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37 5 1035 1040 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2021 年 10 月 收稿日期 2020 12 22 基金项目 福建省作物有害生物监测与治理重点项目 MIMCP 201802 漳州市科技计划项目 ZZ2020J01 作者简介 赖宝春 女 硕士 副研究员 E mail lbc1999 通信作者 DOI 10 16409 ki 2095 039x 2021 04 013 2株拮抗放线菌复合防治番茄青枯病的研究 赖宝春 1 姚锦爱 2 戴瑞卿 1 吴振强 1 王家瑞 1 1 福建省漳州市农业科学研究所 漳州 363005 2 福建省作物有害生物监测与治理重点实验室 福建省农业科学院植物保护研究所 福州 350013 摘要 为克服单一拮抗菌抑菌活性不够稳定 防治效果差等不足 本文研究了 2 株优良放线菌菌株之间亲 和性及其复合对番茄青枯病的防治效果表明 2 株菌之间无明显拮抗作用 将亲和性菌株 FX81 和 FX28 等比例同时复合发酵 复合发酵液对番茄青枯病菌的抑菌圈直径达 36 0 mm 抑菌效果明显高于单一菌株 FX81 27 0 mm 和 FX28 28 8 mm 将 2 株拮抗菌制成复合菌剂 BOF8128 对番茄青枯病的盆栽防效为 82 03 比单一菌剂分别提高了 8 13 BOF81 和 18 63 BOF28 同时复合菌剂显著促进了番茄地 上部分的生长 干重增加 76 58 由此表明 2 株放线菌在防治番茄青枯病方面具有协同增效的作用 有 望用于进一步菌肥的开发和应用 关 键 词 拮抗放线菌 复合菌剂 青枯病 生防效果 中图分类号 S476 文献识别码 A 文章编号 1005 9261 2021 05 1035 06 Control Effect of Two Antagonistic Actinomycete Mixed Strains against Tomato Bacterial Wilt Disease LAI Baochun 1 YAO Jingai 2 DAI Ruiqing 1 WU Zhenqiang 1 WANG Jiarui 1 1 Zhangzhou Institute of Agricultural Sciences of Fujian Province Zhangzhou 363005 China 2 Fujian Key Laboratory for Monitoring and Integrated Management of Crop Pests Institute of Plant Protection Fujian Academy of Agricultural Sciences Fuzhou 350013 China Abstract In order to overcome disadvantages of single antagonistic strain in controlling tomato bacterial wilt such as unstable antibacterial activity or poor control effect the affinity and disease control efficacy of two selected antagonistic actinomycetes mixed strains were investigated The results showed that there was no obvious antagonistic effect between the two strains and the composite fermentation broth of FX81with FX28 strains resulted in a larger inhibition zone 36 mm against R solanacearum growth compared to the single strain FX81 27 mm and FX28 28 8 mm The control efficacy of the two mixed strains BOF8128 on tomato bacterial wilt was 82 03 in potted experiment which was increased by 8 13 BOF81 and 18 63 BOF28 respectively Meanwhile the growth of tomato aerial part was significantly promoted and the dry weight increased by 76 58 Thus the two actinomycete strains had significant synergistic effect on the control of tomato bacterial wilt suggesting that they had the potential to be used in the development and application of microbial fertilizer Key words antagonistic actinomycete combining strain bacterial wilt disease biocontrol efficacy 由茄科劳尔氏菌 Ralstonia solanacearum 引起的番茄青枯病是一种世界范围的细菌性维管束病害 能侵 染 200 多种植物 包括茄科农作物和观赏类植物 1 生产上防控该病的方法主要有施用化学农药 2 选育 抗病品种 3 嫁接或轮作 4 土壤改良 5 等 但都存在明显的弊端 近年来 拮抗微生物菌剂因其高效 生 1036 中 国 生 物 防 治 学 报 第 37 卷 态安全 成本低 专一性强且能促进植株生长等优点已成为植物青枯病生物防治的首选 已筛选出的微生 物菌剂包括单一菌剂和复合菌剂 单一菌剂主要有芽胞杆菌 6 7 无致病力青枯雷尔氏菌 8 假单孢菌 9 链霉菌 10 11 等 但考虑到青枯病菌是一种破坏性极强的土传细菌 在土壤 水和植物中存活时间长 单一 菌剂防效不理想 存在诸如持效性差 环境依赖性强等 难以达到理想的防治效果 12 而复合菌剂具有提 高生物防治效果及延长生防菌作用期限等优点 已成为新的研究热点 目前有关利用复合菌剂防治青枯病 的报道多集中于生防细菌的复配 王丽丽等 13 将健康番茄根际分离到的 2 株芽胞杆菌混合后 对番茄青枯 病的防治效果明显优于单一菌株 李程等 14 将 2 株解淀粉芽胞杆菌 ZM9 和 YH 22 复合后对烟草青枯病菌 的抑菌圈直径显著大于单一菌株处理 吕建林等 15 将短短芽胞杆菌 B011 和侧孢芽胞杆菌 2 Q 9 混合后对 烟草青枯病的防效优于单一菌株 达 83 39 黄小琴等 16 用解淀粉芽胞杆菌和硫酸链霉素混配后 对烟 草青枯病的防效达 65 85 且能减少一半化学农药的施用量 因此 通过复合菌剂来提高番茄青枯病的防 治效果显得尤为重要 有关生防放线菌复合防治番茄青枯病的研究较少 而放线菌中应用最多的是链霉菌 链霉菌已被报道 应用于防治多种植物的青枯病 还能促进植株生长 17 18 链霉菌的代谢产物能产生多种活性物质 如丰加 霉素 环二肽 四烯大环内酯类抗生素等 19 20 且生产上应用的诺尔霉素 水合霉素 中生菌素等农用抗 生素对番茄青枯病均具有良好的防治效果 21 Amano 等 22 Smaoui 等 23 报道的灰锈赤链霉菌能产多种抗 生素及抗真菌纯化合物 Wadetwar 等 24 包慧芳等 25 报道的深红紫链霉菌除了能产生胞外抗生素 还具 有 淀粉酶 酯酶 脂肪酶的活性 因此 探索链霉菌复合防控番茄青枯病具有重要的现实意义 本研究的生防菌株灰锈赤链霉菌 FX81 和深红紫链霉菌 FX28 前期已证实对土传病原真菌镰刀 菌具有良好的抑制作用 抑菌谱广 且能致真菌菌丝畸变 具强烈抑制病菌孢子萌发的能力 26 28 为进一 步评价这 2 株放线菌对土传病原细菌的抑制作用 我们进行了单菌株对番茄青枯病菌的皿内初筛后 发现 这 2 株放线菌均对番茄青枯病菌有较强的抑制作用 因此 本研究从生防放线菌多菌复合协同增效的角度 出发 研究 2 株拮抗放线菌复合对番茄青枯病的防治效果及其对番茄植株的促生作用 以期为番茄青枯病 微生物菌肥的开发及应用提供理论依据和菌种资源 1 材料与方法 1 1 供试材料 供试拮抗放线菌 灰锈赤链霉菌 Streptomyces griseorubiginosus FX81 和深红紫链霉菌 Streptomyces violaceorubidus FX28 菌株 均由漳州市农业科学研究所植物保护研究室筛选保藏 供试病原菌 番茄青枯病菌 R solanacearum QK1 由漳州市农业科学研究所植物保护研究室分离 鉴定 保藏 试验番茄品种 西研 958 西安秦蔬农业有限公司 由漳州市农业科学研究所蔬菜研究室提供 1 2 拮抗菌株间亲和性的测定 将 100 mL 高氏一号液体培养基加入 250 mL 的三角瓶中 121 高压灭菌 30 min 待冷却后分别单独 接入菌株 FX81 和 FX28 的 5 mm 菌饼各 5 块 28 150 r min 振荡培养 7 d 制成 1 0 10 8 cfu mL 菌株 发酵液备用 采用对峙培养法将 2 株菌株的发酵液交叉滴于同一个高氏一号培养基平板上 重复 3 次 28 对峙培养 5 7 d 观察 2 株菌株的生长情况及相互之间有无拮抗作用 1 3 单一及复合拮抗菌离体抑菌作用测定 按 1 2 的方法同时接入菌株 FX81 和 FX28 的 5 mm 菌饼各 3 块 制成 1 0 10 8 cfu mL 的复合发酵液备 用 采用杯碟法 将培养好的番茄青枯菌液 100 L 浓度为 3 0 10 6 cfu mL 与培养基混匀后倒入放置牛 津杯的平板 待凝固后取出牛津杯 在孔中加入 200 L 的待测单一或复合拮抗菌的发酵液 培养 48 h 后 测定透明抑菌圈的大小 29 1 4 单一及复合菌剂对番茄青枯病的防治效果 1 4 1 单一及复合菌剂的制备 单一及复合固体发酵基质配方及固体菌剂发酵参考赖宝春等 26 的方法制 备 即将优化好的猪粪与麦麸质量比为 4 6 装入 250 mL 三角瓶中 每瓶加发酵原料总量 20 g 控制料水 第 5 期 赖宝春等 2 株拮抗放线菌复合防治番茄青枯病的研究 1037 比为 1 0 8 调节 pH 至 7 2 7 5 121 灭菌 20 min 即为固体发酵基质 命名为 GC 按 15 接种量接 入单一及复合发酵液 28 恒温培养 待瓶壁及固体培养基中长满菌丝 并散发出典型的 土腥味 即 完成单一及复合固体菌剂发酵 分别命名为 BOF28 BOF81 BOF8128 菌剂中拮抗菌的含量达到 10 8 cfu g 1 4 2 盆栽防治效果测定 番茄种子催芽后播种于穴盘 待番茄幼苗长至 12 cm 时 挑选长势一致的番茄 幼苗移栽到花盆 直径 25 cm 中 每盆 1 株苗 试验设 6 个处理 分别为 CK1 空白对照 CK2 与 固体发酵基质相当的常规化肥对照 GC 固体发酵基质 BOF81 含 FX81 菌株的菌剂 BOF28 含 FX28 菌株的菌剂 BOF8128 含 2 株菌比例为 1 1 的复合菌剂 固体发酵基质和固体菌剂用量为 2 质量分数 与土壤混匀 每个处理 10 盆 3 次重复 处理 7 d 后 每盆根部接种青枯菌液 5 mL 浓度 为 3 0 10 6 cfu mL 接种 45 d 后采集各处理的根际土样 利用 SMSA 培养基平板稀释涂布法计数青枯 病菌的数量 30 并调查发病率和病情指数 计算防治效果 病害分级标准参照王丽丽等 13 的方法 发病率 发病株数 调查总株数 100 病情指数 病级数 该病级植株数 最大病级数 植株总株 数 100 防治效果 对照组病情指数 处理组病情指数 对照病情指数 100 1 4 3 生物量的测定 按 1 4 2 的方法播种 移栽和管理 45 d 后将各处理的健康番茄植株连根拔起带回 实验室 将植株地上部洗净后装入大牛皮纸袋中 105 杀青 0 5 h 后 80 烘至恒质量 测定植株干质 量 分析生防放线菌复合菌剂对番茄植株的促生作用 1 5 数据统计与处理 试验数据处理采用 DPS 7 5 软件进行分析 Duncan 氏新复极差法进行差异显著性检验 2 结果与分析 2 1 2 株拮抗放线菌亲和性的测定 将菌株 FX81 和 FX28 在高氏一号培养基上共培养 的生长情况进行观察 可见 2 株菌株之间能够重叠生长 菌落之间未观察到明显的抑菌带 即表明 2 株菌株之间 无明显抑制作用 可以进行复合发酵或将菌液进行复配 图 1 2 2 单一及复合拮抗菌株对番茄青枯病菌的抑制作用 2 株放线菌单一菌株或复合菌株发酵液对番茄青枯 病菌均有较强的抑制作用 菌株 FX81 单一发酵液抑菌 圈平均直径为 27 0 0 43 mm 图 2B 菌株 FX28 FX81 FX28 图 1 菌株 FX81 和 FX28 的共培养 Fig 1 Co culture of FX81 and FX28 单一发酵液抑菌圈平均直径为 28 8 0 62 mm 图 2C 复合拮抗菌发酵液抑菌圈平均直径达 36 0 0 46 mm 图 2D 结果表明 拮抗放线菌复合发酵液处理组对番茄青枯病菌的抑菌效果优于单一菌 株处理组 说明 2 株放线菌对番茄青枯病菌具有的协同抑制作用 A 清水对照 Control B 菌株 FX81 发酵液处理组 Single strain fermentation of FX81 C 菌株 FX28 发酵液处理组 Single strain fermentation of FX28 D 菌株 FX81 和 FX28 复合发酵液处理组 Compound fermentation of FX81 and FX28 图 2 单一菌株及复合菌株对番茄青枯病菌的拮抗效果 Fig 2 Inhibitory effect of strain single and compound against R solanacearum 1038 中 国 生 物 防 治 学 报 第 37 卷 2 3 单一及复合菌剂对番茄青枯病的防治效果 2 3 1 单一及复合菌剂对番茄生物量的影响 从表 1 可以看出 单施固体发酵基质 GC 与常规化肥对照 CK2 相比无明显促生效果 各菌剂处理可显著提高番茄地上部干质量 施用单一菌剂 BOF81 和 BOF28 番茄地上部干质量分别比空白对照 CK1 增加 54 49 和 46 51 施用复合菌剂 BOF8128 对番茄生物量 影响最显著 与空白对照 CK1 相比增加 76 58 与单一菌剂 BOF81 和 BOF28 相比 分别增加 14 31 和 20 52 说明复合菌剂 BOF8128 在促进番茄地上部分生长方面显著优于单一菌剂 表 1 单一及复合菌剂对番茄地上部干质量的影响 Table 1 Effects of single and compound microbial agents on dry weight of tomato shoot 处理 Treatments 地上部干质量 Dry weight of tomato shoot g 增长率 Increase rate BOF8128 10 63 0 2 a 76 58 BOF81 9 30 0 30 b 54 49 BOF28 8 82 0 42 c 46 51 GC 6 95 0 10 d 15 45 CK2 6 85 0 30 d 13 79 CK1 6 02 0 15 e 注 表中数据为平均数 标准差 同列数据不同小写字母表示经 Duncan 氏新复极差法检验在 P 0 05 水平差异显著 Note Data were mean SD Data with different lowercase letters in the same column indicated significant difference at 0 05 level by Duncan s new multiple range test 2 3 2 单一及复合菌剂对番茄根际病原菌数量的影响 从图 3 结果可以看出 菌剂可显著影响番茄根际青 枯菌的数量 接种青枯菌 45 d 后 空白对照 CK1 青枯菌的数量达 1 7 10 8 cfu g 显著高于菌剂处理 施用单一菌剂 BOF81 和 BOF28 青枯菌数量分别为 1 4 10 7 cfu g 和 1 9 10 7 cfu g 与空白对照 CK1 相 比 青枯病菌数量增长较缓慢 而施用复合菌剂 BOF8128 青枯菌数量为 2 8 10 6 cfu g 对番茄根际青枯 菌数量的影响最显著 比接种时青枯菌数量 3 0 10 6 cfu g 略低 表明复合菌剂比单一菌剂在抑制青枯菌数 量增长方面效果更好 青枯菌数量 Number of R so lan acea rum lg cfu g 图 3 不同处理组对青枯病菌数量的影响 Fig 3 Effects of different treatments on the number of R solanacearum 2 3 3 单一及复合菌剂对番茄青枯病的防治效果 接种病原菌 45 d 后 空白对照 CK1 发病严重 发病 率达 76 67 单一及复合菌剂的处理 BOF8128 BOF81 和 BOF28 均能显著抑制青枯病的发生 病情指数 分别为 11 67 15 83 和 20 0 复合菌剂 BOF8128 对番茄青枯病的防治效果 82 03 显著高于单一菌剂处 理 BOF28 防效 69 15 表 2 3 讨论 链霉菌对植物病原菌的抑制作用机制之一是产生抗生素 其与病原细菌之间常见有透明的抑菌圈 与 第 5 期 赖宝春等 2 株拮抗放线菌复合防治番茄青枯病的研究 1039 表 2 不同处理组对番茄青枯病的防控效果 Table 2 The control effect of different treatments on tomato bacterial wilt in greenhouse 处理 Treatments 发病率 Disease incidence 病情指数 Disease index 防效 Control effect BOF8128 23 33 5 77 c 11 67 1 44 d 82 03 1 78 a BOF81 26 67 5 77 bc 15 83 3 82 cd 75 86 3 38 ab BOF28 36 67 5 77 b 20 0 4 33 c 69 15 6 75 b GC 66 67 5 77 a 53 33 3 82 b 17 79 2 54 c CK2 73 33 5 77 a 61 67 5 20 a 5 02 1 63 d CK1 76 67 5 77 a 65 00 6 61 a 注 表中数据为平均数 标准差 同列数据不同小写字母表示经 Duncan 氏新复极差法检验在 P 0 05 水平差异显著 Note Data were mean SD Data with different lowercase letters in the same column indicated significant difference at 0 05 level by Duncan s new multiple range test 病原真菌之间常见有透明的抑菌带 说明它们分泌出抗菌素类物质 10 虽然链霉菌对多种植物的青枯病表 现出较好的防效 但大多单一菌株的生防持效性差 防效不理想 将不同作用机制 不同生长条件和不同 生态适应性等特点的拮抗菌株共同作用 能提高防病效果和稳定性 31 因此 将无明显拮抗作用的生防菌 株复合培养 菌株间通过协同作用实现优势互补 发挥出理想的生防效果 前期试验发现菌株 FX81 生态 适应性强 能降低香蕉根际土壤中病原菌的数量 对香蕉枯萎病的防治效果达 81 05 且能促进香蕉植株 生长 26 菌株 FX28 有较强的抑制病菌孢子萌发的能力 对蜜柚炭疽病菌孢子的萌发抑制率达 97 0 对 蜜柚炭疽病的预防效果和治疗效果分别为 83 8 和 71 1 27 本试验将这 2 株放线菌交叉培养后 发现它 们之间无明显拮抗作用 进一步试验结果表明 2 株菌株复合培养后对番茄青枯病菌的抑菌圈平均直径显著 大于单一菌株的抑菌圈平均直径 与前人研究结论一致 葛红莲等 32 将 5 株生防细菌复配后浇灌对盆栽辣椒青枯病的防治效果达到 91 1 优于任何单一菌株 田间采用拌菌堆肥法 添加营养载体 和浇灌法的防治效果分别为 94 0 和 77 0 增产效果分别为 367 0 和 57 8 李勤奋等 33 研究了复合菌液 C1 C2 蘸根 未添加营养载体 处理对盆栽番茄的抗病促生作用 结果表明复合菌液 C1 C2 均能明显促进番茄植株生长 以复合菌剂 C2 对番茄青枯病的防治效果最好 达 66 9 说明生防菌株添加适合的营养载体能够显著提高防效和促进增产 这可能是因为适合的营养载 体使复合菌菌量大量增加 更能适应复杂的土壤微生物环境 提高复合菌在植株根际的定殖能力 占据植 株根部生态位点 促进其产生抗菌物质的能力 从而达到有效抑制病害的发生 且营养载体在发酵过程中 将一些不易利用的营养成分转化为易于植物吸收的小分子物质 能为植物提供更丰富的营养 谭兆赞等 34 研究结果表明 复合微生物菌剂可提高土壤微生物的多样性 降低土壤病原菌的基数 从而抑制番茄青枯 病的发生 Lee 等 35 比较健康番茄和患青枯病番茄根际土壤微生物多样性 结果表明番茄植株根际放线菌 丰度高有利于抑制青枯病的发生 这均与本研究结果基本一致 Marian 等 36 将 变形菌 TWR114 和非致 病性青枯菌 TCR112 按不同比例复合后 对盆栽番茄青枯病的防治效果均优于单一菌剂 可显著降低番茄 根际青枯病菌的数量 其作用机理研究表明复合菌具有更强的防御和协调抑制作用 有助于提高生防效果 本文初步研究了 2 株生防放线菌复合防治番茄青枯病的效果 充分利用有益菌与病原菌之间的拮抗 竞争等关系 发挥了生防菌之间的协同增效特点 降低植株根际病原菌的基数 从而降低发病率和病情指 数 促进植株生长 由于本文仅测定了复合菌剂的盆栽防效 还未进行田间试验 相对较为复杂的大田土 壤环境下的应用效果还有待进一步研究 参 考 文 献 1 康贻军 沈敏 王欢莉 等 两株植物根际促生菌对番茄青枯病的生物防治效果评价 J 中国生物防治报 2012 28 2 255 261 2 袁高庆 陈媛媛 范腕腕 等 3 4 5 三羟基苯甲酸甲酯防治番茄青枯病的物理作用方式及其对番茄根系次生代谢物质的响 J 植物保护 2016 42 6 80 85 3 李玉洪 李业勇 吴永琼 等 抗青枯病番茄砧木品种宝砧 6 号的选育 J 长江蔬菜 2016 16 43 45 4 范梅 谢莉 蔡鹏 等 番茄嫁接抗青枯病栽培技术 J 四川农业科技 2015 7 37 38 1040 中 国 生 物 防 治 学 报 第 37 卷 5 Shen G H Zhang S T Liu X J et al Soil acidification amendments change the rhizosphere bacterial community of tobacco in a bacterial wilt affected field J Applied Microbiology and Biotechnology 2018 22 9781 9791 6 Ho T H Chuang C Y Zheng J L et al Bacillus amyloliquefaciens strain PMB05 intensifies plant immune responses to confer resistance against bacterial wilt of tomato J Phytopathology 2020 110 12 1877 1885 7 Chen M C Wang J P Liu B et al Biocontrol of tomato bacterial wilt by the new strain Bacillus velezensis FJAT 46737 and its lipopeptides J BMC Microbiology 2020 20 1 160 172 8 郑雪芳 刘波 朱育菁 等 植物疫苗鄂鲁冷特对番茄青枯病的田间防治效果 J 植物保护学报 2018 45 5 1096 1102 9 Ayomide F M Adejare R O Adebola O O Biological control of bacterial wilt of tomato caused by Ralstonia solanacearum using Pseudomonas species isolated from the rhizosphere of tomato plants J Archives of Phytopathology and Plant Protection 2020 53 12 1 16 10 卢继英 林纬 黎起秦 等 拮抗植物病害的放线菌的筛选 J 农业网络信息 2005 1 67 69 11 Shen T Lei Y H Pu X D et al Identification and application of Streptomyces microflavus G33 in compost to suppress tomato bacterial wilt disease J Applied Soil Ecology 2021 1 157 168 12 黄明媛 顾文杰 张发宝 等 节杆菌 YB6 发酵滤液稳定性测定及其对盆栽番茄青枯病的防治效果 J 广东农业科学 2013 18 75 78 13 王丽丽 周旭东 李国安 等 番茄青枯病病原菌拮抗菌株的筛选及其田间防控作用研究 J 植物保护 2017 43 1 182 185 14 李程 黎妍妍 杨小琼 等 增效复合拮抗菌对烟草青枯病病原菌抑制效果研究 J 安徽农业科学 2020 48 4 128 131 140 15 吕建林 刘二明 柏连阳 等 烟草青枯病生防菌混合接种对其定殖及防效的影响 J 中国生物防治 2010 26 2 200 205 16 黄小琴 刘勇 张蕾 等 烟草青枯病生防芽胞杆菌协同防治药剂的筛选和复配 J 农药 2015 54 11 848 851 17 Zheng X F Wang J P Chen Z et al A Streptomyces sp strain isolation identification and potential as a biocontrol agent against soilborne diseases of tomato plants J Biological Control 2019 1 136 174 18 Zhao J W Han L Y Yu M Y et al Characterization of Streptomyces sporangiians sp nov a novel soil actinomycete with antibacterial activity against Ralstonia solanacearum J Microorganisms 2019 7 9 360 377 19 曹瑱艳 申屠旭萍 俞晓平 杭白菊枯萎病的病原菌分离鉴定及淀粉酶产色链霉菌对其防治效果 J 中国生物防治学报 2019 35 2 265 271 20 Pakorn W A Waranya C Christopher W et al Antibacterial activity of cyclo L Pro L Tyr and cyclo D Pro L Tyr from Streptomyces sp strain 22 4 against phytopathogenic bacteria J Natural Product Research 2016 30 17 1 5 21 王杰 龙世芳 王正文 等 番茄青枯病防治研究进展 J 中国蔬菜 2020 1 22 30 22 Amano S I Morota T Kano Y K et al Promomycin a polyether promoting antibiotic production in Streptomyces spp J Antibiotics 2010 63 486 491 23 Smaoui S Mathieu F Elleuch L et al Taxonomy purification and chemical characterization of four bioactive compounds from new Streptomyces sp TN256 strain J World Journal of Microbiol Biotechnology 2012 28 793 804 24 Wadetwar R N Patil A T Production of antibiotic from actinomycetes isolated from Nagpur region and optimization of parameters to increase the yield J Pharmaceutical Sciences and Research 2013 4 8 3094 3098 25 包慧芳 侯敏 王宁 等 一种深红紫链霉菌及其应用 P 中国发明专利 2013 C10566781 6 26 赖宝春 戴瑞卿 林明辉 等 一株拮抗放线菌的鉴定及其对香蕉枯萎病的生防效应 J 南方农业学报 2020 51 4 836 843 27 赖宝春 吴振强 戴瑞卿 等 琯溪蜜柚炭疽病拮抗放线菌的筛选和鉴定 J 热带作物学报 2020 41 9 1876 1882 28 赖宝春 吴振强 王家瑞 等 深红紫链霉菌及其生物防治菌剂和制备方法 P 中国发明专利 2020 CN109658341 B 29 徐威主编 微生物学实验 第二版 M 北京 中国医药科技出版社 2014 227 229 30 王丽丽 李洋 林乐志 抑制番茄青枯病拮抗菌株的田间生防效果 J 浙江农业科学 2018 59 2 291 292 31 陈志谊 刘邮洲 刘永锋 等 拮抗细菌菌株之间的互作关系及其对生物防治效果的影响 J 植物病理学报 2005 35 6 539 544 32 葛红莲 郭坚华 祁红英 等 复合菌剂 AR99 防治辣椒青枯病 J 植物病理学报 2004 34 2 162 165 33 李勤奋 邓晓 武春媛 等 复合菌剂对番茄抗病促生的效果研究 J 生态环境学报 2012 21 11 1836 1840 34 谭兆赞 林捷 刘可星 等 复合微生物菌剂对番茄青枯病和土壤微生物多样性的影响 J 华南农业大学学报 2007 28 1 45 49 35 Lee S M Kong H G Song G C et al Disruption of Firmicutes and Actinobacteria abundance in tomato rhizosphere causes the incidence of bacterial wilt disease J International Society for Microbial Ecology 2021 15 1 330 347 36 Marian M Morita A Koyama H et al Enhanced biocontrol of tomato bacterial wilt using the combined application of Mitsuaria sp TWR114 and nonpathogenic Ralstonia sp TCR112 J General Plant Pathology 2019 85 2 142 154 责任编辑 吕平香