芽孢杆菌NH_8对番茄根结线虫病的生防效果.pdf

李德全 邓自发 曹云英 等 芽孢杆菌 NH 8 对番茄根结线虫病的生防效果 J 江苏农业科学 2020 48 8 108 110 doi 10 15889 j issn 1002 1302 2020 08 019 芽孢杆菌 NH 8 对番茄根结线虫病的生防效果 李德全 邓自发 曹云英 孙利军 南通大学生命科学学院 农业农村部南方平原玉米科学观测实验站 江苏南通 226001 摘要 芽孢杆菌 NH 8 对多种植物病害均有较好的防治效果 为进一步验证其田间防治效果 进行生防菌剂防 治番茄根结线虫病的田间试验 结果表明 设施大棚中使用生防菌剂 NH 8 能有效防治番茄根结线虫病 校正防效 达到 81 18 同时对番茄还有一定的促生作用 菌剂处理 20 d 后 番茄苗株高 鲜质量和干质量分别比清水对照增 加 29 51 49 94 55 14 关键词 芽孢杆菌 番茄 根结线虫 防治效果 生防菌剂 中图分类号 S436 412 1 文献标志码 A 文章编号 1002 1302 2020 08 0108 03 收稿日期 2019 07 20 基金项目 国家自然科学基金 编号 81272378 南通市应用基础研 究 编号 MS12015089 南通大学重点项目 编号 03080227 作者简介 李德全 1975 男 江苏徐州人 博士 副教授 主要从事 生物防治和抗性生理研究 E mail lidequan ntu edu cn 根结线虫作为一类重要的植物病原物 分布范 围十分广泛 包括热带和亚热带地区 危害比较严 重的南方根结线虫 目前报道的接近 80 种 1 根结 线虫在我国大多数省份均有发现 可侵染多种农作 物 致使寄主常年减产 15 25 有时高达 75 以上 严重影响了粮食 蔬菜 果树 花卉等作物的 生产和出口创汇 蔬菜中尤以种植面积较大的番 茄 黄瓜等受害最重 2 对于根结线虫病的防治 传统以化学药剂为主 但化学杀线虫剂对环境污 染严重 使用过程中对人 畜也不安全 因此 生物 防治方法日益受到重视 其中应用微生物农药进 行根结线虫防治的研究较多 微生物农药是指由 微生物及其代谢产物加工而成的具有杀虫 杀菌 除草或调节植物生长的具有农药活性的物质 包括 农用抗生素和活体微生物农药 是生物防治的物质 基础和重要手段 3 7 目前 生产中已有一些芽孢 杆菌用于根结线虫防治 效果良好 阿维菌素是由 灰色链霉菌发酵产生的一种新型抗生素 对根结线 虫病具有良好的防效 目前 防治线虫的生防资源 主要有真菌 细菌等 防治线虫的细菌主要有芽孢 杆菌和假单胞菌 8 10 江苏省南通市是保护地蔬菜种植的重要基地 但近年来 根结线虫危害日益严重 给设施蔬菜生 产造成很大损失 严重影响本地农业的可持续发 展 为解决生产中根结线虫病的防治问题 近年来 有一些关于中低毒药剂和生防菌防治根结线虫病 方面的试验报道 11 为保护本地蔬菜免受根结线 虫的危害 减轻根结线虫对蔬菜产量的损失 南通 大学生命科学学院细菌实验室开展了根结线虫生 防菌株的筛选应用 筛选到的芽孢杆菌 NH 8 对 多种植物病害有较好的防治效果 为进一步验证 其田间防治效果 进行生防菌剂防治番茄根结线虫 病田间效果试验 1 材料与方法 1 1 供试材料 1 1 1 供试菌株 NH 8 菌株由笔者所在实验室 从南通市近海海藻中分离获得 将 NH 8 菌株在 28 130 r min 条件下振荡培养 48 h 的菌液 用无菌 水配成 1 0 10 10 CFU mL 的菌悬液 以备灌根使用 1 1 2 供试作物 供试番茄品种为苏粉 8 号 1 2 试验地点 田间试验选取在江苏省海门市正余镇昌盛村 以及如皋市石庄镇杨庄村设施番茄田块进行 室内 试验在南通大学生物技术重点实验室进行 试验 土壤类型为沙土两合土 肥力中等偏上 有机质含 量为 14 g kg 在定植时采用处理药剂进行灌根 1 3 试验方法 1 3 1 生防菌剂处理番茄 棚内面积为 400 m 2 50 m 8 m 设 3 个处理 每个处理 3 次重复 共 设置 9 个小区 采用随机区组排列 每个小区 48 m 2 左右 各小区间设置 2 行隔离区 以防止药液 互相干扰 于移栽前整地时施用充分腐熟的有机 801 江苏农业科学 2020 年第 48 卷第 8 期 肥 番茄移栽时采用 NH 8 发酵液灌根处理 每株 灌根 250 mL 并在移栽 10 20 d 后分别用药剂处理 1 次 以清水处理为对照 1 3 2 生防菌对番茄生长作用的影响 番茄移栽 后 20 d 随机抽取移栽好的番茄苗 采用 5 点取样 法 每点取番茄苗 3 株 调查地上部分植株的鲜质量 和地下部根质量 将番茄植株用自来水洗净晾干 用直尺测量株高 游标卡尺测量主茎粗度 电子秤 称量植株鲜质量和干质量 称量干质量时 先将番 茄植株在烘箱中 45 烘干 每个处理重复 3 次 1 4 病害调查与统计分析 1 4 1 病害调查 于移栽后 60 d 调查根结线虫的 危害程度 以及各处理的病情指数和病株防效 按 照 Luc 等提出的病级标准记录病级数 12 计算病害 严重度和防效 病害严重度和防效的计算公式为 病害严重度 病植株数 病级数 总植 株数 最高病级数 100 防效 对照病害严重度 处理病害严重度 对照病害严重度 100 校正防效用 Henderson Tdlton 公式计算 校 正防治效果 1 处理区药后病情指数 对照区 药前病情指数 处理区药前病情指数 对照区药 后病情指数 100 1 4 2 数据分析 利用 DPS 软件对数据进行统计 分析 采用 Duncan s 新复极差法对各个处理进行显 著性验证 2 结果与分析 2 1 生防菌剂 NH 8 对番茄的促生作用效果 NH 8 菌株对番茄生长影响的测定结果 表 1 显示 菌株发酵液处理对番茄生长具有显著的促进 作用 其中 菌株发酵液处理 20 d 后 苗株高 鲜质 量和干质量分别比清水对照增加 28 95 49 94 55 14 表 1 NH 8 菌株对番茄生长 20 d 时的影响 处理 株高 cm 主茎粗 cm 鲜质量 g 株 干质量 g 株 NH 8 菌株发酵液 31 67a 1 27a 12 67a 3 32a 清水 24 56b 0 75b 8 45b 2 14b 注 Duncan s 新复极差法多重比较 不同小写字母表示 5 的显 著水平 相同字母表示差异不显著 2 2 生防菌剂 NH 8 对番茄根结线虫病的防治 效果 试验地区连续 6 年种植番茄的大棚里 根结线 虫及腐霉 疫霉等多种病原物引起的根部病害非常 严重 在此进行的田间生物防治 试验结果表明 生防菌剂 NH 8 对番茄根结线虫病有着良好的防 治效果 根系增多壮实且相对光滑 根结明显减少 图 1 方差分析结果表明 生防菌剂 NH 8 的校 正防效达到 81 18 有显著提高 表 2 901 江苏农业科学 2020 年第 48 卷第 8 期 表 2 生防菌剂 NH 8 对番茄根结线虫病的防治效果 处理 施药前 第 2 次药后 60 d 病情指数 病穴率 病情指数 病穴防效 校正防效 生防菌剂 NH 8 6 33 16 67 4 67 61 97 81 18 aC 清水对照 6 20 17 00 注 aC 表示 5 的显著水平 3 讨论 根结线虫病是影响番茄生产的重要病害之一 目前防治主要利用杀线虫剂 但应用化学杀线虫剂 会严重影响人畜健康 对环境不友好 近年来 随 着人们对健康的重视和环保意识的增强 根结线虫 病的生物防治也越发受到重视 开发利用生防因 子来防治根结线虫病害 一直是人们关注的热点问 题 13 14 Sharond 等研究发现 哈茨木霉对爪哇根 结线虫病具有很好的防治效果 并对植株的生长有 显著促进作用 15 oberts 等研究发现 绿木霉菌株 GL3 对南方根结线虫卵的孵化产生很好的抑制作用 同时对立枯丝核菌和疫霉均有较好的防治效果 16 Becker 等研究发现 假单胞菌和芽孢杆菌的一些菌株 能杀灭根结线虫的活性 具有较好的防治效果 17 枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis 在自然界中广 泛存在 同时还是植物体内常见的内生细菌 对人 畜无毒害 对环境无污染 具有显著的抗菌活性和 极强的抗逆能力 同时 枯草芽孢杆菌生长快 容 易培养 本试验利用的枯草芽孢杆菌 NH 8 菌株 对多种植物病原生物具有具有较强的拮抗性能 在 温室试验中 对南方根结线虫的二龄幼虫也有很好 的防治效果 表现出较强的生防性能 18 本试验结 果进一步表明 生防菌剂 NH 8 对番茄根结线虫有 着良好的防治效果 使番茄根系粗壮且相对光滑 根结明显减少 校正防效达到 81 18 同时试验 结果还表明 该生防菌剂对供试植株具有很好的促 生作用 由于试验所选用田块长期连作发病较重 在移栽初期用药进行灌根处理 可有效抑制土壤中 根结线虫低龄幼虫进入番茄根内 防效较高 但随 着生长期的延长 药剂药效逐渐降低 土壤中根结 线虫密度增大 番茄根结线虫病病情加重 如果在 番茄不同生长期进行施药处理 防治效果或许更 好 其结果有待进一步试验验证 同时试验没有在 不同番茄品种间进行防病促生作用的对比 有待进 一步研究 参考文献 1 丁国春 付 鹏 李红梅 等 枯草芽孢杆菌 A 11 菌株对南方根 结线虫的生物 J 南京农业大学学报 2005 28 2 46 49 2 魏利辉 周冬梅 王云鹏 等 枯草芽孢杆菌 168 的遗传修饰菌株 对番茄根结线虫病的生防作用 J 农业生物技术学报 2011 19 4 740 745 3 赵鸿孙 彭德良 朱建兰 根结线虫的研究现状 J 植物保护 2003 29 6 5 9 4 李红梅 沈培垠 徐建华 江苏省进出口园林植物寄生线虫的调 查研究 J 南京农业大学学报 2000 23 1 34 38 5 Kiewnick S Sikora A Biological control of the root knot nematode Meloidogyne incognita by Paecilomyces lilacinus strain 251 J Biological Control 2005 38 2 179 187 6 Oka Y Koltai H Bar E M et al New strategies for the control of plant parasitic nematodes J Pest Management Science 2000 56 11 983 988 7 朱玉坤 尹衍才 微生物农药研究进展 J 生物灾害科学 2012 35 4 431 434 8 Mohammed S H Saedy M A Enan M et al Biocontrol efficiency of Bacillus thuringiensis toxins against root knot nematode Meloidogyne incognita J Journal of Cell and Molecular Biology 2008 7 1 57 66 9 Xiao T J Tan S Y Shen Q et al Bacillus cereus X5 suppresses root knot nematode of tomato by colonizing in roots and soil J African Journal of Microbiology esearch 2012 6 10 2321 2327 10 eddy P P ecent advances in crop protection in avermectins M London Springer 2013 11 丁晓帆 梁 蓉 王新军 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对南方根结 线虫的毒力 防效 J 南京农业大学学报 2009 32 4 85 88 12 Luc M Sikora A Bridge J Plant parasitic nematodes in subtropical and teopical agriculture M CAB Internation 1990 13 彭 震 蒋春号 魏利辉 等 生物农药 使命 对黄瓜防病促生 的试验分析 J 上海农业学报 2014 30 4 60 74 14 万景旺 邵 颖 朱 华 等 生防菌 Jdm2 与生物源农药混用防 治黄瓜根结线虫病的效果 J 江苏农业科学 2014 42 4 108 110 15 Sharond E Bar E M Chet I et al Biological control of the root knot nematode Meloidogyne javanic by Trichoderma harzianum J The American Phytopathological Society 2001 91 7 687 693 16 oberts D P Lohrke S M Meyer S L F et al Biocontrol agents applied individually and in combination for suppression of soilborne diseases of cucumber J Crop Protection 2005 24 2 141 155 17 Becker J O Zavaetam E Effects of rhizobacteria on root nem a todes and form ation J Phytopathology 1988 78 11 1466 1469 18 李德全 周鸣鸣 谈 蓉 等 筛选和利用海洋细菌防治玉米纹 枯病试验 J 江苏农业科学 2014 42 8 118 121 011 江苏农业科学 2020 年第 48 卷第 8 期