褪黑素处理对西葫芦果实冷害和品质的影响.pdf

北 null 方 null 园 null 艺 nullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 贮藏保鲜检测 第一作者简介 王锋 nullnullnullnull null 男 硕士 副教授 现主要从事 农产品加工与贮藏等研究工作 null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull 责任作者 杨青珍 nullnullnullnull null 女 博士 教授 现主要从事果 蔬采后生理与分子生物学等研究工作 null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull 基金项目 运城学院博士基金启动资助项目 nullnull null nullnullnullnull 山西省重点学科群建设资助项目 nullnullnullnullnull 收稿日期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 褪黑素处理对西葫芦果实冷害和 品质的影响 王 null 锋 null 杨 青 珍 null 赵 旗 峰 null 张 晓 萍 null nullnull运城学院 生命科学系 山西 运城 nullnullnullnullnullnull nullnull山西农业大学 果树研究所 山西 太谷 nullnullnullnullnullnull nullnull 摘 null 要 以 珍玉 西葫芦为试材 采用褪黑素处理的方法 研究了褪黑素处理对西葫芦 果实低温 nullnullnullnullnull null 贮藏期间冷害 品质和抗氧化酶活性的影响 以期为西葫芦的贮藏提供 参考依据 结果表明 褪黑素处理可显著降低西葫芦果实冷害指数 冷害率和失重率 抑制 叶绿素含量下降及 null null 值和 null null 值上升 并保持较高的硬度和维生素 null 含量 同时褪黑素处 理提高了超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 谷胱甘肽还原酶和抗坏血酸过氧化物酶活性 抑制 了丙二醛含量和相对膜透性上升 综上所述 褪黑素处理可能通过提高抗氧化酶活性和维 持膜透性减轻西葫芦果实冷害 关键词 西葫芦 褪黑素 冷害 抗氧化酶 品质 中图分类号 nullnullnullnullnull null nullnullnull 文献标识码 nullnull 文章编号 nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 西葫芦 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 别名白瓜 茭 瓜 番瓜 因其果实脆嫩 又富含维生素 null 碳水化 合物 钙等营养物质而深受人们喜爱 null nullnull 采后西 葫芦代谢旺盛 常温下营养物质损失严重 衰老较 快 低温虽可降低其新陈代谢速率 延缓衰老 但 西葫芦属于冷敏型果实 不适宜低温条件下贮藏 容易发生冷害 null 中国北方冬天温度较低 而且 长期低于 nullnullnull 从温室或大棚采收后 西葫芦在 贮藏销售过程中长时间处于较低温度 容易诱发 冷害 冷害导致西葫芦耐贮性和抗病性下降 造 成大量腐烂与品质劣变 这已严重制约了西葫芦 产业的发展 褪黑素 nullnull 乙酰 nullnullnull 甲氧基色氨酸 nullnull 是色 氨酸的衍生物 是一种重要的吲哚胺激素 广泛存 在于各种植物中 包括苹果 草莓 番茄 樱桃 黄 瓜和木薯 nullnull 在调节植物生长发育 延缓衰老 促进果实成熟等多种生理过程中发挥作用 null 此 外 nullnull 还可以作为一种抗氧化剂 直接清除活性 氧 激活抗氧化酶 提高其它抗氧化剂的效率 从 而提高果蔬对非生物和生物胁迫的耐受性 null 据 报道 外源 nullnull 可提高抗氧化酶 超氧化物歧化 酶 nullnullnull 谷胱甘肽还原酶 nullnull 抗坏血酸过氧 化物酶 nullnullnull 和过氧化氢酶 nullnullnull 活性 有利 于清除活性氧 进而减轻了石榴果实冷害 null 外 源 nullnull 促进内源总酚和水杨酸的积累 提高了桃 果实的抗冷能力 null 外源 nullnull 可维持膜不饱和 脂肪酸 饱和脂肪酸比值 降低脂氧合酶活性 进 而延缓膜脂过氧化进程 减轻青椒果实冷害 null 此外 外源性 nullnull 还可激活 nullnullnullnull 信号通路 触发 精氨酸通路活性 进而促进内源多胺 脯氨酸和一 氧化氮的积累 提高了番茄果实抗冷能力 null 但 nullnull 对西葫芦冷害的影响尚鲜见报道 因此 该 试验研究 nullnull 处理对西葫芦果实冷害 品质和抗 氧化酶活性的影响 探讨其诱导果实抗冷机理 以 期为西葫芦果实贮运提供参考 nullnull 材料与方法 nullnullnullnull 试验材料 nullnull 供试材料 珍玉 西葫芦采自山西省运城市 盐湖区蔬菜示范基地 采摘结束后 nullnull 运回运城 学院果蔬贮藏保鲜实验室 供试试剂 硫代巴比妥酸 氯化镁 磷酸氢二 钠 三氯乙酸 磷酸二氢钠 氧化性谷胱甘肽 乙二 胺四乙酸二钠 氢氧化钠 三氯乙酸 过氧化氢 氮 蓝四唑等药品试剂均购于上海源叶科技有限公司 供试仪器 nullnullnullnullnullnullnullnull 电导率仪 上海精密仪 器有限公司 nullnullnullnullnullnull 型硬度计 意大利 nullnullnullnullnullnull 公 司 nullnullnullnullnullnullnull 型紫外 null 可见分光光度计 北京瑞利 分析仪器公司 nullnullnullnullnullnullnullnullnull 高速冷冻离心机 德 国 nullnullnullnullnull 公司 nullnullnullnullnullnull 型电子天平 上海舜宇 恒平科学仪器有限公司 nullnullnullnullnullnull 色差仪 日本柯 尼卡美能达公司 nullnullnullnull 试验方法 挑选瓜皮翠绿 瓜条顺直 大小均匀 长 nullnullnull nullnullnull nullnull 直径 nullnullnullnullnullnullnull nullnull 无机械伤 无病虫害 的西葫芦果实为试验材料 果实随机分成 null 组 每组 null 个重复 每重复 nullnullnull 个果 第 null 组对照 nullnull 将果实浸泡于蒸馏 水中 nullnullnullnullnull 第 null 组 nullnull 处理 将果实浸泡于 nullnullnull nullnullnull null nullnullnull nullnull 溶液 nullnullnullnullnull 前期预试验基 础上优选 自然晾干后 将果实装于 nullnullnullnullnullnull nullnull 保鲜袋 含 nullnull 透气孔率 国家农产品保鲜工 程中心 天津 每袋 nullnull 个果实 橡皮筋在袋口轻 绕两圈利于保湿透气 而后平铺于塑料筐内 贮藏 于 nullnullnullnullnull null 相对湿度 nullnullnull nullnullnull 冷库中 贮藏过程中 每隔 nullnull 取 nullnull 个果实用于冷害 指数 维生素 null 含量 叶绿素含量和细胞膜透性 测定 并取样保存于 nullnullnullnull 的超低温冰箱中 用 于抗氧化酶活性和丙二醛 nullnullnull 含量的测定 另有 nullnull 个果实用于冷害率和失重率的计算 每 个处理重复 null 次 整个试验重复 null 次 nullnullnullnull 项目测定 nullnullnullnullnullnull 冷害评估 冷害指数参考张苗等 null 方法 根据果实凹陷 斑和水渍状斑点的面积 将冷害程度分为 null 级 null 级 无冷害 null 级 nullnullnullnull null 级 nullnullnull nullnullnull null 级 nullnullnull nullnullnull null 级 nullnullnullnull 冷害率参考裴 倩如等 nullnull 方法 冷害指数的计算方法如下 冷害指数 null null 冷害级冷 null 该级别果实数 nullnull 果实总数 冷害率 null null 冷害果实数量 果实总数 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 失重率测定 失重率参考薛洁等 nullnull 的方法略有修改 失重 率 null null 贮藏前质量 null 贮藏后质量 贮藏前质量 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 硬度和维生素 null 含量测定 硬度测定参考王玮等 nullnull 方法 采用 nullnullnullnullnullnull 型意大利 探头直径 nullnullnull 测定深度 nullnullnull 硬度 计测定硬度 选果实中部对口去皮果肉硬度 取平 均 值 以 null 表 示 维 生 素 null 含 量 测 定 采 用 nullnullnullnull 等 nullnull 的方法 以 nullnull null nullnull 表示 nullnullnullnullnullnull 叶绿素含量 null null 值和 null null 值的测定 叶绿素含量测定参照张萌等 nullnull 的方法 以 nullnull null nullnull 表示 果皮色差测定采用 nullnullnullnullnullnull 色差 仪测定赤道部位的果皮上 null 个点的 null null null null 值 取 平均值 nullnullnullnullnullnullnullnullnull 含量和细胞膜相对透性测定 细胞膜相对透性测定参照丁天等 nullnull 方法 以 null 表示 nullnullnull 含量测定参照 nullnullnullnull 等 nullnull 方 法 nullnullnull 含量以 nullnullnull null nullnull 表示 nullnullnullnullnullnull 抗氧化酶活性测定 nullnullnull nullnullnull nullnullnull 和 nullnull 活 性 测 定 参 照 nullnullnullnull 等 nullnull 的 方 法 nullnullnull 活 性 以 抑 制 nullnullnull nullnullnull 光化还原为 null 个酶活单位 以 null null nullnull null nullnull 表示 nullnullnull 活 性 以 nullnull 鲜 果 肉 nullnullnullnullnull 波 长 处 nullnullnullnull 吸 光 度 值 变 化 nullnullnullnull 为 null 个 酶 活 单 位 以 null null nullnull nullnullnull nullnull 表示 nullnullnull 活性以 nullnull 鲜果肉 nullnullnullnullnull 波长处 nullnullnullnull 吸光度值变化 nullnullnullnull 为 null 个 酶活单位 以 null null nullnull nullnullnull nullnull 表 示 nullnull 活 性 以 nullnull 鲜果肉 nullnullnullnullnull 波 长 处 nullnullnullnull 吸 光 度 值 变 化 nullnullnullnull 为 null 个 酶 活 单 位 以 null null nullnull nullnullnull nullnull 表示 nullnullnullnull 数据分析 采用 nullnullnullnullnullnullnull 统计软件分析试验数据 平均 nullnullnull 第 期 nullnullnullnullnullnullnull 北 null 方 null 园 null 艺 值 null 标准误 nullnull 表示结果 差异显著性检验采用 最小显著极差法 差异显著水平为 nullnullnullnull nullnull 结果与分析 nullnullnullnullnullnull 处理对西葫芦冷害的影响 西葫芦冷害症状初期表现为表皮出现不规则 的凹陷斑或水渍状斑点 后期斑点逐渐扩大并连 成一片 颜色趋于黄化 腐烂程度加深 图 null 由 图 nullnull 可知 西葫芦果实的冷害指数呈上升趋势 nullnull 处理可延迟冷害症状的出现 并抑制冷害指 数的上升 nullnull 至贮藏结束平均值比对照降低了 nullnullnullnullnull 且差异达显著水平 nullnullnullnullnullnull 由图 nullnull 可知 nullnull 处理降低了冷害率 贮藏结束时 nullnull 处理的冷害率比对照降低了 nullnullnullnullnull 且二者差异 达显著水平 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 处理对西葫芦失重率的影响 由图 null 可知 nullnull 处理降低了失重率 贮藏结 束时 其失重率比对照降低了 nullnullnullnullnull 且差异达 显著水平 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 处理对西葫芦硬度和维生素 null 含量的 影响 nullnull 由图 nullnull 可知 硬度呈下降趋势 nullnull 处理抑 制硬度下降 nullnullnull 至贮藏结束 其硬度平均比对照 提高 nullnullnullnull 且二者差异达显著水平 nullnullnullnullnullnull 由图 nullnull 可知 维生素 null 含量整体呈下降趋 势 nullnull 处理抑制维生素 null 含量下降 nullnullnull 至贮 藏结束 其维生素 null 含量平均比对照提高 nullnullnullnull 且二者差异达显著水平 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 处理对西葫芦叶绿素含量 null null 值和 null null 值的影响 nullnull 由图 nullnull 可知 贮藏期间叶绿素含量整体呈 下降趋势 nullnull 处理抑制叶绿素含量下降 nullnullnull 至贮藏 结 束 其叶绿素含量平均比对照提高 nullnullnullnullnull 且二者差异达显著水平 nullnullnullnullnullnull 注 nullnullnullnull果实 nullnull nullnullnullnullnull null贮藏 nullnullnullnullnull处理果实 nullnull nullnullnullnullnull null贮藏 nullnullnullnullnull处理果实 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 图 null nullnullnull 处理对西葫芦冷害的影响 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 图 null nullnullnull 处理对西葫芦冷害指数 null 和冷害率 null 的影响 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull 北 null 方 null 园 null 艺 nullnullnullnullnullnull 月 下 null 图 null nullnullnull 处理对西葫芦失重率的影响 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 图 null nullnullnull 处理对西葫芦硬度 null 和维生素 null含量 null 的影响 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 图 null nullnullnull 处理对西葫芦叶绿素含量 null null null 值 null 和 null null 值 null 的影响 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null null nullnullnullnullnull null nullnullnullnullnull null nullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull 第 期 nullnullnullnullnullnullnull 北 null 方 null 园 null 艺 nullnullnull null 值为负代表颜色偏绿 值越小颜色越绿 null null 值为正代表颜色偏黄 值越大颜色越黄 由 图 nullnull null 可知 贮藏期间西葫芦果皮 null null null null 值均 呈上升趋势 nullnull 处理抑制 null null null null 值上升 nullnullnull 至贮藏结束 其 null null null null 值平均值分别比对照降低 nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnull 且差异达显著水平 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 处理对西葫芦 nullnullnull 含量和相对膜透性 的影响 nullnull 由图 null 可知 贮藏期间 nullnullnull 含量和相对膜 nullnullnullnullnull 透性均呈上升期趋势 nullnull 处理抑制 nullnullnull 含量 和相对膜透性上升 其含量始终低于对照 nullnull 至 贮藏结束平均值分别比对照降低了 nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnullnull 且差异达显著水平 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 处理对西葫芦 nullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnull 活 性的影响 nullnull 由图 null 可知 nullnullnull nullnullnull nullnullnull 和 nullnull 活性呈 先上升后下降的趋势 nullnull 处理保持较高抗氧化 酶活性 null 至贮藏结束 nullnullnull 和 nullnullnull 活性平均 nullnullnullnullnull 图 null nullnullnull 处理对西葫芦 nullnullnull含量 null 和相对膜透性 null 的影响 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 图 null nullnullnull 处理对西葫芦 nullnullnull null nullnullnull null nullnullnull null 和 nullnull null 活性的影响 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull 北 null 方 null 园 null 艺 nullnullnullnullnullnull 月 下 null 值分别比对照提高了 nullnullnullnull 和 nullnullnullnullnull nullnull 至贮藏 结束 nullnullnull 和 nullnull 活 性 平 均 值 比 对 照 提 高 了 nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnullnull 且差异达显著水平 nullnullnullnullnullnull nullnull 讨论与结论 低温贮运是西葫芦采后保鲜的有效方法 但 在低温下西葫芦容易诱发冷害 这极大限制了西 葫芦贮藏寿命和冷链物流 nullnull 该试验结果表明 nullnull 处理显著抑制了冷害指数的上升 降低了冷 害率 图 null null 延长了贮藏期 再加上 nullnull 处理 操作简单 价格便宜 无毒副作用 因而在西葫芦 果实冷链贮运中具有较好的应用前景 贮藏期间西葫芦叶绿素易发生降解 呈现类 胡萝卜素颜色 使果实变黄 从而影响其商品价 值 该试验结果发现 nullnull 处理有效抑制叶绿素 含量的下降 图 null 可能与其降低叶绿素降解相 关酶活性有关 相似的研究结果已在青花菜中证 实 nullnull 硬 度 会 随 着 果 实 成 熟 与 衰 老 而 下 降 图 nullnull 该试验结果表明 nullnull 处理延缓西葫芦 硬度下降 可能与其抑制硬度有关的果胶裂解酶 null 半乳糖苷酶 多聚半乳糖醛酸酶活性相关 相 似的研究结果已在香蕉果实研究中证实 nullnull nullnull 处理的西葫芦维生素 null 含量高于对照 图 nullnull 可 能与 nullnull 抑制营养成分分解 延缓果实衰老有 关 与褪黑素在鲜切梨果实研究结果一致 nullnull 果蔬采后冷害发生是细胞膜脂过氧化作用的 结果 null 采后果蔬遭受低温胁迫时 活性氧动态 平衡将被打破 导致其大量积累 进而引起膜脂质 过氧化程度加剧 最终引起冷害发生 据报道 果 实抗冷性与抗氧化酶活性呈正相关 nullnull 高湿贮 藏 nullnull 草酸 nullnull 低温预贮 nullnull 等大量采后处理措施 均可通过提高抗氧化酶活性来减轻果蔬冷害 该 试验结果表明 西葫芦果实的 nullnullnull nullnullnull nullnullnull 和 nullnull 活性在贮藏前中期上升 可能是应对低温 逆境活性氧自由基侵害所做出的应激反应 而贮 藏后期其抗氧化酶活性的下降 可能与低温逆境 破坏酶结构和功能有关 此外 nullnull 处理显著提 高 nullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnull 抗氧化酶活性 图 null 这 将有助于清除活性氧 抑制膜脂质过氧化进程 使 nullnullnull 含量和相对膜透性处于较低水平 图 null 最 终减轻西葫芦冷害发生 图 null null 这与 nullnull 在 青椒 null 桃 nullnull 人心果 nullnull 上研究结果相一致 这 些结果说明 nullnull 减轻西葫芦冷害与提高抗氧化 酶活性有关 nullnull 处理降低了冷害指数 冷害率和失重率 有效延缓了硬度 维生素 null 和叶绿素含量的下降 以及 null null 值和 null null 值的增加 从而保持较好的果实 品质 同时 nullnull 处理提高了 nullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnull 等 抗 氧 化 酶 活 性 有效清除活性氧 抑 制 nullnullnull 含量和相对膜透性上升 维持了细胞膜结 构与功能的完整性 从而减轻了西葫芦果实冷害 参考文献 null null 范林林 高元惠 高丽朴 等 nullnull nullnullnullnull 处理对西葫芦冷害和 品质的影响 null null食品工业科技 nullnullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull null null 张苗 姜玉 汤静 等 null冷激结合甜菜碱处理对西葫芦冷害及 能量代谢的影响 null null食品科学 nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnullnullnullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnu