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GB 中华人民共和国农业部 发布 --实施 施 --发布 植物新品种特异性、一致性和稳定性 测试指南 小豆 Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniity and stability -Adzuki bean Vigna angularis Willd Ohwi Ohashi (报批稿) NY/T 201 中华人民共和国农业行业标准 ICS 65.020.20 B 05 1 NY/T XXXX201X 目次 前言II 1 范围1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 符号1 5 繁殖材料的要求 2 6 测试方法 2 7 特异性、一致性和稳定性结果的判定 3 8 性状表 3 9 分组性状 4 10 技术问卷4 附录A(规范性附录) 小豆性状表5 附录B(规范性附录) 小豆性状表的解释8 附录C(规范性附录) 小豆技术问卷14 前言 本标准依据GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部科技教育司提出。 本标准由全国植物新品种测试标准化技术委员会SAC/TC277归口。 本标准起草单位中国农业科学院作物科学研究所、农业部科技发展中心。 本标准主要起草人程须珍、刘平、王丽侠、王素华、刘长友、徐宁。 I 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 小豆 1 范围 本标准规定了小豆(Vigna angularis Willd Ohwi Ohashi)新品种特异性、一致性、稳定性测试的技术要求和结果判定的一般原则。 本标准适用于小豆新品种特异性、一致性和稳定性测试和结果判定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 2905 谷物、豆类作物种子粗蛋白质测定法(半微量凯氏法) GB 5006 谷物籽粒粗淀粉测定法(改进的盐酸水解-旋光法) GB 5511 粮食、油料检验 粗蛋白质测定法 GB 5519 粮食、油脂检验 千粒重检测方法 GB 10461 谷物籽粒粗淀粉测定法 GB/T 3543 农作物种子检验规程 GB/T 5514 粮食、油料检验 淀粉测定法 GB/T 19557.1 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 总则 3 术语和定义 GB/T 19557.1 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 群体测量 Single measurement of a group of plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行测量,获得一个群体记录。 3.2个体测量 Measurement of a number of individual plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行逐个测量,获得一组个体记录。 3.3群体目测 Visual assessment by a single observation of a group of plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行目测,获得一个群体记录。 3.4个体目测 Visual assessment by observation of individual plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行逐个目测,获得一组个体记录。 4 符号 下列符号适用于本标准 MG群体测量 MS个体测量 VG群体目测 VS个体目测 QL质量性状 QN数量性状 PQ假质量性状 a 标注内容在附录B的B.2中进行了详细解释。 标注内容在附录B的B.3中进行了详细解释。 __本文件中下划线是特别提示测试性状的适用范围。 5 繁殖材料的要求 5.1 繁殖材料以种子形式提供。 5.2 提交的种子数量至少为1kg。 5.3提交的繁殖材料应外观健康,活力高,无病虫侵害。繁殖材料的具体质量要求如下 净度≥98.0,发芽率≥85,含水量≤12。 5.4 提交的繁殖材料一般不进行任何影响品种性状正常表达的处理如种子包衣处理。如果已处理,应提供处理的详细说明。 5.5 提交的繁殖材料应符合中国植物检疫的有关规定。 6测试方法 6.1测试周期 测试周期至少为两个独立的生长周期。 6.2测试地点 测试通常在一个地点进行。如某些性状在该地点不能充分表达,可在其他符合条件的地点进行观测。 6.3田间试验 6.3.1试验设计 申请品种和近似品种应相邻种植。 每个小区至少种植150株,行距50cm,株距1520cm。每个测试品种2次重复。 6.3.2田间管理 田间管理方案与测试点所在地区的大田管理措施相同,申请品种、近似品种及标准品种的田间管理须严格一致。 6.4性状观测 6.4.1观测时期 性状观测应按照表A.1和表A.2列出的生育阶段进行。生育阶段描述见表B.1。 6.4.2观测方法 性状观测应按照附录A和附录B规定的观测方法VG、VS、MG、MS进行。部分性状观测方法见附录B的B.2和B.3。 6.4.3观测数量 除非另有说明,个体观测性状VS、MS植株取样数量不少于20株,在观测植株的器官或部位时,每个植株取样数量应为1个。群体观测性状VG、MG应观测整个小区或规定大小的混合样本。 6.5附加测试 必要时,可选用附录A.2的性状或本指南未列出的性状进行附加测试。 7特异性、一致性和稳定性结果的判定 7.1总体原则 特异性、一致性和稳定性的判定按照GB/T 19557.1确定的原则进行。 7.2特异性的判定 申请品种应明显区别于所有已知品种。在测试中,当申请品种至少在一个性状上与近似品种具有明显且可重现的差异时,即可判定申请品种具备特异性。 7.3一致性的判定 对于测试品种,一致性判定时,采用1%的群体标准和至少95的接受概率。当样本大小为120株时,最多可以允许有3个异型株。 7.4稳定性的判定 如果一个品种具备一致性,则可认为该品种具备稳定性。一般不对稳定性进行测试。 必要时,可以种植该品种的下一代种子,与以前提供的繁殖材料相比,若性状表达无明显变化,则可判定该品种具备稳定性。 8性状表 根据测试需要,将性状分为基本性状、选测性状,基本性状是测试中必须使用的性状。小豆基本性状见附录A表A.1,小豆选择测试的性状见附录A表A.2。 8.1概述 性状表列出了性状名称、表达类型、表达状态及相应的代码和标准品种、观测时期和方法等内容。 8.2表达类型 根据性状表达方式,将性状分为质量性状、假质量性状和数量性状三种类型。 8.3表达状态和相应代码 8.3.1每个性状划分为一系列表达状态,以便于定义性状和规范描述;每个表达状态赋予一个相应的数字代码,以便于数据记录、处理和品种描述的建立与交流。 8.3.2对于质量性状和假质量性状,所有的表达状态都应当在测试指南中列出;对于数量性状,为了缩小性状表的长度,偶数代码的表达状态可以不列出,偶数代码的表达状态可描述为前一个表达状态到后一个表达状态的形式。 8.4标准品种 性状表中列出了部分性状有关表达状态可参考的标准品种,以助于确定相关性状的不同表达状态和校正环境因素引起的差异。 9分组性状 本文件中,品种分组性状如下 a 幼茎上胚轴花青甙显色(表A.1中性状1); b 植株生长习性(表A.1中性状9); c 始花期(表A.1中性状3); d 荚形状(表A.1中性状17); e 荚颜色(表A.1中性状18); f 籽粒颜色(表A.1中性状21)。 10技术问卷 申请人应按附录C格式填写小豆技术问卷。 3 附 录 A (规范性附录) 小豆性状表 A.1 小豆基本性状见表A.1 表A.1小豆基本性状表 序号 性状 观测时期及方法 表达状态 标准品种 代码 1 幼茎上胚轴花青甙显色 QL 09 VG 无 1 有 9 2 叶单叶形状 PQ () 09 VG 窄卵圆形 Ks199 1 宽卵圆形 行唐红小豆 B0107 2 3 始花期 QN () 60 VG 早 黄小豆 B0572 1 中 冀红4号 B3992 2 晚 米小豆 B1571 3 4 复叶顶生小叶大小 QN (a 65 VG 小 白红3号 B4804 3 中 冀红4号 B3992 5 大 中红11 B4705 7 5 复叶顶生小叶形状 PQ (a() 67 VG 戟形 裂叶小豆 Ks199 1 窄卵圆形 冀红4号 B3992 2 宽卵圆形 米小豆 B1571 3 6 复叶绿色程度 QN (a 67 VG 浅 中引961 B4806 1 中 冀红4号 B3992 2 深 麻小豆 B1480 3 7 花花蕾花青甙显色 QL 67 VG 无 冀红4号 B3992 1 有 早黑豆 B1546 9 8 花黄色程度 QN 67 VG 浅 冀红4号 B3992 1 中 保M908-15 B4708 2 深 早黑豆 B1546 3 9 植株生长习性 PQ () 87 VG 直立 冀红4号 B3992 1 半蔓生 隰县小豆 B0611 2 蔓生 行唐红小豆 B0107 3 10 植株高度 QN () 87 MS 极矮 中引961 B4806 1 矮 冀红4号 B3992 2 中 黄小豆 B0572 3 高 黑小豆 B2930 4 极高 行唐红小豆B0107 5 11 成熟期 QN () 87 VG 极早 中引961 B4806 1 早 冀红4号 B3992 2 中 行唐红小豆 B0107 3 晚 米小豆 B1571 4 极晚 麻小豆 B1480 5 12 植株主茎节数 QN () 87 MS 少 中引961 B4806 1 中 虞城红小豆 B2789 2 多 冀红4号 B3992 3 13 植株单株分枝 QN () 87 MS 少 中引961 B4806 1 中 黄小豆 B0572 2 多 行唐红小豆 B0107 3 14 植株结荚习性 QL 87 VG 无限 200013 B4806 1 有限 冀红4号 B3992 9 15 植株单株荚数 QN () 87 MS 极少 1 少 中引961 B4806 2 中 冀红4号 B3992 3 多 行唐红小豆 B0107 4 极多 5 16 荚裂荚性 QL () 87 VG 不裂 B3992冀红4号 1 开裂 9 17 荚形状 PQ () 87 VG 直筒形 虞城红小豆 B2789 1 镰刀形 冀红4号 B3992 2 弓形 黑小豆 B2930 3 18 荚颜色 PQ 87 VG 黄白 冀红4号 B3992 1 褐 行唐红小豆 B0107 2 黑 虞城红小豆 B2789 3 19 荚单荚粒数 QN () 87 MS 少 200013 B4806 1 中 虞城红小豆 B2789 2 多 B0572黄小豆) 3 20 荚长度 QN () 87 MS 短 B2789虞城红小豆 1 中 B3992冀红4号 2 长 B0107行唐红小豆) 3 21 籽粒颜色 PQ 99 VG 白 白小豆 B2864 1 绿 隰县小豆 B0611 2 黄 黄小豆(B0572 3 红 冀红4号 B3992 4 褐 鹅翔旦 B0257 5 黑 黑小豆 B2930 6 花斑 花小豆 B2132 7 花纹 麻小豆 B1480 8 22 籽粒红色程度仅适用于红色品种 QN 99 VG 浅 3 中 中引961 B4806 5 深 7 23 籽粒形状 PQ () 99 VG 短圆柱 冀红4号B3992 1 长圆柱 南郑县小豆B4290 2 球形 行唐红小豆B0107 3 楔形 中引961 B4806 4 24 籽粒百粒重* QN () 99 MS 极小 B1480麻小豆 1 小 B1571米小豆) 2 中 B0572黄小豆) 3 大 冀红4号 B3992 4 极大 南郑县小豆 B4290 5 25 籽粒种皮光泽度 QL 99 VG 无 行唐红小豆 B0107 1 有 冀红4号 B3992 9 A.2 小豆选测性状见表A.2 表A.2 小豆选测性状表 序号 性状 观测时期及方法 表达状态 标准品种 代码 26 植株花叶病毒病 QN () 87 VG 高感 1 感 3 中抗 5 抗 7 高抗 9 27 植株叶斑病 QN () 87 VG 高感 1 感 3 中抗 5 抗 7 高抗 9 28 植株蚜虫 QN () 87 VG 高感 1 感 3 中抗 5 抗 7 高抗 9 29 籽粒豆象抗性 QN () 99 MG 高感 1 感 3 中抗 5 抗 7 高抗 9 30 籽粒蛋白质含量 QN () 99 MG 低 1 中 2 高 3 31 籽粒淀粉含量 QN () 99 MG 低 1 中 2 高 3 32 籽粒出沙率 QN () 99 MG 低 1 中 2 高 3 附 录 B (规范性附录) 小豆性状表的解释 B.1 小豆生育阶段 见表B.1。 表B.1小豆生育阶段表 生育阶段代码 描述 00 干种子 09 对生单叶露出地面 60 植株出现第一朵花 65 约50植株开花 67 约70植株开花 87 约70的荚果显现成熟色 99 约70以上的叶片退绿或脱落 B.2 涉及多个性状的解释 (a 复叶主茎中部上1/3处成熟三出复叶的顶生小叶。 B.3 涉及单个性状的解释 性状2 叶单叶形状,见图B.1. 1 窄卵圆形 2 宽卵圆形 图B.1 叶单叶形状 性状3始花期 统计播种后至群体中可见到第一朵花开放的天数。按照始花天数分为3个等级。 1 早(始花天数<50d) 2 中( 50d≤始花天数<60d) 3 晚(始花天数≥60 d) 性状5 复叶顶生小叶形状,见图B.2. 1 戟形 2 窄卵圆形 3 宽卵圆形 图B.2 叶复叶顶生小叶形状 性状9 植株生长习性,图B.3 1 直立 2半蔓生 3 蔓生 图B.3 植株生长习性 性状10 植株高度,见图B.4 以选取的样株为观测对象,测量每株主茎从子叶节或地面到最后一片复叶叶柄着生处的高度。按照成熟植株的高矮程度分为5个等级。 1 极矮(株高<45cm) 2 矮(45cm≤株高<55 cm) 3 中(55cm≤株高<65 cm) 4 高(65cm≤株高<75 cm) 5 极高(株高≥75 cm) 图B.4 植株高度 性状11成熟期 统计播种后至约70的荚果成熟,豆粒显现成熟色,并变硬的天数。根据成熟天数分为5个等级。 1 极早(成熟期<80d) 2 早(80d≤成熟期<90d) 3 中(90d≤成熟期<100d) 4 晚(100d≤成熟期<110d) 5 极晚(成熟期≥110d) 性状12植株主茎节数 主茎子叶节到植株顶端最后一片展开复叶着生节的节数。按照主茎节数分为3个等级。 1 少(主茎节数<17个) 2 中(17个≤主茎节数<19个) 3 多(主茎节数≥19个) 性状13 植株单株分枝 主茎分枝上有两片真叶完全展开的一级分枝的数目。按照分支数分为3个等级。 1 少(单株分枝<3个) 2 中(3个≤单株分枝<4个) 3 多(单株分枝≥4个) 性状15 植株单株荚数 以选取的样株为观测对象,调查每个植株上所有的成熟荚数,按小豆单个植株上的成熟豆荚数,求其平均数。按照单个植株上的成熟豆荚的多少分为5个等级。 1 极少(单株荚数<15个) 2 少(15个≤单株荚数<25个) 3 中(25个≤单株荚数<35个) 4 多(35个≤单株荚数<45个) 5 极多(单株荚数≥45) 性状16 荚裂荚性 观察发育正常的成熟荚果自然状态下的开裂情况。按照开裂情况分为不裂、开裂。 性状17 荚形状,图B.5 镰刀形近荚喙的三分之一处弯曲; 弓形荚的二分之一处弯曲; 1 圆筒形 2 镰刀形 3 弓形 图B.5 荚形状 性状19 荚单荚粒数 以抽取的豆荚为观测对象,调查每个豆荚内所有发育正常的籽粒数,求其平均数。按照单荚粒数分为3个等级。 1 少(单荚粒数<6个) 2 中(6个≤单荚粒数<8个) 3 多(单荚粒数≥8个) 性状20 荚长度 从选取的样株中随机抽取20个正常成熟的豆荚,测每个豆荚的长度,求其平均数。按照加荚的长度分为3个等级。 1 短(长度<7cm) 2 中(7cm≤长度<9cm) 3 长(长度≥9cm) 性状23 籽粒形状,见图B.7 1 短圆柱 2 长圆柱 3 球形 4 楔形 图B.7 籽粒形状 性状 24 籽粒百粒重 以风干后的成熟籽粒为观测对象,参照GB 5519 粮食、油脂检验 千粒重检测方法和GB/T 3543农作物种子检验规程,从清选后的种子中随机取样,重复测定两次,每个重复100粒种子,用1/1 000的电子天平称取其重量,误差小于5%时求其平均数。单位为g,精确到0.01g。按照籽粒大小分为5个等级。 1 极小(百粒重<6g) 2 小(6g≤百粒重<10g) 3 中(10g≤百粒重<15g) 4 大(15g≤百粒重<20g) 5 极大(百粒重≥20g) 性状26 植株花叶病毒病抗性 鉴定圃设在温度和湿度可以控制的温室内,每份材料播种3盆,每盆留苗5株。待植株生长2片真叶完全展开时即可接种。温室温度应控制在25℃以下,接种后14d进行调查。根据病情指数将小豆对普通花叶病毒病抗性划分为5个等级 1 高抗(HR)(0≤病情指数<2) 3 抗(R)(2≤病情指数<10) 5 中抗(MR)(10≤病情指数<20) 7 感(S)(20≤病情指数<50) 9 高感(HS)(病情指数≥50) 在小豆花叶病常发区,可以通过田间观察植株自然发病状况,依据每份材料发病程度,初步评价在自然发病条件下的田间抗性水平。将病情级别中的0和1级视为高抗(HR),3级为抗(R),5级为中抗(MR),7级为感(S),9级为高感(HS)。 性状27 植株叶斑病抗性 鉴定圃设在田间进行,每份材料单行播种,行长1.5~2m,每行留苗20株。待植株长至开花期时即可接种。接种后植株保湿24h,鉴定环境温度应控制在20℃~30℃,2030d调查发病情况。根据病情指数将小豆对尾孢菌叶斑病抗性分为5级。 1 高抗 HR (0≤病情指数<2) 3 抗病 R (2≤病情指数<15) 5 中抗 MR(15≤情指数<60) 7 感病 S (60≤病情指数<80) 9 高感 HS(病情指数≥80) 在尾孢菌叶斑病常发区,可通过田间观察植株自然发病状况,直接依据每份材料发病程度,初步评价在自然发病条件下的田间抗性水平。将病情级别中的0和1级视为高抗(HR),3级为抗(R),5级为中抗(MR),7级为感(S),9级为高感(HS)。 性状28 植株蚜虫抗性 采用自然感虫法在田间进行,每份材料播种1行,行长1.5~2m,每行留苗20~25株。田间不喷施杀蚜药剂,在蚜虫盛发期进行调查。 根据相对蚜害指数将小豆对蚜虫的抗性划分为5个等级 1 高抗(HR) (0≤相对蚜害指数<0. 20 3 抗(R) (0.20≤相对蚜害指数<0.35 5 中抗(MR) (0.35≤相对蚜害指数<0.50 7 感(S) (0.50≤相对蚜害指数<0.75 9 高感(HS) (相对蚜害指数≥0.75) 性状29 籽粒豆象抗性 采用室内人工接虫方法进行鉴定,各鉴定材料取籽粒50粒,放入Φ6cm和H1cm的小盒中,不加盖。小盒放入大塑料盒内(66cm44cm18cm),盒上覆盖二层黑布,置于养虫架上。养虫室温度控制在27℃2℃,保持黑暗和相对高湿。每个大塑料盒内放入400~500对羽化1~3d的豆象成虫,平均每份鉴定材料8对,使其在各材料上随机产卵。接虫40~45d后,调查每份材料的虫害情况,根据籽粒受害率将小豆对豆象抗性划分为5个等级 1 高抗(HR)(籽粒受害率0~10) 3 抗病(R) (籽粒受害率10~35) 5 中抗(MR)(籽粒受害率35~65) 7 感病(S) (籽粒受害率65~90) 9 高感(HS)(籽粒受害率90~100) 性状30 籽粒蛋白质含量 以成熟、清选后的干种子为观测对象,按照GB 2905 谷物、豆类作物种子粗蛋白质测定法(半微量凯氏法)和GB 5511 粮食、油料检验 粗蛋白质测定法,进行样品制备和粗蛋白含量检测。以表示,精确到0.01。按照蛋白质含量多少,分为低(含量<20)、中(20.1≤含量<25)、高(含量≥25)。 性状31 籽粒淀粉含量 以成熟、清选后的干种子为观测对象,按照GB 5006 谷物籽粒粗淀粉测定法(改进的盐酸水解-旋光法)、GB/T 5514 粮食、油料检验 淀粉测定法、GB 10461 谷物籽粒粗淀粉测定法,进行样品制备和粗淀粉含量检测。以表示,精确到0.01。按照淀粉含量多少,分为低(含量<50)、中(50.1≤含量<55)、高(含量≥25)。 性状32 籽粒出沙率 以成熟、清选后的干种子为观测对象,参照下列方法进行小豆豆沙含量和淀粉颗粒大小组成检测。以表示,精确到0.01。 将原料(小豆)50g测定含水量后用300C温水浸泡24h,然后放入高压锅内蒸煮1h,将煮熟的豆粒倒入60目网筛中边研磨边洗沙,将豆皮和豆沙分离,将除去豆皮的溶液放入离心机内离心,除去上清液,将下层豆沙在800C烘箱中烘干至恒重。出沙率计算公式CW0/(M- MV)100,其中,W0为豆沙的重量g,M为供试小豆籽粒的重量g,V为供试小豆含水量()。按照出沙率的多少分为低(含量<720)、中(72.1≤含量<76)、高(含量≥76)。 15 附 录 C (规范性附录) 小豆技术问卷 申请号 (申请人或代理机构签章) 申请日 C.1品种暂定名称 C.2植物学分类 中文名 小豆 拉丁名 Vigna angularis (Willd)Ohwi & Ohashi C.3品种类型 在相符的类型 [ ] 中打√。 北方春小豆[ ] 北方夏小豆[ ] 南方小豆[ ] C.4申请品种的具有代表性彩色照片 C.5其它有助于辨别申请品种的信息 C.6品种种植或测试是否需要特殊条件 在相符的 [ ] 中打√。 是[ ] 否[ ] 如果回答是,请提供详细资料 C.7品种繁殖材料保存是否需要特殊条件 在相符的 [ ] 中打√。 是[ ] 否[ ] 如果回答是,请提供详细资料 C.8申请品种需要指出的性状 在表C.1中相符的代码后 [ ]中打√,若有测量值,请填写在表C.1中。 表C.1申请品种需要指出的性状 序号 性状 表达状态 代码 测量值 1 幼茎上胚轴花青甙显色 (性状1) 无 1 有 9 2 始花期 (性状3) 早 1 中 2 晚 3 3 植株生长习性 (性状9) 直立 1 半蔓 3 蔓生 5 4 植株高度 (性状10) 极矮 1 矮 2 中 3 高 4 极高 5 5 成熟期 (性状11) 极早 1 早 2 中 3 晚 4 极晚 5 6 荚形状 (性状17) 直筒形 1 镰刀形 2 弓形 3 7 荚颜色 (性状18) 黄白 1 褐 2 黑 3 8 籽粒颜色 (性状21) 白 1 绿 2 黄 3 红 4 褐 5 黑 6 花斑 7 花纹 8 9 籽粒百粒重 (性状24) 极小 1 小 2 中 3 大 4 极大 5 参考文献 [1] GB/T 19557.XXXXX 植物新品种特异性、一致性和稳定性描述总则。 [2] UPOV TG/1“GENERAL INTRODUCTION TO THE EXAMINATION OF DISTINCTNESS,UNIITY AND STABILITY AND THE DEVELOPMENT OF HARMONIZED DESCRIPTIONS OF NEW VARIETIES OF PLANTS”. [3] UPOV TGP/7 “DEVELOPMENT OF TEST GUIDELINES”. [4] UPOV TGP/8“TRIAL DESIGN AND TECHNIQUES USED IN THE EXAMINATION OF DISTINCTNESS, UNIITY AND STABILITY”. [5] UPOV TGP/9 “EXAMINING DISTINCTNESS”. [6] UPOV TGP/10 “EXAMINING UNIITY”. [7] UPOV TGP/11 “EXAMINING STABILITY”.
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