2种生防菌及其复配剂对烟草黑胫病的防治效果_王光梅.pdf

湖南农业科学 HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES 2021年8月 56 植物保护 湖南农业科学 引用格式 王光梅 杨丽花 罗王勇 等 2 种生防菌及其复配剂对烟草黑胫病的防治效果 J 湖南农业科学 2021 8 56 58 62 DOI 10 16498 ki hnnykx 2021 008 015 2021 8 56 58 62 烟草黑胫病 Tobacco black shank 是由烟草疫 霉菌 Phytophthora nicotianae 引起的一种典型的土 传病害 其病原菌可在土壤中存活数年并具有累积效 应 可侵染烟株各生长阶段 已成为烟草生产上最顽 固的病害之一 1 该病是 Van Breda de Haan 于 1896 年在印度尼西亚首次发现并定名 2 其发生范围广 危害重且防治难度较大 在烟草还苗期 伸根期 旺 长期 成熟期 茎基部和根部均会遭受该病菌的侵染 感染初期 茎基部会出现黑色斑块 随着时间的推移 病斑逐渐向上延伸扩展到髓部 导致烟株自下而上变 黄 严重时全株叶片还会突然凋萎 茎基部和根部坏 死 综合来讲 感染了烟草黑胫病的烟草植株会出现 黑胫 穿大褂 黑膏药 碟片状 和 腰漏 等 症状 3 而且烟草黑胫病除了单独发生之外往往还会 与烟草青枯病以及根黑腐病一起复合侵染 使烟叶的 质量和产量下降 发生严重时造成的损失达到 75 及以上 有的甚至可能导致绝收 4 严重影响了种烟 农户的经济收益 近年来 烟草黑胫病在云南省各地都有不同程度 的发生 影响了云南省的经济发展 由于农业结构的 调整 作物的复种指数不断提高 5 加上不合理的耕 作方式使得以化学农药和培育抗病品种为基础的防治 2 种生防菌及其复配剂对烟草黑胫病的防治效果 王光梅 1 杨丽花 2 罗王勇 3 字韶兴 4 王正源 2 周丽华 5 户艳霞 5 1 云南农业大学 云南 昆明 650201 2 大理州烟草公司漾濞县分公司 云南 漾濞 672500 3 大理州烟草公司永平县分公司 云南 永平 672100 4 大理州烟草公司弥渡县分公司 云南 弥渡 675600 5 云南省烟草公司大理州公司 云南 大理 671000 摘 要 为寻求防治效果更好的生防菌来防治烟草黑胫病 以红花大金元为试材 设置了 CK 清水 T1 孢子数为 2 亿个 g 的木霉菌可湿性粉剂 T2 芽孢数为 1 000 亿个 g 的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂 T3 木霉菌可湿性粉剂 枯草芽孢杆菌可 湿性粉剂 T4 72 甲霜 锰锌可湿性粉剂 5 个处理的田间试验和温室盆栽试验 调查各药剂对烟草黑胫病的发病率和病情 指数 来衡量各药剂的防治效果 结果表明 T1 T2 T3 T4 处理的田间防治效果分别为 61 3 62 5 57 9 和 72 7 温 室盆栽试验中的防治效果分别为 76 9 78 2 75 2 和 82 6 各药剂处理的病情指数极显著低于 CK 但各药剂处理之间没 有显著差异 表明 4 种药剂对烟草黑胫病的防效显著 且各药剂的防效无明显差异 关键词 烟草黑胫病 木霉菌 枯草芽孢杆菌 防治效果 中图分类号 S435 72 文献标识码 A 文章编号 1006 060X 2021 08 0056 03 Control Effects of Two Biocontrol Bacteria and Their Mixtures on Tobacco Black Shank WANG Guang mei 1 YANG Li hua 2 LUO Wang yong 3 ZI Shao xing 4 WANG Zheng yuan 2 ZHOU Li hua 5 HU Yan xia 5 1 Yunnan Agricultural University Kunming 650201 PRC 2 Yangbi County Branch of Dali Prefecture Tobacco Company Yangbi 672500 PRC 3 Yongping County Branch of Dali Prefecture Tobacco Company Yongping 672100 PRC 4 Midu County Branch of Dali Prefecture Tobacco Company Midu 675600 PRC 5 Dali Prefecture Tobacco Company of Yunnan Tobacco Corporation Dali 671000 PRC Abstract In order to find better biocontrol bacteria to control tobacco black shank disease the field experiment and greenhouse pot experiment with 5 treatments CK clear water T1 Trichoderma wettable powder with 200 million spores g T2 Bacillus subtilis wettable powder with 100 billion spores g T3 Trichoderma wettable powder and Bacillus subtilis wettable powder and T4 metalaxyl mancozeb 72 wettable powder were conducted by using Honghuadajinyuan as test material The incidence rate and disease index of tobacco black shank were investigated to measure the efficacy of each treatment The results showed that the field control effects of T1 T2 T3 and T4 treatments were 61 3 62 5 57 9 and 72 7 respectively and the control effects in greenhouse pot experiment were 76 9 78 2 75 2 and 82 6 respectively the disease index of each agent treatment was extremely significantly lower than that of CK but there was no significant difference among the agent treatments indicating that the control effects of the four agents on tobacco black shank are significant and there is no significant difference among the agents Key words tobacco black shank Trichoderma Bacillus subtilis control effect 收稿日期 2021 06 07 基金项目 云南省烟草公司科技项目 技术推广专项类 2020530000 242027 作者简介 王光梅 1997 女 云南昆明市人 本科在读 烟草专业 通信作者 户艳霞 王光梅等 2种生防菌及其复配剂对烟草黑胫病的防治效果 57 植物保护 措施存在诸多弊端 病原菌在土壤中逐年积累 烟草 黑胫病的发病率越来越高 而且病原菌的抗药性越来 越强 同时伴随着农药残留 环境污染 生态平衡被 破坏 烟叶品质降低等一系列问题的出现 为响应 绿 色生产 绿色防控 的号召 保证稳产 稳收 生物 防治不失为一个行之有效的方法 因此 利用有益生 物防治烟草黑胫病越来越受到人们的青睐 6 易龙等 7 研究表明 生物防治是利用有益微生 物攻击病原菌 产生抗菌物质破坏病原菌细胞结构 或者竞争作用 和病原菌争夺营养物质和生长空间 以及拮抗作用 抑制病原菌的孢子萌发 让土壤中黑 胫病病原物的数量减少 其作用机制是通过有益微生 物在植物根部和根际土壤中定殖产生抗生物质 降低 病原菌的种群密度 防止病原菌的入侵 从而达到防 治病害的作用 李苗苗等 8 的盆栽试验结果表明 枯 草芽孢杆菌对烟草黑胫病的防治效果为 51 42 枯草 芽孢杆菌 Bacillus subtilis 会产生一种抗菌蛋白类物 质 9 该蛋白质有良好的溶菌作用 竞争作用和较高 的抗逆性 用灌根处理的方法可让作物根际微生物群 落结构的多样性和稳定性有所改善 从而起到抑制烟 草黑胫病病原菌生长的效果 10 此外 枯草芽孢杆菌 的菌丝还可在烟草根系中定殖使病原菌不能侵染或侵 染的机会减少 王革等 2 通过盆栽试验和大田试验发 现 其筛选的长枝木霉 Trichodermalongibrachiatum 对烟草黑胫病的防治效果分别达到 97 6 和 67 0 木霉菌 Trichoderma spp 可以产生生物活性物质 次 级代谢产物和细胞壁降解酶 11 通过竞争 重寄生 抗生 诱导抗性 协同拮抗等作用机制来抑制病原菌 的入侵 12 因此 笔者拟开展木霉菌和枯草芽孢杆菌 及其复配剂对烟草黑胫病的防治研究 以期为烟草黑 胫病防治提供更好的生防菌 1 材料与方法 1 1 试验地点及供试材料 田间试验于 2020 年 6 月 10 月在云南大理弥渡 县红岩镇丁家营村展开 大田土壤类型为红壤 前 作植物为大蒜 试验地阳光充足 气候温暖湿润 地 势平坦 全年平均气温 12 24 年降水量 810 850 mm 平均海拔为 1 800 m 比较适合烟草的种植 温 室盆栽试验在大理弥渡县红花大金元科技示范基地展 开 供试土壤为红壤新土 供试烟草品种为红花大金元 供试药剂 孢子数 为 2 亿个 g 的木霉菌可湿性粉剂 上海万力华生物科 技有限公司 芽孢数为 1 000 亿个 g 的枯草芽孢杆 菌 德强生物股份有限公司 72 甲 霜 锰锌可湿 性粉剂 江苏宝灵化工股份有限公司 参照许学明 13 的方法 将烟草黑胫病病株用无 菌水清洗后 进行表面消毒 然后解剖病健交界处的 皮层或者髓部组织块 用 0 1 升 汞 70 酒精漂洗 再使用无菌滤纸吸干水分后移入燕麦琼脂培养基中 随后放入培养箱中培养数日即得供试病原菌 1 2 试验设计 试验分田间试验和温室盆栽试验 调查不同药剂 处理后烟草黑胫病的发病情况 评估发病等级后 计 算病情指数和防治效果 1 2 1 田间试验 设置 4 个药剂处理和 1 个对照 表 1 每个处理 5 个重复 共 25 小区 采用随机区组排列 每小区种植 10 株烤烟 小区间间隔 1 株 表1 不同处理的药剂及用量 处 理 药 剂 用 量 mL 株或 g 株 CK 清 水 200 T1 木霉菌可湿性粉剂 1 T2 枯草芽孢杆菌可湿性粉剂 0 02 T3 木霉菌可湿性粉剂 枯草芽孢杆 菌可湿性粉剂 0 5 0 01 T4 72 甲霜 锰锌可湿性粉剂 0 1 利用灌根施药的方法进行 3 次施药 每次按照用 量对水 每株施药 200 mL 第一次施药与烟苗移栽 同步进行 随后 2 次施药以 10 d 为一个周期开展 1 2 2 温室盆栽试验 同田间试验一样 设置 4 个药 剂处理和 1 个对照 每个处理 5 个重复 共 25 小区 250 株盆栽 以 10 d 为一个周期进行施药 一共 3 次 病害调查 农艺性状测量 不同的是 每小区 10 株 烟苗按顺序排列 对每株烟的土壤进行黑胫病病原菌 的接种 接种方法为 将培养好的烟草疫霉菌菌种 3 瓶 约 600 g 先用约 2 kg 湿润细土稀释拌匀 再加 5 kg 湿润细土继续拌匀 再加 5 kg 湿润细土继续拌匀 每株烟苗施用 200 mL 的菌土 将其与烟根附近的土 拌匀 1 3 观测项目与方法 烟苗移栽 10 d 后测定烟株的农艺性状 并且采 用蔡勇 14 的方法调查烟草黑胫病的发病情况 根据 GB T23222 2008 15 划分烟草黑胫病的病情等级 0 级 全株无病 1 级 茎部病斑不超过茎围的 1 3 或 1 3 以下叶片轻度凋萎 3 级 茎部病斑环绕茎围的 1 3 1 2 或 1 3 1 2 叶片凋萎 5 级 茎部病斑超过茎 围的 1 2 但未全部围绕茎围 或超过 1 3 1 2 叶片凋萎 7 级 茎部病斑全部围绕茎围 或 2 3 以上叶片凋萎 9 级 病株全部叶片凋萎或枯死 发病率 病情指数与防治效果计算公式如下 发病率 发病株数 调查总株数 100 病情指数 各级病株或叶数 该病级值 调查总株或叶数 最高级值 100 湖南农业科学 HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES 2021年8月 58 植物保护 防治效果 空白对照区病指数 处理区病情指数 空白对照区病指 100 2 结果与分析 2 1 田间试验结果 从表 2 可以看出 各药剂处理对烟草黑胫病都有 一定的防治效果 从 8 月 4 日调查的田间黑胫病发病 率情况可知 CK 清水组 的发病率最高 为 5 0 T1 T4 处 理暂时都没有黑胫病的发生 8 月 14 日调 查结果中 各处理的发病率都比 8 月 4 日的发病率有 所升高 8 月 24 日的田间病情调查情况显示 4 种药 剂处理的发病率均比上一次的调查结果高 其中 T4 处理的发病率最低 仅为 7 5 其次为 T2 处理 发 病率为 12 5 然后是 T1 处理 发病率是 15 0 T3 处理的发病率为 20 0 仅次于 CK 27 5 从 8 月 24的防效结果可看出 防治效果最好的是 T4处 理 72 甲霜 锰锌可湿性粉剂 其防治效果为 72 7 其次 是 T2 处理 枯草芽孢杆菌可湿性粉剂 其防效为 62 5 第三是 T1 处理 木霉菌可湿性粉剂 防效 为 61 3 第四是 T3 处理 木霉菌可湿性粉剂 枯 草芽孢杆菌可湿性粉剂 防效为 57 9 从表 1 还可 看出 4 个药剂处理的病情指数极显著低于 CK P 0 01 但各药剂处理之间没有显著差异 表明 4 种药 剂对烟草黑胫病的田间防效显著 且各药剂的防效无 明显差异 表2 田间试验中不同药剂对烟草黑胫病的防治效果 处 理 8月4日 8月14日 8月24日 发病率 发病率 发病率 病情 指数 防治效果 CK 5 10 0 27 5 19 58 T1 0 7 5 15 0 7 58 61 3 T2 0 10 0 12 5 7 34 62 5 T3 0 12 5 20 0 8 24 57 9 T4 0 5 0 7 5 5 34 72 7 注 表中 标记表示药剂处理与对照间差异极显著 P 0 01 下同 2 2 盆栽试验结果 由表 3 可知 8 月 4 日的盆栽中 CK 的黑胫病发 病率最高 为 27 5 T1 T2 T3 T4 处理都有不 同程度的黑胫病发生 8 月 14 日调查结果中 CK 和 其他药剂处理的发病率都有所升高 由 8 月 24 日调 查中可知 发病率最低的为 T4 处理 为 27 5 其 次为 T1 T2 处理 均为 30 0 再次为 T3 处理 为 35 0 发病率最高的是 CK 为 47 5 从 8 月 24 日中的防效来看 各药剂处理的防治效果从高到低依 次为 T4 T2 T1 T3 从表 2 还可看出 4 个药 剂处理的病情指数极显著低于 CK P 0 01 但各 药剂处理之间没有显著差异 表明 4 种药剂对烟草黑 胫病的盆栽试验防效显著 且各药剂的防效无明显 差异 表3 盆栽试验中不同药剂对烟草黑胫病的防治效果 处 理 8月4日 8月14日 8月24日 发病率 发病率 发病率 病情指数 防治效果 CK 27 5 35 0 47 5 51 10 T1 15 0 22 5 30 0 11 80 76 9 T2 22 5 30 0 30 0 11 12 78 2 T3 20 0 30 0 35 0 12 68 75 2 T4 20 0 22 5 27 5 8 90 82 6 3 结论与讨论 综合田间试验和盆栽试验的数据来看 化学药 剂 72 甲霜 锰锌可湿性粉剂的防治效果最好 田间 试验防效达 72 7 这与杨庆焱 16 使用 72 甲霜 锰 锌 1 000 倍液获得的防效值 74 14 差异不大 生 物制剂木霉菌可湿性粉剂和枯草芽孢杆菌可湿性粉剂 对烟草黑胫病病原菌有一定的防治效果 但其防效稍 低于化学药剂 72 甲霜 锰锌可湿性粉剂 但差异不 显著 然而陈志敏等 17 的盆栽试验研究表明 木霉 菌 TG050609 对 烟草黑胫病的防治效果略优于 58 甲 霜灵锰锌 WP 这与笔者的试验结果不一致 可能是 所施药剂浓度和供试烟草品种不同造成的 由此可知 为了提高烟叶的产量和质量 保证烟叶的安全性 筛 选出低毒 低残留 低价位的生防菌剂 16 利用生物 防治手段来防治烟草黑胫病是一个行之有效的方法 田间试验与盆栽试验对比来看 盆栽试验比田间试验 的发病率 病情指数高 可能是因为盆栽试验中接种 的黑胫病病原菌活力强 再加上大棚高温高湿条件 有利于黑胫病的发生 所以发病率和病情指数偏高 生物制剂和化学药剂对烟草黑胫病的防控都有良 好的效果 但是在生物制剂中 芽孢数为 1 000 亿个 g 的枯草芽孢杆菌的防治效果稍优于孢子数为 2 亿个 g 的木霉菌可湿性粉剂 虽然化学药剂 72 甲霜 锰锌 可湿性粉剂的防治效果最好 而且高效 速效 使用 方便 经济效益高 但是农药使用不当容易引起人 畜中毒 造成环境污染 杀伤天敌引起次要害虫再猖 獗 并且长期使用同一种农药 可使某些病害产生不 同程度的抗药性 18 在今后烟草黑胫病的防治中 应 该进一步加强黑胫病病菌生防菌株的筛选 并充分利 用现代生物技术改良生防菌株 19 提高生防菌对烟草 黑胫病的防治效果 降低对人畜及环境的伤害 参考文献 1 李艳红 徐 智 汤 利 生物有机肥调控烟草青枯病和黑胫病研 究进展 J 云 南农业大学学报 自然科学 2014 29 3 436 442 下转第 62 页 湖南农业科学 HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES 2021年8月 62 植物保护 同时释放赤眼蜂 增加天敌基数 确保了邵东市在 6 7 月暴发纵卷叶螟的情况下 早 中稻没有出现连片 成灾的现象 保障了早 中稻的丰收 4 2 充分利用宣传媒介 迅速开展统防统治 要充分利用宣传媒介 迅速开展统防统治理 2020 年 邵东市稻飞虱迁入虫量较大 迁入峰次多 又 因夏秋高温持续时间长 导致中稻后期稻飞虱大发生 8 月 10 11 日面上调查显示 中稻田稻飞虱虫量大 平均虫量 4 35 头 株 与 2019 年同期接近 严重丘 的虫量高达 560 头 株以上 且短翅型虫量较大 在 黑田铺 火厂坪 砂石 仙槎桥等地的个别早熟中稻 田已出现 冒穿 倒禾现象 随后多地都出现了 冒穿 现象 预示中稻后期稻飞虱将会大发生 邵东市植保 站立即印发 病虫情报 及公告 召集各乡镇农业站 负责人参加病虫防治会议 并通过电视 村村响广播 微信 短信等方式 迅速将稻飞虱等病虫发生情况及 病虫防治意见直接传递到种粮户手中 组织开展统防 统治 集中用药 加强田间防效检查 直到将稻飞虱 虫口压下去为止 中稻后期没有出现连片成灾现象 4 3 加强农技宣传与人员培训工作 要加强农技宣传与人员培训工作 通过村村通广 播 手机短信 电视 网络形式等向农民宣传水稻主 要病虫害的防控知识 例如针对不同虫龄的趋势预测 及用药技术等 做到 预防为主 综合防治 通过 室内培训 现场观摩等形式 推广绿色防控技术 优 化水稻病虫害防控体系 保障粮食安全生产 参考文献 1 黄振国 陈俊宇 肖景峰 等 湖南水稻生产现状调查及对策研究 J 湖南农业科学 2020 4 88 90 2 尹有志 申亮文 周检军 等 2010 年邵东县南方水稻黑条矮缩 病流行特点及控防策略 J 湖南农业科学 2011 7 67 69 72 3 覃丽莎 吴碧球 李 成 等 抗 型褐飞虱水稻品种对田间褐 飞虱生物型结构的影响 J 湖南农业科学 2020 7 68 70 4 周训军 张美文 章 宜 等 水稻二化螟在水稻留茬秸秆中越 冬调查 J 湖南农业科学 2019 8 61 62 65 5 亓 璐 张 涛 曾 娟 等 近年我国水稻五大产区主要病害 发生情况分析 J 中国植保导刊 2021 41 4 37 42 65 6 朱 芳 浅谈沿海地区气候因素对水稻病害的影响 J 农业开发与 装备 2020 1 192 196 7 张 鑫 邢立志 我国水稻主要病害防治研究进展 J 安徽农业科 学 2019 47 23 11 13 8 王雪平 2004 2018 年南京市江宁区水稻病害发生概况及防控措 施 J 现代农业科技 2019 7 92 94 9 尹敬耿 刘银发 水稻纹枯病与叶鞘腐败病的区别及防控 J 江西 农业 2015 6 58 10 彭美文 张志刚 曾明会 邵东县稻飞虱为害特点 发生原因及 防治对策探究 J 南方农业 2019 13 18 20 22 11 黄炯祥 周检军 申初成 2008 年水稻两迁害虫暴发特点及其原 因分析 J 湖南农业科学 2009 3 64 65 12 刘长 义 周检军 申意玉 邵东县四代二化螟大发生原因及控防 对策 J 湖南农业科学 2017 8 57 60 63 13 许云和 吴社高 曾纪康 等 水稻纹枯病危害损失测定与药剂 防治技术改进措施 J 湖南农业科学 2002 4 51 52 责任编辑 贺 艺 上接第 58 页 2 王 革 李梅云 段玉琪 等 木霉菌对烟草黑胫病菌的拮抗机 制及其生物防治研究 J 云南大学学报 自然科学版 2001 23 3 222 226 3 蒋士君 吴元华 烟草病理学 M 北京 中国农业出版社 2013 4 陈瑞泰 朱贤朝 王智发 等 全国 16 个主产烟省 区 烟草侵 染性病害调研报告 J 中国烟草科学 1997 18 4 1 7 5 王晶晶 蒋士君 常淑娴 等 两株生防菌对烟草黑胫病的抑制 活性及其鉴定 J 中国烟草学报 2011 17 6 89 93 6 王 静 孔凡玉 烟草黑胫病综合防治技术 J 烟草科技 2002 35 8 45 47 7 易 龙 邱妙文 陈永明 等 烟草黑胫病的生物防治研究进展 J 中国农学通报 2017 33 25 146 151 8 李苗苗 王晓强 王东坤 等 生防菌复配对烟草黑胫病的防治 效果研究 J 中国烟草科学 2020 41 2 32 38 9 匡传 富 2000 亿 CFU g 枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治烟草黑胫病 试验示范报告 J 农业开发与装备 2021 2 145 146 10 刘烈花 4 种生防菌对烟草黑胫病的防治作用 J 植物医生 2018 31 4 42 44 11 阮盈盈 刘 峰 木霉菌生物防治作用机制与应用研究进展 J 浙 江农业科学 2020 61 11 2290 2294 12 张凌萱 孙 影 生防真菌之木霉菌的应用 J 广东蚕业 2020 54 6 113 114 13 许学明 烟草黑胫病菌对六种杀菌剂的抗性测定及抗甲霜灵机制的 初步研究 D 济南 山东农业大学 2007 14 蔡 勇 烟草黑胫病高效生防木霉菌的筛选及其拮抗机制的研 究 D 长沙 湖南农业大学 2010 15 GB T23222 2008 烟草病虫害分级及调查方法 S 16 杨庆焱 不同药剂对烟草黑胫病的防治效果对比分析 J 河南农 业 2019 11 19 21 17 陈志敏 顾 钢 陈顺辉 等 木霉菌对烟草疫霉的拮抗作用 J 福建农林大学学报 自然科学版 2009 38 3 234 237 18 张 薇 武汉市园林植被病虫害递增原因及对策 J 中国园艺文 摘 2014 30 7 91 92 19 曾华兰 雷 强 覃克炳 等 木霉菌防治烟草黑胫病研究进展 J 安徽农业科学 2011 39 31 19164 19165 19168 责任编辑 张焕裕