我国葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性测定.pdf

38 4 868 873 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2022 年 8 月 收稿日期 2022 06 26 基金项目 国家重点研发计划 2019YFD1002000 作者简介 田秀 硕士研究生 E mail 1419058784 通信作者 甄志先 副教授 E mail zhenzhixian 张昊 副研究 员 E mail zhanghao DOI 10 16409 ki 2095 039x 2022 04 002 我国葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性测定 田 秀 1 周连柱 2 黄晓庆 2 孔繁芳 2 王忠跃 2 甄志先 1 3 张 昊 2 1 河北农业大学林学院 保定 071000 2 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193 3 河北省林木种质资源与森林保护重点实验室 保定 071000 摘要 灰霉病是葡萄生产上的重要病害之一 严重影响葡萄果实的品质和产量 为明确葡萄灰霉病菌对四 霉素和啶酰菌胺的敏感性 本研究分别采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了四霉素和啶酰菌胺对采自 云南省宾川县 湖北省武汉市和辽宁省北镇市 60 株葡萄灰霉病菌的有效抑制中浓度 EC 50 建立了敏感性 基线 并分析了二者之间的交互抗性 结果显示 葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感基线分别为 0 245 和 1 115 g mL 上述葡萄灰霉病菌均对四霉素敏感 而 11 7 的菌株表现为啶酰菌胺抗性 并且四霉素与 啶酰菌胺之间不存在交互抗性 r 0 040 P 0 05 因此 四霉素可作为防治葡萄灰霉病的候选药剂 研究结果对两种杀菌剂的科学使用以及葡萄灰霉病的可持续防控具有重要的理论和实践意义 关 键 词 葡萄灰霉病菌 四霉素 啶酰菌胺 敏感性 交互抗药性 中图分类号 S476 文献标识码 A 文章编号 1005 9261 2022 04 0868 06 Sensitivity of Botrytis cinerea to Tetramycin and Boscalid in China TIAN Xiu 1 ZHOU Lianzhu 2 HUANG Xiaoqing 2 KONG Fanfang 2 WANG Zhongyue 2 ZHEN Zhixian 1 3 ZHANG Hao 2 1 College of Forestry Hebei Agricultural University Baoding 071000 China 2 State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pest Institute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences Beijing 100193 China 3 Key Laboratory of Forest Germplasm Resources and Forest Protection Baoding 071000 China Abstract Gray mold caused by Botrytis cinerea Pers is one of the most destructive grape diseases which has influenced grape fruit yield and quality To clarify sensitivity of B cinerea to tetramycin and boscalid we detected the half maximal effective concentration EC 50 of tetramycin and boscalid against 60 isolates from Binchun Wuhan and Beizhen by mycelial growth rate and spore germination methods and analyzed the cross resistance relationship between them The results showed that baseline sensitivity of B cinerea to tetramycin and boscalid were 0 245 and 1 115 g mL respectively All the B cinerea isolates exhibited sensitive to tetramycin while 11 7 were resistant to boscalid In addition no cross resistance was found between tetramycin and boscalid r 0 040 P 0 05 Thus tetramycin can be a candidate fungicide for gray mold control in field The results are of significance in application of fungicides and sustainable control of gray mold Key words Botrytis cinerea tetramycin boscalid sensitivity cross resistance 葡萄是世界上广泛种植的水果之一 由灰葡萄孢 Botrytis cinerea 侵染引起的灰霉病是葡萄生产上的主 要病害 严重影响葡萄果实的品质和产量 1 近年来 随着设施栽培的推广和应用 葡萄灰霉病日趋严重 一般损失在 20 左右 发病严重时病穗率可达 40 以上 有些地区或品种甚至造成绝收 2 目前 化学防 第 4 期 田秀等 我国葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性测定 869 治是灰霉病田间防治的主要手段 但随着杀菌剂的大量和高频次使用 葡萄灰霉病菌对杀菌剂的抗性日趋 严重 据报道 目前该病原菌已对苯并咪唑类 二甲酰亚胺类 烟酰胺类以及咪唑类等多种杀菌剂产生了 抗性 3 5 亟需筛选高效安全的葡萄灰霉病防治药剂 啶酰菌胺属于琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂 于 2008 年在我国登记注册 已广泛用于防治蔬菜 果 树等作物的灰霉病等 6 这类药剂主要通过抑制病原菌琥珀酸脱氢酶的活性 阻碍其能量代谢 从而抑制 病原菌的生长 7 但由于其作用位点单一 长期广泛地使用容易产生田间抗性菌株 国际杀菌剂抗性委员 会 Fungicide Resistance Action Committee FRAC 已将其归为中等至高抗性风险杀菌剂 8 啶酰菌胺是 此类杀菌剂中的重要产品 故其抗性风险备受关注 目前 已有部分地区的灰霉病菌对啶酰菌胺产生了抗 性 9 明确不同葡萄产区灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性 对于指导科学用药具有重要意义 随着无公害 绿色和有机食品的发展 生物农药逐渐成为未来农药的发展方向之一 四霉素又称梧宁 霉素 是一种广谱且高效低毒的农用抗生素类杀菌剂 四霉素不仅可以有效防治子囊菌 担子菌和半知菌 引起的病害 10 还可以诱导寄主体内苯丙氨酸解氨酶 过氧化物酶和多酚氧化酶等防御酶系活性升高 11 从而提高寄主植物对病原菌的抗性 该药剂在我国于 2016 年登记用于防治水稻立枯病 小麦白粉病和赤 霉病 杨树溃疡病等 12 目前 已发现四霉素对蔬菜菌核病菌 13 番茄叶霉病菌 14 及辣椒疫霉病菌 15 等 具有较好的抑菌活性及防治效果 但对灰霉病菌的防治效果报道较少 Song 等 16 研究表明四霉素对草莓 及黄瓜灰霉病均具有较好的预防和治疗效果 由于不同寄主植物上的灰葡萄孢病菌存在遗传分化 17 四霉 素对葡萄灰霉病菌的抑制活性尚不明确 云南省宾川县 湖北省武汉市和辽宁省北镇市分别位于我国西南地区 长江中游地区和环渤海湾地区 是我国重要葡萄栽培区 18 葡萄灰霉病是各地的主要防治对象之一 随着灰霉病菌抗药性问题日益突出 高效安全杀菌剂的筛选对葡萄灰霉病的田间防控具有重要指导意义 为此 本试验分别采用菌丝生长速 率法和孢子萌发法 检测上述地区葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性 并分析两种药剂之间的 交互抗性关系 以期为四霉素和啶酰菌胺在防治葡萄灰霉病上的应用提供理论依据 减少灰霉病造成的 经济损失 1 材料与方法 1 1 供试材料 1 1 1 供试病原菌 本试验所用葡萄灰霉病菌为 2016 2017 年采集自我国云南省宾川县 湖北省武汉市和 辽宁省北镇市的葡萄主产区并保存在中国农业科学院植物保护研究所葡萄病害创新任务实验室的菌株 共 60 株 表 1 1 1 2 供试药剂 四霉素 0 3 的四霉素水剂 由辽宁微科生物工程股份有限公司提供 啶酰菌胺 中国 农业科学院植物保护研究所农药中心提供的 98 5 原药 溶于 100 的甲醇 配制成 10 mg mL 的母液 1 1 3 培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 Potato Dextrose Agar PDA 将马铃薯去皮 洗净吸干水分 称取 200 g 切成 1 cm 的土豆块放入 1 L 去离子水中煮至熟透 用纱布过滤掉马铃薯 加入 20 g 葡萄糖 20 g 琼脂 加热并搅拌至全部溶解 加 ddH 2 O 定容至 1 L 用锥形瓶分装后于 121 灭菌 20 min 2 水 琼脂培养基 Water Agar WA 20 g 琼脂 加 ddH 2 O 定容至 1 L 用锥形瓶分装后于 121 灭菌 20 min 1 2 试验方法 1 2 1 葡萄灰霉病菌对四霉素的敏感性测定 采用菌丝生长速率法测定葡萄灰霉病菌对四霉素的敏感性 四霉素敏感性检测浓度为 0 025 0 1 0 2 0 4 0 8 和 1 g mL 将供试药剂分别按上述比例与经高温灭 菌的 PDA 培养基混合制成所需浓度的含药 PDA 平板 将已活化的灰霉菌接种于普通 PDA 平板上 22 下培养 3 d 用直径 5 mm 的打孔器沿菌落边缘打取菌饼 表面朝下接种于含药 PDA 平板上 以无药 PDA 为对照 置于 22 的恒温培养箱培养 每个处理重复 3 次 3 d 后待对照组菌落直径达到平板的 3 4 时 采用十字交叉法测量菌落直径 并计算抑制率 有效抑制中浓度 EC 50 及 EC 50 变异系数 Variation factor VF 其中抑制率 对照菌落直径 处理菌落直径 对照菌落直径 100 EC 50 变异系数 最大 EC 50 值 最小 EC 50 值 870 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 1 2 2 葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性测定 采用孢子萌发法测定葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性 将活化好的灰霉菌株接种到 PDA 平板上培养 10 d 待其产孢后 使用无菌水将孢子洗脱 双层纱布对孢 子悬浮液进行过滤 并使用血球计数板在光学显微镜下将孢子悬浮液浓度调至 1 10 6 孢子 mL 将啶酰菌 胺按比例与 WA培养基充分混匀后缓慢倒入 60 mm培养皿中制成含药平板 啶酰菌胺浓度分别设置为 0 25 0 5 1 5 10 和 20 g mL 在不同浓度的含药平板上 吸取 40 L 孢子悬浮液均匀涂布开 以无药平板 为对照 每个处理重复 3 次 在 22 恒温培养箱培养 10 h 后 用显微镜观察并统计孢子的萌发情况 当 孢子的芽管长度大于孢子短半径时视为萌发 每个平板观察 100 个孢子 按计算孢子萌发率 抑制率 EC 50 值及其变异系数 其中 萌发率 萌发孢子数 观察孢子总数 100 抑制率 对照孢子萌 发率 处理孢子萌发率 对照孢子萌发率 100 变异系数 最大 EC 50 值 最小 EC 50 值 根据建立的葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感基线 分析上述葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的抗性频率与抗 性水平 其中抗性频率 抗性菌株个数 菌株总数 100 抗性因子 Resistance Factor RF 菌株 EC 50 敏感基线 抗性分级标准 19 如下 RF 5 为敏感 S 5 RF 20 为低抗 20 RF 100 为中抗 RF 100 为高抗 1 2 3 葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的交互抗性关系 将上述 60 株葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的 EC 50 对数值进行相关性分析 根据相关系数 r 与 P 的值确定四霉素与啶酰菌胺之间是否存在交互抗性关系 1 2 4 数据处理 使用 SPSS 25 0 软件进行下列数据分析 分别计算四霉素及啶酰菌胺对灰霉病菌菌丝生 长及孢子萌发的有效抑制中浓度 EC 50 采用 Fisher 最小显著差检验比较不同地区间的平均 EC 50 之间的 差异 P 0 05 存在显著差异 将啶酰菌胺和四霉素 EC 50 值转换成 lgEC 50 后 采用皮尔逊相关性分析评估 二者之间的交互抗性 2 结果与分析 2 1 葡萄灰霉病菌对四霉素的敏感性 采用菌丝生长速率法测定了 60 株葡萄灰霉病菌对四霉素的敏感性 表 1 其中四霉素抑制菌丝生长 的 EC 50 值范围为 0 075 0 433 g mL 平均 EC 50 值为 0 245 0 065 g mL 变异系数 VF 为 5 773 病菌的 EC 50 值整体呈一条单峰曲线 图 1 正态性检验结果表明供试的 60 株葡萄灰霉病菌对四霉素的 EC 50 值符合正态分布 因此 该病菌群体的 EC 50 均值可作为葡萄灰霉病菌对四霉素的敏感基线 不同地 区间葡萄灰霉病菌对四霉素的 EC 50 值无显著差异 P 0 05 表 1 表 1 不同地区葡萄灰霉病菌对四霉素的敏感性 Table 1 Sensitivity to tetramycin of B cinerea in different areas EC 50 g mL 地区 Region 样本数 株 Number 范围 Range 均值 Mean 变异系数 VF 云南省宾川县 Binchuan Yunnan 20 0 184 0 433 0 256 0 072 a 2 353 湖北省武汉市 Wuhan Hubei 20 0 135 0 378 0 233 0 051 a 2 800 辽宁省北镇市 Beizhen Liaoning 20 0 075 0 356 0 248 0 070 a 4 747 合计 Total 60 0 075 0 433 0 245 0 065 5 773 注 表中数值为平均值 标准差 同列相同字母表示经 Fisher 最小显著性差异法检测在 P 0 05 水平上差异不显著 Note Data are mean SD Mean values followed by the same letter in the columns were not significantly different in Fisher s least significant difference test at P 0 05 2 2 葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性情况 采用孢子萌发法测定了 60 株葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性 表 2 其中啶酰菌胺抑制孢子萌发 的 EC 50 值范围为 0 249 11 876 g mL 变异系数 VF 为 47 695 病菌的 EC 50 值整体呈非连续性分布 表明葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性存在一定分化 部分菌株已产生抗药性 通过对灰霉病菌 EC 50 值分 布频率进行分析 发现灰霉病菌的 EC 50 值主要分布在 0 25 2 64 g mL 且在该区间其敏感性频率分布符 合正态分布 图 2 通过对这一区间内的菌株提取得到 41 株 通过计算求得其平均 EC 50 值为 1 115 第 4 期 田秀等 我国葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性测定 871 0 579 g mL 以此平均值作为葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感基线 并且 不同地区间葡萄灰霉病菌对 啶酰菌胺的 EC 50 值无显著差异 P 0 05 根据建立的啶酰菌胺敏感基线 发现上述 3 个地区的 60 株葡萄灰霉病菌中共有 7 株抗性菌株 总体 抗性频率为 11 7 且全部为低抗菌株 其中云南宾川县共有 3 株低抗菌株 抗性频率为 15 其他两个 地区均发现了 2 株低抗菌株 抗性频率为 10 表明整体抗性水平较低 表 3 0 0 6 0 1 2 0 1 2 0 1 8 0 1 8 0 2 4 0 2 4 0 3 0 0 3 0 0 3 6 0 3 6 0 4 2 0 4 2 0 4 8 敏感性频率 Sen s it iv ity freq u ency 图 1 四霉素对 60 株葡萄灰霉病菌对的 EC 50 值分布 Fig 1 Distribution of EC 50 values for tetramycin against 60 B cinerea isolates 30 0 敏感性频率 Sen s it ivi ty freq uency 20 10 0 2 5 0 6 5 0 6 5 1 0 5 1 0 5 1 4 5 1 4 5 1 8 5 1 8 5 2 2 4 2 2 4 2 6 4 EC 50 g mL 图 2 啶酰菌胺对 41 株葡萄灰霉病菌的 EC 50 值分布 Fig 2 Distribution of EC 50 values for Boscalid against41 B cinerea isolates 表 2 不同地区葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性 Table 2 Sensitivity to boscalid of B cinerea in different areas EC 50 g mL 地区 Region 样本数 株 Number 范围 Range 均值 Mean 变异系数 VF 云南省宾川县 Binchuan Yunnan 20 0 459 8 614 2 057 2 330 a 18 767 湖北省武汉市 Wuhan Hubei 20 0 295 11 540 2 166 2 881 a 39 119 辽宁省北镇市 Beizhen Liaoning 20 0 249 11 876 3 216 2 651 a 47 695 合计 Total 60 0 249 11 876 2 480 2 639 47 695 注 表中数值为平均值 标准差 同列相同字母表示经 Fisher 最小显著性差异法检测在 P 0 05 水平上差异不显著 Note Data are mean SD Mean values followed by the same letter in the columns were not significantly different in Fisher s least significant difference test at P 0 05 表 3 不同地区葡萄灰霉病菌啶酰菌胺抗性菌株的分布和数量 Table 3 Distribution and number of Boscalid resistant B cinerea from different areas 地区 Region 样本数 株 Sample number 敏感菌株 株 Sensitive isolate 低抗菌株 株 Low resistant isolate 中抗菌株 株 Medium resistant isolate 高抗菌株 株 High resistant isolate 抗性频率 Resistance frequency 云南省宾川县 Binchuan Yunnan 20 17 3 0 0 15 湖北省武汉市 Wuhan Hubei 20 18 2 0 0 10 辽宁省北镇市 Beizhen Liaoning 20 18 2 0 0 10 合计 Total 60 53 7 0 0 11 7 2 3 葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的交互抗性分析 将上述灰霉病菌对四霉素的 lgEC 50 值与啶酰菌胺的 lgEC 50 值进行皮尔逊相关分析 图 3 结果显示 皮尔逊相关系数 r 为 0 040 P 0 05 表明四霉素与啶酰菌胺的相关性未达到显著水平 二者之间不存 在交互抗性关系 872 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 3 讨论 葡萄灰霉病是世界上葡萄重要病害之一 该病原菌在葡萄的生长期和贮藏期均能进行侵染 低温高湿 环境下容易大面积发生 造成的经济损失高达 50 2 在农业生产中灰霉病的防治主要以化学防 治为主 由于灰葡萄孢菌具有遗传变异大 繁殖速 率快和适合度高等特点 在连续多年单一使用某 一种杀菌剂后 极易使病原菌产生抗药性及交互 抗性 20 研究发现 我国很多地区的葡萄灰霉病菌 已对多菌灵 腐霉利 乙霉威和嘧霉胺等产生了抗 药性 甚至出现了 双抗 甚至 多抗 灰霉菌菌 株 3 5 如 2021 年贾爽爽等 5 发现黑龙江省和云南 省葡萄灰霉病菌对多菌灵的抗性频率接近 100 抑菌脲以及对两种杀菌剂的多药抗性频率平均也 达到 70 以上 因此 该病害高效 无公害药剂的 筛选工作也就显得尤其重要 r 0 040 P 0 763 1 5 1 0 0 5 0 0 5 1 0 0 2 0 4 0 6 0 8 1 0 1 2 四霉素的 lgEC 50 g mL 1 lgEC 50 of tetramycin 啶酰菌胺的 lg EC 50 g mL 1 lgE C 50 of bo scalid 图 3 葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的交互抗性 Fig 3 Cross resistance of B cinerea to tetramycin and boscalid 本研究表明 葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性基线为 1 115 0 579 g mL 并且云南省 湖北省和 辽宁省等 3 个地区灰霉菌株对啶酰菌胺的敏感性无显著差异 表明啶酰菌胺对葡萄灰霉病菌具有较高的抑 菌活性 可作为后续田间抗药性检测的依据 本研究建立的葡萄灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感基线低于魏佳 爽等 21 测定的番茄灰霉病菌的敏感基线 2 56 g mL 这可能与不同作物上的灰霉病菌存在变异有关 尽管本研究测定的大多数菌株对啶酰菌胺仍表现敏感 但田间抗药性菌株的出现表明采用该药剂防治葡萄 灰霉病具有一定的风险性 2019 年 宋昱菲 22 检测了山东省灰霉病菌对啶酰菌胺 吡唑萘菌胺 氟唑菌酰 胺 苯并烯氟菌唑 氟吡菌酰羟胺和氟吡菌酰胺 6 种琥珀酸脱氢酶抑制剂的抗性情况 发现除了啶酰菌胺 之外 灰霉病菌对其他 5 种琥珀酸脱氢酶抑制剂也存在不同程度的抗性 各药剂之间存在显著的交互抗性 因此 田间使用时应注意限制同一生长季的用药次数 并与不同作用机制的杀菌剂交替或混合使用 以减 小对田间种群的选择性压力 延缓病原菌对该类药剂的抗性发展 四霉素对灰霉病菌的毒力试验结果显示 四霉素抑制菌丝生长的 EC 50 值范围为 0 075 0 433 g mL 平均 EC 50 值为 0 245 0 065 g mL 变异系数为 5 773 表明四霉素对灰霉病菌的敏感性范围窄 23 这可 能与该类药剂在葡萄灰霉病防治中未正式使用有关 宋莹莹等 24 测定了黄瓜 草莓及葡萄等不同作物上灰 霉病菌对四霉素的敏感性 也得到了相似的结果 敏感基线 0 35 0 20 g mL 表明葡萄灰霉病菌对四 霉素表现出较高的敏感性 并且我们发现其与啶酰菌胺之间不存在交互抗性 因此 四霉素作为一种低毒 对环境安全的生物源农药 用于防治葡萄灰霉病具有很大的应用潜力 可作为候选药剂单独或与啶酰菌胺 等其它类型的药剂混配使用 以避免或延缓病菌抗药性的产生 提高防治效果 后续将进一步通过田间药 效试验验证四霉素的防治效果 为该药剂用于葡萄灰霉病田间防治提供科学依据 参 考 文 献 1 王忠跃 葡萄健康栽培与病虫害防控 M 北京 中国农业科学技术出版社 2017 187 190 2 陈宇飞 文景芝 李立军 葡萄灰霉病研究进展 J 东北农业大学学报 2006 5 693 699 3 严红 燕继晔 王忠跃 等 葡萄灰霉病菌对 3 种杀菌剂的多重抗药性检测 J 果树学报 2012 29 4 625 629 4 普继雄 周宗山 王娜 等 弥勒市葡萄灰霉病菌对 4 种杀菌剂的抗药性检测 J 果树学报 2021 38 7 1147 1152 5 贾爽爽 黄晓庆 孔繁芳 等 黑龙江和云南葡萄产区灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性检测 J 植物保护 2021 47 4 239 243 6 华乃震 SDHI 类杀菌剂啶酰菌胺 J 世界农药 2018 40 5 9 15 7 胡伟群 病原真菌对琥珀酸脱氢酶抑制剂抗性研究进展 J 世界农药 2020 42 12 1 5 8 Amiri A Heath S M Peres N A Resistance to fluopyram fluxapyroxad and penthiopyrad in Botrytis cinerea from strawberry J Plant Disease 2014 98 第 4 期 田秀等 我国葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性测定 873 532 539 9 余玲 刘慧平 韩巨才 等 山西灰霉菌对啶酰菌胺的敏感性测定 J 山西农业大学学报 2012 32 3 232 234 10 陈乐乐 郭贝贝 李北兴 等 四霉素对番茄叶霉病菌的毒力效应及田间防治效果 J 农药学学报 2017 19 3 324 330 11 钟丽娟 赵新海 张庆华 等 四霉素诱导水稻对稻瘟病的抗性研究 J 安徽农业科学 2010 38 12 6263 6264 6344 12 中华人民共和国农业部农药检定所 农药登记数据 农药名称 四霉素 EB OL 2021 7 26 13 黄学屏 宋昱菲 肖斌 等 山东省不同地区蔬菜菌核病菌对四霉素的敏感性 J 农药学学报 2018 20 5 601 606 14 陈乐乐 郭贝贝 李北兴 等 四霉素对番茄叶霉病菌的毒力效应及田间防治效果 J 农药学学报 2017 19 3 324 330 15 Ma D Zhu J He L et al Baseline sensitivity and control efficacy of tetramycin against Phytophthora capsici isolates in China J Plant Disease 2018 102 5 863 868 16 Song Y He L Chen L et al Baseline sensitivity and control efficacy of antibiosis fungicide tetramycin against Botrytis cinerea J European Journal of Plant Pathology 2016 146 2 337 347 17 陈林凤 新疆灰霉菌遗传多样性及三种生防菌对灰霉菌的拮抗作用初探 D 乌鲁木齐 新疆农业大学 2009 18 刘凤之 中国葡萄栽培现状与发展趋势 J 落叶果树 2017 49 1 1 4 19 任璐 余玲 韩巨才 等 抗啶酰菌胺蔬菜灰霉病菌突变体的诱导及其生物学性状 J 植物保护学报 2014 41 1 87 92 20 Veloukas T Kalogeropoulou P Markoglou A et al Fitness and competitive ability of Botrytis cinerea field isolates with dual resistance to SDHI and QoI fungicides associated with several sdh B and the cyt b G143A mutations J Phytopathology 2014 104 347 356 21 Ajouz S Walker A S Fabre F et al Variability of Botrytis cinerea sensitivity to pyrrolnitrin an antibiotic produced by biological control agents J BioControl 2011 56 353 363 22 宋昱菲 山东省灰霉病菌对六种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的敏感性检测及对啶酰菌胺抗性机制探究 D 泰安 山东农业大学 2019 23 魏佳爽 袁善奎 向冰峰 等 番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea 对 3 种杀菌剂的抗性监测及交互抗药性研究 J 现代农药 2021 20 1 46 49 24 宋莹莹 山东省灰霉病菌对常用杀菌剂的抗性监测及对吡唑萘菌胺和四霉素的敏感性 D 泰安 山东农业大学 2016 责任编辑 吕平香