番茄黄化曲叶病毒与番茄褪绿病毒复合侵染对番茄黄化曲叶病毒传播的影响.pdf

nullnullnullnullnull nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 收稿日期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 修订日期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 基金项目 null 国家自然科学基金 nullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnull 国家大宗蔬菜产业技术体系 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull null 通信作者 null nullnullnullnullnull 史彩华 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 刘勇 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 番茄黄化曲叶病毒与番茄褪绿病毒复合侵染对 番茄黄化曲叶病毒传播的影响 罗瑞雪 null null null 赵 null 丹 null null 潘求一 null null 曾 null 颖 null null 张战泓 null 史晓斌 null null 张德咏 null null 史彩华 nullnull null 刘 null 勇 null nullnull nullnull长江大学农学院 荆州 nullnullnullnullnullnullnull nullnull湖南省农业科学院植物保护研究所 长沙 nullnullnullnullnullnullnull nullnull双峰县农业农村局 娄底 nullnullnullnullnullnullnull nullnull安乡县植保植检站 常德 nullnullnullnullnullnullnull nullnull湖南省农业科学院蔬菜研究所 长沙 nullnullnullnullnullnullnull 摘要 null 番茄黄化曲叶病毒 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull 是一种由烟粉虱传播的单链环状 nullnullnull病毒 在 田间可与多种病毒发生复合侵染 如番茄褪绿病毒 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull 等 本文对比了 nullnullnullnullnull单独侵 染和 nullnullnullnullnull与 nullnullnullnull复合侵染对烟粉虱获取和传播 nullnullnullnullnull的影响 结果表明 与取食 nullnullnullnullnull单独侵染的番 茄相比 取食复合侵染番茄的烟粉虱对 nullnullnullnullnull的传毒率显著提高 且番茄植株和烟粉虱体内 nullnullnullnullnull的病毒积累 量也显著提高 试验结果说明复合侵染会提高烟粉虱的传毒率 促进 nullnullnullnullnull的发生与流行 关键词 null 番茄黄化曲叶病毒 null 复合侵染 null 番茄褪绿病毒 null 烟粉虱 null 实时荧光定量 nullnullnull 中图分类号 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 文献标识码 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull null null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull null nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 番茄黄化曲叶病毒 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull 隶属于双生病毒科 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 菜豆 nullnull卷第 null期 罗瑞雪等 番茄黄化曲叶病毒与番茄褪绿病毒复合侵染对番茄黄化曲叶病毒传播的影响 金色花叶病毒属 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null 具有单链 nullnull 环状 nullnullnull 基因组 null nullnull 大小约 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull 于 nullnullnullnull 年在以色列被首次报道 null 随后在全球各地迅速传 播 中国于 nullnullnullnull 年在上海被首次报道 null nullnullnullnullnull 由烟粉虱 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 以持久性方式传播 null 在 田间造成的损失高达 nullnullnullnullnullnullnullnull null 感染 nullnullnullnull nullnull 后 植株发育迟缓并向上卷曲 黄化 植株叶片 会变少 变小 null nullnull 番茄褪绿病毒 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull 隶属于长 线 形 病 毒 科 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull 毛形病毒属 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 于 nullnull 世纪 nullnull 年代中期 在美国佛罗里达州被首次报道 中国于 nullnullnullnull 年在台 湾被首次 报 道 nullnull 迄 今 已 在 nullnull 个国家和地区发 生 null nullnullnullnull 是由烟粉虱传播的半持久性 nullnullnull 病 毒 带 毒 烟 粉 虱 取 食 健 康 植 株 后 可 造 成 植 株 nullnullnullnull 的发病率 null 与大多数植物病毒不同 感染 nullnullnullnull 的植株表现为老叶先发病 叶脉间黄化褪绿 变厚变脆且边缘向内卷曲 null nullnull 一般要 nullnullnull 周才表 现症状 null nullnull nullnullnullnullnull 与 nullnullnullnull 复合侵染自 nullnullnullnull 年在山东 寿光被首次报道以来 在江苏和云南等地相继被报 道 且 nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnull 的 发 病 率 都 在 逐 年 上 升 nullnull nullnullnull 复合侵染的番茄植株中 nullnullnullnullnull 的带毒 量比 nullnullnullnull 高 nullnullnullnullnullnullnull 倍 nullnull 且复合侵染会给番 茄造成 nullnullnull 以上的减产 严重时甚至绝收 null nullnull nullnullnull 已有研究表明 植株发生复合侵染时会产生协生作 用 发病症状更为严重 加速寄主植物死亡 nullnull nullnullnull 复 合侵染还会提高病毒的基因重组概率 导致病毒的 侵染能力和扩散速度增加 nullnull nullnullnull nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnull 复合侵染番茄植株后 显著提高烟粉虱获取和传播 nullnullnullnull 的效率 nullnull 但是复合侵染对 nullnullnullnullnull 传播的 影响 缺乏研究 针对这一问题 本文研究了 nullnullnullnull nullnull 和 nullnullnullnull 复合侵染番茄植株后烟粉虱获取和传 播 nullnullnullnullnull 效率的变化 以及 nullnullnullnullnull 在烟粉虱和 番茄体内积累量的变化 并进一步明确了复合侵染 是否影响烟粉虱对 nullnullnullnullnull 的传播 为研究 nullnullnullnull nullnull 和 nullnullnullnull 复合侵染后二者产生的协生作用及分 子机制奠定基础 nullnull 材料与方法 nullnullnullnull 试验材料 供试植株 番茄品种为 钻红美娜 该品种不抗 nullnullnullnullnull 供试昆虫 null 型烟粉虱 由中国农业科学院蔬菜 花卉研究所张友军研究员馈赠 之后放在 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull 的养虫笼内 nullnullnullnull null nullnull nullnullnull null null 光周期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 条件下 用健康番茄 饲养 定期做生物型的鉴定 nullnull 供试菌液 含 nullnullnullnullnull 的农杆菌菌液由中国农 业科学院植物保护研究所周雪平团队馈赠 nullnullnullnull 试验方法 nullnullnullnullnullnull 番茄中 nullnullnullnullnull 的鉴定 用 nullnullnullnull 法提取番茄的总 nullnullnull 特异性引物 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull 表 null 扩 增 片 段 长 度 为 nullnullnullnullnull nullnull 退火温度为 nullnullnull 经验证该引物特异性 及扩增效率良好 使用南京诺维赞 nullnullnullnullnullnull 生物 公司 nullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull 试剂 盒 按照说明书步骤进行 nullnullnull 扩增 nullnullnull 产物用 nullnullnullnull 琼脂糖电泳凝胶进行检测 紫外灯下观察并记 录结果 将条带正确的 nullnullnull 产物纯化回收后送生工 生物工程 上海 股份有限公司测序 比对序列是否 正确 nullnullnullnullnullnull 烟粉虱中 nullnullnullnullnull 的鉴定 单头烟粉虱 nullnullnull 的提取 用蛋白酶 null 和树脂 提取单头烟粉虱的 nullnullnull 后续鉴定步骤参照 nullnullnullnullnull 用 nullnullnullnull 法提取多头烟粉虱的总 nullnullnull 后续鉴定步 骤参照 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 番茄和烟粉虱中 nullnullnullnull 的鉴定 用 nullnullnullnullnullnull 法提取番茄或烟粉虱的总 nullnullnull 后用 南京诺维赞 nullnullnullnullnullnull 生物公司的 nullnullnullnull 试剂盒 按 照说明书合成 nullnullnullnull 以 nullnullnullnull 为模板 采用特异 性引物 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 表 null 扩增 目的片段长 度为 nullnullnullnullnull nullnull 退 火 温 度 为 nullnullnull 后 续 步 骤 参 照 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 侵染性克隆与虫传毒株 将 nullnullnullnullnull 病毒侵染性克隆接种在含有卡那 霉素 nullnullnullnull null 和利福平 nullnullnullnull null 的 nullnull 固体培 养基上 nullnullnull 恒温培养箱中过夜培养 将活化后 的农杆菌菌体溶解在去离子水中 浓度为 nullnullnullnullnullnull null 使用 nullnullnull 医用注射器 在健康番茄长出 nullnullnull 片真叶时 将农杆菌菌液注射到番茄茎秆上 每株 番茄接种 nullnullnullnullnull 菌液 接种后放置温室内 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 的 养 虫 笼 中 于 nullnullnullnull null nullnull nullnullnullnull null 光周期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 条件下培育 nullnullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法进行检测 将 nullnullnull 头健康烟 nullnullnull nullnullnullnull 粉虱转 移 到 感 染 了 nullnullnullnullnull 的 毒 株 上 饲 毒 nullnullnull 后 取出全部烟粉虱将其转移到健康番茄 nullnullnull 片 真叶期 上取食 nullnullnull nullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法进行 检测 复合侵染的番茄采自田间 经过 nullnullnull 以及小 nullnullnull 测序确定无其他病毒复合侵染 放入温室内 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 的养虫笼中 nullnullnullnull null nullnull nullnullnullnull null 光周期 nullnullnullnullnullnull nullnull 条件下培养 将 nullnullnull 头健康烟粉虱放到 nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnull 复合侵 染的病株上取食 nullnullnull 后 取出全部的烟粉虱将其放 到健康番茄 nullnullnull 片真叶 上取食 nullnullnull nullnullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法检测 nullnullnullnullnull nullnullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法 检测 nullnullnullnull 选择 nullnullnullnullnull 的病毒量一致的复合侵 染与单独侵染的番茄进行后续试验 表 null null 番茄与烟粉虱带毒情况检测所用引物信息 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 引物名称 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 引物序列 nullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 退火温度 null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 扩增片段大小 null null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 用途 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull检测 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull检测 nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnulln