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34(4)514-519 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2018 年 8 月 收稿日期: 2017-08-16 基金项目: 2017 年草莓主要害虫非化学防治关键技术集成( 20170111) ;重要入侵生物快速识别关键新技术与生物防治新产品( 2016YFC1201201) 作者简介:乔岩,博士,高级农艺师, E-mail: qy0914126.com; *通信作者,副研究员, E-mail: lvjialecaas.cn。 DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2018.04.003 联合应用智利小植绥螨与丁氟螨酯防治草莓二斑叶螨 乔 岩1,张正伟2,张 涛1,庞 博3,郑书恒1,祝保英2,王步云1,王恩东4,吕佳乐4* ( 1. 北京市植物保护站, 北京 100029; 2. 北京市昌平区小汤山现代农业科技示范园管理中心, 北京 102211; 3. 北京市农业环境监测站, 北京 100029; 4. 中国农业科学院植物保护研究所,北京 100193) 摘要: 本文研究了新型杀螨剂丁氟螨酯对叶螨天敌智利小植绥螨的毒性、对智利小植绥螨繁殖的影响以及两者联合应用对草莓二斑叶螨的防治效果。结果表明,丁氟螨酯对智利小植绥螨的毒性很低,即使在 400 mg/L的高浓度下,智利小植绥螨的死亡率仍然低于 35%,对雌、雄成螨的 LC50分别为 669.4 mg/L 和 456.4 mg/L。施用丁氟螨酯后,丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨存活率影响无显著差异。田间试验表明单独使用智利小植绥螨和联合使用智利小植绥螨与丁氟螨酯,两周内对草莓二斑叶螨的防治效果都在 90%以上,明显好于单独使用丁氟螨酯。相比于单独使用智利小植绥螨的生物防治区,联合防治区的防治效果更好, 28 d 时仍高于 95%。因此,智利小植绥螨与丁氟螨酯联合应用防治草莓叶螨效果更佳。 关 键 词: 智利小植绥螨;丁氟螨酯;二斑叶螨;草莓 中图分类号: S476.2 文献标识码: A 文章编号: 1005-9261(2018)04-0514-06 Integrating Phytoseiulus persimilis and Cyflumetofenin for Control of Tetrangchus urticae on Strawberry QIAO Yan1, ZHANG Zhenwei2, ZHANG Tao1, PANG Bo3, ZHENG Shuheng1, ZHU Baoying2, WANG Buyun1, WANG Endong4, L Jiale* (1. Beijing Plant Protection Station, Beijing 100029, China; 2. Beijing Changping District Xiaotangshan Modern Agricultural Science and Technology Demonstration Park Management Center, Beijing 102211, China; 3. Beijing Agricultural Environment Monitoring Station, Beijing 100029, China; 4. Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China)Abstract: In the present study, we investigated the toxicity of cyflumetofen, a new type of miticide, on Phytoseiulus persimilis, an important natural enemy of spider mites, the impact of cyflumetofen on reproduction of P. persimilis, and the potential of integrating the miticide and the predator in strawberry spider mite control. Our results showed that cyflumetofen is low toxic to P. persimilis, with 35% mortality observed at the highest tested concentration (400 mg/L) and LC50to female and male adults of 669.4mg/L and 456.4 g/L, respectively. No significant impact of cyflumetofen on 7-day fecundity of P. persimilis was observed. In the field experiment, control efficiency of spider mites maintained at 90% for two weeks in the treatments with P. persimilis release alone or integrated application of the predators and the miticide. Integrated application showed higher potential than use the miticide alone, with 95% control efficiency at 28 days after application. Integrated application of the predator and the miticide can be recommended for spider mite management in greenhouse strawberries. Key words: Phytoseiulus persimilis; cyflumetofenin; Tetranychus urticae; strawberry 近年来,在北京地区叶螨已经上升为草莓的主要害虫,尤其在春季 3 月后草莓生产末期,发生最为严重。在个别温室内叶螨的暴发期提前至 1 月份甚至更早。由于叶螨难以得到有效防治,导致许多草莓种植 第 4 期 乔岩等:联合应用智利小植绥螨与丁氟螨酯防治草莓二斑叶螨 515 户提前结束草莓季。 目前普遍应用化学农药防治草莓叶螨,但一方面由于叶螨很容易产生抗药性,尤其已经对几种防治叶螨的常用药产生了很强的抗性1,2,导致药效大幅下降。另一方面草莓作为一种直接进口生食的连续采收果品,在采果期使用化学农药会严重威胁产品的安全性。 近年来, 应用捕食螨防治草莓叶螨的理念因其安全、 高效而热度逐渐上升3。 智利小植绥螨 Phytoseiulus persimilis Athias-Henriot 是对叶螨捕食量较大的专食性天敌,实践证明用智利小植绥螨防治草莓上的二斑叶螨 Tetranychus urticae Koch 取得了较好的防治效果,其减退率及防效都在 80%以上4,5。 但许多农户在开始尝试生物防治的过程中,常常将捕食螨与杀螨剂联合应用,甚至在使用化学农药后还没有过药效期时,就开始释放天敌。此时如果所使用的农药对捕食螨有较高的毒性,就会导致天敌的无效投放,从而无法取得较好的防效。 丁氟螨酯( cyflumetofen)是一种新型苯酰乙腈类杀虫杀螨剂,对叶螨的卵和成螨均有效,对若螨的活性更高6,7。该药剂的作用机制区别于以往众多的杀螨剂品种,其作用机制新颖,防治抗性害螨效果显著,且未发现与其他药剂产生交互抗性。同时对各种植物均无显著药害,对哺乳动物、水生生物、有益生物及天敌等非靶标生物均十分安全8。我们通过室内试验明确了丁氟螨酯对智利小植绥螨存活及繁殖的影响,并通过田间试验评价了智利小植绥螨与丁氟螨酯联合应用是否对草莓叶螨的防治具有增效作用。以期通过本研究对草莓叶螨实现更有效地防控。 1 材料与方法 1.1 供试虫源 二斑叶螨由中国农业科学院植物保护研究所提供。智利小植绥螨采购于首伯农(北京)生物技术有限公司。 20%丁氟螨酯悬浮剂(商品名:金螨枝)由苏州富美实植物保护剂有限公司生产。 1.2 丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨的毒力测定 采用玻片浸渍法9,10,在载玻片上贴双面胶,然后将二斑叶螨成螨和智利小植绥螨雌、雄成螨粘在双面胶上,分别暴露于不同稀释倍数的丁氟螨酯 500、 1000、 1500、 2000 和 2500 倍液(折算为有效成分浓度分别为 400、 200、 133.3、 100 和 80 mg/L)和清水对照中 5 s。 24 h 后分别计算不同稀释倍数下智利小植绥螨和叶螨的死亡率,以及对智利小植绥螨的毒力回归方程和 LC50。每处理重复 10 次,每次 10 头。 1.3 丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨存活及产卵的影响 试验设 3 个处理:叶片与叶螨均喷施丁氟螨酯;叶片喷施丁氟螨酯而叶螨不喷施丁氟螨酯;叶片与叶螨均不喷施丁氟螨酯(对照)。每处理重复 20 次。 采用喷雾塔喷雾,推荐使用的中等浓度 1500 倍液,有效成分浓度 133.3 mg/L。在小室(试验小室由 3层有机玻璃板构成,中层为厚 3 mm, 30 mm 20 mm 的长方形有机玻璃板,并在其正中央打直径 10 mm的圆孔;上层和下层为厚 1 mm, 20 mm 20 mm 的正方形玻璃板。将边长 2 cm 的正方形芸豆叶片置于中层孔中央;最后盖上顶层盖子防止捕食螨逃逸。 3 层玻璃板一起用燕尾夹夹紧)中进行试验,每个小室为1 个重复,重复 20 次。接入足量叶螨,并接入 1 头初羽化交配约 24 h 的雌成螨。每 24 h 观察雌成螨的存活情况,然后将其移入新的小室,并记录其产卵量,连续观察 7 d。 以上两部分试验均在人工气候箱内( 25 1), RH( 80 5) %,光周期 16L:8D 的条件下进行。 1.4 丁氟螨酯和智利小植绥螨及两者联合应用对草莓二斑叶螨的田间防治效果 试验在北京市顺义区北京市植物保护站科技展示基地 7 号大棚内开展。大棚内共种植草莓 58 行,行距 0.8 m,每行长 8 mm。草莓品种为红颜,定植日期为 2016 年 8 月 26 日。 2017 年 3 月下,该棚内草莓自然发生叶螨危害。 2017 年 4 月 6 日开展本试验。由西向东共划分 4 个大区,每个大区内划分 3 个小区视为 3 个重复。除东西两端两小区每个小区 4 行外( 120 株),其余小区每小区为 5 行( 150 株)草莓。每小区选择中间行(东西两端小区分别为东西起第 2 行),在南北端约 0.5 m 处以及行中间位置各设一个采样点。即每小区3 个采样点,总计 36 个采样点。 516 中 国 生 物 防 治 学 报 第 34 卷 试验共设置化学防治、生物防治、化学防治生物防治和对照共 4 个处理。化学防治: 20%丁氟螨酯 悬浮剂 1500 倍液喷雾(喷施设备为濛花牌 MH16 型全密封塑料喷雾器,压力 0.2 0.3 Mpa,实际用量约0.3 L/行);生物防治:人工洒放智利小植绥螨约 1500 头 /行;化学防治生物防治:丁氟螨酯 1500 倍液人工洒放智利小植绥螨约 1500 头 /行,在化学防治后 2 h 释放捕食螨;空白对照:不防治。 防治后每隔 7 d 采样一次, 共采样 4 次。 每个采样点随机选取叶片面积中等的草莓叶一枝 ( 3 片小叶) ,单独装入自封袋中,在体视显微镜下记录叶片上叶螨卵数、叶螨混合螨态活体数、叶螨死亡个体数、智利小植绥螨卵数、智利小植绥螨幼若螨数、智利小植绥螨成螨数以及田间可能存在的其他捕食螨数。以 3 个采样点平均叶螨数( /叶)作为该小区叶螨密度。 1.5 数据统计与分析 所有数据采用 SPSS 16.0 统计软件处理,用 Sigmaplot 作图。连列表 Pearson 卡方分析丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨的致死作用和对智利小植绥螨成螨存活及产卵的影响试验中每天的存活个体数与死亡个体数;采用线性方程拟合智利小植绥螨存活螨数与丁氟螨酯浓度的关系,并用外推法计算 LC50;利用双因子方差分析对日均产卵量和处理、天数等因子进行分析;采用多因子方差分析( ANOVA)比较丁氟螨酯、智利小植绥螨及两者联合应用对草莓叶螨的田间防治时各处理不同时间叶螨密度差异。防治效果( %)(处理区虫口减退率对照区虫口减退率)/( 100对照区虫口减退率) 100。 2 结果与分析 2.1 丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨的毒力测定 丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨的 LC50分别达到了 669.4 mg/L 和 456.4 mg/L,丁氟螨酯对智利小植绥螨的致死作用较弱(表 1)。 表 1 丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨的毒力测定 Table 1 The toxicity of cyflumetofenin to P. persimilis 智利小植绥螨 P. persimilis 毒力回归方程 Toxicity regression equation LC50(mg/L) 相关系数 Correlation index 雌螨 Female y 0.0045x 8.0124 669.4 0.355 雄螨 Male y 0.0082x 8.7425 456.4 0.667 2.2 丁氟螨酯对智利小植绥螨成螨存活及产卵的影响 对照组的智利小植绥螨存活率反而略低于两个处理组。经 Pearson 卡方检验显示 3 个处理之间智利小植绥螨雌成螨的每日存活率与 7 日的总存活率均不存在显著差异(表 2)。 表 2 不同处理下智利小植绥螨雌成螨的每日存活率 Table 2 Female daily survival rate of P. persimilis under different treatments 智利小植绥螨雌成螨的日存活率 Female daily survival rate of P. persimilis (%) 处理 Treatment 1 d 2 d 3 d 4 d 5 d 6 d 7 d A 95.00 0.0 5 a 80.00 0.09 a 80.00 0.09 ab 80.00 0.09 ab 75.00 0.09 a 55.00 0.11 a 55.00 0.11 a B 100.00 0.00 a 100.00 0.00 a 95.00 0.05 a 85.00 0.18 a 80.00 0.09 a 45.00 0.11 a 45.00 0.11 a 对照 CK 100.00 0.00 a 76.47 0.10 a 64.71 0.12 b 64.71 0.12 b 64.71 0.12 a 35.29 0.12 a 35.29 0.12 a 注 Note: A施药叶片施药叶螨 Pesticide application on leaf pesticide application on spider mite; B施药叶片未施药叶螨 Pesticide application on leaf spider mite。 在第 2、 3 d 的产卵量最高,随后产卵量逐渐下降(图 1)。通过方差分析显示不同丁氟螨酯处理及处理与天数的交互作用都没有显著影响,各不同天数之间产卵量存在差异(表 3)。 2.3 丁氟螨酯、智利小植绥螨及两者联合应用对草莓叶螨的田间防治效果 无论是叶螨卵还是活动螨态都在化防处理中的数量增长最快,甚至高于对照。生防和化防生防的处理中叶螨的数量都一直保持在较低的水平(图 2)。 第 4 期 乔岩等:联合应用智利小植绥螨与丁氟螨酯防治草莓二斑叶螨 517 智利小植绥螨日均产卵量(粒)The fecundity of phytoseiulus persimilis注:图中不同字母表示在 P 0.05 水平上差异显著。 Note: Different lowercase letters indicated significant difference at 0.05 level. 图 1 丁氟螨酯处理后不同天数智利小植绥螨的产卵量 Fig. 1 The fecundity of P. persimilis after treatment of cyflumetofenin 表 3 丁氟螨酯处理后天数对智利小植绥螨产卵量的影响 Table 3 Effect of cyflumetofenin on the fecundity of P. persimilis 因子 Factor df F P 处理 Treatment 2 0.766 0.466 天数 Days 6 12.226 0.001 处理天数 Treatment days 12 0.997 0.451 误差 Error 378 0501001502002503003500 7 14 21 28处理后天数 Number of days after treatment (d)卵密度(/叶)Egg density (leaf)024681012141618200 7 14 21 28活动螨态密度(/叶)Activity mitedensity( leaves)化防 Chemical control生防 Biological control化防 +生防 Chemical control+biological control对照 CKAB图 2 田间各处理二斑叶螨卵 ( A) 和活动螨态 ( B) 的密度 Fig. 2 Densities of eggs (A) and active states (B) of T. urticae in different treatments 518 中 国 生 物 防 治 学 报 第 34 卷 根据防效计算显示,化防区在防治的第二周有接近 60%的防治效果,但防效维持的时间很短,三周后无防治效果。而生防区与联合防治区整体防治效果较高,两者相比之下,联合防治区的防治效果维持的更高且长久。 在处理后的 21 d 与 28 d, 生防区防治效果有所下降, 但联合防治区的防治效果仍然较高 (表 4) 。 田间智利小植绥螨由于发现数量较少, 对其密度未进行方差分析。 智利小植绥螨主要发现于释放区域。但 28 d 时,非释放区域也有少量发现,可见其在释放区内叶螨数量明显降低后,有向叶螨较多的区域扩散的趋势(图 3)。 表 4 各处理在不同天数对二斑叶螨不同螨态的防治效果 Table 4 The effect of different states of T. urticae in different days 防治效果 Control effect (%) 7 d 14 d 21 d 28 d 化防 Chemical control 4.3 a 62.6 a 58.9 a 11.6 a 卵 Egg 生防 Biological control 100.0 b 97.4 b 27.7 b 72.9 b 化防生防 Chemical control biological control 99.1 b 98.4 b 90.1 c 98.3 c 化防 Chemical control 3.9 a 37.8 a 80.0 a 42.9 a 活动螨态 Active stages 生防 Biological control 100.0 b 96.1 a 80.1 b 96.2 b 化防生防 Chemical control biological control 97.9 b 99.0 a 98.0 b 96.0 b 化防 Chemical control 5.9 a 61.1 a 53.0 a 8.4 a 总体 Total 生防 Biological control 100.0 b 96.9 b 40.0 b 77.5 b 化防生防 Chemical control biological control 98.9 b 98.5 b 92.0 c 97.8 c 注:不同字母表示在 P 0.05 水平上差异显著。 Note: Different lowercase letters indicated significant difference at 0.05 level. 7142128714212801230123卵密度(/叶)Egg density (leaf)活动熟期密度(/叶)Immature stage density( leave)7142128处理后天数 Number of days after treatment (d)0123成螨密度(/叶)Adult density ( leaf)ABC对照 CK化防 Chemical control生防 Biological control化防生防 Chemical control biological control图 3 各处理田间智利小植绥螨卵 ( A) ,幼螨 ( B) 和成螨 ( C) 的密度 Fig. 3 The egg (A), nymph (B) and adult (C) density of P. persimilis in field 第 4 期 乔岩等:联合应用智利小植绥螨与丁氟螨酯防治草莓二斑叶螨 519 3 讨论 试验结果表明丁氟螨酯对智利小植绥螨的存活和产卵均没有显著的影响。在喷洒丁氟螨酯防治叶螨时未对智利小植绥螨的存活与繁殖产生影响。在试验中,因为在低浓度区只做到 2500 倍,所以没有对叶螨的 LC50进行预测。赵恒科等11利用药膜法测定丁氟螨酯对朱砂叶螨的 LC50为 4.32 mg/L,与本文中智利小植绥螨的 LC50( 669.4 mg/L)比较,说明丁氟螨酯对智利小植绥螨的毒性远远低于其对叶螨的毒性。 有关报道表明丁氟螨酯虽然对叶螨卵孵化的抑制作用较弱,但对其各生长阶段均有很高的活性,尤其对幼螨的活性更高12,13。本试验在防治期间化防区只喷施一次丁氟螨酯,可能是导致效果不明显的原因。赵舒14测定丁氟螨酯对叶螨卵的 LC50大约是其对成螨 LC50的 20 倍,本试验在田间应用时,由于叶螨以混合螨态的形式存在,且试验开展时田间卵量远大于活动螨态数量,因此可能需要在一个生长周期内经过多次喷药,才能对各个螨态起到较好的防治效果。 综合本文结果来看,丁氟螨酯对智利小植绥螨的毒性较低,在田间与智利小植绥螨联合应用防治叶螨时的效果比单独利用两种方法时都要好,起到了增效作用。但是在实际生产中,如果田间的叶螨密度较低时,我们还是应该首选生物防治的方法进行防治,当叶螨发生较为严重时可以利用智利小植绥螨与丁氟螨酯联合应用防治叶螨效果最佳。 在本试验中由于各处理起始密度差异较大,可能影响到分析结果。另外,田间分布不均匀,可能导致采样结果有偏差。以上均有待于进一步试验。 参 考 文 献 1 黄国洋 , 徐展华 , 方志刚 . 浙江省柑橘全爪螨抗药性研究 J. 浙江林学院学报 , 1999, 16(3): 256-259. 2 陈道茂 , 方培林 , 林荷芳 , 等 . 桔全爪螨对炔螨特抗药性测定 J. 浙江农业学报 , 2000, 12(5): 300-301. 3 Escudero L A, Ferragut F. Life-history of predatory mites Neoseiulus californicus and Phytoseiulus persimilis (Acari: Phytoseii-dae) on four spidermites peciesasprey, with special reference to Tetranychus evansi (Acari:Tetranychidae)J. Biological Control, 2005, 32(3): 372-384. 4 郝建强 , 姜晓环 , 庞博 , 等 . 释放智利小植绥螨防治设施栽培草莓上二斑叶螨 J. 植物保护 , 2015, 41(4): 196-198. 5 武雯 , 成玮 , 张顾旭 , 等 . 智利小植绥螨防治大棚草莓二斑叶螨试验初报 J. 中国植保导刊 , 2015, 35(1): 34-36. 6 李伟群 , 曾东强 , 刘晓亮 , 等 . 20%丁氟螨酯悬浮剂对柑橘全爪螨的防效评价 J. 南方农业学报 , 2013, 44(2): 240-243. 7 陈秋双 , 赵舒 , 邹晶 , 等 . 朱砂叶螨抗性监测 J. 应用昆虫学报 , 2012, 49(2): 364-369. 8 杨国璋 . 杀虫杀螨剂丁氟螨酯 J. 世界农药 , 2013, 35(6): 59-60. 9 Thomas V L, Steven V P, Luc T. Comparative acaricide susceptibility and detoxifying enzyme activities in- field collected resisant and susceptible strains of Tetranychus urticaeJ. 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