growth 嘧环 咯菌腈 泛菌 D25 V V 试验抑菌率 Experimental inhibition rate 理论抑菌率 Theoretical inhibition rate 毒性比率 Toxicity ratio 10 0 49 88 3 50 d 49 88 1 0000 9 1 48 15 3 67 d 50 33 0 9567 8 2 47 29 2 11 d 50 78 0 9312 7 3 65 59 2 81 b 51 23 1 2802 6 4 70 73 1 37 a 51 68 1 3686 5 5 72 69 2 68 a 52 14 1 3943 4 6 71 40 2 62 a 52 59 1 3578 3 7 64 83 2 58 b 53 04 1 2224 2 8 47 83 2 15 d 53 49 0 8943 1 9 47 78 1 30 d 53 94 0 8858 0 10 54 39 1 89 c 54 39 1 0000 注 同列不同小写字母表示差异显著 P 0 05 Note Data with different lowercase letters in the same column indicate significant difference P 0 05 表 6 复配剂对番茄灰霉病的盆栽防治效果 Table 6 Efficacy of cyprodinil fludioxonil and D25 complex on the control of tomato gray mold in pot experiment 处理 Treatment 处理 Treatment 病情指数 Disease index 防治效果 Control efficacy 治疗处理 17 78 0 64 de 61 57 嘧环 咯菌腈 泛菌 D25 预防处理 12 82 0 69 e 72 29 治疗处理 24 90 1 74 bc 46 17 嘧环 咯菌腈 预防处理 21 73 0 57 cd 53 03 治疗处理 27 60 0 27 b 40 34 泛菌 D25 预防处理 26 37 1 43 bc 43 00 对照组 清水处理 46 26 0 43 a 注 同列不同小写字母表示差异显著 P 0 05 治疗处理 接种病原菌 48 h 后喷施药剂 预防处理 喷施药剂 48 h 后接种病原菌 病原菌浓度 为 5 10 6 孢子 mL Note Data with different lowercase letters in the same column indicate significant difference P 0 05 Therapeutic the fungicides was sprayed after B cinerea inoculation Prevention the fungicides was sprayed before B cinerea inoculation The concentration of B cinerea was at 5 10 6 spores mL 3 讨论 化学药剂和生物药剂复配防治植物病害已经在实际生产中得到应用 如纪兆林等 21 连续 3 年使用咪鲜 胺单剂防治桃枝枯病 发现药后 35 d 防效从 55 22 下降至 15 74 而与地衣芽胞杆菌 W10 复配使用的防 治效果能够稳定在 30 以上 陈长卿等 22 利用甲基营养型芽胞杆菌 NJ13 分别与嘧菌环胺和苯醚甲环唑复 866 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 配对田间人参黑斑病菌的防治效果可达 80 39 和 89 33 谷春艳等 23 利用芽胞杆菌 WH1G 与氟啶胺复配 防治草莓灰霉病的田间防效可达 69 79 近年多项研究发现辽宁 山西等地的灰霉病菌对生产中常用杀菌 剂已经产生抗药性 6 7 因此减少化学杀菌剂用药量 提高防效成为生产中亟需解决的问题 但该方面研究 非常匮乏 本研究在前期获得新的生防菌 D25 15 基础上 研究了该菌与常用杀菌剂的复配毒力和温室防效 明确了复配制剂比例 为番茄灰霉病的防治提供了新的药剂 明确杀菌剂的毒力以及杀菌剂与生防菌的相容性是筛选复配制剂的重要指标 本研究测定的 2 种微 生物杀菌剂对番茄灰霉病菌的 EC 50 值最低 杀菌作用强 但是两种微生物杀菌剂在 PDA 培养基中抑制 泛菌 D25 的生长 可能与两种微生物杀菌剂产生的抗菌代谢物同时具有杀真菌和杀细菌作用 24 有关 因而不适合与泛菌 D25 混和使用 植物源杀菌剂具有环境友好 对非靶标生物安全 不易产生抗药性 等优点 但试验中使用的香芹酚和苦参 蛇床素的 EC 50 值较高 对番茄灰霉病菌的抑制 作用不强 需要 使用高剂量才有可能达到较为可观的防治效果 由于植物源杀菌剂通常以天然植物提取物 稀有植物和 高毒植物为材料 25 产量有限 26 因而也不适合与泛菌 D25 联合使用 8 种化学杀菌剂中 嘧环 咯菌 腈的 EC 50 值最低 并与泛菌 D25 有较好的生物相容性 室内毒力和盆栽试验结果表明嘧环 咯菌腈的用 药量在减少 50 情况下 复配制剂的防效显著高于两种单剂 具有很大应用潜力 但仍需在田间进行药 效评价 化学杀菌剂是防治番茄灰霉病的主要药剂 但药剂的选择作用容易导致番茄灰霉病菌产生抗药性 并 逐渐成为田间流行的优势群体 从而使常用的杀菌剂防效下降甚至完全失效 27 28 为能够实现番茄灰霉病 的绿色防治 需要不断推出科学的防治方案 生防菌 D25 与杀菌剂嘧环 咯菌腈复配制剂的获得 对番茄 灰霉病的有效防控具有重要意义 有望降低杀菌剂用量和成本 达到农药减施增效的目的 参 考 文 献 1 杨燕涛 国内保护地蔬菜灰霉病侵染规律及防治技术研究进展 J 农药 2003 1 6 10 2 Xu H Sun L L Wang Q et al Effects of different temperature and humidity on the growth of tomato gray mold mycelia C Proceedings of the Third Conference on Horticulture Science and Technology 2012 426 430 3 Zhang Q X Xing C L Li S Y et al In vitro antagonism and biocontrol effects of Paenibacillus polymyxa JY1 5 against Botrytis cinerea in tomato J Biological Control 2021 160 104689 4 Cao S N Yuan Y Qin Y et al The pre rRNA processing factor Nop53 regulates fungal development and pathogenesis via mediating production of reactive oxygen species J Environmental microbiology 2018 20 4 1531 1549 5 Li Y G Cai Y N Liang Y B et al Assessment of antifungal activities of a biocontrol bacterium BA17 for managing postharvest gray mold of green bean caused by Botrytis cinerea J Postharvest Biology and Technology 2020 161 111086 6 纪明山 刘妍 朱赫 等 辽宁省番茄灰霉病菌对常用杀菌剂的抗药性监测与交互抗药性 J 农药 2017 56 9 676 678 7 冯宝珍 李培谦 山西运城温室番茄灰葡萄孢对啶酰菌胺的抗性 J 西北农业学报 2019 28 8 1351 1357 8 杜颖 辽宁省番茄灰霉病菌对腐霉利抗药性机制及快速检测技术研究 D 沈阳 沈阳农业大学 2018 9 李凤芳 番茄立枯病生防细菌的筛选及其防治效果 D 南宁 广西大学 2020 10 王永强 解淀粉芽胞杆菌 SDTB009 的分离鉴定及其对番茄枯萎病的防治研究 D 泰安 山东农业大学 2020 11 王兵 生防菌与杀菌剂联合应用对水稻主要病害病原菌的作用 D 大庆 黑龙江八一农垦大学 2021 12 陈美云 防控生姜茎基腐病的生防菌与杀菌剂协同施用研究 D 泰安 山东农业大学 2019 13 张萌 翟乾行 朱承余 等 荧光假单胞菌 YG 1 与杀菌剂复配对番茄灰霉病的联合毒力 J 中国蔬菜 2021 5 70 74 14 Ji X X Li J J Meng Z et al Synergistic effect of combined application of a new fungicide fluopimomide with a biocontrol agent Bacillus methylotrophicus TA 1 for management of gray mold in tomato J Plant Disease 2019 103 8 1991 1997 15 Zheng L N Zhang J P Wu X et al A novel biocontrol strain Pantoea jilinensis D25 for effective biocontrol of tomato gray mold causative agent Botrytis cinerea J Biological Control 2021 164 104766 16 Li Y G Xi Q X Wen S Y The research of inhibition mechanism and the application on Botrytis ci