几种生物农药及其混配剂对兰州百合贮存期鳞茎腐烂病防治作用_姜玉玲.pdf

37 5 1041 1049 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2021 年 10 月 收稿日期 2021 01 06 基金项目 甘肃省科技重大专项 18ZD2NA010 兰州市科技局项目 2018 4 78 甘肃省农牧厅项目 GNSW 2016 25 甘肃农业大学学 科建设基金项目 GAU XKJS 2018 155 作者简介 姜玉玲 硕士研究生 E mail 1301034480 通信作者 博士 教授 E mail liangql DOI 10 16409 ki 2095 039x 2021 06 002 几种生物农药及其混配剂对兰州百合贮存期 鳞茎腐烂病防治作用 姜玉玲 梁巧兰 魏列新 孟秀鹏 蔺 珂 岳 阳 甘肃农业大学植物保护学院 甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室 兰州 730070 摘要 为了筛选出防治兰州百合鳞茎腐烂病菌的高效低毒生物杀菌剂 延缓生产中病原菌对药剂的抗性 采用生长速率法测定了几种生物农药及其混配剂对尖孢镰孢菌 Fusarium oxysporum 的抑菌率 活性及共毒 系数 结果表明 6 种生物农药对尖孢镰孢菌抑菌率均在 69 以上 且活性从大到小依次为多粘类芽胞杆菌 绿色木霉 申嗪霉素 哈茨木霉 丁子香酚 香芹酚 获得 4 种具有增效作用的混配药剂 分别为多 丁 9 1 多 丁 8 2 多 百 8 2 和丁 百 4 6 其共毒系数分别为 347 88 129 73 440 60 和 641 66 这 4 种 混配剂对尖孢镰孢菌引起的兰州百合鳞茎腐烂病的防效均显著高于单剂的防效 较单剂防效提高了 5 88 57 89 且在发病前 后施药 混配剂及单剂的保护作用防治效果均高于治疗作用防治效果 关 键 词 百合 尖孢镰孢菌 生物杀菌剂 活性 增效作用 防治 中图分类号 S476 文献识别码 A 文章编号 1005 9261 2021 05 1041 09 Control Effect of Several Biological Fungicides and Their Mixtures on the Bulb Rot of Lanzhou Lily During Storage JIANG Yuling LIANG Qiaolan WEI Liexin MENG Xiupeng LIN Ke YUE Yang Biocontrol Engineering Laboratory of Crop Diseases and Pests of Gansu Province College of Plant Protection Gansu Agricultural University Lanzhou 730070 China Abstract In order to screen out biological fungicides with high efficiency and low toxicity against Lanzhou lily bulb rot disease and alleviate the resistance of pathogen to pesticides in production inhibition rate activity and co toxicity coefficient of several biological fungicides and their mixtures to Fusarim oxysporum were determined by the growth rate method The results showed that the inhibition rates of the six biological fungicides against F oxysporum were all above 69 and the values of EC 50 in descending order was Paenibacillus polymyxa Trichoderma viride phenazine 1 carboxylic acid Trichoderma harzianum eugenol and carvacrol Four kinds of mixtures agents with synergistic effects were obtained namely Paenibacillus polymyxa with eugenol 9 1 Paenibacillus polymyxa with eugenol 8 2 Paenibacillus polymyxa with chlorothalonil 8 2 and eugenol with chlorothalonil 4 6 and their co toxicity coefficients were 347 88 129 73 440 60 and 641 66 respectively Compared with the single agent control effects of these four kinds of mixtures to Lanzhou lily bulb rot disease increased by 5 88 57 89 The protective effects of mixture and single agents were higher than the treatment effects Key words lily Fusarium oxysporum biological fungicide virulence synergistic effect control 1042 中 国 生 物 防 治 学 报 第 37 卷 兰州百合 Lilium davidii Duch 是百合科百合属多年生草本球根植物 是全国唯一食用性甜百合 1 3 具 有较高的食用和药用价值 由于其辖域分布 种植结构单一化 复种指数大 重茬现象普遍等原因 造成 百合病害发生日益严重 4 5 其中 由尖孢镰孢菌引起的百合鳞茎腐烂病是百合生产栽培和贮存期发生严重 的病害之一 造成植株枯萎 鳞茎腐烂 6 田间发病率高达 21 50 30 60 鳞茎软化腐烂 平均感染率 在 50 以上 严重时感染率可达 100 如果将发病鳞茎作为种球播种会影响其发芽率 造成缺苗断垅 影响百合的生产 在甘肃省定西市临洮县百合种植基地发现百合鳞茎腐烂病 从带病鳞片上分离纯化获得 了具有强致病性鳞茎腐烂病菌 经致病性测定 形态特征观察及 rDNA ITS 序列分析将其鉴定为尖孢镰孢 菌 F oxysporum GenBank 登录号 MT824577 1 目前 多种化学药剂可防治尖孢镰孢菌引起的植物枯萎病 7 其中 多菌灵 代森锰锌 百菌清 福 美双 苯醚甲环唑 己唑醇 噁霉灵 烯唑醇 氟硅唑 咯菌腈等药剂对百合枯萎病病原菌尖孢镰孢菌表 现出较高的活性和防效 8 16 代森锰锌 甲基托布津 多菌灵 代森锰锌和多菌灵 甲基托布津 多菌灵 福 美双 绿精灵和多菌灵 福美双 21 过氧乙酸等化学农药复配剂均对百合枯萎病防效较好 16 17 但是化学 农药由于残留污染及病原菌易产生抗药性等问题 限制了其在百合病害防治中的应用 18 筛选生物药剂有 效防治百合病害已成为发展百合产业 提高百合品质的有效举措 据报道 尖孢镰孢菌引起的植物枯萎病 常见的生防药剂主要包括生防真菌 生防细菌 植物源和放线菌等 7 尖孢镰孢菌非致病性菌株如 Fo47 和 CS 20 毛壳菌属 丛生菌根 AM 芽胞杆菌属 Bacillus spp 19 22 等生防真菌 枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis 和解淀粉芽胞杆菌 Bacillus amyloliquefaciens 等生防细菌 23 24 大蒜鳞茎粗提液 紫茎泽兰提取液及 其与沼液混合液等植物源农药 23 25 放线菌发酵液 24 及申嗪霉素 中生菌素等抗生素类杀菌剂均可有效防 治尖孢镰孢菌引起的百合枯萎病 生物农药由于防效慢 受环境因素限制等问题 影响其在生产实际中的应用 由此 通过将不同作用 机理的生物农药或与化学农药混配来提高生物农药的速效性 拓宽防治谱 实现多种病害的有效兼治 并 且还可降低化学农药的使用量 减轻环境污染 延缓病原菌对化学药剂抗药性的产生 25 26 本试验通过几 种生物源农药对尖孢镰孢菌的抑菌作用及活性的测定 并与化学农药进行比较 旨在筛选出对兰州百合贮 存期鳞茎腐烂病防效较好的生物农药及其混配剂 研究结果对指导百合贮存期鳞茎腐烂病和预防带病种球 播种后枯萎病的发生具有重要的意义 1 材料与方法 1 1 供试材料 供试菌株 引起兰州百合鳞茎腐烂病病原菌尖孢镰孢菌 F oxysporum 保存于甘肃农业大学农药学实 验室 4 冰箱中 供试培养基 马铃薯 200 g 葡萄糖 18 g 琼脂粉 14 g 去离子水 1 L 供试药剂见表 1 1 2 试验方法 1 2 1 生物农药对尖孢镰孢菌的抑菌活性测定 病原菌活化 挑取保存于 4 冰箱中的尖孢镰孢菌 接种 于 PDA 培养基中央进行菌种活化 并置于 25 恒温箱培养 4 d 备用 在超净工作台上用灭菌水将 12 种供试药剂 表 1 分别配制成相应浓度母液 取 1 mL 母液加入到灭 菌冷却至 45 的 49 mL PDA 培养基中 充分混匀 使其达到表 1 中各药剂的推荐浓度 将每个药剂处理 分别倒入 4 个灭菌培养皿 90 mm 中制成含毒培养基平板 以分别加入 1 mL 百菌清母液和无菌水制备 的 PDA 平板为化学药剂对照和空白对照 将上述培养 4 d 的病原菌 用打孔器从菌落边缘打成直径 5 mm 的菌饼 菌丝朝下接入含毒 PDA 平板和对照平板中央 置于 25 下恒温培养 每个处理重复 4 次 4 d 后采用十字交叉法测量菌落直径 并按下式计算药剂抑菌率 抑菌率 对照菌落直径 处理菌落直 径 对照菌落直径 菌饼直径 100 1 2 2 生物农药对尖孢镰孢菌的活性比较 采用生长速率法 27 将抑菌率在 60 以上的药剂稀释成 5 个系 列浓度 3 亿 CFU 克哈茨木霉 WP 浓度分别为 1 00 10 6 2 50 10 5 6 25 10 4 1 56 10 4 和 3 91 10 3 孢子 mL 2 亿 CFU 克绿色木霉 WP 浓度分别为 8 33 10 5 4 17 10 5 2 08 10 5 1 04 10 5 和 5 21 10 4 第 5 期 姜玉玲等 几种生物农药及其混配剂对兰州百合贮存期鳞茎腐烂病防治作用 1043 表 1 供试药剂 Table 1 Tested fungicides 杀菌剂类型 Fungicide type 药剂 Fungicide 剂型 Formulations 推荐浓度 Recommended concentration 生产厂家 Manufacturer 3 亿 CFU g 哈茨木霉 T harzianum 可湿性粉剂 WP 1 00 10 6 CFU g 美国拜沃有限公司 真菌类 Fungal 2 亿 CFU g 绿色木霉 T viride 可湿性粉剂 WP 8 33 10 5 CFU g 山东泰诺药业有限公司 细菌类 Bacteria 0 1亿 CFU g多粘类芽胞杆菌 P polymyxa 细粒剂 FG 3 33 10 4 CFU g 浙江省桐庐汇丰生物科技有限公司 0 3 丁子香酚 eugenol 可溶液剂 SL 4000 00 g mL 南通神雨绿色药业有限公司 5 香芹酚 carvacrol 水剂 AS 3333 00 g mL 兰州世创生物科技有限公司 1 蛇床子素 cnidiadin 水乳剂 EW 3333 00 g mL 江苏省苏科农化有限责任公司 2 1 小檗碱 berberine 水剂 AS 7000 00 g mL 潍坊奥丰作物病害防治有限公司 植物源 Plant derived 1 3 苦参碱 matrine 水剂 AS 1333 00 g mL 恒源伟业生物科技 6 春雷霉素 kasugamycin 可湿性粉剂 WP 3333 00 g mL 延边春雷生物药业有限公司 1 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid 悬浮剂 SC 1000 00 g mL 上海农乐生物制品股份有限公司 其他生物类 Other biological 3 多抗霉素 polyoxin 可湿性粉剂 WP 7000 00 g mL 延边春雷生物药业有限公司 化学类 Chemical 75 百菌清 chlorothalonil 可湿性粉剂 WP 3333 00 g mL 利民化学有限公司 孢子 mL 0 1 亿 CFU g 多粘芽胞杆菌 FG 浓度分别为 3 33 10 4 8 33 10 3 2 08 10 3 5 21 10 2 和 1 30 10 2 孢子 mL 0 3 丁子香酚 SL 浓度分别为 4000 2000 1000 500 和 250 g mL 5 香芹酚 AS 浓度 分别为 3333 1666 50 833 25 416 63 和 208 31 g mL 1 申嗪霉素 SC 浓度分别为 1000 500 250 125 和 62 5 g mL 75 百菌清 WP 浓度分别为 3333 416 63 52 08 6 51 和 0 81 g mL 然后按 1 2 1 中 方法制成含毒培养基 接菌 置于 25 下恒温培养 每个处理重复 4 次 4 d 后采用十字交叉法测量菌落 直径 测定不同药剂不同浓度的抑菌率 然后以浓度的对数为横坐标 以抑菌率的几率值为纵坐标 求出 毒力回归方程和 EC 50 比较各药剂的活性大小 1 2 3 生物农药混配剂对尖孢镰孢菌的协同增效作用测定 采用 Horsfall 28 和王小艺等 29 方法测定混配药 剂的最佳混配比例 即在单剂活性测定的基础上 将 3 亿 CFU 克哈茨木霉 WP 2 亿 CFU 克绿色木霉 WP 0 1 亿 CFU g 多粘类芽胞杆菌 FG 0 3 丁子香酚 SL 5 香芹酚 AS 1 申嗪霉素 SC 和 75 百菌清 WP 7 种药剂分别按照 1 2 2 中测得的各药剂的有效中浓度 扩大 50 倍配制母液 以体积比 0 10 1 9 2 8 3 7 4 6 5 5 6 4 7 3 8 2 9 1 10 0 不同配比进行二元混配 采用菌丝生长速率法 将以上不同配比的 混配剂按照 1 2 1 方法分别配成含毒培养基平板 并接菌 置于 25 下恒温培养 每个处理重复 4 次 以 加入等量无菌水为空白对照 4 d 后采用十字交叉法测量菌落直径 测得实际抑菌率 按照以下公式计算 各混剂预期抑制率和毒效比率 根据毒效比率 1 为增效作用 毒效比率 1 为相加作用 毒效比率 1 为 拮抗作用的标准进行混配剂协同增效作用评价 30 31 混剂预期抑制率 A 药剂 EC 50 值实际抑制率 A 药剂所占比例 B 药剂 EC 50 值实际抑制率 B 药剂所占比例 100 毒效比率 实际抑制率 混剂预期抑制率 100 将上述配比中毒效比率大于 1 的混配剂 采用 Sun 和 John 32 的共毒系数法 co toxicity coefficient CTC 对它们的增效作用进行进一步评价 按照上述方法将毒效比率大于 1 的混配剂配制成母液 稀释成 5 个浓 度梯度 按照 1 2 2 中的方法测定各个混剂的抑制率 求出毒力回归方程和 EC 50 以 A 药剂作为标准药剂 按下式分别计算各单剂 混剂的毒力指数 混剂的理论毒力指数及共毒系数 毒力指数 TI 标准杀菌 剂 EC 50 单剂 EC 50 100 混配实测毒力指数 ATI 标准杀菌剂 EC 50 混配剂 EC 50 100 混配理论毒力 指数 TTI A 药剂毒力指数 A 药剂在混配中的含量 B 药剂毒力指数 B 药剂在混配中的含量 共毒系数 CTC 混配实测毒力指数 混配理论毒力指数 100 共毒系数 CTC 大于 120 为增效 作用 在 80 120 之间为相加作用 80 为拮抗作用 1 2 4 混配剂对鳞茎腐烂病的室内防效测定 根据毒效比率和共毒系数法将 1 2 3 中筛选出具有明显协同 1044 中 国 生 物 防 治 学 报 第 37 卷 增效作用的混配剂 采用离体鳞片法测定不同混配剂及其单剂对尖孢镰孢菌引起的百合鳞茎腐烂病的防治 效果 选取大小一致且健康百合鳞片 放入 75 酒精中灭菌 1 min 经无菌水清洗晾干 根据单剂的有效 中浓度配制母液以不同体积比配制具有增效作用的混配剂药液 备用 保护作用防治效果测定 将上述灭菌处理的百合鳞片分别浸入 20 mL 的混配剂及单剂的药液中 3 min 取出后用滤纸吸去多余药液 待药液稍干后放入灭菌培养皿中 培养皿底部垫有经灭菌水浸湿的海绵 上 覆一层滤纸 中间用吸水的脱脂棉球保湿 每皿 4 片 在每个鳞片中间接入直径 5 mm 的菌饼 每个处 理重复 3 次 以混配剂处理后的百合鳞片为处理组 以生物农药单剂 百菌清和灭菌水浸泡处理的百合鳞 片作为生物药剂对照 化学药剂对照和空白对照 然后置于气候箱中 25 1 黑暗条件下培养 4 d 后 十字交叉法测量病斑直径 并按下式计算防治效果 防治效果 对照病斑直径 处理病斑直 径 对照病斑直径 菌饼直径 100 治疗作用防治效果测定 分别在灭菌处理的百合鳞片中间接入直径 5 mm 的菌饼 然后置于气候箱中 每皿 4 片 每个处理重复 3 次 黑暗条件下培养 36 h 去掉菌饼 进行药液处理 参照上述方法设置处理 组和对照组进行治疗作用测定 1 3 数据统计与分析 采用 Excel 和 SPSS 软件对测定数据进行处理和统计 2 结果与分析 2 1 几种生物农药对尖孢镰孢菌的抑菌作用 通过试验结果表明 几种生物农药对尖孢镰孢菌均有不同程度的抑菌作用 且菌落直径和抑菌率之间 均存在极显著差异 其中 香芹酚抑菌作用最好 抑菌率为 97 96 比百菌清高 9 18 多粘类芽胞杆菌 抑菌作用次之 抑菌率为 86 12 比百菌清低 2 66 丁子香酚 申嗪霉素 哈茨木霉和绿色木霉抑菌率 均在 60 以上 其他生物农药的抑菌率均在 50 以下 表 2 综上 筛选出 3 亿 CFU g 哈茨木霉 WP 2 亿 CFU 克绿色木霉 WP 0 1 亿 CFU g 多粘类芽胞杆菌 FG 0 3 丁子香酚 SL 5 香芹酚 AS 1 申嗪霉 素 SC 6 种抑菌率在 60 以上的生物农药供进一步筛选 表 2 生物农药和百菌清对尖孢镰孢菌的抑制作用 4 d Table 2 Inhibition of biological Fungicides and chlorothalonil on F oxysporum 4 d 药剂 Fungicide 推荐浓度 Recommended concentration 菌落直径 Colony diameter mm 抑菌率 Inhibition rate 哈茨木霉 T harzianum 1 00 10 6 CFU g 20 20 0 10 H 69 05 0 04 F 绿色木霉 T viride 8 33 10 5 CFU g 23 20 0 10 G 62 93 0 02 G 多粘类芽胞杆菌 P polymyxa 3 33 10 4 CFU g 11 80 0 10 K 86 12 0 01 C 丁子香酚 eugenol 4000 00 g mL 14 20 0 10 J 81 22 0 01 D 香芹酚 carvacrol 3333 00 g mL 6 00 0 10 M 97 96 0 06 A 蛇床子素 cnidiadin 3333 00 g mL 30 20 0 10 F 48 64 0 01 H 小檗碱 berberine 7000 00 g mL 44 30 0 10 C 19 73 0 01 K 苦参碱 matrine 1333 00 g mL 45 20 0 10 B 18 03 0 01 L 春雷霉素 kasugamycin 3333 00 g mL 31 30 0 10 E 46 26 0 01 I 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid 1000 00 g mL 18 50 0 10 I 72 45 0 02 E 多抗霉素 polyoxin 7000 00 g mL 36 00 0 10 D 36 73 0 01 J 百菌清 chlorothalonil 3333 00 g mL 10 50 0 10 L 88 78 0 02 B 对照 CK 54 00 1 00 A 注 不同大写字母表示处理之间差异极显著 P 0 01 下同 Note Data with the different capital letters indicated significant difference at 0 01 level among treatments The same as below 第 5 期 姜玉玲等 几种生物农药及其混配剂对兰州百合贮存期鳞茎腐烂病防治作用 1045 活性比较结果表明 6 种生物农药对尖孢镰孢菌活性有一定差异 表 3 其中多粘类芽孢杆菌对尖 孢镰孢菌的活性最好 EC 50 值为 85 95 g mL 但比百菌清的 EC 50 值高 81 67 g mL 香芹酚对尖孢镰孢菌 的活性最差 EC 50 值为 1080 69 g mL 其他生物农药对尖孢镰孢菌的 EC 50 介于这二者之间 表 3 生物农药对尖孢镰孢菌的室内毒力测定 Table 3 Laboratory Toxicity Determination of Biological Fungicides to F oxysporum 药剂 Fungicide 毒力回归方程 Virulence regression equation EC 50 相关系数 Correlation coefficient r 哈茨木霉 T harzianum y 0 421x 3 972 276 70 0 98 绿色木霉 T viride 0 450 x 4 075 114 82 0 99 多粘类芽胞杆菌 P polymyxa y 0 669x 3 706 85 95 0 99 丁子香酚 eugenol y 1 069x 2 138 478 63 0 96 香芹酚 carvacrol 3 408x 5 339 1080 69 0 93 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid y 1 819x 0 048 183 74 0 99 百菌清 chlorothalonil y 0 429x 4 729 4 28 0 98 2 2 生物农药混配剂对尖孢镰孢菌的协同增效作用 2 2 1 几种混配剂不同比例的毒效比率 通过混配剂毒效比率测定 结果表明不同配比下的混配剂对尖孢 镰孢菌抑菌活性不同 其中多粘类芽胞杆菌与申嗪霉素在 9 1 和 8 2 多粘类芽胞杆菌与丁子香酚在 9 1 8 2 7 3 6 4 5 5 和 4 6 多粘类芽胞杆菌与百菌清在 8 2 和丁子香酚与百菌清在 4 6 的混配比例下 毒效比率均大于 1 表现为增效作用 多粘类芽胞杆菌与百菌清在 9 1 的混配下 毒效比率等于 1 表现 为相加作用 其他混配剂在不同混配比例下 毒效比率均小于 1 综上 初步筛选出 10 种毒效比率大于 1 的增效配比 进一步筛选出具有协同增效作用混配剂 表 4 表 4 不同混配剂的毒效比率 Table 4 Toxicity ratio of different mixtures 多 申 P P 多 丁 P E 多 百 P C 丁 百 E C 体积比 v v 实际抑 菌率 预期抑 菌率 毒效比 实际抑 菌率 预期抑 菌率 毒效比 实际抑 菌率 预期抑 菌率 毒效比 实际抑 菌率 预期抑 菌率 毒效比 10 0 51 28 51 28 1 00 51 28 51 28 1 00 50 27 50 27 1 00 50 4 50 40 1 00 9 1 64 42 51 12 1 26 64 10 51 22 1 25 50 27 50 16 1 00 1 59 50 37 0 03 8 2 63 78 50 96 1 25 64 42 51 15 1 26 62 91 50 05 1 26 7 16 50 34 0 14 7 3 49 36 50 80 0 97 52 24 51 09 1 02 40 93 49 95 0 82 11 41 50 32 0 23 6 4 42 95 50 64 0 85 52 56 51 03 1 03 30 77 49 84 0 62 5 31 50 29 0 11 5 5 46 47 50 48 0 92 53 21 50 96 1 04 38 19 49 73 0 77 13 53 50 27 0 27 4 6 45 19 50 32 0 90 63 78 50 90 1 25 38 46 49 62 0 78 59 15 50 24 1 18 3 7 49 36 50 16 0 98 35 90 50 83 0 71 36 26 49 51 0 73 12 47 50 21 0 25 2 8 29 81 50 00 0 60 19 87 50 77 0 39 41 76 49 40 0 85 3 45 50 19 0 07 1 9 27 88 49 84 0 56 31 41 50 71 0 62 35 71 49 29 0 72 8 49 50 16 0 17 0 10 49 68 49 68 1 00 50 64 50 64 1 00 49 18 49 18 1 00 50 13 50 13 1 00 注 多 申 多粘类芽胞杆菌 申嗪霉素 多 丁 多粘类芽胞杆菌 丁子香酚 多 百 多粘类芽胞杆菌 百菌清 丁 百 丁子香酚 百 菌清 下同 Note P P Paenibacillus polymyxa phenazine 1 carboxylic acid P E Paenibacillus polymyxa eugenol P C Paenibacillus polymyxa chlorothalonil E C eugenol chlorothalonil The same as below 1046 中 国 生 物 防 治 学 报 第 37 卷 2 2 2 几种混配剂对尖孢镰孢菌的协同增效作用 共毒系数测定结果表明 生物农药多粘类芽胞杆菌与丁 子香酚以 9 1 和 8 2 混配和生物农药多粘类芽胞杆菌 丁子香酚分别与化学药剂百菌清以 8 2 4 6 混配 后均表现为增效作用 EC 50 值和 CTC 分别为 26 92 g mL 79 26 g mL 347 88 129 73 和 4 05 g mL 0 95 g mL 440 60 641 66 这 4 种混配剂的 EC 50 值均小于多粘类芽胞杆菌 丁子香 酚和百菌清单剂的 EC 50 值 表明这 4 种混配剂对尖孢镰孢菌的抑制活性明显好于单剂 其他各混配剂在不同配比下表现为相 加或拮抗作用 表 5 综上 筛选出 4 种具有协同增效作用的混配剂 用于对尖孢镰孢菌引起的百合鳞 茎腐烂病的防治效果评价 表 5 混配剂对尖孢镰孢菌的协同增效作用 Table 5 Synergistic effect of mixtures on F oxysporum 药剂 Fungicide 体积比 v v 毒力回归方程 Virulence regression equation EC 50 g mL 相关系数 Correlation coefficient r CTC 评价 Evaluation 多 申 P P 9 1 y 0 469x 4 064 99 08 0 98 91 62 相加 Additive 多 申 P P 8 2 y 0 455x 4 112 89 47 0 98 107 52 相加 Additive 多 丁 P E 9 1 y 0 573x 4 181 26 92 0 94 347 88 增效 Synergistic 多 丁 P E 8 2 y 0 743x 3 589 79 26 0 97 129 73 增效 Synergistic 多 丁 P E 7 3 y 1 197x 1 483 851 14 0 98 13 40 拮抗 Antagonistic 多 丁 P E 6 4 y 1 139x 1 841 588 84 0 99 21 43 拮抗 Antagonistic 多 丁 P E 5 5 y 1 256x 1 263 944 71 1 00 15 43 拮抗 Antagonistic 多 丁 P E 4 6 y 1 209x 1 478 812 83 1 00 20 83 拮抗 Antagonistic 多 百 P C 8 2 y 0 260 x 4 842 4 05 0 99 440 60 增效 Synergistic 丁 百 E C 4 6 y 0 358x 5 008 0 95 0 99 641 66 增效 Synergistic 多粘类芽胞杆菌 P polymyxa y 0 669x 3 706 85 95 0 99 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid y 1 819x 0 048 183 74 0 99 丁子香酚 eugenol y 1 069x 2 138 478 63 0 96 百菌清 chlorothalonil y 0 429x 4 729 4 28 0 98 2 3 混配剂对百合鳞茎腐烂病离体防效 4 种混配剂对百合鳞茎腐烂病均有不同程度的防治效果 各混配剂的防效均高于 61 且混配剂的防 效明显高于单剂 生物农药混配剂多 丁 9 1 8 2 对百合鳞茎腐烂病的保护作用和治疗作用防效分别为 77 33 66 00 70 59 61 76 与多粘类芽胞杆菌和丁子香酚相比防效平均分别提高了 28 69 43 82 多 百和丁 百 8 2 4 6 对百合鳞茎腐烂病的保护作用和治疗作用防效分别为 82 22 84 56 73 53 76 47 与多粘类芽胞杆菌 丁子香酚和百菌清相比防效平均分别提高了 38 97 54 10 9 82 与多 丁 9 1 和 8 2 相比防效评价提高了 5 24 和 15 32 混配剂与单剂防效之间存在极显著差异 且各单剂 及混配剂的保护作用均高于其治疗作用 表 6 图 1 表 6 混配剂对鳞茎腐烂病的防治效果 Table 6 Control effect of mixtures on bulb rot 保护作用 Protective effect 治疗作用 Therapeutic effect 药剂 Fungicide 体积比 v v 病斑直径 Lesion diameter mm 防治效果 Control efficacy 病斑直径 Lesion diameter mm 防治效果 Control efficacy 多 丁 P E 9 1 6 70 0 10 F 77 33 0 01 C 6 70 0 10 EF 70 59 0 01 C 多 丁 P E 8 2 7 60 0 10 D 66 00 0 04 E 7 20 0 10 D 61 76 0 01 E 多 百 P C 8 2 6 30 0 10 G 82 22 0 01 B 6 50 0 10 FG 73 53 0 01 B 丁 百 E C 4 6 6 20 0 10 G 84 56 0 01 A 6 30 0 10 G 76 47 0 01 A 多粘类芽胞杆菌 P polymyxa 9 30 0 10 C 42 22 0 01 F 8 50 0 10 C 38 24 0 01 F 丁子香酚 eugenol 10 50 0 10 B 26 67 0 01 G 9 30 0 10 B 23 53 0 01 G 百菌清 chlorothalonil 7 20 0 10 E 71 11 0 01 D 6 80 0 10 E 67 65 0 01 D 对照 CK 12 50 0 10 A 10 70 0 10 A 第 5 期 姜玉玲等 几种生物农药及其混配剂对兰州百合贮存期鳞茎腐烂病防治作用 1047 a b c d h gf e A a B e B b c d hgf A A 保护作用 Protective effect B 治疗作用 Therapeutic effect a 多 丁 Paenibacillus polymyxa eugenol 9 1 b 多 丁 Paenibacillus polymyxa Eugenol 8 2 c 多 百 Paenibacillus polymyxa chlorothalonil 8 2 d 丁 百 eugenol chlorothalonil 4 6 e 多粘类芽胞杆菌 Paenibacillus polymyxa f 丁子香酚 eugenol g 百菌清 chlorothalonil h 对照 Control 图 1 混配剂对百合鳞茎腐烂病的防治效果 Fig 1 The control effect of mixtures on lily bulb rot 3 讨论 在百合枯萎病防治中 多菌灵 代森锰锌 百菌清 福美双 苯醚甲环唑等化学药剂常被采用 9 但 由于化学药剂的不科学合理使用 使得病原菌产生抗药性 防效逐年降低 残留污染严重 严重影响百合 的产量和品质 因此 筛选出防效较好的生物农药及其混配剂对防治百合病害 延缓病原菌抗药性产生 促进百合产业绿色无公害发展具有重要意义 据报道 生物农药与化学农药混配施用 既能减少化学农药的用量 又能发挥化学农药防治速度快和 效果稳定的优势 同时还保持了微生物农药在植物根 叶周围定殖 分泌抗生素 诱导植物产生抗病性等 特点 改善植物源杀菌剂持效期短和速效性差的问题 33 35 生防细菌 NJ13 与丙环唑和苯醚甲环唑 生防 芽胞杆菌 Bacillus spp 与甲基硫菌灵 芽胞杆菌与咪鲜胺 枯草芽胞杆菌与吡唑醚菌酯 枯草芽胞杆菌与 戊唑醇 刀孢蜡蚧菌与百菌清等生物农药与化学农药混配后对人参镰刀菌根腐病菌 Fusarium solani 香蕉 枯萎病菌 F oxysporum f sp cubense 茄腐镰刀菌 Fusarium solani 草莓枯萎病 F oxysporum 均表现出增效 作用 抑菌率达 70 以上 36 39 同时与单剂相比有的混配剂对病害的防治效果提高 40 41 另外 拟康氏木 霉与枯草芽胞杆菌和放线菌与细菌 绿色木霉与芽胞杆菌 非致病尖孢镰孢菌 Fo47 与恶臭假单胞 Pseudomonas putida WCS35 等生物农药之间混配后可有效地防治由黄瓜枯萎病菌 F oxysporum 西瓜枯萎 病菌 F oxysporum f sp niveum 亚麻枯萎病菌 F oxysporum f sp lini 42 45 等病原菌引起的枯萎病 防治效 果均在 71 以上 本研究也筛选出了对尖孢镰孢菌抑菌率在 69 以上且作用机理不同的香芹酚 丁子香酚 1048 中 国 生 物 防 治 学 报 第 37 卷 申嗪霉素 多粘类芽胞杆菌 哈茨木霉 绿色木霉 6 种生物农药 通过将 6 种生物农药之间及其与化学农 药百菌清进行二元混配 初步筛出 10 种毒效比率大于 1 的混配剂 通过共毒系数法进一步进行协同增效 作用评价 获得了具有协同增效作用的多 丁 9 1 多 丁 8