菌株15对甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效_王丽丽.pdf

116 2021 年 第 62 卷第 1 期 收 稿日期 2020 11 07 基金项目 宁波市科技富民项目 2017C10007 作者简介 王丽丽 1987 女 浙 江绍兴人 农艺师 硕士 从事土壤肥料与微生物研究 E mail wanglili531 163 com 文献著录格式 王丽丽 朱诗君 金树权 菌株 15 对甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效 J 浙江农业科学 2021 62 1 116 118 DOI 10 16178 j issn 0528 9017 20210139 菌 株 15 对甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效 王 丽丽 朱诗君 金树权 宁波市农业科学研究院 浙 江 宁波 315040 摘 要 为 了研究菌株 15 对土传病害的拮抗效果 以甜瓜根腐病和西瓜枯萎病为靶标病害 研究菌株 15 对其防治作用 结果表明 菌株 15 在室内能抑制甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌 室外对这 2 种病害也有一定 的防控效果 灌菌次数越多 防效越好 最高防效分别达 41 2 和 42 3 关键词 菌株 15 芽孢杆菌 拮抗菌 甜瓜根腐病 西瓜枯萎病 防效 中图分类号 S144 9 文献标志码 B 文章编号 0528 9017 2021 01 0116 03 甜瓜根腐病是由真菌半知菌亚门瓜类腐皮镰孢 菌 1 侵 染植株而引起的土传病害 是甜瓜生产上 的常见病害 西瓜枯萎病是由真菌镰孢属引起的土 传病害 在各地发生均较为严重 在重茬地发病率 为 30 以上 严重地块可达到 80 以上 甚至造 成绝产 2 是 西瓜生产中危害最为严重的病害之 一 甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌均可长期在土 壤中存活 因此 防治十分困难 利用 1 种或多种微生物来抑制病原菌生命活力 和繁殖能力的方法称之为生物防治 其中利用拮抗 菌株防治土传病害是生物防治的重要研究方向 也 是农业可持续发展的主要防治措施之一 路晓萌 等 3 从甜瓜根际土壤中筛选得到 2 株根腐病拮抗菌 F22 和 T5b 这 两株菌株对瓜类腐皮镰孢菌均有较 好的拮抗效果 岳菊等 4 筛选得到的枯草芽孢杆 菌对真菌镰孢属菌丝生长的抑制作用较为明显 且 对 西瓜枯萎病的田间防控效果较好 葛慈斌等 5 筛选出的枯草芽孢杆菌对真菌镰孢属的抑制作用很 明 显 室内抑制效果能达到 80 6 孙立军等 6 从 中药植物金银花的组织中分离到 1 株具有广谱抗 菌活性的多粘芽孢杆菌 对真菌镰孢属具有很强的 抑制作用 对田间防治西瓜枯萎病有一定的效果 本研究对实验室之前筛选分离到的 1 株具有拮 抗作用的芽孢杆菌菌株 15 进行深入研究 研究其 对其他土传病害 甜瓜根腐病 西瓜枯萎病 的 室内和田间防控效果 为菌株 15 的更广泛应用提 供技术支持 1 材料与方法 1 1 供试菌株和培养基 菌株 15 为实验室前期从黄瓜枯萎病发病严重 地区的健康土壤中分离到的 1 株芽胞杆菌 甜瓜根 腐病病原菌和西瓜枯萎病病原菌来自宁波市农科院 蔬菜研究所 PDA 培养基 20 马铃薯浸出液 1 000 mL 200 g 马铃薯煮沸腾 15 min 定容至 1 000 mL 蔗糖 20 g 琼脂 20 g 121 下灭菌 20 min 牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏 5 g 蛋白胨 10 g 氯化钠 5 g 自来水 1 000 mL pH 值为 7 2 7 4 121 灭菌 20 min 1 2 菌株 15 对甜瓜根腐病病原菌和西瓜枯萎病病 原菌的室内拮抗效果 将甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌活化 然后 用打孔器打取直径 6 mm 的菌苔置于平板中央 于 28 下培养 2 d 将菌株 15 菌落点接于病原菌菌 片周围 以单独接种病原菌菌苔的平板作为对照 于 28 恒温培养 3 d 观察病原菌生长情况及有无 抑菌圈出现 挑取拮抗效果好的菌株进行纯化 将 纯化后的菌株连续多次进行平板对峙试验 观察其 抑菌效果 1 3 菌株 15 对甜瓜根腐病的田间防控效果 田间试验在宁波市鄞州区宁波市农业科学研究 院东钱湖基地内进行 试验材料为菌株 15 发酵液 王 丽丽 等 菌株 15 对甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效 117 试 验设置 1 0 10 6 T1 1 0 10 7 T2 1 0 10 8 T3 1 0 10 9 T4 mL 1 4 个 浓度梯度 于甜瓜移栽后 50 d 开始施用菌株 15 的发酵液 每 隔 7 d 施用 1 次 共计 3 次 每株甜瓜浇灌 10 mL 每处理 3 次重复 以施用等量清水为对照 病情调查 甜瓜根腐病病情指数考查甜瓜根腐 病 分为 5 个级别 0 级 全株无病 外部无症 状 1 级 全株叶片总数的 1 4 以下叶片发病 或 茎内维管束 1 4 以下变褐色 2 级 全株叶片总数 的 1 4 1 2 叶片发病 或茎内维管束 1 4 1 2 变 褐色 3 级 全株叶片总数的 1 2 以上叶片发病 或茎内维管束 3 4 以上变褐色 4 级 整株因病枯 死 计算病情指数和防治效果 1 4 菌株 15 对西瓜枯萎病的田间防控效果 田间试验在宁波市鄞州区宁波市农业科学研究 院东钱湖基地内进行 试验材料为菌株 15 发酵液 试验设置 1 0 10 6 T1 1 0 10 7 T2 1 0 10 8 T3 1 0 10 9 T4 mL 1 4 个 浓度梯度 于西瓜出苗后 10 d 开始施用拮抗菌株的发酵液 每隔 7 d 施用 1 次 共计 3 次 每株西瓜苗浇灌 10 mL 每处理重复 3 次 以施用等量清水为对照 病情调查 西瓜枯萎病发病程度分为 5 个级 别 0 级 植株正常生长 1 级 叶片或茎蔓萎焉 萎焉面积由下而上占全株的 1 4 或不到 1 4 2 级 叶片或茎蔓萎焉 萎焉面积由下而上占全株的 1 2 茎蔓上有树脂状琥珀色黏液 3 级 叶片或茎 蔓萎焉 萎焉面积由下而上占全株的 3 4 茎蔓上 有树脂状琥珀色黏液 4 级 全株萎焉死亡 计算 病情指数和防治效果 1 5 数据分析 采用 DPS 数据处理系统进行数据统计分析 2 结果与分析 2 1 菌株 15 对甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的室内拮 抗效果 由图 1 可知 菌株 15 对甜瓜根腐病和西瓜枯 萎病病原菌均具有一定的拮抗性 在平板上有一定 的拮抗圈 2 2 菌株 15 对甜瓜根腐病的生物防效 由表 1 可知 随着菌株 15 发酵液浓度的增加 对甜瓜根腐病的防效增高 随着灌根次数的增多 其 防效也越好 灌根 3 次后 T4 的防效最好 但与 T2 T3 无显著差异 显著高于 T1 因此 推荐浓度为 T2 T4 其 3 次灌菌后的防效为 32 3 41 2 图 1 菌 株 15 的室内拮抗效果 表 1 菌株 15 发酵液对甜瓜根腐病的田间防效 浓 度 处 理 1 次 灌菌后 2 次 灌菌后 3 次灌菌后 病指 防效 病指 防效 病指 防效 T1 0 32 15 5 b 0 37 24 9 b 0 41 28 2 b T2 0 31 17 8 ab 0 34 30 1 b 0 38 32 3 ab T3 0 29 22 3 ab 0 33 33 6 ab 0 36 36 7 ab T4 0 28 24 4 a 0 31 36 8 a 0 33 41 2 a CK 0 38 0 0 49 0 0 58 0 注 同列数据后无相同小写字母 表示组间差异显著 P 0 05 表 2 同 2 3 菌 株 15 对西瓜枯萎病的生物防效 由表 2 可知 随着菌株 15 发酵液浓度的增加 菌株 15 对西瓜枯萎病的防效增高 随着灌根次数 的增多 其防效也越高 灌根 3 次后 T4 处理的 防效最好 与 T3 无显著差异 与 T1 T2 差异显 著 因此 推荐菌株 15 发酵液浓度为 T3 T4 其 3 次灌菌后的防治效果为 35 8 42 3 表 2 菌株 15 发酵液对西瓜枯萎病的田间防效 浓 度 处 理 1 次 灌菌后 2 次 灌菌后 3 次灌菌后 病指 防效 病指 防效 病指 防效 T1 0 31 13 8 a 0 37 21 2 c 0 38 28 5 b T2 0 28 21 0 a 0 34 26 7 bc 0 35 33 3 b T3 0 28 23 2 a 0 33 30 1 ab 0 33 35 8 ab T4 0 27 25 6 a 0 30 35 7 a 0 30 42 3 a CK 0 36 0 0 50 0 0 50 0 3 小 结与讨论 土传病害是发生在植株根部或茎部且以土壤为 媒介进行传播病害的统称 7 一 般包括根腐病 枯萎病 猝倒病 立枯病 疫病 黄萎病等病害种 类 土传病害的病原菌的生活史一部分或者大部分 在土壤中完成 在条件适宜时病原菌萌发 并且侵 染植株根部或茎部导致植株发生病害 8 近 年来 由于化肥的大量施用 不但造成土壤肥力严重下降 和化肥的超量 还导致土壤微生物区系紊乱 使得 118 2021 年 第 62 卷第 1 期 农作物土传病害逐年加重 这给农业生产带来巨大 经 济损失 严重制约着农业生产发展 9 化学药剂在防治植株土传病害上发挥着重要作 用 但化学药剂存在很多弊端 首 先 化学药剂大 量应用引起药物残留 导致环境污染 其次 化学 药剂大量使用还会导致病原微生物产生抗药性 使 得防治工作更加困难 10 12 利用拮抗细菌防治植 株土传病害具有成本低 环境友好和无药物残留等 特 点 具有广阔的应用前景 13 15 本 试验通过菌株 15 对甜瓜根腐病 西瓜枯萎 病的室内和田间防控效果研究表明 菌株 15 室内 能拮抗甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌 田间对这 两种病害也有一定的防控效果 且灌菌次数越多 防治效果也越好 最高防效分别可达 41 2 和 42 3 菌株 15 对根腐病和枯萎病的生防机理有 待进一步研究 参 考文献 1 李 金玉 甜瓜抗病基因同源序列的克隆与序列分析 D 乌鲁木齐 新疆大学 2006 2 徐伟慧 周岩 吴凤芝 西瓜枯萎病的研究进展 J 中国 蔬菜 2013 8 4 11 3 路 晓萌 姚良同 赵丽明 等 三株甜瓜拮抗细菌的筛选 与鉴定 J 生物技术通报 2010 5 111 115 4 岳 菊 刘邮洲 张荣胜 等 西瓜枯萎菌拮抗细菌的筛选 鉴定及防效测定 J 中国生物防治学报 2011 27 3 428 432 5 葛 慈斌 刘波 朱育菁 等 生防菌 NH BS 2000 对西瓜枯 萎病原菌抑制作用的研究 J 厦门大学学报 自然科学 版 2004 43 S1 87 90 6 孙 力军 陆兆新 别小妹 等 1 株抗菌植物内生菌 EJH 2 菌株的分离和鉴定 J 中国微生态学杂志 2006 18 1 23 26 7 徐 美娜 王光华 靳学慧 土传病害生物防治研究进展 J 吉林农业科学 2005 30 2 39 42 8 李 世东 缪作清 高卫东 我国农林园艺作物土传病害发 生和防治现状及对策分析 J 中国生物防治学报 2011 27 4 433 440 9 李 洪连 黄俊丽 袁红霞 有机改良剂在防治植物土传病 害中的应用 J 植物病理学报 2002 32 4 289 295 10 ZAKI K MISAGHI I J HEYDA I A et al Control of cotton seedling damping off in the field by Burkholderia Pseudomonas cepacia J Plant Disease 1998 82 3 291 293 11 HEYDA I A MISAGHI I J Biocontrol activity of Burkholderiacepacia against hizoctoniasolani in herbicide treated soils J Plant and Soil 1998 202 1 109 116 12 HEYDA I A MISAGHI I J The role of rhizosphere bacteria in herbicide mediated increase in hizoctoniasolani induced cotton seedling damping off J Plant and Soil 2003 257 2 391 396 13 CHA UDATTAN Biological control of weeds by means of plant pathogens Significance for integrated weed management in modern agro ecology J Biocontrol 2001 46 2 229 260 14 BOTELHO G MENDON A HAGLE L C Fluorescent Pseudomonads associated with the rhizosphere of crops an overview J Brazilian Journal of Microbiology 2006 37 4 401 416 15 Abo Elyousr K A M Hashem M AliE H Integrated control of cotton root disease by mixing fungal bio control agents and resistance inducers J Crop Protection 2009 28 4 295 301 责 任编辑 张瑞麟